2013-2021年海南省流感病原學(xué)檢測(cè)及流行特征分析

王如敏,崔 蕾,潘家興,李丹丹,孫初陽,馮芳莉,馬 焱,曾祥潔

流行性感冒(Influenza,簡稱流感)是由流感病毒感染引起的急性呼吸道傳染疾病,是世界衛(wèi)生組織(WHO)第一個(gè)實(shí)行全球性監(jiān)測(cè)的傳染病[1]。流感病毒根據(jù)M蛋白和NP蛋白的抗原性不同,分為甲(A)、乙(B)、丙(C)、丁(D)4型,屬正粘病毒科,流感病毒屬,具有傳染性強(qiáng)、傳播速度快等特點(diǎn),曾多次在世界范圍引起暴發(fā)流行,成為全球關(guān)注的重要公共衛(wèi)生問題[2]。流感病毒是單股負(fù)鏈的RNA病毒,由于用于復(fù)制的RNA聚合酶或逆轉(zhuǎn)錄酶,缺乏矯正機(jī)制[3],突變率較高,人群普遍易感。迄今為止,每年流感流行會(huì)導(dǎo)致全球出現(xiàn)10億左右感染病例,300萬至500萬重癥病例,甚至每年因?yàn)榧竟?jié)性流感而引起的呼吸道疾病導(dǎo)致多達(dá)65萬人死亡[4-6]。海南省2011-2015年度流感疫情數(shù)據(jù)顯示,暴發(fā)的優(yōu)勢(shì)循環(huán)株變化頻繁,暴發(fā)疫情呈上升趨勢(shì)[7],另外,海南省2016-2020年度國家級(jí)哨點(diǎn)醫(yī)院流感樣病例(influenza-like illness,ILI)網(wǎng)絡(luò)報(bào)告顯示ILI呈上升趨勢(shì),ILI比例也幾乎呈上升趨勢(shì)[8],與往年相比,海南省2020-2021年度,流感病毒檢出率下降,流感活動(dòng)處于較低水平,同期中國大陸,乃至全球流感活動(dòng)水平均有所下降,處于較低的水平傳播[9-10]。有研究發(fā)現(xiàn),2020-2021年流感活動(dòng)主要來自熱帶和亞熱帶國家以及北半球和南半球溫帶的一些國家[11]。在國際旅行大幅重啟后,國內(nèi)這種持續(xù)的低水平病毒循環(huán)可能會(huì)導(dǎo)致流感傳播。及時(shí)了解流感病原學(xué)監(jiān)測(cè)情況至關(guān)重要,能更好地為未來的流感暴發(fā)疫情預(yù)警做好準(zhǔn)備,現(xiàn)將海南省2013-2021年度流感病原學(xué)檢測(cè)及流行特征分析如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 對(duì)象 海南省6家監(jiān)測(cè)哨點(diǎn)醫(yī)院,以各醫(yī)院內(nèi)科、兒內(nèi)科門診與急診和發(fā)熱門診就診的病人為監(jiān)測(cè)對(duì)象,登記發(fā)熱(體溫≥38 ℃)伴咳嗽或咽痛癥狀之一者為ILI[12],對(duì)發(fā)病3 d內(nèi)且沒有服用過抗病毒藥物的病例采集鼻咽拭子標(biāo)本送至相應(yīng)的流感監(jiān)測(cè)網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室待檢。

1.2 方 法

1.2.1 監(jiān)測(cè)年度 每年4月至次年3月為一個(gè)流感監(jiān)測(cè)年度,如2013-2014年度為2013年4月至2014年3月。

1.2.2 標(biāo)本采集與處理 按國家流感監(jiān)測(cè)方案要求,各監(jiān)測(cè)哨點(diǎn)醫(yī)院全年平均每周采集ILI標(biāo)本20份左右。采集后放入含采樣液的病毒采樣管中,存放于2 ℃～8 ℃條件下,48 h內(nèi)運(yùn)送至相應(yīng)的流感監(jiān)測(cè)網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室;如未能48 h內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室,置于-70 ℃或以下保存,于1周內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室,標(biāo)本避免反復(fù)凍融。

