◆作者:鐘 雷 袁俊光 陳宇航 曹雙俊 周良星 劉建高
◆單位:1.廣東德寧水產(chǎn)科技有限公司;2.廣東省水產(chǎn)高效健康養(yǎng)殖(德寧)工程技術(shù)研究中心;3.新希望六和股份有限公司
大口黑鱸(Micropterus salmoides),又名加州鱸,肉質(zhì)鮮美,營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高,深受廣大消費(fèi)者喜愛。近年來(lái)隨著養(yǎng)殖技術(shù)的進(jìn)步和飼料營(yíng)養(yǎng)的完善,據(jù)《2022 中國(guó)漁業(yè)統(tǒng)計(jì)年鑒》大口黑鱸養(yǎng)殖量已突破70 萬(wàn)噸,是重要的淡水養(yǎng)殖品種。大口黑鱸是肉食性魚類,人工配合飼料中魚粉和雞肉粉的比例在60%左右,占據(jù)飼料大部分成本,并由此產(chǎn)生的魚粉和雞肉粉需求分別在30 萬(wàn)噸和10 萬(wàn)噸左右,對(duì)本已緊張的魚粉和雞肉粉供應(yīng)帶來(lái)巨大壓力,因此研究大口黑鱸魚粉和雞肉粉替代方案對(duì)大口黑鱸養(yǎng)殖發(fā)展顯得尤為重要。目前關(guān)于大口黑鱸魚粉替代研究較多集中于菌體蛋白(Ma 等,2022)、蟲體蛋白(Gu 等,2022;Xu 等,2021)、植物蛋白(He 等,2022;Yang 等,2022)等,雞肉粉替代研究?jī)H有黑水虻替代見諸報(bào)道(Fisher 等,2022)。
豬肉粉是常見的以豬經(jīng)屠宰分割后食用價(jià)值低的下腳料或者非傳染性病死豬為原料,經(jīng)破碎、高溫蒸煮、滅菌、脫脂干燥、粉碎等生產(chǎn)工藝獲得的產(chǎn)品(馮幼等,2014;程小飛等,2020)。豬肉粉蛋白高(粗蛋白質(zhì)60%以上),氨基酸組成較理想,營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高;同時(shí)基于我國(guó)龐大的生豬養(yǎng)殖及屠宰量,豬肉粉原料供應(yīng)充足,作為加州鱸這種肉食性魚類的動(dòng)物蛋白源具有一定利用前景。關(guān)于大口黑鱸飼料中豬肉粉替代魚粉或雞肉粉的研究較少,且僅見于小規(guī)格階段(卞 宇 豪 等,2022;Tidwell 等,2005),尚無(wú)替代后對(duì)全周期養(yǎng)殖大口黑鱸養(yǎng)殖的效果評(píng)估。因此,本研究利用豬肉粉替代魚粉或雞肉粉,評(píng)估替代后對(duì)大口黑鱸全養(yǎng)殖周期不同生長(zhǎng)階段生長(zhǎng)及飼料利用的影響,為豬肉粉在大口黑鱸飼料中的商業(yè)使用提供參考。
實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與分組見表1。實(shí)驗(yàn)飼料所用豬肉粉、秘魯日本級(jí)魚粉、泰國(guó)魚粉、雞肉粉、大豆粕、棉籽蛋白均購(gòu)于廣州希望飼料有限公司,豬肉粉、秘魯日本級(jí)魚粉、雞肉粉營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)見表2。
表2 實(shí)驗(yàn)所用動(dòng)物蛋白營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)(干物質(zhì)計(jì),%)
所有原料粉碎過(guò)80 目篩,使用小型混合機(jī)充分混合均勻,經(jīng)單螺桿膨化機(jī)用孔徑3.0 mm模板制成膨化飼料,烘干冷卻后置于-18 ℃冰箱保存。實(shí)驗(yàn)飼料配方及生化組成見表3,實(shí)驗(yàn)飼料氨基酸組成見表4。
表3 實(shí)驗(yàn)飼料配方及營(yíng)養(yǎng)組成(干物質(zhì)計(jì),%)
