日糧脂肪水平對(duì)鯉生長(zhǎng)、血清生化指標(biāo)、糖代謝及抗氧化能力的影響

王文娟, 孟騫騫, 李美靜,2, 姚祖兵,2, 王宇江, 吳滿瑭, 張夢(mèng)勤, 王文秀

(1.西南大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院,重慶 榮昌 402460; 2.海南大學(xué)海洋學(xué)院,海南 海口 570228; 3.山東省濱州畜牧獸醫(yī)研究院,山東 濱州 256600)

脂類是魚(yú)類重要的營(yíng)養(yǎng)元素,魚(yú)類體內(nèi)的脂肪不僅具備基本的供能、貯能作用,還具有提供必需脂肪酸,溶解脂溶性維生素等多種功能[1]。魚(yú)類脂肪攝入不足時(shí),必需脂肪酸、脂溶性維生素也會(huì)隨之缺乏,從而導(dǎo)致魚(yú)類生長(zhǎng)遲緩甚至停滯、抗病力低下及代謝紊亂[2];同時(shí),魚(yú)類將增加對(duì)蛋白質(zhì)飼料的消耗以保證機(jī)體能量的供給從而造成蛋白質(zhì)資源的浪費(fèi)。因此,適當(dāng)增加日糧中的脂肪含量,不僅能夠滿足魚(yú)類對(duì)脂類的需要量,節(jié)約蛋白質(zhì)飼料,提高飼料利用率并減少養(yǎng)殖水體中氮的排放,有利于水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)發(fā)展[3]。

然而,高水平脂肪的攝入會(huì)增加動(dòng)物體內(nèi)脂質(zhì)的異常沉積、引發(fā)機(jī)體肥胖、代謝紊亂和炎癥,導(dǎo)致生長(zhǎng)受到抑制[4]。在對(duì)人和小鼠的研究中發(fā)現(xiàn),肥胖往往伴隨著血糖的升高。目前關(guān)于水產(chǎn)動(dòng)物糖脂代謝的研究大多集中于探究飼料糖類水平對(duì)糖代謝、脂代謝或日糧脂肪水平對(duì)脂代謝的影響,關(guān)于脂肪水平對(duì)魚(yú)類糖代謝影響的報(bào)道較少。魚(yú)類屬于先天性糖尿病體質(zhì),高脂肪飼料的攝入量關(guān)乎魚(yú)類的健康和生長(zhǎng)。在糖脂比對(duì)魚(yú)類影響的試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),隨著糖脂比的升高,瓦氏黃顙魚(yú)[5]、暗紋東方鲀(Takifuguobscurus)[6]、建鯉(Cyprinuscarpiovar. jian)[7]、吉富羅非魚(yú)(Oreochromisniloticus)[8]的腸道淀粉酶活性、血糖水平、血漿胰島素水平以及肝臟/肝胰臟的糖酵解酶如葡萄糖激酶(GK)、磷酸果糖激酶(PFK)、丙酮酸激酶(PK)活性及PKmRNA的表達(dá)升高,腸道脂肪酶活性及肝臟糖異生酶如磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)活性下降。在日糧糖類水平相等(粗纖維除外)的情況下,攝食含5%、10%脂肪日糧的大黃魚(yú)肝臟糖酵解酶如GK、PFK、PK及PEPCK活性因不同的糖源、糖水平呈現(xiàn)出不同的結(jié)果。由此推測(cè),日糧脂類可能是一個(gè)次于糖類的影響糖代謝的因素,對(duì)于魚(yú)類的生長(zhǎng)和健康亦非常重要。因此,本研究以鯉(Cyprinuscarpio)為試驗(yàn)動(dòng)物,通過(guò)調(diào)節(jié)日糧中脂肪含量,結(jié)合幼鯉生長(zhǎng)性能、形體指標(biāo)、血清生化指標(biāo)等探討日糧脂肪水平對(duì)魚(yú)類糖代謝及抗氧化能力的影響,為富含脂肪日糧在魚(yú)類上的應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)飼料

