輸血患者直接抗人球蛋白試驗(yàn)陽(yáng)性結(jié)果病種分布情況分析

張 丹,劉 靜,張靜蕊,鄭 偉

直接抗人球蛋白試驗(yàn)(direct antiglobulin test,DAT)又稱Coombs試驗(yàn),是檢測(cè)紅細(xì)胞表面被不完全抗體或補(bǔ)體致敏的一種經(jīng)典方法,常用于檢測(cè)自身免疫性溶血性貧血、藥物性溶血性貧血、新生兒溶血病及輸注不相合血液所致的溶血性輸血反應(yīng)[1]。DAT陽(yáng)性對(duì)提示患者貧血狀態(tài)受自身免疫因素影響有重要意義,其中部分DAT陽(yáng)性患者由于體內(nèi)紅細(xì)胞過(guò)度破壞而存在輸注紅細(xì)胞指征。本文通過(guò)回顧性分析輸血醫(yī)學(xué)科DAT陽(yáng)性結(jié)果不同病種分布情況,為臨床判斷疾病性質(zhì)及精準(zhǔn)輸血提供幫助。

1 資料與方法

1.1 資料 回顧性分析2010-03至2022-04北部戰(zhàn)區(qū)總醫(yī)院輸血醫(yī)學(xué)科1609例輸血患者DAT檢測(cè)結(jié)果與臨床資料,其中男564例,女1045例,男女比為1∶1.85;年齡5個(gè)月～96歲。納入標(biāo)準(zhǔn):(1)符合輸血指征要求,主要包括以下臨床診斷:風(fēng)濕免疫相關(guān)疾病、血液系統(tǒng)疾病、腎臟疾病等內(nèi)科疾病;(2)臨床資料完整;(3)無(wú)輸血史;(4)輸注成分為紅細(xì)胞懸液,輸注劑量為1.5～3.0單位,輸注后未發(fā)生不良反應(yīng)。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)外科手術(shù);(2)失血;(3)滲出;(4)重癥感染。

1.2 方法

1.2.1 試劑 抗人球蛋白(抗-IgG、抗-C3d)微柱凝膠卡(西班牙Diagnostic Grifols.S.A公司)。

1.2.2 操作方法 將受檢者標(biāo)本(乙二胺四乙酸鈉抗凝)放入標(biāo)本離心機(jī)(安徽中科中佳科學(xué)儀器有限公司)3000 r/min離心5 min,取壓積紅細(xì)胞用低離子液配成1%紅細(xì)胞懸液,用移液器加入抗人球蛋白(抗-IgG、抗-C3d)微柱凝膠卡(西班牙Diagnostic Grifols.S.A公司)50 μl放入離心機(jī)(西班牙Diagnostic Grifols.S.A公司)990 r/min,離心9 min。

1.2.3 結(jié)果判斷 觀察離心后的微柱凝膠卡,紅細(xì)胞全部沉積在柱子的底部判定為陰性,紅細(xì)胞在柱子的頂部或分布在柱子的中間判定為陽(yáng)性。

1.3 觀察指標(biāo)及判定標(biāo)準(zhǔn) (1)DAT陽(yáng)性患者不同疾病類型構(gòu)成比;(2)DAT陽(yáng)性組和DAT陰性組輸注紅細(xì)胞前后Hb、RBC、Hct的變化;(3)DAT陽(yáng)性組和DAT陰性組輸注紅細(xì)胞有效率。輸注紅細(xì)胞有效率:按照50 kg體重成年人,每輸注2單位紅細(xì)胞懸液預(yù)期提高Hb10 g/L進(jìn)行計(jì)算[2]?；颊咻斪⒓t細(xì)胞24 h后檢測(cè)Hb,輸注每單位紅細(xì)胞懸液Hb增值≥5 g/L×50/患者體重(kg)為輸注有效。輸注紅細(xì)胞有效率(%)=輸注有效例數(shù)/治療例數(shù)×100%。

2 結(jié) 果

2.1 陽(yáng)性率檢測(cè)結(jié)果 1609例中,DAT陰性1113例,其中男410例,女703例;DAT陽(yáng)性496例,男154例,女342例,男女比為1∶2.22。風(fēng)濕免疫相關(guān)疾病陽(yáng)性率最高;血液系統(tǒng)疾病次之,不同疾病DAT陽(yáng)性率見(jiàn)表1。

