不同環(huán)境因子對不結(jié)球白菜軟腐病發(fā)生的影響?

摘 要：以不結(jié)球白菜品種甬青8號為試材，采用軟腐病菌葉基部刺傷接種法，開展了不同溫度、濕度和接種量對不結(jié)球白菜軟腐病發(fā)生影響的研究。結(jié)果表明：溫度、濕度和接種量對軟腐病的發(fā)生均有顯著性影響，發(fā)病率和病情指數(shù)都隨著溫度的增加而上升，30和35℃處理的發(fā)病率與病情指數(shù)都分別達到100%和100，均顯著高于其他處理，而20℃處理的發(fā)病率與病情指數(shù)分別為52.67%和36.48，均顯著低于25℃處理；濕度是影響軟腐病發(fā)生的關(guān)鍵因子，高濕有利于病害的發(fā)生，RH為80%～100%處理的發(fā)病率和病情指數(shù)都分別達到100%和100，均顯著高于其他處理，而RH為0%～60%處理的發(fā)病率和病情指數(shù)分別僅為2.67%和1.52，均與清水處理（CK）無顯著性差異；發(fā)病率和病情指數(shù)均隨著接種量（菌液濃度）的增加而上升，菌液濃度為1×106和1×108 CFU/mL處理的發(fā)病率和病情指數(shù)都分別達到100%和100，均顯著高于其他處理，而菌液濃度為1×102 CFU/mL處理的軟腐病發(fā)病率和病情指數(shù)分別僅為6.00%和5.05，均與CK無顯著性差異。

關(guān)鍵詞：不結(jié)球白菜；軟腐??；溫度；空氣濕度；接種濃度；發(fā)病率；病情指數(shù)

中圖分類號：S634 文獻標識碼：A 文章編號：1006-060X（2023）06-0070-03

Abstract：Using non-heading Chinese cabbage Yongqing No. 8 as experimental material， the influence of variable temperature， air relative humidity （RH） and inoculum on the occurrence of soft rot in non-heading chinese cabbage was studied via the leaf base puncture innoculation. The results showed that the factors of temperature， air relative humidity and inoculum significantly influenced the occurrence of soft rot. With the increase of temperature， the morbidity and disease index increased，" reaching 100% and 100， respectively both at 30℃ and 35℃ which were significantly higher than the other treatments， while at 20℃ were 52.67% and 36.48， respectively， significantly lower than at 25℃. Air relative humidity is the key factor affecting the occurrence of soft rot; high humidity is conducive to the occurrence of diseases. The morbidity and disease index of RH 80%-100% treatment were 100% and 100， respectively， both significantly higher than those of the other treatments， while those of RH 0%-60% treatment were only 2.67% and 1.52， respectively， not significantly different from CK （clean water treatment）. The morbidity and disease index increased with the increase of the inoculum （concentration of bacterial solution）， reaching 100% and 100， respectively at an inoculum of 1×106 or 1×108 CFU/mL，" which were significantly higher than the other treatments， whereas were only 6.00% and 5.05， respectively at an inoculum of 1×102 CFU/mL， presenting no significant difference compared to CK.

Key words：non-heading Chinese cabbage; soft rot; temperature; air relative humidity; inoculum concentration; morbidity; diesase index

不結(jié)球白菜（Brassica campestris ssp. Chinensis Makina），又稱青菜、小白菜，是我國主要蔬菜作物之一，具有種類多樣、生育期短、采收期靈活、復(fù)種指數(shù)和經(jīng)濟效益高等特點，在維持蔬菜市場均衡供應(yīng)中起到重要作用。細菌性軟腐病是不結(jié)球白菜的一種重要病害，在整個生長期均可為害，其病原菌為胡蘿卜軟腐果膠桿菌（Pectobacteriumcaro- tovorum）。該病可在我國大部分地區(qū)廣泛發(fā)生，主要通過土壤、堆肥、灌溉水等傳播，其發(fā)病極快，在高溫多雨天氣下發(fā)病尤為嚴重，能夠?qū)е庐a(chǎn)量和品質(zhì)大幅度下降，從而造成巨大的經(jīng)濟損失[1]。不結(jié)球白菜在夏秋季多采用大棚等設(shè)施栽培[2]，由于設(shè)施栽培環(huán)境為半封閉，其空氣流通差、溫度高、濕度大、復(fù)種指數(shù)高，常導(dǎo)致軟腐病大規(guī)模爆發(fā)。

環(huán)境因子與作物病害的發(fā)生關(guān)系密切，其中環(huán)境溫度、相對濕度、環(huán)境中的病菌基數(shù)等對病害的發(fā)生具有顯著性影響。雖然關(guān)于不結(jié)球白菜軟腐病的研究很多，但具體的不同環(huán)境因子參數(shù)對不結(jié)球白菜軟腐病發(fā)生影響的研究較少。為此，筆者設(shè)置不同溫度、濕度和接菌量處理，采用軟腐病菌葉基部刺傷接種法開展了不同環(huán)境因子對不結(jié)球白菜軟腐病發(fā)生影響的研究，以期為軟腐病的田間防治提供參考。