本試驗(yàn)日糧以豆粕和魚(yú)粉為主要蛋白質(zhì)來(lái)源,非轉(zhuǎn)基因大豆油為主要脂肪來(lái)源,次粉為主要糖類來(lái)源,制備4組不同脂肪水平的飼料,日糧脂肪水平分別為3.68%、7.60%、11.52%及15.44%(表1)。其中,所用氯化膽堿的有效含量為60%。每1 kg預(yù)混料提供VA5 100 IU、VD34 800 IU、VE4.8 mg、VK30.30 mg、VB13.00 mg、VB21.80 mg、VB61.20 mg、VB120.03 mg、甲硫氨酸6.00 mg、硫酸銅1.80 mg、硫酸鐵12.00 mg、硫酸錳3.60 mg;硫酸鋅6.00 mg;碘化鉀0.60 mg;輕質(zhì)碳酸鈣0.36 mg。

將豆粕、麩皮等原料粉碎后過(guò)60目篩,采用逐級(jí)擴(kuò)大方法混勻,按照配方比例加入豆油和適量水充分混合,用制粒機(jī)擠壓成直為2 mm的顆粒飼料,在恒溫鼓風(fēng)干燥箱(65 ℃)烘干后,于-20 ℃冰箱中保存?zhèn)溆?。風(fēng)干日糧營(yíng)養(yǎng)成分含量(表2)為實(shí)測(cè)值。

表1 風(fēng)干日糧組成

表2 風(fēng)干日糧營(yíng)養(yǎng)成分含量

1.2 試驗(yàn)魚(yú)與飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)用鯉幼魚(yú)購(gòu)買于甘家祠漁場(chǎng)(重慶榮昌,105.6°E,29.4°N),購(gòu)買的魚(yú)苗經(jīng)3% NaCl溶液消毒后暫養(yǎng)于西南大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院養(yǎng)殖基地水泥池(2.35 m×1.20 m×0.70 m)中,7 d后挑選規(guī)格相近、健康活潑的幼魚(yú)300尾,每尾(17.90±0.16) g隨機(jī)分為4組,每組3個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)25尾魚(yú),養(yǎng)殖于玻璃水族缸(1.10 m×0.40 m×0.40 m)中。每日定時(shí)(8:00,13:00,18:00)投喂,待魚(yú)飽食,清理剩余餌料和糞便。投喂期間觀察并記錄水溫、攝食及生長(zhǎng)情況,微流水養(yǎng)殖,24 h持續(xù)充氧,每日換水1/3。養(yǎng)殖試驗(yàn)期間,維持養(yǎng)殖水體溶氧量高于6.5 mg/L,水溫為25～30 ℃,pH值為7.0～7.7,水體銨態(tài)氮濃度低于 0.05 mg/L,養(yǎng)殖周期為58 d。

1.3 樣品采集及分析方法

1.3.1 樣品采集 養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束后,禁食24 h,統(tǒng)計(jì)每個(gè)水族缸中所投喂的飼料質(zhì)量、幼鯉的尾數(shù),并稱取每缸魚(yú)總質(zhì)量,用于計(jì)算生長(zhǎng)性能。每個(gè)缸中隨機(jī)挑選3尾魚(yú),測(cè)量體質(zhì)量和量取體長(zhǎng);采用尾靜脈采血方式收集血液于離心管中,靜置2 h,以3 000 r/min離心10 min,取血清,保存?zhèn)錅y(cè);將魚(yú)放在冰盤上解剖,分離內(nèi)臟團(tuán)、肝胰臟以及腸道,分別稱質(zhì)量并測(cè)定腸道長(zhǎng)度;將肝胰臟樣品取出,液氮速凍后保存于-80 ℃冰箱中,用于測(cè)定肝胰臟糖代謝酶活性及抗氧化酶活性;另取5尾魚(yú)剪碎后凍干,保存于-20 ℃冰箱中以測(cè)定魚(yú)體成分。

1.3.2 分析方法 參考張麗英的方法[9]對(duì)飼料常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分及魚(yú)體成分進(jìn)行測(cè)定,即分別采用105 ℃烘箱干燥法、半微量凱氏定氮法、魯氏殘留法及馬弗爐灰化法測(cè)定魚(yú)體水分、粗蛋白、粗脂肪及粗灰分含量。

用日立7600-110型全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定血清中的總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)及葡萄糖(GLU)含量。

