鹿角脫盤物質(zhì)基礎(chǔ)及藥理研究進(jìn)展 *

李振宇 馬佰偏

（1.黑龍江康爾泰克生物科技有限公司，黑龍江 哈爾濱 150028；2.黑龍江北野龍醫(yī)藥科技有限公司，黑龍江 哈爾濱 150036；3.哈爾濱圣源生物工程有限公司，黑龍江 哈爾濱 150028；4.漠河五行健生物科技有限公司，黑龍江 漠河 165399）

鹿角脫盤又名鹿角帽、鹿角盤、鹿花盆，為馬鹿、梅花鹿取茸后次年春自然脫落的角基，性溫、味咸，歸腎、肝經(jīng)，無(wú)毒?！渡褶r(nóng)本草經(jīng)》記載其“主惡瘡癰腫，逐邪惡氣，留血在陰中”，歷來(lái)被《中華人民共和國(guó)藥典》按鹿角收載［1］。但長(zhǎng)久以來(lái)，鹿角脫盤一直未得到良好的開發(fā)利用，僅為初加工產(chǎn)品，主要為粉碎后直接配伍使用。民間經(jīng)驗(yàn)方多采用鹿角脫盤治療乳腺疾病，效果較好。

本研究從物質(zhì)基礎(chǔ)決定藥理活性這一理念出發(fā)，綜合歷年國(guó)內(nèi)外相關(guān)文獻(xiàn)，綜合闡述鹿角脫盤的最新研究進(jìn)展及發(fā)展方向，希望為這種東北道地藥材的開發(fā)提供參考。

1 鹿角脫盤的產(chǎn)生機(jī)制

鹿角是哺乳動(dòng)物惟一能夠完全再生的器官，鹿茸與鹿角的交替更新是一個(gè)以干細(xì)胞為基礎(chǔ)的發(fā)育過(guò)程［2］，同時(shí)高表達(dá)鹿茸中的某些抑癌基因［3］。

利用蛋白質(zhì)組學(xué)方法發(fā)現(xiàn)，目前馬鹿鹿茸中有36種高表達(dá)蛋白質(zhì)，而梅花鹿鹿茸中有144種高表達(dá)蛋白質(zhì)。這些差異表達(dá)蛋白參與了氧化磷酸化、核糖體、細(xì)胞外基質(zhì)相互作用和PI3K-Akt（磷脂酰肌醇3 激酶-蛋白激酶B）途徑的調(diào)控［4］。

利用基因組學(xué)方法發(fā)現(xiàn)，目前梅花鹿的鹿角早期（30 d）與鹿角快速生長(zhǎng)期（60 d）差異表達(dá)基因?yàn)?464個(gè)、長(zhǎng)非編碼RNA（lncRNAs）85 個(gè)、微小RNA（miRNAs）61 個(gè)；鹿角早期與鹿角末期（90 d）差異表達(dá)基因1748 個(gè)、lncRNAs 138 個(gè)、miRNAs 78 個(gè)；鹿 角 快 速生長(zhǎng)期和鹿角末期差異表達(dá)的lncRNAs 49個(gè)、miRNA 24個(gè)。研究［5］發(fā)現(xiàn)182 個(gè)miRNA-mRNA 作用對(duì)和89 個(gè)miRNA-lncRNA 作用對(duì)參與構(gòu)建了內(nèi)源競(jìng)爭(zhēng)RNA 調(diào)控網(wǎng)絡(luò)（ceRNET）。此過(guò)程涉及多種信號(hào)通路激活的基因差異表達(dá)及多種生物學(xué)過(guò)程［6］。

鹿茸、鹿角的大小和形態(tài)是鹿的年齡、營(yíng)養(yǎng)和遺傳等因素綜合作用的結(jié)果［7］，其中溫度對(duì)鹿脫掉鹿角脫盤的影響大于濕度和光照［8］。而鹿角脫盤作為鹿茸與鹿角交替更新的附屬產(chǎn)物，其蛋白組學(xué)、基因組學(xué)與上述研究具有相關(guān)性，但目前尚未開展。