1 材料與方法

1.1 供試材料

供試不結(jié)球白菜品種為甬青8號，由寧波豐登種業(yè)科技有限公司提供。將種子播種在9×9 cm的方形營養(yǎng)缽中，每缽播種1粒種子。然后置于人工氣候室中培養(yǎng)，并適時在根部澆水。培養(yǎng)條件為空氣相對濕度（RH）90%，日溫25℃，夜溫18℃。待幼苗長至6葉1心時備用。

供試軟腐病病原菌為Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum，為寧波市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院蔬菜所分離鑒定。軟腐病病菌培養(yǎng)基為牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基（NA、NB）。首先將－80℃保存的軟腐病菌在NA平板上劃線活化，置于28℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48 h，然后在平板上挑取單菌落接種到NB培養(yǎng)基中，置搖床上在28℃、180 r/min條件下振蕩培養(yǎng)12 h，再配置成軟腐病菌原液備用。

1.2 試驗方法

1.2.1 不同溫度對不結(jié)球白菜軟腐病發(fā)生的影響 先將培養(yǎng)好的軟腐病菌原液稀釋至1×104 CFU/mL（OD600≈0.2時菌液濃度約為2×108 CFU/mL），然后采用葉基部刺傷接種法[3]對準備好的不結(jié)球白菜幼苗進行接種，再置于不同溫度下培養(yǎng)。溫度設(shè)20、25、30和35℃共4個處理，RH均為80%～100%，每個處理10株，每株接種葉片5片，共接種50片葉，以接種清水為對照（CK）。接種后置不同溫度的人工氣候箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)48 h后調(diào)查軟腐病病害發(fā)生情況。

1.2.2 不同濕度對不結(jié)球白菜軟腐病發(fā)生的影響 不結(jié)球白菜幼苗采用上述同樣的方法接種1×104 CFU/mL軟腐病菌菌液后置于不同空氣相對濕度（RH）下培養(yǎng)。RH設(shè)0%～60%、60%～80%和80%～100%共3個處理，溫度均為30℃，每個處理10株，每株接種葉片5片，共接種50片葉，以接種清水為對照（CK）。接種后置不同RH的人工氣候箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)48 h后調(diào)查軟腐病病害發(fā)生情況。

1.2.3 不同接種量對不結(jié)球白菜軟腐病發(fā)生的影響 不同接種量設(shè)菌液濃度1×102、1×104、1×106和1×108 CFU/mL共4個處理，以清水為對照（CK）。首先將培養(yǎng)好的軟腐病菌原液稀釋至上述不同濃度的菌液，將準備好的不結(jié)球白菜幼苗采用葉基部刺傷接種法接種后再置于RH為80%～100%、溫度為20℃的人工氣候箱中培養(yǎng)。每個處理10株，每株接種葉片5片，共接種50片葉。培養(yǎng)48 h后調(diào)查軟腐病病害發(fā)生情況。

1.3 發(fā)病情況調(diào)查方法

在接種后48 h逐株調(diào)查記錄軟腐病病葉數(shù)，并參照謝鑫鑫等[4]的分級標準對不結(jié)球白菜軟腐病進行病害分級。分級標準為：0級，無癥狀；1級，病斑長度1～10 mm；3級，病斑長度10～20 mm；5級，病斑長度20～30 mm；7級，病斑長度30 mm以上。再根據(jù)軟腐病病株數(shù)和病害等級分別按公式（1）和（2）計算出軟腐病發(fā)病率和病情指數(shù)。

發(fā)病率（%）=（軟腐病病葉數(shù)/調(diào)查總?cè)~數(shù)）×100" " " " " " " " " " " " " " " " " " " " " " " " " " nbsp; " " " " " " " " " " " （1）

病情指數(shù)=∑（各級病葉數(shù)×該病級值）/（調(diào)查總?cè)~數(shù)×最高級值）×100" " " " " " " " " " " " " " " " " " （2）

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

采用Excel 軟件和DPS軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同溫度處理對不結(jié)球白菜軟腐病發(fā)生的影響

如圖1所示，不同溫度處理對不結(jié)球白菜軟腐病的發(fā)生有顯著性影響，高溫有利于病害的發(fā)生。

30℃和35℃處理的軟腐病發(fā)病率與病情指數(shù)都分別為100%和100，均顯著高于其他處理；25℃處理的軟腐病發(fā)病率與病情指數(shù)分別為85.33%和68.76，均顯著低于和35℃處理；20℃處理的軟腐病發(fā)病率與病情指數(shù)分別為52.67%和36.48，均顯著低于25℃處理；而清水處理（CK）沒有發(fā)病。