取肝胰臟組織塊約 0.2 g于玻璃勻漿器中,加入9倍體積的0.86%冷生理鹽水,在冰浴中充分研磨,制成勻漿液,將勻漿液移入1.5 ml離心管中,3 000 r/min冷凍離心10 min,取上清液待測(cè)。肝胰臟丙酮酸激酶(PK)、乳酸脫氫酶(LDH)、乳酸(LD)含量、超氧化物歧化酶(T-SOD)、過(guò)氧化氫酶(CAT)及谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)活性及組織蛋白(TP)含量采用南京建成生物公司生產(chǎn)的試劑盒測(cè)定;磷酸果糖激酶(PFK)及己糖激酶(HK)活性采用蘇州夢(mèng)犀生物公司生產(chǎn)的試劑盒測(cè)定。

1.4 計(jì)算公式

1.4.1 生長(zhǎng)指標(biāo) 生長(zhǎng)指標(biāo)包括增重率(WGR)、特定生長(zhǎng)率(SGR)、飼料系數(shù)(FCR)、成活率(SR)。

WGR=(Wt-W0)/W0×100%

SGR=( lnWt-lnW0)/t×100%

FCR=F/(Wt-W0)

SR=Nt/N0×100%

式中:Wt為終末質(zhì)量(g);W0為初始質(zhì)量(g);t為養(yǎng)殖周期(58 d);F為飼料質(zhì)量(g);Nt為終末每缸魚(yú)總數(shù);N0為初始每缸魚(yú)總數(shù)。

1.4.2 形體指標(biāo) 形體指標(biāo)包括臟體比(VSI)、腸長(zhǎng)系數(shù)(ILI)、肥滿度(CF)。

VSI=Wv/W×100%

ILI=Lvi/L×100%

CF=W/L3×100%

式中:W為體質(zhì)量(g);Wv為內(nèi)臟團(tuán)質(zhì)量(g);Lvi為腸長(zhǎng)(cm);L為體長(zhǎng)(cm)。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析

用SAS9.4軟件進(jìn)行單因素方差分析(One-way ANOVA),并使用Duncan’s法進(jìn)行多重比較,結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示,P<0.05表示顯著差異。

2 結(jié) 果

2.1 日糧脂肪水平對(duì)幼鯉生長(zhǎng)及形體指標(biāo)的影響

日糧脂肪水平對(duì)飼料系數(shù)(FCR)、增重率(WGR)、特定生長(zhǎng)率(SGR)無(wú)顯著影響(P>0.05)(表3)。隨著日糧脂肪水平的升高,飼料系數(shù)(FCR)逐漸增加,但差異不顯著(P>0.05)。試驗(yàn)期間,各試驗(yàn)組幼鯉成活率(SR)均為100%。本試驗(yàn)條件下,盡管日糧脂肪水平較高的兩組幼鯉肥滿度(CF)在數(shù)值上高于脂肪水平較低的兩組幼鯉,但日糧脂肪水平對(duì)幼鯉臟體比(VSI)、腸長(zhǎng)系數(shù)(ILI)及肥滿度(CF)無(wú)顯著影響(P>0.05)。

2.2 日糧脂肪水平對(duì)幼鯉魚(yú)體組成的影響

不同日糧脂肪水平對(duì)幼鯉粗蛋白含量無(wú)顯著影響(表4)。幼鯉水分含量隨日糧脂肪水平的升高逐漸降低,15.44%日糧脂肪水平幼鯉水分含量(70.29%±1.81%)顯著低于其余3組(P<0.05)。幼鯉粗脂肪含量隨日糧脂肪水平的升高而持續(xù)升高,其中,15.44%日糧脂肪水平幼鯉粗脂肪含量顯著高于11.52%日糧脂肪水平,11.52%日糧脂肪水平幼鯉粗脂肪含量顯著高于3.68%日糧脂肪水平,15.44%日糧脂肪水平幼鯉粗脂肪含量顯著高于其他3個(gè)日糧脂肪水平(P<0.05)。3.68%和7.60%日糧脂肪水平幼鯉粗灰分含量顯著高于11.52%日糧脂肪水平(P<0.05)。

表3 不同日糧脂肪水平的幼鯉生長(zhǎng)指標(biāo)和形體指標(biāo)

