血站實(shí)驗(yàn)室ELISA檢測的質(zhì)量問題及其對(duì)策*

陳 敏,王 芳,魏 蘭

(重慶市血液中心,重慶 400052)

血液篩查是安全輸血鏈條中的關(guān)鍵環(huán)節(jié),是防止輸血相關(guān)傳染病最直接有效的途徑,嚴(yán)格把控檢測質(zhì)量是保障血液安全的重要手段[1]。定期對(duì)實(shí)驗(yàn)室檢測數(shù)據(jù)進(jìn)行回顧分析,尋找失控、過程中斷原因,可為實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量改進(jìn)提供可靠依據(jù)。本文回顧性分析了血清學(xué)實(shí)驗(yàn)室2020年7月至2021年6月酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法(ELISA)室內(nèi)質(zhì)控失控率、告警率、吐板率,并分析其原因,總結(jié)如下。

1 資料與方法

1.1研究對(duì)象 收集2020年7月至2021年6月重慶市血液中心檢驗(yàn)科血清學(xué)ELISA檢測數(shù)據(jù),含檢測微板數(shù)、無效板數(shù)、重做板數(shù)、告警板數(shù)、失控板數(shù)、吐板數(shù)及其原因。

1.2方法

1.2.1儀器與試劑 Xantus全自動(dòng)加樣儀(深圳愛康);酶免分析加樣系統(tǒng)Microlab STAR(瑞士Hamilton);全自動(dòng)酶標(biāo)儀Microlab FAME(瑞士Hamilton)。所有儀器均校準(zhǔn)合格。乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)檢測試劑:北京萬泰/英國索林;抗-HIV+P24檢測試劑:北京萬泰/美國伯樂;抗-梅毒螺旋體(TP)檢測試劑:上?？迫A/北京萬泰;抗-HCV檢測試劑:北京萬泰/美國強(qiáng)生。均按說明書操作,試劑均在效期內(nèi)使用。

1.3數(shù)據(jù)處理 統(tǒng)計(jì)研究期間血清學(xué)ELISA 8個(gè)項(xiàng)目檢測情況。檢測微板數(shù)含無效/重做板數(shù);失控板數(shù)含無效板數(shù);統(tǒng)計(jì)并計(jì)算比率,按原因分類,采用Pareto 圖分析結(jié)果。

2 結(jié) 果

2.1檢測微板數(shù) 2020年7月至2021年6月血清學(xué)ELISA共檢測19 188板,月檢測量最高1 869板,最低1 162板,月均檢測1 599板。見圖1。

圖1 檢測微板數(shù)

2.2室內(nèi)質(zhì)控

2.2.1室內(nèi)質(zhì)控失控率 2020年7月至2021年6月ELISA檢測室內(nèi)質(zhì)控月失控率最高1.24%,最低0.13%,平均0.63%。見圖2。

圖2 室內(nèi)質(zhì)控月失控率

2.2.2失控原因分析 2020年7月至2021年6月血清學(xué)無效/重做微板72,主要原因占比:隨機(jī)誤差(18.06%)、人員操作不當(dāng)(18.06%)、顯色劑衰減(9.72%)、加樣誤差(9.72%),占比較低的為:洗液桶橡膠圈老化(1.39%)、過程沖突(1.39%)、儀器參數(shù)誤調(diào)(1.39%)。見圖3。

圖3 失控原因分析

2.2.3室內(nèi)質(zhì)控告警率 2020年7月至2021年6月血清學(xué)ELISA檢測室內(nèi)質(zhì)控告警364次,平均月告警率為364/19 188=1.89%,+2SD告警229次,-2SD告警135次。見圖4。

圖4 室內(nèi)質(zhì)控月告警率

2.3FAME吐板

2.3.1FAME吐板率 2020年7月至2021年6月FAME平均月吐板率為2.89%,最高為5.48%,最低為1.18%。見圖5。

圖5 月吐板率

2.3.2吐板原因分析 2020年7月至2021年6月FAME吐板549,原因占比位于前3位為:洗板單元故障(20.40%)、系統(tǒng)死機(jī)(12.57%)、終止液分配故障(10.02%),占比較低的為:升降塔故障(0.73%)、洗液桶感應(yīng)故障(0.73%)、酶標(biāo)儀故障(1.09%)、通道感應(yīng)故障(1.46%)。見圖6。

