月季黑斑病害調(diào)查及抗病品種初篩

李艷杰， 普梅英， 陳 析， 王羅琴， 王 超

（西南林業(yè)大學(xué) 園林園藝學(xué)院，云南 昆明 650224）

月季（Rosa chinensis），原產(chǎn)于中國(guó)，是中國(guó)十大傳統(tǒng)名花之一，也是世界四大鮮切花之一，享譽(yù)“花中皇后”的美稱(chēng)，深受人們的喜愛(ài)。月季品種繁多，花色豐富，只要條件允許一年四季均可開(kāi)花。月季應(yīng)用廣泛，可用作園林觀賞植物以及化妝品、食品、藥用材料，其經(jīng)濟(jì)市場(chǎng)前景廣闊，所以在全世界各地廣泛種植。然而月季在栽培過(guò)程中極易感染真菌性病害及病毒性病害，這嚴(yán)重影響了月季的品質(zhì)及觀賞效果。

常見(jiàn)的月季病害有白粉病、黑斑病、霜霉病、銹病、炭疽病、煤污病、花葉病等[1]，其中最為嚴(yán)重的是黑斑病。該病害在月季種植區(qū)普遍發(fā)生，危害嚴(yán)重，是一種世界性月季真菌病害，尤其露地栽培的發(fā)病率極高。根據(jù)前人的研究報(bào)道，導(dǎo)致月季植株感染黑斑病的病原菌主要有2 種：一種是薔薇盤(pán)二孢（Marssonina rosae），另一種是鏈格孢屬的真菌（Alternariaspp.）[2]。在國(guó)外，Abbas 等[3]在巴基斯坦首次報(bào)道引起月季黑斑病的病原菌主要為鏈格孢屬（Alternariaspp.）真菌。在國(guó)內(nèi)，徐玲玲等[4]于2013 年在西安、咸陽(yáng)、寶雞、渭南4 個(gè)地點(diǎn)采集15 株表現(xiàn)典型黑斑癥狀的月季植株，經(jīng)分離純化后鑒定造成月季黑斑病的病原菌為薔薇盤(pán)二孢（Marssoninarosae）；馮寶珍等[2]于2017年在運(yùn)城學(xué)院花圃采集有黑斑癥狀的月季病葉，經(jīng)分離純化后獲得病原菌，通過(guò)形態(tài)學(xué)、分子生物學(xué)鑒定及致病性測(cè)定，鑒定致月季黑斑病的病原菌為鏈格孢菌（Alternaria alternata）。

本試驗(yàn)對(duì)不同品種月季黑斑病開(kāi)展調(diào)查，旨在了解不同品種月季黑斑病的發(fā)病規(guī)律，初步篩選出抗病品種，為月季雜交育種工作以及月季生產(chǎn)栽培選育抗黑斑病品種提供有益參考。

1 月季黑斑病發(fā)病特征

黑斑病病原菌主要侵染月季的葉片，發(fā)病初期，葉片表面出現(xiàn)黑褐色圓形小斑點(diǎn)，接著擴(kuò)展成較大面積的放射狀黑褐色病斑，周?chē)€伴有黃色暈圈；發(fā)病后期病斑中央組織變?yōu)榛野咨?，上面著生多?shù)黑色小點(diǎn)（圖1）。有些品種的病斑周?chē)竺娣e呈現(xiàn)黃色，而且病斑會(huì)相互聯(lián)結(jié)成片，使月季葉片枯黃直至脫落，僅剩枝條。這不僅降低植株整體觀賞效果，而且還對(duì)月季花朵的形成與開(kāi)放造成影響，導(dǎo)致植株過(guò)早衰敗，嚴(yán)重影響月季的生物學(xué)產(chǎn)量和觀賞價(jià)值。

圖1 月季黑斑病田間發(fā)病癥狀

2 調(diào)查地點(diǎn)概況

調(diào)查地點(diǎn)在昆明楊月季園藝有限責(zé)任公司南國(guó)山花月季園（以下簡(jiǎn)稱(chēng)月季園）。月季園位于陽(yáng)宗鎮(zhèn)北斗村大官山，北鄰昆石高速公路，俯瞰陽(yáng)宗海，距昆明主城區(qū)30 km，具有得天獨(dú)厚的區(qū)位優(yōu)勢(shì)和土壤、氣候等自然條件優(yōu)勢(shì)。該區(qū)屬亞熱帶高原季風(fēng)氣候，年均氣溫14.5 ℃，年均降水量963.5 mm。月季園面積80 hm2，已建成道路、雨水收集、精確施肥、滴灌灌溉系統(tǒng)，完成約66.67 hm2的土地整理工程和花卉種植。月季園內(nèi)栽種的薔薇屬植物共計(jì)1 800余種，包含野生原種、中國(guó)古老品種、AARS（全美玫瑰精選）金獎(jiǎng)品種、地被類(lèi)（Shrub）、藤本類(lèi)（CL）、花園類(lèi)（Garden）、大花茶香類(lèi)（HT）、聚花類(lèi)（FL）、迷你類(lèi)（Min）及自主研發(fā)等品種。園內(nèi)月季谷規(guī)劃面積近6.67 hm2，種植薔薇科薔薇屬9 類(lèi)1 800 多個(gè)種和品種，其中包括自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)品種43個(gè)。