表4 實(shí)驗(yàn)飼料氨基酸組成(干物質(zhì)計(jì),%)
本實(shí)驗(yàn)在廣東德寧水生生物研究中心試驗(yàn)基地內(nèi)的網(wǎng)箱開展,網(wǎng)箱2 m×2 m×1.8 m。實(shí)驗(yàn)于2022 年7 月1 日-2023 年1 月2 日期間開展,為期186 d。試驗(yàn)開始前大口黑鱸暫養(yǎng)于魚塘網(wǎng)箱中用對(duì)照組飼料馴食2周。實(shí)驗(yàn)前饑餓24h,每個(gè)網(wǎng)箱隨機(jī)挑選100 尾實(shí)驗(yàn)魚,初始體重每尾55 g 左右,養(yǎng)殖第60 d 第一次取樣(D 60),并在D 60 每個(gè)網(wǎng)箱驗(yàn)收魚中隨機(jī)挑選50 尾實(shí)驗(yàn)魚,初始體重為每尾178 g左右;養(yǎng)殖第122 d 第二次取樣(D 122),并在每個(gè)網(wǎng)箱驗(yàn)收魚中隨機(jī)挑選35 尾魚,初始體重為每尾306 g 左右;養(yǎng)殖第186 d第三次取樣(D 186)。根據(jù)分組分別投喂5 種飼料,每組5 個(gè)平行,共25 個(gè)網(wǎng)箱。
實(shí)驗(yàn)期間每天投喂2 次(7:00 和16:30)。整個(gè)養(yǎng)殖期間,水體溶解氧含量在5.2~7.9 mg/L,氨氮0.05~0.47 mg/L,亞硝酸鹽0~0.05 mg/L;D60 養(yǎng)殖期間水溫27.4~32.3℃,平均水溫30.16℃,D122 養(yǎng)殖期間水溫24.4~29.6℃,平均水溫27.82℃;D186 養(yǎng)殖期間水溫13.5~24.6 ℃,平均水溫19.39℃。
每次采樣前饑餓24 h,每個(gè)網(wǎng)箱實(shí)驗(yàn)魚計(jì)數(shù)稱重。每個(gè)網(wǎng)箱隨機(jī)抽取3 尾魚解剖,稱內(nèi)臟團(tuán)和肝臟重量,用于計(jì)算臟體比和肝體比,分離的肝臟拍照統(tǒng)計(jì)白肝指數(shù)。
成活率(SR,%)= 存活數(shù)量(尾)/ 初始數(shù)量(尾)×100%
日攝食率(DFR,%)= 攝食量(g)/[終末體重(g)+ 初始體重(g)]×2/ 養(yǎng)殖天數(shù)(d)×100%
飼料系數(shù)(FCR)= 攝食飼料總量(g)/[終末體重(g)- 初始體重(g)]
增重率(WGR,%)=[終末體重(g)- 初始體重(g)]/ 初始體重(g)×100%
特定生長(zhǎng)率(SGR,%/d)=[ln(終末體重)- ln(初始體重)]/飼養(yǎng)天數(shù)×100%
肥滿度(CF,g/cm3)=(終末體重(g)/ 終末體長(zhǎng)(cm)3)×100%
臟體比(VSI,%)= 臟體重量(g)/ 魚體重(g)×100%
肝體比(HSI,%)=肝臟重量(g)/ 魚體重(g)×100%
白肝指數(shù)(%)= 白肝數(shù)量/解剖肝數(shù)量×100%
使用SPSS 19.0 軟件對(duì)結(jié)果數(shù)據(jù)進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn);數(shù)據(jù)方差齊性后,進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA),采用Duncan’s 多重比較法分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果的差異顯著性,差異顯著水平為P<0.05。
