Sysmex XN系列血細胞分析儀與顯微鏡鏡檢對白細胞分類計數(shù)百分比檢測中的對比分析

吳炳榮 上饒市鄱陽縣疾病預(yù)防控制中心 （江西 上饒 333100）

內(nèi)容提要：目的：評價Sysmex XN系列血細胞分析儀（儀器法）與顯微鏡鏡檢（鏡檢法）對白細胞分類計數(shù)的準確性，為臨床標本檢查的規(guī)范化提供依據(jù)。方法：選擇90份用儀器法檢測血常規(guī)結(jié)果出現(xiàn)白細胞分類計數(shù)有報警提示的標本，同時進行顯微鏡鏡檢（鏡檢法）復(fù)檢，比較儀器法和金標準鏡檢法的結(jié)果。結(jié)果：送檢的90例血清樣本，有62例為真陽性，符合率為68.89%；28例呈現(xiàn)假陽性，假陽性率占31.11%。儀器法檢測存在單核細胞假性升高，中性粒細胞假性減低現(xiàn)象。結(jié)論：Sysmex XN系列血細胞分析儀白細胞出現(xiàn)報警提示可以有效篩選陽性標本，但同時對陽性標本需要進行人工鏡檢復(fù)核，以避免假陽性結(jié)果。

隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)不斷發(fā)展，醫(yī)療器械更新?lián)Q代也日趨頻繁，血細胞分析儀也從最初的二分類、三分類發(fā)展到如今的五分類全自動血細胞分析儀。這些自動分析儀的投入使用，讓可檢驗的項目種類更多、更全，用時也更短，檢測結(jié)果也更精密和準確。也是因為這些自動分析儀的投入，臨床中人工鏡檢的使用率明顯降低。但實際上當人體外周血細胞發(fā)現(xiàn)病理改變時，尤其出現(xiàn)紅細胞形態(tài)變化時，全自動血細胞分析儀對細胞形態(tài)改變不夠精確。以Sysmex XN-1000型號為例，該設(shè)備是通過半導(dǎo)體激光流式細胞分析及核酸染色法對血細胞進行分析，但當人體內(nèi)血液發(fā)生溶血、高膽紅素血癥、高脂血癥、乳糜血等情況時，對儀器檢測就會造成較大的影響，儀器顯示的數(shù)值常會與真實數(shù)值存在較大差異，因此并不能完全摒棄人工鏡檢[1]?；诖?，本文以SysmexXN-1000全自動血細胞分析儀為例，將其對白細胞五分類異常檢測結(jié)果與人工鏡檢的結(jié)果進行對比分析，以評價SysmexXN-1000血細胞分析儀的臨床診療價值。

1.資料與方法

1.1 一般資料

將上饒市鄱陽縣蓮湖鄉(xiāng)中心衛(wèi)生院檢驗科攬收的行血細胞計數(shù)檢查樣本作為研究對象，具體抽樣方式為2021年10月1日～2021年10月30日每天都從XN-1000細胞分析儀選擇3份提示白細胞分類報警信息的樣本，連續(xù)30日共收集90例樣本，樣本收集處理后送至上饒市鄱陽縣疾病預(yù)防控制中心檢測。

1.2 試劑與儀器

儀器選擇：希森美康生產(chǎn)SysmexXN-1000型血細胞分析儀，對應(yīng)的試劑、質(zhì)控品、校準品等均采用廠家配套；人工鏡檢光學(xué)顯微鏡選擇奧林巴斯生產(chǎn)光學(xué)顯微鏡；希森美康SP-1000i推片儀的染色液為珠海BASO生物技術(shù)生產(chǎn)瑞士-吉姆薩染色液。

1.3 “報警信息”系統(tǒng)設(shè)置

SysmexXN-1000分析儀出現(xiàn)報警信息時一般分為可疑性信息及異常信息兩種，對于可疑報警信息一般分析儀會對每個信息設(shè)置直方圖，檢驗人員可通過直方圖判斷報警信息的真實性。通常每個報警指標的臨界值設(shè)定為100，當某指標Q-flag值<100，提示陰性；若該指標Q-flag值為100～300則判斷為陽性。Q-flag值越高，意味著可信度也更高[2]。白細胞相關(guān)報警信息主要包括散點圖分布異常、白細胞計數(shù)升高或降低、中性粒細胞計數(shù)降低或升高、淋巴細胞計數(shù)升高或降低、單核細胞計數(shù)升高、嗜酸粒細胞計數(shù)升高、嗜堿粒細胞計數(shù)升高、未成熟粒細胞存在、核左移、異常淋巴細胞等。

1.4 方法

1.4.1 儀器法

血液采集后2h內(nèi)進行檢測，排除標本發(fā)生凝塊、凝集、溶血等現(xiàn)象。具體方法如下：確認儀器狀態(tài)良好，應(yīng)用廠家配套校準品對一起進行校準，后保證SysmexXN-1000分析儀時刻處于工作狀態(tài)并嚴格進行室內(nèi)控制，在儀器工作正常前提下評價儀器的性能。