1.2.3 病原學(xué)檢測(cè) 各流感監(jiān)測(cè)網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室收到標(biāo)本后,應(yīng)立即進(jìn)行檢測(cè),如不能及時(shí)檢測(cè),保存于-70 ℃,避免反復(fù)凍融。具體檢測(cè)方法為Real-time熒光PCR法和病毒分離方法。具體流程為標(biāo)本經(jīng)過核酸提取后,經(jīng)過熒光PCR法檢測(cè),流感甲型或乙型核酸陽性的原始標(biāo)本,進(jìn)一步用犬腎細(xì)胞(Madin-Darby canine kidney,MDCK)和(或)無特定病原體的雞胚(Specific Pathogen Free,SPF)分離流感病毒[12-13];或者不經(jīng)過PCR過程直接將原始標(biāo)本接種MDCK細(xì)胞和SPF雞胚分離病毒。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析 從《中國流感監(jiān)測(cè)信息系統(tǒng)》中下載海南省2013年4月至2021年3月8個(gè)監(jiān)測(cè)年度的流感病原學(xué)監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù),使用SPSS 20.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。統(tǒng)計(jì)推斷計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn),與流感相關(guān)的危險(xiǎn)因素采用二值多元Logistic回歸分析,對(duì)連續(xù)變量(監(jiān)測(cè)年度)轉(zhuǎn)化為有序變量,與多分類變量(年齡、性別、季節(jié)、職業(yè)和地區(qū))一并設(shè)啞變量。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α<0.05。

2 結(jié) 果

2.1 病原學(xué)監(jiān)測(cè)結(jié)果 2013年4月至2021年3月,海南省6家監(jiān)測(cè)哨點(diǎn)醫(yī)院共采集ILI咽拭子標(biāo)本50 415份,其中流感病毒陽性標(biāo)本5 581份,陽性率為11.07%。2019-2020年度流感病毒陽性率最高,為18.90%,2020-2021年度最低,為0.25%。流感病毒型別分布顯示,2013-2014、2015-2016、2017-2018、2019-2020、2020-2021年度乙型占比最高,2014-2015、2016-2017年度H3N2型占比最高,2018-2019A(H1N1)pdm09型占比最高。

2.2 單因素分析

2.2.1 人群分布

2.2.1.1 年齡分布 年齡中位數(shù)為2歲(0～95歲),5 581份流感病毒陽性標(biāo)本中,年齡中位數(shù)為4歲(1月～89歲)。5～14歲年齡組流感病毒陽性率最高,為17.56%,0～4歲年齡組流感病毒陽性率最低,為7.32%,各年齡組流感病毒陽性率見表1,不同年齡組間流感病毒陽性檢出率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=631.807,P<0.05)。

表1 不同類型人群流感病毒檢出分布情況

2.2.1.2 性別分布 男性標(biāo)本流感病毒陽性率為10.87%,女性標(biāo)本流感病毒陽性率為11.35%,男女性別比為1.37,不同性別流感病毒陽性檢出率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=2.805,P>0.05)。

2.2.1.3 職業(yè)分布 采樣病例主要集中在散居兒童和幼托兒童,分別占病例總數(shù)的35.84%、28.79%。流感病毒陽性率較高的前5組職業(yè)人群依次為干部職員、學(xué)生、離退人員、公共場(chǎng)所工作人員及家政人員,各職業(yè)人群流感病毒陽性率見表1,不同職業(yè)人群差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=1 003.874,P<0.05)。

2.2.2 時(shí)間分布

2.2.2.1 年份分布 2013-2014年度、2015-2016年度、2017-2018年度和2019-2020年度的優(yōu)勢(shì)流行株為乙型,2014-2015年度和2016-2017年度的優(yōu)勢(shì)流行株為H3N2型,2018-2019年度的優(yōu)勢(shì)流行株為A(H1N1)pdm09型,2020-2021年度出現(xiàn)A(H1N1)pdm09型和B(Victoria)系共流行。2019-2020年度流感病毒陽性率最高,為18.90%,2020-2021年度最低,為0.25%。各監(jiān)測(cè)年度流感病毒陽性率見表1,不同監(jiān)測(cè)年度間流感病毒陽性檢出率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=2 002.646,P<0.05)。

2.2.2.2 月份分布 2013-2021年度海南省流感陽性檢出率高峰期主要集中在12月至次年3月、1月份流感病毒陽性檢出率最高的,為15.82%,9月份最低,為5.63%,各月份流感病毒陽性率見表1,不同月份流感陽性檢出率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=560.383,P<0.05)。見表1。