2.2 不同濕度處理對不結(jié)球白菜軟腐病發(fā)生的影響

如圖2所示，在相同溫度和接種量的條件下，不同濕度（RH）對不結(jié)球白菜軟腐病的發(fā)生有顯著性影響，高濕有利于病害的發(fā)生。RH為0%～60%處理的發(fā)病率和病情指數(shù)分別僅為2.67%和1.52，均與清水處理（CK）無顯著性差異；RH為60%～80%處理的軟腐病發(fā)病率和病情指數(shù)均顯著高于RH為0%～60%處理；RH為80%～100%處理的軟腐病發(fā)病率和病情指數(shù)都是最高，分別為100%和100，均顯著高于其他處理。

2.3 不同接種量處理對不結(jié)球白菜軟腐病發(fā)生的影響

如圖3所示，不同接種量處理對不結(jié)球白菜軟腐病的發(fā)生有顯著性影響，軟腐病發(fā)病率和病情指數(shù)均隨著接種量（菌液濃度）的增加而上升。菌液濃度為1×102 CFU/mL處理的軟腐病發(fā)病率和病情指數(shù)分別僅為6.00%和5.05，均與清水處理（CK）無顯著性差異；而菌液濃度為1×106和1×108 CFU/mL處理的發(fā)病率和病情指數(shù)都分別達到100%和100，均顯著高于其他處理。

3 討 論

曾向萍等[5]調(diào)查發(fā)現(xiàn)，溫度、濕度及降雨量與白菜軟腐病的發(fā)生具有緊密聯(lián)系，當(dāng)環(huán)境溫濕度高和降雨量大時，都易造成軟腐病發(fā)生且發(fā)病嚴重；但當(dāng)溫度低于15℃時軟腐病菌生長變緩慢，其侵染能力也減弱[6]。不同病原菌侵染作物所需的關(guān)鍵環(huán)境因子不同，汪漢成等[7]的研究表明，影響煙草青枯病菌致病力的關(guān)鍵因子為溫度和pH值，而濕度并非青枯病發(fā)生的關(guān)鍵因素，溫度還可影響煙草品種對青枯病的抗性[8]；閆鑫等[9]的研究表明，濕度是谷子白發(fā)病發(fā)生的主要影響因素，低溫高濕環(huán)境條件有利于病害發(fā)生。一般認為，只有當(dāng)病原菌到達一定濃度時病菌才有能力侵染寄主作物，例如：只有當(dāng)接菌濃度達到1×102～1×1010 CFU/mL時才會引起番茄青枯病的發(fā)生[10]；當(dāng)接菌濃度為1×108～2×108 CFU/L時最有利于釀酒葡萄霜霉病發(fā)病，接種濃度過高和過低均不利于發(fā)病[11]。筆者的試驗結(jié)果表明，溫度、濕度和接種量對不結(jié)球白菜軟腐病的發(fā)生均有顯著性影響，在相同的濕度和接種量的條件下，軟腐病發(fā)病率和病情指數(shù)都隨著溫度的增加而上升，30℃和35℃處理的發(fā)病率與病情指數(shù)都分別達到100%和100，均顯著高于其他處理，25℃處理的發(fā)病率與病情指數(shù)分別為85.33%和68.76，而20℃處理的發(fā)病率與病情指數(shù)分別為52.67%和36.48，均顯著低于25℃處理；在相同的溫度和接種量的條件下，高濕有利于病害的發(fā)生，RH為80%～100%處理的發(fā)病率和病情指數(shù)都分別達到100%和100，均顯著高于其他處理，而RH為0%～60%處理的發(fā)病率和病情指數(shù)分別僅為2.67%和1.52，均與清水處理（CK）無顯著性差異，RH為60%～80%處理的發(fā)病率和病情指數(shù)也均顯著高于RH為0%～60%的處理；在溫度為20℃、RH為80%～100%的條件下，軟腐病發(fā)病率和病情指數(shù)均隨著接種量（菌液濃度）的增加而上升，菌液濃度為1×106和1×108 CFU/mL處理的發(fā)病率和病情指數(shù)都分別達到100%和100，均顯著高于其他處理，而菌液濃度為1×102 CFU/mL處理的軟腐病發(fā)病率和病情指數(shù)分別僅為6.00%和5.05，均與清水處理（CK）無顯著性差異。

根據(jù)上述研究結(jié)果，筆者認為控制田間濕度對防控軟腐病的發(fā)生非常重要，特別是在夏季設(shè)施栽培時，棚內(nèi)通風(fēng)降濕能夠明顯降低軟腐病的發(fā)生；及時清除病殘體，進行合理輪作能夠減少田間病菌的數(shù)量，也可有效防治軟腐病的發(fā)生。

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（責(zé)任編輯：肖光輝）