①空白計數(shù)：將SysmexXN-1000稀釋液選作受檢樣本，在體液模式下連續(xù)3次對其進行化驗，將每項檢查最高值作為最終得到的檢測結(jié)果數(shù)值。儀器出廠設(shè)置標準計數(shù)為：白細胞計數(shù)≤1×106/L，紅細胞計數(shù)≤3×109/L。本研究將SysmexXN-1000稀釋液當做受檢樣本，經(jīng)反復(fù)三次檢查后白細胞計數(shù)均提示為0，紅細胞計數(shù)也一樣為0，兩項指標均顯著低于廠商設(shè)定的標準值。因此，SysmexXN-1000血細胞分析儀空白計數(shù)值完全符合臨床檢測標準。

②連續(xù)3次檢測證實儀器質(zhì)控良好后應(yīng)用Sysmex XN-1000分析儀對本次納入研究的90個血清標本進行全血細胞分析。

1.4.2 手工法

納入研究的90份血清標本均采用統(tǒng)一推片儀進行推片、染色，隨后進行白細胞分類計數(shù)分析，將平均值作為計數(shù)結(jié)果。人工鏡檢由經(jīng)驗豐富的檢驗醫(yī)師完成，具體操作流程嚴格按第四版《全國臨床檢驗操作規(guī)程》進行，將血涂片進行白細胞分類并與全自動血細胞分析儀進行對比[3]。進行血涂片分析時，注意染色應(yīng)深淺適宜，細胞展開良好、位置分布均勻，在血片體尾交接處。每張血涂片分類100個白細胞，取2張血片各類細胞均值，同時注意觀察是否有幼稚細胞、異常淋巴細胞及其他異常細胞形態(tài)。顯微鏡下注意分辨是否有嗜堿性粒細胞（Basophils，BA）、嗜酸性粒細胞（Eosinophil，EO）、單核細胞（Monocyte，MO）、淋巴細胞（Lymphocyte，LY）以及中性粒細胞（Neutrophilicgranulocyte，NE）等各類異常細胞。人工顯微鏡分類復(fù)檢：BA>1.5%、EO>6.5%、LY>65%、NE>85%以及2.0×109/L