表4 不同日糧脂肪水平的幼鯉魚(yú)體組成

2.3 日糧脂肪水平對(duì)幼鯉血清生化指標(biāo)的影響

隨著日糧脂肪水平的提高,幼鯉血清中葡萄糖(GLU)、總膽固醇(TC)及甘油三酯(TG)含量呈現(xiàn)逐漸升高的趨勢(shì),但各日糧脂肪水平幼鯉血清中葡萄糖(GLU)含量差異不顯著(P>0.05)(表5)。3.68%日糧脂肪水平幼鯉血清中總膽固醇(TC)含量[(4.41±0.24) mmol/L]顯著低于其他3個(gè)日糧脂肪水平(P<0.05),11.52%和15.44%日糧脂肪水平的幼鯉血清中的甘油三酯(TG)含量顯著高于7.60%日糧脂肪水平(P<0.05)。隨著日糧脂肪水平升高,幼鯉血清中高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)含量表現(xiàn)出升高的趨勢(shì),3.68%日糧脂肪水平幼鯉血清中高密度脂蛋白(HDL)[(2.96±0.16) mmol/L]和低密度脂蛋白(LDL)[(4.41±0.24) mmol/L]含量均顯著低于其他3個(gè)日糧脂肪水平(P<0.05)。其中15.44%日糧脂肪水平的幼鯉血清中高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)含量均最高,分別為(3.82±0.14) mmol/L和(5.86±0.32) mmol/L。

2.4 日糧脂肪水平對(duì)鯉幼魚(yú)肝胰臟糖代謝酶活性的影響

本試驗(yàn)條件下,日糧脂肪水平對(duì)幼鯉肝胰臟糖酵解酶活性及乳酸(LD)含量有顯著影響(P<0.05)(表6)。7.60%日糧脂肪水平幼鯉肝胰臟己糖激酶(HK)活性最高,顯著高于其他3個(gè)日糧脂肪水平(P<0.05)。隨著日糧脂肪水平升高,幼鯉肝胰臟6-磷酸果糖激酶(PFK)活性升高,3.68%日糧脂肪水平幼鯉肝胰臟6-磷酸果糖激酶(PFK)活性最低,顯著低于11.52%和15.44%日糧脂肪水平(P<0.05)。隨著日糧脂肪水平升高,幼鯉肝胰臟丙酮酸激酶(PK)及乳酸脫氫酶(LDH)活性呈現(xiàn)出先降低后升高的趨勢(shì)。7.60%日糧脂肪水平幼鯉肝胰臟丙酮酸激酶(PK)活性最低,15.44%日糧脂肪水平最高,顯著高于其他3個(gè)日糧脂肪水平(P<0.05)。7.60%和11.52%日糧脂肪水平幼鯉肝胰臟乳酸脫氫酶(LDH)活性均顯著低于3.68%日糧脂肪水平,15.44%日糧脂肪水平幼鯉肝胰臟乳酸脫氫酶(LDH)活性顯著高于3.68%日糧脂肪水平。3.68%和7.60%日糧脂肪水平幼鯉肝胰臟乳酸(LD)含量顯著低于11.52%和15.44%日糧脂肪水平幼鯉(P<0.05)。

表5 不同日糧脂肪水平的幼鯉血清生化指標(biāo)

表6 不同日糧脂肪水平的幼鯉肝胰臟糖代謝酶活性和乳酸含量

2.5 日糧脂肪水平對(duì)鯉幼魚(yú)肝胰臟抗氧化能力的影響

日糧脂肪水平對(duì)肝胰臟抗氧化酶活性存在影響(表7)。15.44%日糧脂肪水平幼鯉肝胰臟過(guò)氧化氫酶(CAT)活性高于其他3個(gè)日糧脂肪水平(P<0.05)。各日糧脂肪水平間幼鯉肝胰臟總超氧化物歧化酶(T-SOD)和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)活性差異不顯著 (P>0.05)。

