PARP 抑制劑與PD-1/PD-L1 抑制劑在卵巢癌治療中的聯(lián)合應用

郭京京，張云鳳，王悅

卵巢癌是女性生殖系統(tǒng)的常見腫瘤，早期難以診斷且易出現(xiàn)復發(fā)和耐藥，患者預后往往不佳[1]。因此，學者們一直在尋找新的治療策略，包括免疫治療、靶向治療以及各種聯(lián)合治療等，以期改善卵巢癌患者的預后。程序性死亡受體1（programmed death-1，PD-1）及其配體（programmed death-ligand 1，PDL1）通路在卵巢癌的發(fā)生發(fā)展及免疫逃逸過程中發(fā)揮重要作用[2]。目前，PD-1/PD-L1 抑制劑已被廣泛應用于多種腫瘤的治療，但卵巢癌的免疫逃逸機制復雜，且具有免疫抑制的腫瘤微環(huán)境，使得PD-1/PDL1 抑制劑對卵巢癌的治療效果受到極大限制[3]。多腺苷二磷酸核糖聚合酶抑制劑[poly (ADP-ribose)polymerase inhibitor，PARPi] 是一種癌癥靶向治療藥物，已被用于鉑類藥物化療后的一線治療，而近年許多研究表明，PARPi 可通過多種機制參與腫瘤的免疫調控，可提高卵巢癌對PD-1/PD-L1 抑制劑的敏感性，為PARPi 聯(lián)合PD-1/PD-L1 抑制劑治療提供了理論基礎[4]。

1 PD-1/PD-L1 抑制劑

1.1 PD-1/PD-L1 抑制劑的作用機制PD-1 是一種共抑制性T 細胞受體，在正常組織細胞中的表達可使機體免受細胞毒性T 細胞的攻擊，阻止自身免疫性疾病的發(fā)生[5]。PD-L1 是PD-1 的主要配體，主要表達于T 細胞、B 細胞、樹突狀細胞、巨噬細胞和上皮細胞等細胞中，還在許多腫瘤和腫瘤微環(huán)境中的細胞中表達[6]。研究表明，腫瘤微環(huán)境中PD-1/PDL1 介導的免疫抑制信號是腫瘤免疫逃逸的重要組成部分。首先，PD-1 與PD-L1 結合會導致細胞內酪氨酸抑制模體和激活模體的磷酸化，磷酸化的模體與Src 同源區(qū)2（src-homology domain 2，SH2）蛋白酪氨酸磷酸酶1（SH2-containing protein tyrosine phosphatase-1，SHP-1）和SHP-2 結合后，發(fā)揮下調T 細胞分化的作用，低分化的T 細胞在腫瘤微環(huán)境內產(chǎn)生免疫抑制信號[2,5]。其次，腫瘤微環(huán)境中PD-1 的高表達還能造成CD8+T 細胞、CD4+T 細胞以及調節(jié)性T 細胞功能障礙和耗竭，抑制免疫細胞對腫瘤細胞的殺傷作用，進一步促進腫瘤的發(fā)生發(fā)展[7]。PD-1/PD-L1 抑制劑通過阻斷PD-1 與PD-L1 的相互作用，逆轉或阻止腫瘤特異性T 細胞的耗竭，促進免疫細胞對腫瘤細胞的監(jiān)視和殺傷，提供有效的抗腫瘤作用[2]。多項研究已證實PD-1/PD-L1 抑制劑可以增強效應T 細胞的應答。然而大多數(shù)卵巢癌患者對PD-1/PD-L1 抑制劑治療不敏感，因此需要聯(lián)合治療以達到更大的抗腫瘤療效[8]。

1.2 PD-1/PD-L1 抑制劑在卵巢癌中的應用目前已有3 種抗PD-1 抗體（納武單抗、帕博利珠單抗和西米普利單抗）獲得美國食品藥品監(jiān)督管理局（Food and Drug Administration，F(xiàn)DA）批準用于微衛(wèi)星不穩(wěn)定性腫瘤患者的治療[9]。已有多項臨床試驗評估PD-1/PD-L1 抑制劑在卵巢癌中的療效，盡管一些小型研究發(fā)現(xiàn)了PD-1/PD-L1 抑制劑單藥治療卵巢癌的潛力，但在隨后進行的大樣本臨床試驗中發(fā)現(xiàn)其療效并不理想[8]。KEYNOTE-100 是迄今為止最大的免疫檢查點抑制劑單藥治療晚期復發(fā)性卵巢癌的Ⅱ期研究，該研究共納入376 例晚期復發(fā)性卵巢癌患者，主要研究終點為客觀緩解率（objective response rate，ORR），結果顯示，各隊列合并ORR 僅為8.0%，平均疾病控制率（disease control rate，DCR）為37%[10]。此外，2021 年Zhu 等[11]進行的一項薈萃分析共納入了15 項PD-1/PD-L1 抑制劑治療卵巢癌的相關臨床試驗，結果顯示，PD-1/PD-L1 抑制劑單藥用于卵巢癌的ORR 僅為9%，提示單獨使用PD-1/PD-L1抑制劑治療卵巢癌療效有限。未來的研究需要進一步探索PD-1/PD-L1 抑制劑聯(lián)合其他治療方法，比如化療、放療和靶向治療等，以提高對卵巢癌的療效。