1.5 統(tǒng)計學(xué)分析

所有數(shù)據(jù)均錄入SPSS 21.0并進行統(tǒng)計學(xué)分析，檢測結(jié)果進行配對樣本t檢驗，P<0.05為有顯著差異。

2.結(jié)果

2.1 白細胞分類儀器報警提示檢測樣本的鏡檢結(jié)果

90例樣本中，62例真陽性，符合率為68.89%；28例假陽性，假陽性率為31.11%，見表1。

表1.白細胞分類儀器報警提示檢測樣本的鏡檢結(jié)果

2.2 白細胞分類儀器法與鏡檢法結(jié)果比較

本研究顯示，儀器法檢測存在單核細胞假性升高，中性粒細胞假性減低現(xiàn)象，見表2。

表2.白細胞分類儀器法與鏡檢法結(jié)果比較

3.討論

血細胞分析是臨床最常用的檢驗項目，對多種疾病診斷具有重要價值。白細胞計數(shù)和分類價值最高，尤其對血液系統(tǒng)疾病的診斷，對良惡性血液病的診斷及預(yù)后評估具有重要作用。不同的白細胞分類計數(shù)對應(yīng)不同生理功能，不同誘發(fā)因素也可引發(fā)不同類型白細胞出現(xiàn)改變，比如細菌、病毒、真菌感染等。因此，及時完善血常規(guī)檢查，明確各類白細胞計數(shù)及分類能夠更真實反映患者機體處于生理還是病理情況。WBC分類及計數(shù)可能受許多影響因素感染，比如存在抗凝不充分、高脂血癥、高蛋白血癥、乳糜血、外周血內(nèi)存在較多有核紅細胞、巨大血小板或血小板病理性聚集等。傳統(tǒng)人工鏡檢即檢驗醫(yī)師用顯微鏡對血涂片中白細胞進行計數(shù)統(tǒng)計和人工分類，該檢查比較繁瑣，且依賴較大人力資源，近年來，隨著各醫(yī)療機構(gòu)對全自動血細胞分析儀的引進，已經(jīng)越來越少應(yīng)用人工進行鏡檢，盡管全自動血細胞分析儀能夠大幅度降低血常規(guī)的檢驗壓力，但在實際臨床中其取得的結(jié)果準確性在特定情況下尚有爭議。全自動血細胞分析儀具有操作簡單、快捷、重復(fù)性高、精密度高等特點，被廣泛用于各醫(yī)療機構(gòu)檢驗科中。不過，不同儀器原理、不同廠家型號，各儀器間的檢測結(jié)果也存在一定系統(tǒng)差異。而全自動血細胞分析儀對臨床多種疾病診斷均有較高的價值，能夠顯著提高診斷效率和準確率，也是幫助醫(yī)師盡早完成診斷和贏取寶貴救治時間的關(guān)鍵所在，因此也被廣泛應(yīng)用。XN-1000作為Sysmex系列產(chǎn)品中非常先進的技術(shù)模塊顛覆了傳統(tǒng)的全自動血細胞分析原理，同時具有流式細胞術(shù)及電阻抗雙重計數(shù)原理，還能夠依據(jù)客戶檢驗需求進一步進行個性化設(shè)置，比如產(chǎn)品參數(shù)、處理速度、自動復(fù)檢方式、試劑系統(tǒng)、擺放方式以及標本分類等[4,5]。不過，全自動血細胞分析儀在對各類細胞形態(tài)進行分析時，尤其是體內(nèi)存在大量有核紅細胞、異型淋巴細胞、幼稚細胞、原始細胞等進行分類時存在一定不足，如過度依賴儀器不做人工鏡檢就會造成漏診甚至誤診，引發(fā)不必要醫(yī)療糾紛。并且，通過與核酸熒光染色、半導(dǎo)體激光、熒光染料染色等諸多技術(shù)手段相結(jié)合，SysmexXN-1000能夠?qū)ρ逯杏行纬煞诌M行準確的定量分析。并且其檢測結(jié)果也被證實比該公司XE系列產(chǎn)品更優(yōu)越。SysmexXN-1000還貼心的設(shè)置了低值白細胞通道，因該通道模式中WBC計數(shù)是全血計數(shù)的3倍之多，因此再次通道模式下散點圖中會有許多散點，這種模式檢測低值白細胞時結(jié)果會更準確，也更方便檢驗人員對低值白細胞標本進行化驗，會降低人工鏡檢的壓力，提高臨床診斷效率。戰(zhàn)偉等研究指出[6-8]，全自動血細胞分析儀不僅可以對全血多種細胞進行計數(shù)統(tǒng)計，還可以通過設(shè)置低值血小板、白細胞通道等對低值結(jié)果進行反復(fù)重復(fù)復(fù)查，還可以對異常結(jié)果進行報警提醒，同傳統(tǒng)人工計數(shù)及涂片復(fù)查對比，不僅更簡單、快捷，還大幅度提高了PLT及WBC低值結(jié)果的檢測準確度，顯著優(yōu)于過去的阻抗及光學(xué)檢測分析儀。不過不管自動化還是人工智能發(fā)展如何完美，仍不能完全取代人工鏡檢在臨床檢驗中的重要性，人工是智能不能替代的，需要將人工與自動化相結(jié)合，互為補充，這樣才能更合理的對疾病和診斷進行判斷[9]。

儀器的本底計數(shù)是整個檢驗結(jié)果的關(guān)鍵，一旦出現(xiàn)誤差，會直接導(dǎo)致結(jié)果失真。本研究中儀器空白計數(shù)結(jié)果極低，白細胞及紅細胞的檢驗數(shù)值均為0，完全能夠滿足臨床檢驗需求。本研究結(jié)果也證實，當全自動血細胞分析儀出現(xiàn)報警提醒時，與人工鏡檢相比，中性粒細胞、單核細胞計數(shù)兩組有顯著差異；淋巴細胞、嗜酸粒細胞、嗜堿粒細胞、幼稚粒細胞等方面對比則沒有明顯差異。分析原因考慮白細胞出現(xiàn)報警提醒樣本，多取樣與惡性腫瘤正處于化療或血液病患者，這類患者血清中存在較多的中毒顆粒，因此原始細胞、異常淋巴細胞等含量也相對較高，這時經(jīng)溶血素處理后染色質(zhì)疏松程度、胞漿顆粒、細胞體積與單核細胞有很高的相似度，自動分析儀可能會將這些細胞誤判為單核細胞。最終從結(jié)果數(shù)值看，全自動血細胞分析儀得到的單核細胞計數(shù)要高于人工鏡檢法，中性粒細胞結(jié)果則與人工鏡檢對比明顯偏低，鏡檢結(jié)果出現(xiàn)假陽性率31.11%。對于上述問題，最好的解決措施是將大量血液檢測樣本用儀器法篩除陰性標本，對陽性標本再進行人工鏡下一一篩查。

SysmexXN-1000血細胞分析儀可以對血細胞進行精準的分類和計數(shù)，盡管其原理包含許多計數(shù)模塊，但仍存在一定局限性，可能出現(xiàn)分類錯誤，比如將中心粒細胞誤判呈單核細胞或嗜酸性細胞，異型淋巴細胞誤判為單核細胞等。因血常規(guī)的結(jié)果最終是服務(wù)臨床，幫助醫(yī)生判斷患者病情，因此結(jié)果真?zhèn)尉哂兄匾R床意義，所以，當臨床檢查時，發(fā)現(xiàn)陽性樣本，應(yīng)主動進行人工鏡檢以復(fù)查，必要時可再次采集標本。細胞形態(tài)是血常規(guī)檢查的重要組成部分，將儀器與手工顯微鏡相結(jié)合是獲取最真實結(jié)果的手段，也能夠減少誤診和漏診。

綜上所述，Sysmex XN系列血細胞分析儀白細胞出現(xiàn)報警提示可以有效篩選陽性標本，但同時對陽性標本需要進行人工鏡檢復(fù)核，以避免假陽性結(jié)果。