表7 不同日糧脂肪水平的幼鯉肝胰臟抗氧化酶活性

3 討 論

3.1 日糧脂肪水平對(duì)幼鯉生長(zhǎng)性能的影響

脂類在魚(yú)、蝦類生命代謝過(guò)程中具有多種生理功用,是魚(yú)、蝦類所必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。日糧中脂肪不足會(huì)導(dǎo)致機(jī)體代謝紊亂,營(yíng)養(yǎng)缺乏,飼料利用率下降、生長(zhǎng)抑制等[4]。陳云飛[10]指出適當(dāng)增加飼料中脂肪含量能有效促進(jìn)草魚(yú)增重率和特定生長(zhǎng)率的提高。在點(diǎn)藍(lán)子魚(yú)(Siganusguttatus)[11]、額爾齊斯河銀鯽(Carass-iusauratusgibelioBlock)[12]、白甲魚(yú)(Onychostomasimum)[13]、異育銀鯽幼魚(yú)(Carassiusauratusgibelio)[14]、吉富羅非魚(yú)[15]的試驗(yàn)中也得到了類似的結(jié)果。然而,飼料中過(guò)多的脂肪不利于魚(yú)類的生長(zhǎng)。李雪菲[16]、許明珠[17]等在美國(guó)紅魚(yú)(Sciaenopsocellatus)及擬穴青蟹(Scyllaparamamosain)仔蟹的試驗(yàn)中持續(xù)增加飼料中的脂肪水平,動(dòng)物的WGR和SGR降低。關(guān)于黃鱔(MonopterualbusZuiew)[18]、團(tuán)頭魴(Megalobramaamblycephala)[19]、雜交石斑魚(yú)(Epinephelusfuscoguttatus×Epinepheluspolyphekadion)[20]的研究結(jié)果也證實(shí)了這一點(diǎn)。本試驗(yàn)中,隨著日糧脂肪水平的提高,WGR和SGR下降,FCR上升。然而,付世建等[21]發(fā)現(xiàn)南方鯰的生長(zhǎng)性能隨飼料脂肪水平的升高而升高,這可能與其所設(shè)置的脂肪水平未超出南方鯰的需要量有關(guān)。

3.2 日糧脂肪水平對(duì)幼鯉形體指標(biāo)和魚(yú)體組成的影響

魚(yú)類的形體指標(biāo)能夠初步反映魚(yú)體的營(yíng)養(yǎng)狀況和健康狀況,包括臟體比、腸長(zhǎng)系數(shù)、肥滿度等。當(dāng)魚(yú)類從飼料中攝入的脂肪較高時(shí),導(dǎo)致脂肪在腹腔、肝胰臟以及腸道等部位積累[22]。本試驗(yàn)中 ,日糧脂肪水平對(duì)臟體比、肥滿度及腸長(zhǎng)系數(shù)無(wú)顯著影響,這與Marins等[23]在比目魚(yú)(HippoglossushippoglossusL.)中的試驗(yàn)結(jié)果相同。然而,在軍曹魚(yú)(Rachy-centroncanadum)[24]、鱈魚(yú)(Melanogrammusaeglefinus)[25]、吉富羅非魚(yú)[26]的試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),飼料脂肪水平的升高會(huì)顯著提升魚(yú)體的臟體比和肥滿度。造成這些差異的原因可能是不同種魚(yú)類脂肪沉積的部位不同。

魚(yú)體的粗脂肪含量是影響魚(yú)肉品質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的重要指標(biāo),也是決定水產(chǎn)品加工性能的關(guān)鍵因素,研究結(jié)果表明,魚(yú)體脂肪含量通常隨著飼料脂肪含量的升高而升高[22]。本試驗(yàn)中,隨日糧脂肪水平的升高,魚(yú)體脂肪含量顯著增加,水分含量持續(xù)降低,與點(diǎn)籃子魚(yú)[11]、軍曹魚(yú)[24]、梭魚(yú)(Chelonhaematocheilus)[27]、淡水黑鯛(Hephaestusfuliginosus)[28]、春鯉(Cyprinuslongipectoralis)[29]及黑尾近紅鲌(Ancherythroculternigrocauda)[30]等的研究結(jié)果相似。鑒于形體指標(biāo)的結(jié)果,本試驗(yàn)中,隨著日糧脂肪水平的升高,脂肪可能在非內(nèi)臟部位如肌肉中的沉積增加。高攀等[12]在關(guān)于額爾齊斯河銀鯽的研究中也發(fā)現(xiàn)日糧脂肪水平對(duì)臟體比、肝體比及肥滿度沒(méi)有影響,全魚(yú)及肌肉脂肪含量隨日糧脂肪水平的升高顯著升高。