2 PARPi

2.1 PARPi 的抗腫瘤機制PARP 參與轉錄、染色質重塑和DNA 單鏈斷裂修復等細胞基本生理過程[12]。DNA 雙鏈斷裂是最致命的DNA 損傷，可以通過同源重組（homologous recombination，HR）或非同源末端連接修復。PARPi 主要作用于PARP1，抑制DNA單鏈修復，使單鏈斷裂積累變成雙鏈斷裂，而雙鏈斷裂數(shù)量增多使細胞對HR 途徑的依賴性增強[13]。乳腺癌相關基因（breast cancer-related gene，BRCA）是參與HR 的關鍵組分，在乳腺癌和卵巢癌中常發(fā)生突變，由此產(chǎn)生的BRCA 缺陷細胞無法精確修復雙鏈斷裂，在此基礎上使用PARPi 可抑制細胞DNA修復，達到殺傷腫瘤細胞的目的，即PARPi 誘導的合成致死作用[4]。此外，近期研究表明PARPi 可通過參與抗腫瘤免疫調控發(fā)揮抗腫瘤作用[14]。PARPi 誘導的DNA 雙鏈斷裂和細胞質DNA 片段積累能激活環(huán)磷酸鳥苷-腺苷一磷酸合成酶-干擾素基因刺激因子（cyclic GMP-AMP synthase-stimulator of interferon genes，cGAS-STING）通路，該通路與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關[15-16]。cGAS-STING 信號通路的下游產(chǎn)物Ⅰ型干擾素（interferon，IFN）可誘導樹突狀細胞成熟，并增強樹突狀細胞的抗原提呈能力，也可直接調控T 細胞和B 細胞的活性，參與抗腫瘤免疫反應[17]。

2.2 PARPi 在卵巢癌中的應用奧拉帕利是最早被美國FDA 批準用于治療晚期卵巢癌的PARPi[18]。SOLO-1 是一項Ⅲ期臨床研究，該試驗納入來自15 個國家的260 例BRCA 突變的晚期卵巢癌患者，評估奧拉帕利用于治療新診斷的晚期卵巢癌的療效和安全性，主要研究終點為無進展生存期（progression free survival，PFS），結果顯示奧拉帕利組的中位PFS顯著長于安慰劑組，分別為56.0 個月和13.8 個月[19]。同樣地，SOLO-2 研究納入295 例組織學證實為復發(fā)性高級別漿液性或子宮內膜樣卵巢癌并接受過≥2 次鉑類藥物治療的患者，以2∶1 的比例隨機分組，分別接受奧拉帕利或安慰劑治療，評估患者的總生存期（overall survival，OS），結果顯示，奧拉帕利組和安慰劑組的中位OS 分別為51.7 個月和38.8 個月，嚴重不良反應的報告率分別為26%和8%[20]。上述研究表明PARPi 在卵巢癌的治療中具有較為理想的療效。然而PARPi 耐藥在臨床上普遍存在，超過40%的BRCA1/2 缺陷患者對PARPi 無反應，且隨著PARPi口服時間的延長，許多患者出現(xiàn)PARPi 耐藥[21]。為克服這些問題并提高患者對PARPi 的反應性，仍需進一步探索包括聯(lián)合治療在內的各種臨床治療策略。