2 鹿角脫盤的物質(zhì)基礎(chǔ)

鹿角脫盤中含有蛋白質(zhì)、多肽、氨基酸、糖類、脂類、性激素及無(wú)機(jī)鹽等。

梅花鹿鹿角脫盤中的粗蛋白含量較高，約為32.8%，目前發(fā)現(xiàn)具有6 個(gè)特征帶峰［9］，其中水溶性蛋白的含量約為8.3%［10］；目前發(fā)現(xiàn)5 種多肽，其分子量分別為11 kDa、18 kDa、40 kDa、64 kDa、80 kDa［11］，為主要活性成分；氨基酸總量為33.5%，高于鹿角（28.0%），但低于鹿茸（48.3%），目前發(fā)現(xiàn)21 種氨基酸，其中甘氨酸（Gly）、脯氨酸（Pro）、丙氨酸（Ala）、精氨酸（Arg）及谷氨酸（Glu）等含量較高［12］。

鹿角脫盤中糖類的含量約為1.7%，其中可溶性糖為1.1%，還原糖為0.6%，且多糖的含量高于鹿角［13］；具體為：鹿角脫盤（梅花鹿）＞鹿角脫盤（馬鹿）＞鹿角（梅花鹿）＞鹿角（馬鹿）［14］，多糖類為其抗癌的主要活性成分。

梅花鹿鹿角脫盤中粗脂肪的含量為1.9%，其中游離脂肪酸含量為0.1%，磷脂含量為0.3%［10］；醇含量為0.224 μg/g［15］；含有雌二醇（E2）、孕酮（P）、睪酮（T）等3種性激素，總含量為143.41 ng/g［16］。

梅花鹿鹿角脫盤中無(wú)機(jī)物與有機(jī)物的比值為58∶42。目前無(wú)機(jī)物檢測(cè)到了21 種元素，包括5 種常量元素，尤以Ca、P（磷）含量為最高；及16 種微量元素，以Zn、Fe、Si、Al、Sr 及Ba 含量較為豐富［17］。在鹿14月齡時(shí)，增加Ca、P（磷）的攝入量可使鹿角中Ca、Mg、Na、P（磷）的含量和鹿骨中Ca、Na、P（磷）的含量顯著增加。適當(dāng)?shù)匮a(bǔ)充Ca、P（磷）對(duì)鹿角、鹿骨的礦物組成有正面影響，提高了常量元素的含量［18］，也可能會(huì)影響鹿角脫盤中常量元素的含量。

3 鹿角脫盤的藥理作用

目前研究發(fā)現(xiàn)鹿角脫盤具有抗乳腺癌、抗乳腺增生、抗肝癌、抗輻射致癌、預(yù)防骨質(zhì)疏松、護(hù)膚、抗菌、抗病毒、抗氧化、抗衰老、抗炎及降糖等藥理作用。

3.1 抗乳腺癌體外實(shí)驗(yàn)［19］證實(shí)，低劑量的鹿角脫盤水提物可促進(jìn)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞的增殖，高劑量的水提物才能抑制MCF-7細(xì)胞的增殖，即使得細(xì)胞周期蛋白D1（Cyclin D1）表達(dá)降低，將癌細(xì)胞增殖阻滯在S 期，從而抑制癌細(xì)胞增殖；促進(jìn)細(xì)胞凋亡調(diào)控因子p-38和c-Jun 高表達(dá)，抑制Bcl-2 表達(dá)，從而促進(jìn)癌細(xì)胞凋亡；提示鹿角脫盤水提物通過(guò)調(diào)控ER-α36 介導(dǎo)的雌激素信號(hào)通路，從而起到對(duì)乳腺癌細(xì)胞的雙相調(diào)節(jié)作用。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)［20］也證明，梅花鹿鹿角脫盤多肽也可通過(guò)促進(jìn)端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶（TERT）mRMA 的表達(dá)來(lái)抑制端粒酶活性，并能使癌細(xì)胞在G0/G1期停滯［21］；與鹿角脫盤總肽和膠原蛋白相比，多肽的抑制效果最好［22］。