3.3 日糧脂肪水平對(duì)幼鯉血清生化指標(biāo)的影響

血清生化指標(biāo)是反映魚(yú)體生理狀況的重要指標(biāo),受飼料、環(huán)境等多種因素的影響。在大菱鲆 (Psettamaxi-ma)[31]、紅鰭東方鲀(Takifugurubripes)[32]、團(tuán)頭魴(Megalobramaamblycephala)[33]、大西洋鮭(Salmosalar)[34]及血鸚鵡(Viejasynspila×Amphilophuscitrinellus)[35]等魚(yú)的血液指標(biāo)中發(fā)現(xiàn),當(dāng)所投喂的飼料脂肪含量升高時(shí),對(duì)應(yīng)的試驗(yàn)魚(yú)血清中TC、TG含量會(huì)隨之升高,本試驗(yàn)亦如此。體內(nèi)脂質(zhì)主要是以血漿脂蛋白的形式運(yùn)輸,其中HDL的作用是將肝臟外的膽固醇輸入肝臟進(jìn)行分解,而LDL的作用正好相反,將內(nèi)源性膽固醇輸送到肝外的各個(gè)組織[36]。本試驗(yàn)中,血清HDL與LDL含量均隨日糧脂肪水平的升高而顯著升高,與大口黑鱸(Micropterussalmoides)[37]、梭魚(yú)[38]、額爾齊斯河銀鯽[12]的研究結(jié)果相似,表明隨著日糧脂肪水平的增加,機(jī)體脂代謝增強(qiáng)。血糖是機(jī)體維持穩(wěn)態(tài)的重要指標(biāo)之一[39],受飼料成分、應(yīng)激反應(yīng)等多種因素的影響,肌糖原和肝糖原對(duì)于維持血糖的平穩(wěn)起到重要作用。馬紅娜等[40]、陸游等[41]分別以葡萄糖和小麥淀粉作為糖源飼喂大黃魚(yú),發(fā)現(xiàn)在任何糖類水平下,10%日糧脂肪水平與5%日糧脂肪水平的血糖含量差異不顯著;在不同糖類水平下,肝糖原和肌糖原含量對(duì)日糧脂肪水平的響應(yīng)不同,例如,當(dāng)飼料中小麥淀粉或葡萄糖含量為10%和20%時(shí),10%日糧脂肪水平大黃魚(yú)肌糖原含量顯著低于5%日糧脂肪水平,當(dāng)?shù)矸酆繛?0%時(shí),10%日糧脂肪水平大黃魚(yú)肌糖原含量又顯著高于5%日糧脂肪水平。肝糖原對(duì)飼料中葡糖糖水平的響應(yīng)比淀粉水平更敏感,不同葡萄糖水平,10%日糧脂肪水平大黃魚(yú)肌糖原、肝糖原含量與5%日糧脂肪水平大黃魚(yú)肌糖原、肝糖原含量差異均顯著;而日糧中不同小麥淀粉水平,不同脂肪水平間大黃魚(yú)肝糖原含量差異不顯著。本試驗(yàn)次粉含量為20%,隨著日糧脂肪水平的升高,血糖呈現(xiàn)上升趨勢(shì),但差異不顯著。因此,如果延長(zhǎng)飼喂時(shí)間或者增加日糧脂肪水平變化的幅度,超出機(jī)體對(duì)血糖的調(diào)節(jié)能力,血糖可能會(huì)呈現(xiàn)顯著性差異。

3.4 日糧脂肪水平對(duì)鯉肝胰臟糖代謝酶活性的影響

糖的無(wú)氧酵解及有氧氧化、糖異生、磷酸戊糖途徑等是魚(yú)類重要的糖代謝途徑。HK、PFK、PK是糖酵解的關(guān)鍵酶。以小麥淀粉為飼料糖源的大黃魚(yú)(Larimichthyscrocea)的試驗(yàn)結(jié)果[41]表明,糖酵解酶、糖異生酶活性與脂肪水平無(wú)關(guān)。而在本試驗(yàn)中,脂肪水平較高時(shí),鯉肝胰臟PFK和PK的活性較高,與翹嘴紅鲌(Erythrocu-lterilishaeformis)[42]及以葡萄糖為糖源的大黃魚(yú)的研究結(jié)果[40]相似,這說(shuō)明飼料脂肪水平對(duì)糖酵解有影響,其作用受魚(yú)種類以及飼料中脂肪種類、脂肪水平、糖源種類、糖含量等的影響。同時(shí)在本試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),日糧脂肪水平最低時(shí),幼鯉肝胰臟PK活性較高,與低脂組草魚(yú)[43]、吉富羅非魚(yú)[44]糖酵解酶基因表達(dá)及酶活性顯著高于其他組的試驗(yàn)結(jié)果一致。由此可以推斷對(duì)于一些魚(yú)類,能夠通過(guò)增強(qiáng)糖酵解供能來(lái)適應(yīng)低脂日糧。在王秋梅等[44]關(guān)于吉富羅非魚(yú)的研究中發(fā)現(xiàn),脂肪含量較高的兩組試驗(yàn)魚(yú)肝臟PFK活性較低,可能與該試驗(yàn)設(shè)置的脂肪水平較低有關(guān)。