3 PARPi 與PD-1/PD-L1 抑制劑的聯(lián)合應用

3.1 PARPi 與PD-1/PD-L1 抑制劑聯(lián)合應用的作用機制

3.1.1 PARPi 上調PD-L1 的表達 腫瘤組織中PD-L1 的表達水平是評估患者接受PD-1/PD-L1 抑制劑治療是否有效的最常用的生物標志物[22-24]。研究表明，PARPi 激活cGAS-STING 通路，促進IFN-α/β的釋放，進而激活Janus 激酶-信號轉導子和轉錄激活子-干擾素調節(jié)因子（Janus kinase-signal transducer and activator of transcription -interferon regulatory factor，JAK-STAT-IRF）通路，上調PD-L1 的表達[2]。PARPi 還通過使糖原合成酶激酶3β 失活，以及激活毛細血管擴張性共濟失調癥突變蛋白-ATM 及Rad3相關蛋白-檢查點蛋白激酶1（ataxia telangiectasia mutated-ATM and Rad3 related-checkpoint kinase 1，ATM-ATR-CHEK1）通路等方式誘導PD-L1 的表達[23]。PD-L1 表達水平的提高為PD-1/PD-L1 抑制劑提供了作用靶點，從而提高卵巢癌對PD-1/PD-L1抑制劑的反應性。此外，臨床前試驗也表明，PD-L1過表達介導的免疫抑制效應可拮抗PARPi 引起的抗腫瘤反應，削弱其抗腫瘤作用，這也是卵巢癌患者發(fā)生PARPi 耐藥的機制之一，而聯(lián)合使用PD-1/PD-L1 抑制劑可促使腫瘤細胞對T 細胞殺傷的再敏感化，降低卵巢癌患者對PARPi 的耐藥性[25]。研究表明，與奧拉帕利單藥治療相比，在奧拉帕利單藥治療的基礎上加用PD-1 抑制劑可延長患者的OS[14]。

3.1.2 PARPi 提高卵巢癌對PD-1/PD-L1 抑制劑的敏感性 PD-1/PD-L1 抑制劑的抗腫瘤活性依賴于基因突變導致的蛋白質表達模式異常，如新抗原或腫瘤特異性抗原（tumor specific antigen，TSA）[14]。TSA包含由腫瘤細胞基因組擾動所產(chǎn)生的突變氨基酸序列，這些抗原由HLA-Ⅰ/Ⅱ類分子提呈后可激活T細胞，產(chǎn)生抗腫瘤免疫反應。卵巢癌腫瘤突變負荷較低，缺乏TSA，免疫原性差，故對PD-1/PD-L1 抑制劑敏感性較差[22]。此外，實體腫瘤包含異質性腫瘤細胞群，其中腫瘤干細胞可通過降低HLA-Ⅰ類分子的表達進一步阻礙抗原提呈[26]。PARPi 誘導的合成致死作用可引起DNA 雙鏈損傷和基因組不穩(wěn)定，增加癌細胞微核和細胞質雙鏈DNA 的形成，從而產(chǎn)生更多的新抗原并表達于細胞表面，提高卵巢癌細胞的免疫原性，增強卵巢癌對PD-1/PD-L1 抑制劑的敏感性[23,27]。

卵巢癌免疫抑制的腫瘤微環(huán)境也是導致其對PD-1/PD-L1 抑制劑不敏感的原因之一[18]。卵巢癌腫瘤微環(huán)境中的髓源性抑制細胞（myeloid-derived suppressor cell，MDSC）、腫瘤相關巨噬細胞和調節(jié)性T 細胞通過產(chǎn)生轉化生長因子-β（transforming growth factor-β，TGF-β）、白細胞介素-10（interleukin-10，IL-10）和IL-6 等免疫調節(jié)分子，誘導并招募免疫抑制細胞，維持高度免疫抑制的腫瘤微環(huán)境，促進腫瘤的發(fā)生發(fā)展[28]。PARPi 通過影響參與免疫應答的細胞和可溶性因子，將免疫抑制的腫瘤微環(huán)境轉化為更具免疫反應性的腫瘤微環(huán)境[29]。Pantelidou 等[30]研究表明，PARPi 通過激活cGAS-STING 通路，使小鼠血液循環(huán)中T 細胞、自然殺傷（natural killer，NK）細胞和IFN、C-C 趨化因子配體5（C-C chemokine ligand 5，CCL5）等細胞因子以及CXC 趨化因子配體10（CXC chemokineligand-10，CXCL10）的水平增加，改善機體的免疫環(huán)境，而PARPi 與PD-1/PD-L1 抑制劑的聯(lián)合應用可進一步增強這些作用，證明了兩者聯(lián)合用藥的合理性。此外，PARPi 與PD-1/PD-L1抑制劑聯(lián)合應用時，PD-1、T 細胞免疫球蛋白、含黏蛋白結構域蛋白-3 和淋巴細胞激活基因-3 等抑制性因子以及MDSC 在小鼠原位癌細胞系中減少，可提高腫瘤對PD-1/PD-L1 抑制劑的反應性[23]。

