一例仔豬偽狂犬病和豬瘟病毒混合感染癥的診斷和控制

梁日祥，張才旺，唐榮峰

（1.桂林市臨桂區(qū)茶洞鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)農(nóng)村綜合服務(wù)中心，廣西桂林 541107；2.桂林市臨桂區(qū)四塘鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)農(nóng)村綜合服務(wù)中心，廣西桂林 541104；3.桂林市臨桂區(qū)動物疫病預(yù)防控制中心，廣西桂林 541199）

豬偽狂犬病對豬只的危害極大，不同年齡、性別的豬只癥狀表現(xiàn)不同。成年豬呈隱性感染，常見癥狀為發(fā)熱沉郁、咳嗽、嘔吐或上呼吸道卡痰[1]。種豬的主要表現(xiàn)為繁殖障礙。若種母豬在妊娠前期（配種后30 d 內(nèi)）感染偽狂犬病病毒，則胚胎會被吸收，母豬重新進入發(fā)情期；若妊娠中期感染，偽狂犬病毒可以通過胎盤屏障感染胎兒引起繁殖障礙，表現(xiàn)為流產(chǎn)、死胎或木乃伊胎；若妊娠后期感染，會引發(fā)早產(chǎn)，產(chǎn)死胎、弱胎[2]。哺乳仔豬感染偽狂犬病毒后潛伏期一般很短，只有2～4 d，出現(xiàn)典型的臨床癥狀前，哺乳仔豬多表現(xiàn)倦怠、厭食、發(fā)熱、眼球震顫、唾液分泌增多及運動障礙，最后發(fā)展到角弓反張、癲癇，有的后肢麻痹呈犬坐姿勢，有的轉(zhuǎn)圈或側(cè)臥做劃水運動，有的出現(xiàn)嘔吐、腹瀉等典型癥狀，一般2 d 后死亡，死亡率高達100%[3]。

豬瘟病毒?。ㄒ韵潞喎Q豬瘟?。┯址Q爛腸瘟，是由黃病毒科豬瘟病毒屬豬瘟病毒引起的一種傳染性疾病，豬是該病毒唯一的自然宿主。病豬是豬瘟病的主要傳染源，病豬的排泄物、分泌物、尸體、臟器及被病毒污染的飼料、飲用水等都是危險的傳染源。公豬可通過精液將豬瘟病毒傳給母豬和仔豬[4]。豬瘟病的主要特征是高熱稽留和小血管變性引起的廣泛出血、梗死與壞死病變、白細胞減少，臨診表現(xiàn)為非典型、亞臨診感染等，按癥狀和病程長短可分為最急性型、急性型、亞急性型及慢性型4 種類型[5]。

2021 年，廣西桂林市臨桂區(qū)兩江鎮(zhèn)某豬場發(fā)生了這兩種病毒混合感染，現(xiàn)將此豬場發(fā)病的臨床表現(xiàn)、診斷及治療情況進行報告。

1 仔豬發(fā)病簡況

兩江鎮(zhèn)某養(yǎng)豬場有存欄母豬120 頭、肉豬約650 頭、哺乳仔豬約300 頭，現(xiàn)場調(diào)查發(fā)現(xiàn)養(yǎng)殖密度較大、環(huán)境衛(wèi)生較差。發(fā)病前豬場的免疫程序為3 日齡接種豬偽狂犬疫苗1 頭份，7 日齡接種豬瘟弱毒苗2 頭份，20 日齡接種圓環(huán)病毒苗1 頭份，28 日齡斷奶，斷奶后35 日齡接種豬口蹄疫疫苗1 mL，60 日齡左右接種豬瘟三聯(lián)苗2 頭份。經(jīng)產(chǎn)母豬的免疫接種程序為產(chǎn)后10 d 接種豬口蹄疫疫苗3 mL，產(chǎn)后20 d 接種藍耳圓環(huán)二聯(lián)苗4 mL，再次配種成功后80～90 d 接種豬偽狂犬滅活苗，每年春秋兩季接種4～5 頭份豬瘟三聯(lián)苗，100 d 左右接種豬流行性腹瀉和傳染性胃腸炎二聯(lián)苗1 頭份。