3.2 抗乳腺增生民間用藥傳統(tǒng)及現(xiàn)代理論研究［23］均證實(shí)，鹿角脫盤對(duì)乳腺增生效果較好。梅花鹿鹿角脫盤水提物對(duì)乳腺增生大鼠有顯著治療作用，實(shí)驗(yàn)［24］中觀察到給藥劑量為1.575 g/（kg·d）時(shí)乳腺變化最為明顯，提示其治療作用可能通過(guò)增強(qiáng)機(jī)體免疫力、調(diào)節(jié)血清中E2及P水平實(shí)現(xiàn)。

研究［25］發(fā)現(xiàn)，當(dāng)梅花鹿角脫盤多肽給藥劑量為200 mg/kg時(shí)，可降低小白鼠的子宮系數(shù)；提高乳腺增生小鼠的超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-PX）活性，降低丙二醛（MDA）含量；降低血清中E2、泌乳素（PRL）含量，提高血清中P、黃體生成素（LH）含量，可顯著抑制乳腺增生，使腺導(dǎo)管和腺泡等恢復(fù)正常，并減少腺泡萎縮數(shù)量、緩解腺導(dǎo)管腔擴(kuò)大。

3.3 抗肝癌梅花鹿鹿角脫盤超微粉及水、醇、酸、堿、鹽等5種提取物均能顯著抑制肝癌H22細(xì)胞的生長(zhǎng)，促進(jìn)腫瘤凋亡，保護(hù)脾臟組織結(jié)構(gòu)，誘導(dǎo)腫瘤組織壞死，提高免疫器官指數(shù)和脾淋巴細(xì)胞刺激指數(shù)，提高脾臟和外周血中CD4+、CD8+比值，提高血清中白細(xì)胞介素-2（IL-2）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）、白細(xì)胞介素-12（IL-12）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、γ 干擾素（IFNγ）等細(xì)胞因子的含量，同時(shí)降低免疫抑制細(xì)胞因子轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β（TGF-β）的含量以提高小鼠的細(xì)胞免疫水平，提高血清中IgE、IgG、IgM 的含量以增強(qiáng)肝癌H22 荷瘤小鼠的體液免疫水平。不同提取物抗腫瘤效果不同，其中堿提物效果最好［26］。

3.4 抗輻射致癌鹿角脫盤超微粉可通過(guò)抑制小鼠胸腺淋巴瘤Notch2 基因及蛋白的表達(dá)，提高小鼠免疫功能，進(jìn)而降低輻射致癌的發(fā)生率，起到抗腫瘤的作用［27］。

3.5 預(yù)防骨質(zhì)疏松實(shí)驗(yàn)證實(shí)，鹿角脫盤水提物和醇提物均可增加環(huán)磷酰胺致骨質(zhì)疏松小鼠中股骨的干重及骨鈣的含量，其中高劑量組使骨羥脯氨酸（Hyp）含量提高顯著［28］；也可通過(guò)調(diào)控p38-MAPK信號(hào)通路來(lái)促進(jìn)人類成骨樣細(xì)胞MG-63 的骨形成和抑制破骨細(xì)胞的骨吸收，雙向調(diào)節(jié)成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞之間的動(dòng)態(tài)平衡，從而起抗骨質(zhì)疏松的作用［29］。

經(jīng)梅花鹿鹿角脫盤膠原蛋白治療，去卵巢所致的骨質(zhì)疏松大鼠骨密度顯著增加、骨形態(tài)學(xué)及骨力學(xué)指標(biāo)顯著改善；血清堿性磷酸酶（ALP）活性降低，Hyp 含量升高，對(duì)體質(zhì)量及臟器系數(shù)無(wú)顯著影響，證明鹿角脫盤膠原蛋白對(duì)骨質(zhì)疏松有治療效果［30］。