2013-2014年流感流行無明顯夏季流行期,冬春季流行期集中在9月至次年3月,峰值25.00%,優(yōu)勢(shì)流行株為乙型;2014-2015年流感整體流行態(tài)勢(shì)較低,出現(xiàn)夏季(4-6月)與冬季(1-2月)流行小高峰,優(yōu)勢(shì)流行株為H3N2型;2015-2016年流感夏季流行期集中在5-6月,峰值30.33%,優(yōu)勢(shì)流行株為H3N2型,冬季流行期集中在1-3月,峰值36.80%,優(yōu)勢(shì)流行株為乙型;2016-2017年流感呈現(xiàn)較低的流行態(tài)勢(shì),無明顯夏季流行期,冬春季流行期集中在9-11月,峰值31.15%,優(yōu)勢(shì)流行株為H3N2型;2017-2018年夏季流行期集中在7月-9月,優(yōu)勢(shì)流行株為H3N2型,峰值40.16%;冬春季流行期集中在11月-次年3月,峰值42.14%,優(yōu)勢(shì)流行株轉(zhuǎn)換為乙型和A(H1N1)pdm09型,2017年底以乙型為主,進(jìn)人2018年初A(H1N1)pdm09型占比逐漸增多成為優(yōu)勢(shì)流行株;2018-2019年無明顯夏季流行期,冬春季流行期集中在9月至次年3月,峰值54.17%,優(yōu)勢(shì)流行株為A(H1N1)pdm09型。2019-2020年流感夏季流行期集中在4-8月,峰值53.64%,優(yōu)勢(shì)流行株為乙型,冬春季流行期集中在12月至次年1月,峰值47.30%,優(yōu)勢(shì)流行株為H3N2型。2020-2021年流感病毒陽性檢出率呈現(xiàn)斷崖式下降,檢出率僅為0.25%,A(H1N1)pdm09型和B(Victoria)型共流行,無明顯流行期。見圖1。

圖1 2013-2021年海南省流感病毒型別及陽性率時(shí)間分布(月份)

2.2.3 地區(qū)分布 海南省5個(gè)地區(qū),?？诘貐^(qū)流感病毒陽性檢出率最高(15.35%),定安最低(5.61%),各地區(qū)流感病毒陽性率見表1,不同地區(qū)流感陽性檢出率差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=1 011.344,P<0.05)。

2.3 多因素二元Logistic回歸分析 以流感病毒檢出結(jié)果為因變量(陰性=0;陽性=1),性別、年齡、季節(jié)、監(jiān)測(cè)年度、職業(yè)和地區(qū)等6個(gè)危險(xiǎn)因素作為自變量,進(jìn)行多因素Logistic回歸分析,變量賦值見表2。結(jié)果顯示年齡、季節(jié)、監(jiān)測(cè)年度(除2016-2017年)、職業(yè)和地區(qū)與流感病毒檢出相關(guān)(表3)。

表2 流感影響因素的Logistic回歸分析變量賦值

3 討 論

監(jiān)測(cè)是預(yù)防和控制流感的關(guān)鍵策略[14]。流感是第一個(gè)實(shí)現(xiàn)全球性監(jiān)測(cè)的傳染病,通過及時(shí)有效的流感監(jiān)測(cè)可了解其流行趨勢(shì),追蹤病毒變異,發(fā)現(xiàn)新型流感病毒,為應(yīng)對(duì)流感大流行提供依據(jù)[15]。海南省2004年納入國家流感監(jiān)測(cè)網(wǎng)絡(luò),已建立包括6家哨點(diǎn)醫(yī)院和5家網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室在內(nèi)的較完善的監(jiān)測(cè)體系。2017年,國家衛(wèi)生計(jì)生委辦公廳印發(fā)《全國流感監(jiān)測(cè)方案(2017年版)》,對(duì)標(biāo)本檢測(cè)的及時(shí)性提出了更高的要求,網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室檢出流感病毒能力大幅度提升,為流感監(jiān)測(cè)工作提供有力的技術(shù)保障。

