乙酰肝素酶在重癥急性胰腺炎相關(guān)肺損傷中的表達及意義＊

梁文美 趙曉宇 薄世興

1.遵義醫(yī)科大學附屬醫(yī)院重癥醫(yī)學科 (貴州 遵義 563000)

2.遵義市第一人民醫(yī)院綜合醫(yī)療中心 (貴州 遵義 563000)

3.遵義醫(yī)科大學附屬醫(yī)院老年醫(yī)學科 (貴州 遵義 563000)

重癥急性胰腺炎(severe acute pancreatitis，SAP)是一種嚴重的胰腺疾病，其臨床特點包括劇烈的腹痛、胰腺組織炎癥和胰腺功能損害[1]。盡管胰腺是主要受累的器官，然而，越來越多的研究表明[2-3]，重癥急性胰腺炎也會引發(fā)其他器官的損害，尤其肺部。重癥急性胰腺炎相關(guān)肺損傷是導致患者死亡的重要原因之一。肺外源性因素所致肺損傷的特征是內(nèi)皮細胞糖萼降解介導了肺泡微血管功能障礙的發(fā)生。內(nèi)皮糖萼(endothelial glycocalyx, EG)是一種富含糖胺聚糖的血管內(nèi)層，包含硫酸乙酰肝素(heparan sulfate, HS)、硫酸軟骨素和透明質(zhì)酸[4]。乙酰肝素酶(heparanase，HPSE)是哺乳動物在血紅素的代謝過程中，體內(nèi)唯一能夠降解硫酸乙酰肝素的β-葡萄糖醛酸內(nèi)切酶。因此，乙酰肝素酶對糖萼的結(jié)構(gòu)和功能起重要作用[5-7]。HPSE能夠促進血紅素形成膽綠素等產(chǎn)物，發(fā)揮抗炎癥反應(yīng)及抗凋亡、抗氧化的功能[8]。有研究發(fā)現(xiàn)，HPSE的過表達能夠改善急性重癥胰腺炎的肝臟病變及肝腎功能，但關(guān)于其在急性肺損傷中影響機制尚不完全清楚。因此，本研究旨在探究HPSE在SAP相關(guān)肺損傷中的表達情況，并進一步探討其潛在的意義，有望為理解SAP相關(guān)肺損傷的發(fā)生機制提供新的指導，并為尋找針對該疾病的治療方法和預(yù)防策略提供新的思路，內(nèi)容如下。

1 資料與方法

1.1 研究對象選取2021年5月至2023年5月在本院就診的SAP患者112例，男性66例，女性56例，年齡27～74歲，平均年齡(44.82±9.85)歲。

納入標準：符合《中國急性胰腺炎診療指南(2021年)》診斷標準[9]；急性胰腺炎床旁嚴重度指數(shù)(Βedside Index for Severity in Acute Pancreatitis，ΒISAP)評分≥3分；年齡≥18歲。排除標準：因外科手術(shù)引起的胰腺炎；重要臟器功能不全；近期內(nèi)具有抗生素或免疫抑制劑治療史；合并惡性腫瘤、免疫系統(tǒng)類疾病；處于哺乳期或妊娠期；認知障礙。

1.2 研究方法

1.2.1 外周血HPSE表達的檢測 患者入院24h內(nèi)，采集患者外周血3mL，離心，TRIzol法提取RNA，逆轉(zhuǎn)錄cDNA，HPSE正向引物：5＇-GTACGTTACGTTCGTTACCGTTATTC-3＇，反向引物：5＇-GTGTTTTTACGTACACCGCGTTATTC-3＇。實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(quantitative real-time polymerase chain reaction，qRT-PCR)反應(yīng)條件：92℃預(yù)變性2min，92℃變性12s，63℃退火23s，75℃延伸20s，41cycls，采用2-??Ct法計算HPSE mRNA相對表達量。

1.2.2 肺損傷判斷 依據(jù)中華醫(yī)學會重癥醫(yī)學分化擬定的《急性肺損傷/急性呼吸窘迫綜合征診斷和治療指南(2006)》[10]判定是否存在肺損傷，并依據(jù)是否發(fā)生肺損傷分為肺損傷組、無肺損傷組。

1.2.3 資料收集 收集患者資料，包括性別、年齡、體質(zhì)量指數(shù)(body mass index，ΒMI)、基礎(chǔ)疾病、血紅蛋白(hemoglobin，Hb)、白細胞計數(shù)(white blood cell，WΒC)、淀粉酶(amylase，AMY)、ΒISAP評分、乳酸脫氫酶(乳酸脫氫酶，LDH)、白細胞介素-6(interleukin-6，IL-6)、C-反應(yīng)蛋白(C-reactive protein，CRP)、纖維蛋白原(Fib)、降鈣素原(procalcitonin，PCT)、腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)。

1.3 統(tǒng)計學方法采用SPSS 25.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行分析，計量資料用(±s)表示，比較用t檢驗；計數(shù)資料用[n(%)]表示，比較用χ2檢驗；以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié) 果

2.1 SAP患者肺損傷發(fā)生情況112例SAP患者并發(fā)肺損傷55例(肺損傷組)、未并發(fā)肺損傷57例(無肺損傷組)。

2.2 兩組一般資料比較兩組性別、年齡、ΒMI、基礎(chǔ)疾病、Hb、WΒC、AMY比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，兩組ΒISAP評分、LDH、IL-6、CRP、Fib、PCT、TNF-α比較差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，見表1。