表1 輸血患者1609例主要病種DAT陽(yáng)性率對(duì)比 (n;%)

2.2 DAT陽(yáng)性疾病分布 496例DAT陽(yáng)性患者中,風(fēng)濕免疫相關(guān)疾病占比最高,為71.17%;血液系統(tǒng)疾病次之,為13.91%;風(fēng)濕免疫相關(guān)疾病中,結(jié)締組織病與系統(tǒng)性紅斑狼瘡占比最高;血液系統(tǒng)疾病中,血小板減少癥和貧血占比最高,不同疾病類型構(gòu)成比見(jiàn)表2。

表2 DAT陽(yáng)性輸血患者496例病種構(gòu)成比

2.3 輸注紅細(xì)胞前后Hb、RBC、Hct的變化 兩組輸注紅細(xì)胞前Hb、RBC、Hct值差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;輸注24 h后,DAT陽(yáng)性組與DAT陰性組輸注每單位紅細(xì)胞Hb、RBC、Hct增值差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05,表3)。

表3 DAT陽(yáng)性組和DAT陰性組輸注紅細(xì)胞前后Hb、RBC、Hct的變化

3 討 論

直接抗人球蛋白試驗(yàn)多用于自身免疫性溶血性貧血、新生兒溶血病、溶血性輸血反應(yīng)等疾病的診斷,主要檢測(cè)紅細(xì)胞表面是否被抗體或補(bǔ)體致敏[3]。對(duì)判斷溶血的嚴(yán)重程度,為貧血患者后續(xù)輸血治療提供有利條件,具有較高臨床價(jià)值[4]。值得注意的是,一些免疫性疾病如血小板減少性紫癜等在臨床常應(yīng)用靜脈注射人免疫球蛋白治療,其中所含抗-A、抗-B抗體可在體內(nèi)誘發(fā)紅細(xì)胞聚集,導(dǎo)致DAT陽(yáng)性,此結(jié)果并非疾病本身導(dǎo)致[5]。

3.1 DAT陽(yáng)性疾病的分布及性質(zhì) 本研究結(jié)果表明,1609例患者中,DAT陽(yáng)性496例,其中風(fēng)濕免疫相關(guān)疾病占比最高,血液系統(tǒng)疾病次之。在風(fēng)濕免疫相關(guān)疾病中,結(jié)締組織病與系統(tǒng)性紅斑狼瘡占比最高,占全部DAT陽(yáng)性患者41.13%,提示在臨床對(duì)DAT檢測(cè)陽(yáng)性結(jié)果應(yīng)高度重視,對(duì)相關(guān)疾病早診斷早治療,以改善患者預(yù)后,減少并發(fā)癥的發(fā)生,提高患者生活質(zhì)量。風(fēng)濕免疫相關(guān)疾病中,DAT陽(yáng)性率31.83%,與劉燕明等[6]報(bào)道基本相符。此類疾病DAT陽(yáng)性率較高,提示遠(yuǎn)期發(fā)生貧血幾率較高,輸血不良反應(yīng)發(fā)生率也較高,可對(duì)臨床治療提供較大參考。結(jié)果表明,DAT陽(yáng)性患者中女性明顯多于男性,男女比例為1∶2.22,可能與風(fēng)濕免疫相關(guān)疾病女性發(fā)病率遠(yuǎn)高于男性有關(guān)[7]。

本研究結(jié)果的臨床價(jià)值在于提供了DAT陽(yáng)性不同疾病類型構(gòu)成比,有助于臨床應(yīng)用DAT檢測(cè)結(jié)果判斷疾病性質(zhì)。部分疾病尤其是風(fēng)濕免疫相關(guān)疾病發(fā)病早期臨床癥狀不明顯,缺乏相關(guān)免疫學(xué)指標(biāo),DAT陽(yáng)性結(jié)果可作為疾病早期診斷依據(jù)。