在生物體內(nèi),LDH的主要作用在于可逆地催化丙酮酸與LD之間的轉(zhuǎn)化,參與機(jī)體的能量代謝調(diào)控。LDH是組織損傷判定的重要指標(biāo),當(dāng)魚(yú)類受到低氧脅迫時(shí),組織中LDH活性顯著升高[45]。本試驗(yàn)中當(dāng)日糧脂肪水平為15.44% 時(shí),鯉肝胰臟LDH活性顯著高于其他3個(gè)日糧脂肪水平,與西伯利亞雜交鱘(AcipenserbaeriiBrandt×A.schrenckiiBrandt)[46]血清LDH活性以及斜帶石斑魚(yú)(Epinepheluscoioides)[47]肝臟LDH活性隨飼料脂肪水平升高而升高的試驗(yàn)結(jié)果相似。這可能與飼喂高脂肪水平日糧導(dǎo)致動(dòng)物肝臟氧化受損有關(guān)[48]。LD是糖無(wú)氧酵解產(chǎn)物,同時(shí)也是供能代謝的重要底物,當(dāng)肝胰臟無(wú)氧代謝能力增強(qiáng)時(shí),LD累積增加。本試驗(yàn)中,當(dāng)日糧脂肪水平超過(guò)11.52%時(shí),鯉肝胰臟LD含量顯著增加,說(shuō)明高脂日糧會(huì)導(dǎo)致組織無(wú)氧酵解增強(qiáng)。

3.5 日糧脂肪水平對(duì)鯉肝胰臟抗氧化能力的影響

魚(yú)類的抗氧化系統(tǒng)對(duì)魚(yú)體的健康和生長(zhǎng)起著重要作用。在抗氧化酶系統(tǒng)中,SOD、CAT及GSH-Px是清除自由基的主要抗氧化酶[49-51]。SOD的作用是將機(jī)體產(chǎn)生的超氧陰離子自由基還原成過(guò)氧化氫(H2O2);CAT則是將機(jī)體產(chǎn)生的H2O2轉(zhuǎn)化為H2O和O2;GSH-Px能夠?qū)⒂卸镜倪^(guò)氧化物還原成無(wú)毒的羥基化合物,保護(hù)細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)和功能不受過(guò)氧化物的損害[52]。研究發(fā)現(xiàn),過(guò)多的飼料脂肪會(huì)導(dǎo)致魚(yú)體內(nèi)脂質(zhì)氧化產(chǎn)物增加,進(jìn)而引起抗氧化酶活性升高,以此維持體內(nèi)氧化與抗氧化的平衡[53]。本試驗(yàn)中,日糧脂肪水平升高,鯉肝胰臟CAT酶活力升高,表明魚(yú)體處于氧化應(yīng)激狀態(tài),與朱婷婷等[54]對(duì)俄羅斯鱘(Acipensergueldenstaedtii)幼魚(yú)的研究結(jié)果一致。隨著脂肪水平的升高,褐菖鲉(Sebastiscusmarmoratus)肝臟[55]、胭脂魚(yú)(Myxocyprinusnsiaticu)肝胰臟[56]抗氧化酶活性呈先增加后降低趨勢(shì),前者丙二醛含量持續(xù)增加,后者丙二醛含量呈先降后升的趨勢(shì)。這說(shuō)明抗氧化功能的發(fā)揮與日糧中的油脂種類及其含量有關(guān),日糧中過(guò)高的或過(guò)低的脂肪含量均不利于機(jī)體的抗氧化功能;在低脂日糧中,以魚(yú)油或魚(yú)粉中的油脂為日糧油脂來(lái)源的魚(yú)體抗氧化性能優(yōu)于以豆油為日糧油脂來(lái)源的魚(yú)體。

4 結(jié) 論

本研究發(fā)現(xiàn),日糧脂肪水平過(guò)高會(huì)導(dǎo)致幼鯉生長(zhǎng)性能下降,影響魚(yú)體組成、血脂含量及糖酵解,造成氧化應(yīng)激。