鹿角脫盤微切助粉能降低去卵巢所致骨質(zhì)疏松大鼠的體質(zhì)量，顯著降低ALP和骨鈣素（BGP），升高E2、降鈣素（CT）和類胰島素生長(zhǎng)因子-1（IGF-1）的水平，改善股骨骨小梁結(jié)構(gòu)，使骨小梁互相接連及數(shù)量增多，顯著增加股骨密度。連續(xù)12 周應(yīng)用微切助粉進(jìn)行治療，對(duì)大鼠臟器、血糖、血脂和肝腎功能未產(chǎn)生明顯影響，說(shuō)明鹿角脫盤微切助粉能安全、有效地治療骨質(zhì)疏松癥［31］。

3.6 護(hù)膚梅花鹿鹿角脫盤膠原肽有顯著的護(hù)膚作用，可使小鼠皮膚中SOD 和Hyp 水平顯著升高、MDA 水平顯著降低［32］。

3.7 抗菌抗病毒梅花鹿鹿角脫盤小肽對(duì)革蘭氏陰性、陽(yáng)性菌均有不同程度的抑制作用［33］。梅花鹿鹿角脫盤多肽對(duì)大腸桿菌具有抑制作用，抑菌作用與濃度呈正相關(guān)，但未達(dá)到強(qiáng)抑菌效果［34］。鹿角脫盤多糖抗牛病毒性腹瀉病毒（BVDV）效果顯著，并與濃度呈正相關(guān)［35］。

3.8 抗氧化抗疲勞制備的鹿角脫盤渣抗氧化肽對(duì)自由基清除能力（DPPH 法）較高［36］。梅花鹿鹿角脫盤提取物能降低小鼠運(yùn)動(dòng)前后血中乳酸的累積，加速乳酸等代謝產(chǎn)物的清除，促進(jìn)機(jī)體的恢復(fù)，提高機(jī)體運(yùn)動(dòng)能力，可顯著延長(zhǎng)小鼠負(fù)重游泳的時(shí)間，有較強(qiáng)延緩疲勞的作用，并可提高運(yùn)動(dòng)耐力［37］。

3.9 抗炎鹿角脫盤水提物的抗炎作用可能是通過(guò)抑制一氧化氮（NO）的過(guò)量表達(dá)來(lái)減少細(xì)胞損傷；增強(qiáng)溶菌酶（LZM）的活力來(lái)改善小鼠體內(nèi)的黏多糖代謝；增強(qiáng)SOD 和GSH-PX 的活力來(lái)減少脂質(zhì)過(guò)氧化，從而減輕炎癥反應(yīng)［38］。鹿角脫盤水提物可顯著降低足跖腫脹小鼠炎足浸出液中IL-6的含量，而不影響IFN-γ和IL-2的含量。其抗炎作用可能是通過(guò)抑制機(jī)體炎癥介質(zhì)過(guò)量表達(dá)，抑制巨噬細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá)和增強(qiáng)機(jī)體內(nèi)相關(guān)酶的活力來(lái)實(shí)現(xiàn)的［38］。

3.10 降糖 鹿角脫盤多肽不僅可降低肥胖和糖尿病小鼠（KKay）的血糖，還可顯著促進(jìn)胰島素抵抗人肝癌細(xì)胞HepG2 的葡萄糖消耗［39］，證明鹿角脫盤多肽具有顯著的降糖活性。

4 討論

鹿角脫盤長(zhǎng)期以來(lái)作為鹿茸、鹿角的附屬產(chǎn)物，國(guó)內(nèi)外對(duì)其研究較少，且主要集中在梅花鹿上，對(duì)馬鹿的研究更少?，F(xiàn)代物質(zhì)基礎(chǔ)及藥理研究［11］證實(shí)，多肽為其主要活性成分，但目前僅發(fā)現(xiàn)5 種多肽，有待于深入發(fā)掘；多糖類為其抗癌的主要活性成分，但詳細(xì)種類及數(shù)量也有待于深入發(fā)掘。