本研究分析顯示,流感的檢出相關(guān)危險(xiǎn)因素與年齡、季節(jié)、職業(yè)、地區(qū)和部分監(jiān)測(cè)年度有關(guān),而與性別無相關(guān)性。0～4歲年齡組ILI標(biāo)本采集最多而陽性率最低,與南寧等地區(qū)研究結(jié)果一致[16-17],其原因可能是,嬰幼兒受重視程度高,身體免疫功能不完善,對(duì)病原抵抗力差[18],由其他病毒、細(xì)菌等致病微生物感染引起的流感樣癥狀[19],及時(shí)送醫(yī)就診數(shù)量多,但嬰幼兒活動(dòng)范圍小,暴露于病毒的機(jī)會(huì)相對(duì)減少。5～14歲年齡組流感病毒陽性率最高,與部分研究結(jié)果一致[20-22],其原因可能與免疫功能低,流感疫苗接種率低、所處環(huán)境空氣流通不暢、人員密集程度有關(guān)。提示處于幼托機(jī)構(gòu)和學(xué)校是流感防控的重點(diǎn)。60歲以上年齡組ILI占比最低,可能與老年人行動(dòng)不便,社會(huì)性活動(dòng)較少和自主就診意識(shí)不強(qiáng)有關(guān)。流感病毒一旦感染患有基礎(chǔ)疾病的老年人,會(huì)加重其基礎(chǔ)疾病,且在流行過程中常引發(fā)抗原的“漂移”變異,是老年人等高危人群發(fā)病死亡的主要原因之一,給全世界帶來巨大的健康負(fù)擔(dān),預(yù)防流感病毒感染的最佳方式是接種疫苗[23-24],在流感流行高峰前1～2月接種流感疫苗可降低流感的發(fā)病水平[25],然而,傳統(tǒng)疫苗只在短時(shí)間內(nèi)有效,注射過流感疫苗的兒童僅40%得到了疫苗保護(hù),成人略高達(dá)到 65%[26-27],建議今后應(yīng)更加重視流感的預(yù)防控制工作,提高流感疫苗接種率,加強(qiáng)廣泛宣傳教育,提升個(gè)人防護(hù)意識(shí),最大限度地降低海南省流感發(fā)病水平。

監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示,2013-2021年度海南省流感病毒以乙型、A(H1N1)pdm09型和H3N2型3種類型為主,在人群中交替出現(xiàn),前5個(gè)監(jiān)測(cè)年度呈現(xiàn)了“乙型—H3N2型—乙型—H3N2型—乙型”流感交替流行,2018-2019年度優(yōu)勢(shì)流行株為A(H1N1)pdm09型,2019-2020年度優(yōu)勢(shì)流行株轉(zhuǎn)換為乙型,與相關(guān)研究結(jié)果一致[20,28],符合流感流行趨勢(shì)。推測(cè)可能與流感病毒易變異以及人群免疫周期性變化有關(guān)。各年度檢出的流感病毒病原學(xué)構(gòu)成不同,流感流行高峰在各個(gè)監(jiān)測(cè)年度不盡相同,個(gè)別年份的流行時(shí)間跨度大,這可能與海南省的亞熱帶氣候有關(guān),研究表明[29-30],氣候要素是影響流感病毒活動(dòng)的重要因素。2020-2021年度流感病毒活動(dòng)無明顯流行期,陽性檢出率呈斷崖式下降,與相關(guān)研究一致[31-32],究其原因可能是,新冠疫情期間,實(shí)施COVID-19防控公共措施,在降低COVID-19傳播的同時(shí),也減少了流感及其他呼吸道病毒的傳播[33]。提示群體對(duì)流感病毒保護(hù)性主動(dòng)免疫降低,隨之而來的可能是更為嚴(yán)峻的暴發(fā)流行。

在流感感染人群的職業(yè)分布中,干部職員和學(xué)生這兩類人群流感病毒陽性檢出率較高,可能與活動(dòng)范圍廣,流感暴露風(fēng)險(xiǎn)增加有關(guān),?？谑鞘?huì)城市,人口流動(dòng)較其他地區(qū)頻繁,尤其是5～14歲年齡組學(xué)生和25歲以上的干部職員,社會(huì)活動(dòng)參與度高,且接觸人群多存在不穩(wěn)定影響因素,因而這部分人群屬于流感高危人群。

綜上所述,及時(shí)監(jiān)測(cè)本地流感的流行趨勢(shì)和病原學(xué)特征,對(duì)于流感的防控工作十分重要[34]。加強(qiáng)對(duì)流感病毒健康教育與提高流感疫苗接種率是重要防控措施,同時(shí),采取公共衛(wèi)生干預(yù)措施也是流感等呼吸道傳染病經(jīng)濟(jì)、實(shí)用的防控手段,綜合運(yùn)用各種方式,從而達(dá)到可防可控的目的。

利益沖突：無