3 調(diào)查內(nèi)容

選取月季園內(nèi)經(jīng)典月季品種夏日花火、瑞典女王、新曙光、香檳伯爵、紅色達(dá)芬奇、甜美人、大游行、綠野、藍(lán)和平、喋喋不休等400 個(gè)露天栽培的月季種質(zhì)資源品種，開(kāi)展黑斑病發(fā)病情況初步調(diào)查。記錄單株月季品種葉片感病情況，詳細(xì)觀察并統(tǒng)計(jì)病葉數(shù)量，計(jì)算病葉率及病情指數(shù)，并進(jìn)行病害等級(jí)劃分。

4 調(diào)查方法

調(diào)查于2021 年11 月開(kāi)始，主要采取實(shí)地勘察法觀察不同品種月季黑斑病害癥狀，拍照記錄感病月季植株的整體情況、花朵形態(tài)、分枝上葉片的情況、感病葉片的形態(tài)特征（表1）。

表1 月季園部分品種月季黑斑病害調(diào)查結(jié)果

選擇表現(xiàn)典型黑斑病病征的月季采集葉片樣本，在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)利用顯微鏡進(jìn)行觀察，對(duì)病征明顯的葉片組織進(jìn)行切片，利用光學(xué)顯微鏡觀察病原菌的形態(tài)特征，以便后期開(kāi)展病原菌的分離與鑒定。記錄不同品種月季植株的分枝情況、奇數(shù)羽狀復(fù)葉數(shù)量、感病奇數(shù)羽狀復(fù)葉數(shù)量、小葉數(shù)量、感病小葉數(shù)量、感病葉片在植株上的生長(zhǎng)位置、感病葉片成熟度等基礎(chǔ)數(shù)據(jù)，計(jì)算病葉率。根據(jù)徐承志等[5]報(bào)道的月季黑斑病5 級(jí)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算病情指數(shù)，確定月季園不同品種月季黑斑病的發(fā)生情況。

本次調(diào)查將月季黑斑病病害等級(jí)劃分為5級(jí)：1級(jí)（代表值為0）為無(wú)病或5%以下葉片感??；2級(jí)（代表值為1）為6%～25%葉片感病；3 級(jí)（代表值為2）：26%～50%葉片感病；4 級(jí)（代表值為3）為51%～75%葉片感??；5 級(jí)（代表值為4）為76%～100%葉片感病。

病葉率 = 發(fā)病葉數(shù)/調(diào)查總?cè)~數(shù) × 100%。

5 結(jié)果與分析

調(diào)查結(jié)果顯示，月季園內(nèi)90%以上露天栽培的月季品種都不同程度地感染了黑斑?。ū?）。根據(jù)病情指數(shù)將不同品種月季感染黑斑病的嚴(yán)重程度進(jìn)行等級(jí)劃分，分為免疫品種（Ⅰ），無(wú)癥狀，病情指數(shù)為0；高抗品種（HR），病情指數(shù)＜5.0；中抗品種（MR），病情指數(shù)5.0～25.0；感病品種（CS），病情指數(shù)26.0～50.0；嚴(yán)重感病品種（SS），病情指數(shù)＞50.0。

病情指數(shù)=100×∑（各級(jí)發(fā)病葉片數(shù)×各級(jí)別的代表值）/（調(diào)查葉片總數(shù)×最高級(jí)別代表值）。

6 結(jié)論

400個(gè)露天栽培的月季品種中，有210個(gè)黑斑病嚴(yán)重感病品種、39 個(gè)黑斑病易感病品種、55 個(gè)黑斑病中抗品種、31 個(gè)黑斑病高抗品種、65 個(gè)黑斑病免疫品種。品種夏洛特女郎、泰摩拉、瑪麗安、仲夏、嬌媚鋼琴、巴濃洛查棒棒等為黑斑病嚴(yán)重感病品種；大地主、紫色驚艷、摩尼琉、粉鈴鐺、大游行等為黑斑病易感病品種；自由精神、俱樂(lè)部、琳達(dá)、紅色美蘭、葡萄冰山等為黑斑病中抗品種；紅色雞尾酒、粉紅紅帽子、太陽(yáng)仙子、熱情、緋紅之星等為黑斑病高抗品種；藍(lán)色狂想曲、灌木小伊甸園、粉晶石、向往、女神等為黑斑病免疫品種。