2.3 兩組外周血HPSEmRNA水平比較 肺損傷組外周血HPSE mRNA水平高于無肺損傷組(P<0.05)，見表2。

表2 兩組外周血HPSE mRNA水平比較

2.4 SAP患者發(fā)生肺損傷的多因素Logistic回歸分析以SAP患者是否發(fā)生肺損傷為因變量，未發(fā)生=“0”，發(fā)生=“1”，以ΒISAP評分、LDH、IL-6、CRP、Fib、PCT、TNF-α作為自變量進行多因素Logistic回歸分析，結(jié)果顯示ΒISAP評分[OR=2.891，95%CI：1.481～5.644]、HPSE mRNA[OR=3.335，95%CI：1.711～6.513]、Fib[OR=3.285，95%CI：1.524～6.231]、IL-6[OR=1.654，95%CI：1.105～5.254]、CRP[OR=1.884，9 5%C I：1.1 1 2～5.8 8 5]、P C T[O R=1.7 1 3，9 5%C I：1.121～5.126]、TNF-α[OR=1.624，95%CI：1.087～6.321]均是影響SAP患者肺損傷的危險因素(P<0.05)，見表3。

表3 SAP患者發(fā)生肺損傷的多因素Logistic回歸分析

2.5外周血HPSE mRNA、Fib對SAP患者肺損傷的預(yù)測價值外周血HPSE mRNA AUC為0.791(95%CI：0.726～0.845)、Fib AUC為0.658(95%CI：0.612～0.821)，聯(lián)合Fib預(yù)測SAP患者肺損傷敏感性為85.51%、特異性79.35%、AUC為0.821(95%CI：0.754～0.903)高于單一檢測，見表4、圖1。

圖1 外周血HPSE mRNA預(yù)測SAP患者肺損傷的ROC曲線

表4 外周血HPSE mRNA、Fib對SAP患者肺損傷的預(yù)測價值

3 討 論

SAP炎癥的發(fā)生可導致胰腺組織的壞死和炎癥，釋放大量的炎性介質(zhì)和細胞因子，這些炎性介質(zhì)會進入血液循環(huán)系統(tǒng)，引起全身性的炎癥反應(yīng)，包括肺部的炎癥反應(yīng)，導致肺損傷[11]。另外SAP患者由于胰腺炎癥和壞死，導致胰酶的釋放和激活，進而引起以肺部為主的多器官受損[12]。胰酶和其他胰液成分可通過胰肺分子反應(yīng)進入肺腔并直接損傷肺組織。SAP患者還可能伴隨著高凝狀態(tài)、血栓形成以及微循環(huán)障礙。這些因素可導致肺部的微循環(huán)障礙，進而引起肺組織的缺血缺氧和損傷[13]。因此，積極預(yù)測SAP患者是否發(fā)生肺損傷是改善患者預(yù)后的關(guān)鍵。

本研究結(jié)果顯示，兩組ΒISAP評分、LDH、IL-6、CRP、Fib、PCT、TNF-α比較差異具有統(tǒng)計學意義，多因素Logistic回歸分析，結(jié)果顯示ΒISAP評分、HPSE mRNA、IL-6、CRP、Fib均是影響SAP患者肺損傷的危險因素。分析原因，ΒISAP評分一定程度上可以反映胰腺受損嚴重程度，ΒISAP評分越高說明患者胰腺受損程度越嚴重，可增加肺部損傷的發(fā)生風險。已有研究表明，HPSE在肺損傷中發(fā)揮了一定的作用。多項研究顯示[14-15]，在肺部炎癥和感染狀態(tài)下，HPSE的表達和活性都會增加，從而導致肺泡壁和毛細血管的損傷、肺水腫、肺部纖維化等肺部損傷的發(fā)生。此外，HPSE還可以促進炎癥細胞的浸潤和肺部炎癥反應(yīng)的發(fā)生，進一步加重肺損傷程度。ROC曲線顯示，外周血HPSE mRNA聯(lián)合Fib預(yù)測SAP患者肺損傷敏感性為85.51%、特異性79.35%、AUC為0.821(95%CI：0.754～0.903)高于單一檢測，說明外周血HPSE聯(lián)合Fib預(yù)測SAP患者肺損傷效能較高。分析其原因，外周血HPSE和Fib在預(yù)測肺損傷方面具有互補作用，HPSE是一種酶，其升高可以反映出炎癥反應(yīng)的程度，而Fib是一種纖維蛋白原，在肺損傷發(fā)生時會被消耗掉，通過聯(lián)合檢測這兩個指標，可以綜合評估炎癥反應(yīng)的程度以及纖維蛋白原的水平，從而更全面地判斷胰腺炎患者是否會發(fā)生肺損傷。單一檢測指標可能受到干擾因素的影響，導致預(yù)測結(jié)果的不穩(wěn)定性，而通過聯(lián)合檢測兩個指標，可以減少誤判的可能性，提高預(yù)測結(jié)果的穩(wěn)定性。雖然外周血HPSE水平與SAP患者肺損傷相關(guān)，但具體的機制仍需要進一步研究和探索。

綜上所述，外周血HPSE、Fib均與SAP相關(guān)肺損傷有關(guān)，且外周血HPSE聯(lián)合Fib對SAP患者發(fā)生肺損傷的預(yù)測效能高。