目前研究發(fā)現(xiàn)，梅花鹿鹿角脫盤多肽通過(guò)ER-α36介導(dǎo)的雌激素信號(hào)通路，調(diào)控Cyclin D1的表達(dá)，將癌細(xì)胞增殖阻滯在分裂間期，從而抑制癌細(xì)胞增殖；同時(shí)促進(jìn)細(xì)胞凋亡調(diào)控因子p-38 和c-Jun 高表達(dá)，抑制Bcl-2表達(dá)，從而促進(jìn)癌細(xì)胞凋亡，并與劑量及時(shí)間呈正相關(guān)。通過(guò)調(diào)控Cyclin 來(lái)治療乳腺癌為目前國(guó)際上主要的研發(fā)方向之一，例如CDK4/6 抑制劑等。所以鹿角脫盤多肽對(duì)乳腺癌細(xì)胞Cyclin 調(diào)控的細(xì)胞分子機(jī)制、作用靶點(diǎn)等值得深入研究。

目前乳腺增生患者的治療藥物以中成藥為主，占比高達(dá)95%以上；乳腺炎患者的治療藥物也以中成藥為主，占比為90%以上。這與我國(guó)女性的認(rèn)知及中成藥對(duì)乳腺疾病的獨(dú)特療效有關(guān)?；瘜W(xué)藥物由于其不良反應(yīng)及療效等原因，鮮有女性問(wèn)津。目前尚未有多肽緩控釋的乳腺治療外用藥及相關(guān)醫(yī)療器械等。相比于口服制劑，外用藥及醫(yī)療器械避免了首過(guò)效應(yīng)；相比于注射劑，外用藥及醫(yī)療器械安全性更高，所以研發(fā)鹿角脫盤多肽緩控釋乳房透皮吸收制劑及相關(guān)醫(yī)療器械等，值得探討?？紤]到我國(guó)女性患者對(duì)中藥的認(rèn)可度，及乳腺增生、乳腺炎的發(fā)病率不斷增長(zhǎng)，筆者認(rèn)為鹿角脫盤在此領(lǐng)域的發(fā)展前景較為廣闊。

鹿角脫盤對(duì)骨質(zhì)疏松癥的治療，目前僅研究到其超微粉及提取物對(duì)酶、激素的調(diào)控，尚未深入到多肽等對(duì)細(xì)胞、分子的調(diào)控層次。骨質(zhì)疏松癥的治療藥物由傳統(tǒng)的化學(xué)藥物逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)樯镏苿绕涫翘禺愋园邢蛏镄》肿?。?guó)內(nèi)抗癌藥研發(fā)進(jìn)行得如火如荼、競(jìng)爭(zhēng)激烈，但骨質(zhì)疏松癥領(lǐng)域則為短板，已經(jīng)大幅落后于發(fā)達(dá)國(guó)家。鹿角是哺乳動(dòng)物惟一可完全再生的器官，鹿茸、鹿角，及其附屬產(chǎn)物鹿角脫盤蘊(yùn)含著干細(xì)胞分化、發(fā)育、再生的秘密。破解這一秘密，對(duì)于骨再生具有重要意義。鹿角脫盤提取物具有雙向調(diào)節(jié)成骨、破骨細(xì)胞間的動(dòng)態(tài)平衡，進(jìn)而防治骨質(zhì)疏松的優(yōu)異特性，而鹿角脫盤多肽，尤其是小分子多肽在此領(lǐng)域的研究目前尚屬空白。

綜上所述，筆者認(rèn)為鹿角脫盤對(duì)于乳腺增生、乳腺癌、乳腺炎，以及骨質(zhì)疏松等疾病的治療價(jià)值較大，值得深入研究。鹿角脫盤在《中華人民共和國(guó)藥典》中按中藥材鹿角管理，但隨著研究的深入，發(fā)現(xiàn)鹿角脫盤與鹿角的物質(zhì)基礎(chǔ)、藥理作用等差別越來(lái)越大，不可混為一談，需辨證分析，將二者分開收載。