3.2 PD-1/PD-L1 抑制劑與PARPi 聯(lián)合應用的臨床進展目前，多項PD-1/PD-L1 抑制劑與PARPi 聯(lián)合治療的臨床試驗已經(jīng)開展并取得了初步成效[26]。在一項Ⅱ期臨床研究中，共納入了35 例復發(fā)性卵巢癌患者，接受奧拉帕利聯(lián)合度伐利尤單抗治療直至疾病進展，主要研究終點為ORR。結果顯示，ORR 為14%，DCR 為71%，并且觀察到IFN 和趨化因子CXCL9/CXCL10 的表達增加，并且腫瘤浸潤淋巴細胞數(shù)量增加，表明聯(lián)合治療提高了腫瘤微環(huán)境的免疫原性[31]。MEDIOLA 是一項Ⅱ期臨床研究，評估在實體瘤和BRCA1/2 突變的腫瘤患者中，奧拉帕利和度伐利尤單抗聯(lián)合治療方案的療效和安全性，該研究納入34 例鉑類敏感的復發(fā)性卵巢癌患者，接受奧拉帕利治療4 周，隨后聯(lián)合使用奧拉帕利和度伐利尤單抗直至疾病進展。28 周DCR 為65.6%，ORR 為71.9%，共7 例完全緩解，PFS 為11.1 個月，緩解持續(xù)時間（duration of overall response，DOR）為10.2 個月[32]。同樣，TOPACIO/KEYNOTE-162Ⅰ/Ⅱ期研究[33]評估了尼拉帕利聯(lián)合帕博利珠單抗在鉑耐藥的復發(fā)性卵巢癌中的療效和安全性，結果顯示ORR 為18%，其中完全緩解3 例，部分緩解8 例，DCR 為65%，中位PFS 為3.4 個月，在無腫瘤BRCA 突變的患者中，2 種藥物單藥治療的反應均高于預期，無4 級免疫相關不良反應發(fā)生。該研究表明，尼拉帕尼聯(lián)合抗PD-1 抑制劑治療復發(fā)性卵巢癌患者具有良好的耐受性。

另有研究結果顯示，與傳統(tǒng)治療方式相比，PARPi 與PD-1/PD-L1 抑制劑的聯(lián)合使用可顯著提高療效[26]。2021 年Pusztai 等[34]發(fā)表的Ⅱ/Ⅲ期臨床研究對比分析了標準紫杉醇化療與德瓦魯單抗聯(lián)合奧拉帕利治療人表皮生長因子受體2（human epidermal growth factor receptor 2，HER2）陰性乳腺癌的臨床效果，該實驗顯示聯(lián)合治療與紫杉醇化療相比顯著提升了患者的病理完全緩解率（pathologic complete response rate），其中聯(lián)合治療組和化療組平均病理完全緩解率分別為37%和20%，且聯(lián)合治療組患者的殘余腫瘤負荷更低。目前在卵巢癌方面尚無關于聯(lián)合治療與單藥治療臨床效果對比的臨床試驗發(fā)表，但有學者正在對此進行研究。正在進行的ATHENA-COMBO 是一項隨機、雙盲的Ⅲ期臨床試驗，比較盧卡帕利聯(lián)合納武單抗與盧卡帕利單藥治療卵巢癌的臨床效果，該研究納入標準為18 歲以上初診的晚期高級別上皮性卵巢癌、原發(fā)性腹膜或輸卵管癌，且已完成一線含鉑雙藥化療和腫瘤細胞減滅術的患者，以1∶1 的比例隨機分為試驗組和對照組，分別給予盧卡帕利+納武單抗和盧卡帕利+安慰劑治療，直至疾病進展或死亡，主要評估指標為PFS，預計將于2023 年后得出試驗結論[35]。除此之外，目前還有多項探索PARPi 與PD-1/PD-L1 抑制劑藥物聯(lián)合治療晚期或復發(fā)性卵巢癌的Ⅰ～Ⅲ期臨床試驗正在進行[4]。

4 結語

目前關于PARPi 與PD-1/PD-L1 抑制劑的相互作用的機制已經(jīng)有較多成熟的研究成果發(fā)表，為2 種藥物的聯(lián)合應用提供了堅實的理論基礎。在卵巢癌中，也有多項臨床試驗證明PARPi 與PD-1/PD-L1抑制劑聯(lián)合治療取得了理想的效果，特別是對于鉑耐藥的復發(fā)性卵巢癌，能夠顯著延長患者的生存期。但免疫聯(lián)合靶向治療相較于卵巢癌標準治療方法的優(yōu)勢仍需大量的臨床試驗來證實，兩者聯(lián)合用藥能否用于晚期卵巢癌的一線治療值得期待。盡管免疫治療聯(lián)合其他藥物治療在卵巢癌中已經(jīng)初具成效，卵巢癌仍是惡性程度高、預后差的腫瘤，進一步探索免疫治療與放化療、靶向藥物等治療手段聯(lián)合應用有望進一步提高療效，改善患者預后。