3 討 論

室內(nèi)質(zhì)控是反映實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量的重要指標(biāo),對(duì)其進(jìn)行回顧分析,有助于評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理運(yùn)行情況,為實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理持續(xù)改進(jìn)提供依據(jù)[2]。血站ELISA為定性試驗(yàn),采用弱陽性質(zhì)控品進(jìn)行質(zhì)控,根據(jù)法規(guī)要求使用Levey-Jennings圖監(jiān)測隨機(jī)誤差和系統(tǒng)誤差[3]。統(tǒng)計(jì)期間ELISA室內(nèi)質(zhì)控月均失控率為0.63%,低于其他研究報(bào)道[4-5]。其分析發(fā)現(xiàn):(1)人為因素失控占比較高,人員操作不當(dāng)(18.06%)、儀器參數(shù)誤調(diào)(1.40%),合計(jì)19.45%,低于周鼎等[6]報(bào)道;(2)表單記錄完整性不足,8.33%無效/重做未記錄原因,應(yīng)及時(shí)詳細(xì)地記錄實(shí)驗(yàn)過程便于后續(xù)分析;(3)伯樂艾滋顯色劑衰減問題突出,說明書標(biāo)明該顯色劑配置后可穩(wěn)定6 h,但工作中2 h后抗原陽性對(duì)照孔檢測值已有降低趨勢,提示應(yīng)探索符合實(shí)驗(yàn)室環(huán)境的試劑配制時(shí)間;(4)索林乙型肝炎試劑酶黏稠度大易漏液導(dǎo)致花板,建議使用前充分平衡,且潤洗加酶的注射器。

預(yù)警分析可知,2020年7月+2SD告警率較高2.03%,分析發(fā)現(xiàn)當(dāng)月延遲進(jìn)板情況較多,加樣與FAME人員配合不緊密導(dǎo)致延遲進(jìn)板;以及故障吐板后延時(shí)進(jìn)板。提示工作中應(yīng)加強(qiáng)崗位間溝通和配合,嚴(yán)格按SOP執(zhí)行,加強(qiáng)儀器預(yù)維護(hù),降低故障率。見圖4。

全自動(dòng)酶標(biāo)儀Microlab FAME實(shí)現(xiàn)了自動(dòng)化、標(biāo)準(zhǔn)化,減少了人為因素所致的系統(tǒng)誤差,顯著提高了酶免實(shí)驗(yàn)的特異性和精密度,廣泛應(yīng)用于血站血清學(xué)篩查,提高了血液檢測質(zhì)量[7-8]。研究期間月均吐板率為2.89%,高于黃伯泉等[9]報(bào)道。洗板單元故障是吐板的主因,可能是吸液針堵、注液針堵、洗板機(jī)頭電路板和插槽感應(yīng)異常、電路板有水漬等[10],有以下建議:(1)嚴(yán)格控制標(biāo)本質(zhì)量,避免樣本血凝塊或纖維蛋白;(2)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后進(jìn)行日維護(hù)(溫水更佳),洗液現(xiàn)配現(xiàn)用減少結(jié)晶形成;(3)保持電路板干燥;(4)密切關(guān)注儀器動(dòng)態(tài)加強(qiáng)預(yù)維護(hù)。系統(tǒng)死機(jī)是吐板的次因,分析期間出現(xiàn)1次UPS故障,6次軟件崩潰,5次電腦藍(lán)屏。系統(tǒng)死機(jī)導(dǎo)致機(jī)器癱瘓所有反應(yīng)終止,實(shí)驗(yàn)吐板數(shù)陡增,給工作造成不便且影響檢測質(zhì)量。整改建議:定期檢查確保UPS正常,開展實(shí)驗(yàn)室斷電應(yīng)急演練;更換反復(fù)藍(lán)屏電腦;定期備份數(shù)據(jù),減少數(shù)據(jù)冗余造成的系統(tǒng)崩潰。

本研究尚有不足之處,未統(tǒng)計(jì)加樣器故障,FAME吐板率未按儀器進(jìn)行分類,這將是今后改進(jìn)的方向。此外,加強(qiáng)人員培訓(xùn)規(guī)范操作對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果十分重要[11]; FAME除了必要的日維護(hù)、周維護(hù)、月維護(hù)外,應(yīng)加強(qiáng)工程師的預(yù)維護(hù),定期排查故障降低吐板率。實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制是不斷持續(xù)改進(jìn)的過程,定期分析檢測數(shù)據(jù),發(fā)現(xiàn)問題查找原因,更好的保證檢測質(zhì)量,保障血液安全。