由表5 可知,在整個(gè)養(yǎng)殖周期,各組成活率無(wú)顯著差異(P>0.05)。D60 養(yǎng)殖階段FM8 組大口黑鱸增重率和特定生長(zhǎng)率顯著高于C 組(P<0.05),其他組與C 組無(wú)顯著差異(P>0.05),各組間飼料系數(shù)無(wú)顯著差異(P>0.05)。D122 養(yǎng)殖階段,隨著豬肉粉替代魚粉或雞肉粉水平升高,大口黑鱸日攝食率升高,并在16%豬肉粉替代魚粉或雞肉粉較對(duì)照組出現(xiàn)顯著差異(P<0.05);各組間增重率、特定生長(zhǎng)率、飼料系數(shù)均無(wú)顯著差異(P>0.05)。D186 養(yǎng) 殖 階 段,F(xiàn)M8、FM16、PM8、PM16 組 大 口黑鱸日攝食率顯著高于C 組(P<0.05);C 組與各組間增重率、特定生長(zhǎng)率無(wú)顯著差異(P>0.05),豬肉粉替代魚粉或雞肉粉水平從8%升高至16%,大口黑鱸增重率、特定生長(zhǎng)率有下降趨勢(shì),飼料系數(shù)有升高趨勢(shì),其中FM8 組增重率、特定生長(zhǎng)率顯著高 于FM16 和PM16 組(P<0.05),F(xiàn)M16 和PM16 組飼料系數(shù)均顯著高于C 組和FM8 組(P<0.05)。
表5 飼料中豬肉粉部分替代魚粉或雞肉粉對(duì)大口黑鱸生長(zhǎng)和飼料利用的影響
由表6 可知,全養(yǎng)殖周期,C組大口黑鱸肥滿度均高于其他各組,在D186 階段,F(xiàn)M16 組和PM16 大口黑鱸肥滿度顯著低于C 組(P<0.05);各組臟體比、肝體比無(wú)顯著差異(P>0.05)。
表6 飼料中豬肉粉部分替代魚粉或雞肉粉對(duì)大口黑鱸形體指標(biāo)的影響
由表7 可知,整個(gè)養(yǎng)殖期間,各組間大口黑鱸白肝比例無(wú)明顯差異。
表7 飼料中豬肉粉部分替代魚粉或雞肉粉對(duì)大口黑鱸白肝指數(shù)的影響
水產(chǎn)動(dòng)物飼料中蛋白源替代的使用效果有以下3 個(gè)因素:(1)替代后適口性,對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物攝食率的影響(Ai 等,2006);(2)水產(chǎn)動(dòng)物對(duì)替代動(dòng)物蛋白源的消化利用(Bureau 等,1999);(3)替代后氨基酸平衡性(Ai 等,2005)。
水產(chǎn)品種對(duì)豬肉粉消化利用研究較多集中于豬肉粉營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的表觀消化率測(cè)定分析。河蟹對(duì)豬肉粉蛋白質(zhì)、脂肪及氨基酸表觀消化率顯著低于魚粉和雞肉粉(吳英珂等,2022);虹鱒對(duì)豬肉粉蛋白質(zhì)、脂肪及能量的表觀消化率與雞肉粉接近(Elliot等,2003);花鱸對(duì)豬肉粉的干物質(zhì)、蛋白質(zhì)、能量和氨基酸的表觀消化率均高于雞肉粉。不同水產(chǎn)品種對(duì)豬肉粉營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率差異可能與各品種的消化生理結(jié)構(gòu)差異有關(guān),同時(shí)豬肉粉質(zhì)量差異也是影響因素(程小飛等,2020)。目前尚無(wú)大口黑鱸對(duì)豬肉粉的消化利用數(shù)據(jù),從全周期生長(zhǎng)上來(lái)看,表明大口黑鱸對(duì)豬肉粉的消化利用較魚粉和雞肉粉無(wú)明顯差異。此外,本研究中D60、D122 養(yǎng)殖階段飼料系數(shù)無(wú)顯著差異,而在D186 養(yǎng)殖階段FM16、PM16 組飼料系數(shù)均顯著高于C 組,這可能與D186 養(yǎng)殖階段較其他養(yǎng)殖階段水溫低有關(guān)(D 60 養(yǎng)殖期間水溫27.4~32.3 ℃,平均水溫30.16℃,D 122 養(yǎng)殖期間水溫24.4~29.6℃,平均水溫27.82℃,D 186 養(yǎng)殖期間水溫13.5~24.6 ℃,平均水溫19.39℃)。