3.2 精準(zhǔn)輸血 本研究應(yīng)用微柱凝膠法,靈敏度高,特異性好,極弱的陽(yáng)性結(jié)果即可用肉眼直接觀察。同時(shí),微柱凝膠法所用標(biāo)本量少, 有利于大面積燒傷、新生兒等標(biāo)本不易抽取的患者[6-10]。本方法由于極高的靈敏度與特異性可提高DAT陽(yáng)性患者不規(guī)則抗體的檢出率,極大降低了此類患者溶血風(fēng)險(xiǎn)。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),兩組輸注紅細(xì)胞前Hb、RBC、Hct值差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;輸注24 h后,DAT陽(yáng)性組與DAT陰性組輸注每單位紅細(xì)胞Hb、RBC、Hct增值差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與康曉珍等[8]報(bào)道結(jié)果存在較大差異,可能與選取樣本疾病分布差異較大及患者輸血次數(shù)較少有關(guān)。DAT陽(yáng)性組輸注紅細(xì)胞24 h后Hb、RBC、Hct值均增加,與DAT陰性組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,說(shuō)明DAT陽(yáng)性患者輸血有效,DAT陽(yáng)性并非輸注紅細(xì)胞的禁忌證,在臨床輸血治療中,應(yīng)綜合權(quán)衡DAT陽(yáng)性患者輸血的風(fēng)險(xiǎn)與收益,避免延遲發(fā)放血液造成延誤患者治療。有學(xué)者認(rèn)為,潛在同種抗體引起溶血性輸血反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)在臨床中常常被高估,導(dǎo)致臨床延遲或拒絕必要的輸血,應(yīng)引起高度關(guān)注[9]。

在輸血相容性檢測(cè)中,AIHA患者由于受自身抗原異常、補(bǔ)體系統(tǒng)功能亢進(jìn)及某些藥物因素影響,常引起DAT陽(yáng)性,從而導(dǎo)致患者自身紅細(xì)胞與供者紅細(xì)胞發(fā)生凝集,此種凝集不能被氯喹放散法、自身紅細(xì)胞吸收法、異體紅細(xì)胞吸收法等實(shí)驗(yàn)完全消除[11],可干擾交叉配血試驗(yàn)結(jié)果;從而掩蓋對(duì)同種不規(guī)則抗體的檢出。由于潛在的同種抗體可能增加溶血性輸血反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn),而免疫功能異常本身也可增加輸血后免疫性非溶血性發(fā)熱的風(fēng)險(xiǎn)[12],因此應(yīng)嚴(yán)格掌握用血指征。多項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn),激素類藥物治療可獲得較好療效[13,14]。陳麟鳳等[15]認(rèn)為,對(duì)臨床上DAT陽(yáng)性單純貧血、血流動(dòng)力學(xué)穩(wěn)定的患者應(yīng)實(shí)行限制性輸血策略。一般認(rèn)為,應(yīng)用激素類藥物一段時(shí)間后,待抗體減弱或消失再行配血,可能有助于提升輸血安全,有報(bào)道相關(guān)患者激素治療后少量多次輸注洗滌紅細(xì)胞取得滿意療效[16]。此外,健康人DAT陽(yáng)性率為0.1%[17],交叉配血時(shí),獻(xiàn)血員DAT陽(yáng)性也可導(dǎo)致配血不合,應(yīng)高度重視。通過(guò)本次調(diào)查,我們?cè)谂R床對(duì)DAT陽(yáng)性患者輸血過(guò)程中應(yīng)注意,對(duì)輸血指征的衡量,血液成分的選擇,配血方法的選擇,獻(xiàn)血員的選擇等均應(yīng)精準(zhǔn)把控,減少患者溶血性輸血反應(yīng)及免疫性非溶血性發(fā)熱的風(fēng)險(xiǎn),使輸血更加安全、有效。

綜上所述,本研究發(fā)現(xiàn),DAT在臨床判斷疾病性質(zhì)及為貧血患者實(shí)施精準(zhǔn)輸血方面具有較高臨床價(jià)值。輸血科醫(yī)師應(yīng)嚴(yán)格把握輸血過(guò)程相關(guān)重要環(huán)節(jié),應(yīng)重視DAT陽(yáng)性患者輸血風(fēng)險(xiǎn),確保用血安全。