Xue 等(2018)研究表明,水溫不同通過(guò)影響魚類腸道蠕動(dòng)、消化酶活性,改變魚類生理狀態(tài),進(jìn)而造成消化利用的差異。水溫的降低顯著降低魚類對(duì)飼料營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化率,從而導(dǎo)致飼料利用下降,飼料系數(shù)升高。大口黑鱸隨著生長(zhǎng),消化器官不斷發(fā)育,功能完善,長(zhǎng)期的飼料攝食對(duì)腸道生理結(jié)構(gòu)和環(huán)境產(chǎn)生影響,對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化利用也相應(yīng)發(fā)生變化(劉建高等,2023),因此同一實(shí)驗(yàn)組大口黑鱸在不同養(yǎng)殖階段與對(duì)照組生長(zhǎng)和飼料利用效果比較有差異。
必需氨基酸不足,氨基酸組成不平衡是限制替代魚粉水平的重要因素。在大菱鲆的研究表明,豬肉粉替代魚粉,蛋氨酸下降,導(dǎo)致豬肉粉使用超過(guò)220g/kg,生長(zhǎng)和飼料利用顯著下降(Ha 等,2021);卵形鯧鲹飼料中豬肉粉替代魚粉,賴氨酸、蛋氨酸等多種必需氨基酸下降,豬肉粉使用超過(guò)9%,生長(zhǎng)和飼料利用顯著下降(Huang 等,2022)。近年來(lái),關(guān)于大口黑鱸的氨基酸需求研究發(fā)現(xiàn)賴氨酸、蛋氨酸、精氨酸的最適量為2.8%、1.22%、1.91%(陳乃松等,2010)。本研究中對(duì)照組氨基酸營(yíng)養(yǎng)均能滿足大口黑鱸的營(yíng)養(yǎng)需求,所用豬肉粉較魚粉、雞肉粉在氨基酸組成上有較大差異,多種必需氨基酸均低于魚粉和雞肉粉,見表2。替代后,賴氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸、異亮氨酸等必需氨基酸較對(duì)照組下降。針對(duì)性補(bǔ)充晶體氨基酸,F(xiàn)M8 組9 種必需氨基酸均高于對(duì)照組,相應(yīng)的,生長(zhǎng)方面,F(xiàn)M8 組全周期各階段增重率和特定生長(zhǎng)率均高于C 組,表明補(bǔ)充晶體氨基酸可以平衡豬肉粉替代后飼料氨基酸組成,提升效果。蛋氨酸不足對(duì)可顯著降低大口黑鱸生長(zhǎng)和飼料效率(Coyle等,2000);亮氨酸可激活水產(chǎn)動(dòng)物mTOR 信號(hào)通路,對(duì)生長(zhǎng)和飼料有促進(jìn)(Wei 等,2023)。本研究中16%豬肉粉替代組蛋氨酸和亮氨酸均下降,相應(yīng)的FM16和PM16 組在D186 養(yǎng)殖階段飼料系數(shù)顯著高于對(duì)照組,表明16%豬肉粉替代應(yīng)更關(guān)注蛋氨酸和亮氨酸的補(bǔ)充。
大口黑鱸在長(zhǎng)期攝食營(yíng)養(yǎng)不均衡或高含量的抗?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)的飼料,肝臟容易出現(xiàn)肝細(xì)胞空泡化、腫脹等病理變化,表觀癥狀為肝臟腫大,顏色偏白,臟體比和肝體比上升(徐祥泰等,2016)。本研究,豬肉粉替代魚粉或雞肉粉后對(duì)大口黑鱸的白肝指數(shù)、肝體比和臟體比無(wú)顯著增加,可粗略的推測(cè)未對(duì)大口黑鱸的健康造成明顯影響。
處于平均水溫高于27℃養(yǎng)殖階段的中小規(guī)格大口黑鱸,使用16%豬肉粉替代魚粉或雞肉粉并補(bǔ)充氨基酸不影響生長(zhǎng)和飼料利用;處于平均水溫低于20℃養(yǎng)殖階段的大規(guī)格大口黑鱸,建議豬肉粉替代魚粉或雞肉粉的使用量不超過(guò)8%。
參考文獻(xiàn):(略)