1.1 主要臨床癥狀

在仔豬出現(xiàn)死亡前6 d，仔豬陸續(xù)出現(xiàn)被毛松亂、體溫上升至39.5～42.0 ℃、運動失調(diào)、犬坐姿勢等癥狀，隨后出現(xiàn)大部分皮膚潮紅、腹部散布出血點、耳尖鼻尖處皮膚有藍色瘀血塊、腹股溝淋巴結(jié)腫大變青瘀色等癥狀，病仔豬常扎堆在一起，發(fā)抖、痙攣、嘔吐拉稀、消瘦、眼眶發(fā)紅、眼瞼和嘴角出現(xiàn)水腫，有的仔豬出現(xiàn)眼皮被膿性分泌物黏在一起、口角有大量白色泡沫和唾液等典型癥狀。典型癥狀出現(xiàn)后，仔豬在2 d 內(nèi)死亡，且越小日齡豬發(fā)病死亡越快。該豬場此次發(fā)病死亡仔豬100 頭左右，損失慘重。

1.2 剖檢病變情況

共剖檢8 頭病死仔豬，病死仔豬的心臟、肝臟、腎臟和泌尿道等器官均有廣泛出血點或出血斑，咽喉部喉頭明顯腫大，存在水腫情況，尤其是6 日齡左右的仔豬比較明顯。被剖檢的病死仔豬中有5 頭肝臟腫大、呈土黃色，額下淋巴結(jié)等明顯腫大。對這些淋巴結(jié)做切面觀察，發(fā)現(xiàn)其均表現(xiàn)出紫紅色、紫色、白色相間的大理石病變。有2 頭病死豬胸腔積液，肺臟水腫，有纖維素性炎癥，肺臟與胸膜粘連。

1.3 定性診斷

1.3.1 病菌實驗

1）鏡檢。因為仔豬有神經(jīng)癥狀，具有感染鏈球菌的典型癥狀，故無菌采集病豬的淋巴結(jié)、血液等組織進行鏡檢，未發(fā)現(xiàn)鏈球菌桿菌，排除了鏈球菌感染。為了排除多種細菌感染的可能，無菌采集病死仔豬的心臟、肝臟、脾臟和小腸內(nèi)容物，研磨后分別涂片，革蘭氏染色后鏡檢均未發(fā)現(xiàn)任何細菌。

2）營養(yǎng)肉湯實驗。在肉湯中加入采集好的病料懸液培養(yǎng)18～20 h，肉湯中出現(xiàn)均勻渾濁，管底有黏性沉淀，液面與管壁處有菌環(huán)。取管壁菌環(huán)物質(zhì)革蘭氏染色后在顯微鏡下觀察，發(fā)現(xiàn)有紅色、粉紅色桿菌，判斷為大腸桿菌，未見其他病菌。

1.3.2 動物接種實驗

將病死豬的淋巴結(jié)、肝臟、脾臟等病料用器皿磨碎后用生理鹽水制成1 ∶10 的懸液，用離心機分離懸液，取上層液，每毫升上層液加入青霉素、鏈霉素各1 000 單位，在4 ℃條件下作用5 h，然后進行動物接種實驗。

用制好的懸液接種健康家兔2 只，每只皮下注射2 mL，對照組兔2 只皮下注射2 mL 滅菌生理鹽水。在注射后2 d 內(nèi)，2 只試驗兔注射部位發(fā)癢，出現(xiàn)不斷摩擦、咬爛抓爛皮膚的情況，且停食、鳴叫。2 d 后，實驗兔因心力衰竭、四肢麻痹死亡，表現(xiàn)出豬偽狂犬病的典型特征；2 只對照兔一切正常。

1.3.3 血清抗體檢測實驗

鑒于部分仔豬出現(xiàn)眼皮被膿性分泌物黏在一起、口角有大量白色泡沫和唾液等豬瘟病的典型癥狀，懷疑并發(fā)豬瘟病毒感染，因此進行豬瘟抗體正向間接血凝實驗。采集經(jīng)豬瘟三聯(lián)苗免疫過的架子豬、發(fā)病仔豬和早產(chǎn)或者流產(chǎn)母豬血清各10 頭份進行抗體效價檢測。

1）實驗使用的材料有蘭州獸醫(yī)研究所生產(chǎn)的豬瘟正向間接血凝診斷液、96 孔110 度V 型醫(yī)用血凝板、微量移液器等。

2）實驗步驟。參照豬瘟正向間接血凝診斷試劑使用說明書，在血凝板上1～6 孔分別加入50 μL 稀釋液，然后在1～6 孔依次加入被檢血清，稀釋倍數(shù)依次為1 ∶2、1 ∶4、1 ∶8、1 ∶16、1 ∶32、1 ∶64。在第8 孔和第9 孔分別加入64 倍稀釋陰性對照血清和512 倍稀釋陽性對照血清，第10 孔加入50 μL 稀釋液空白對照。最后分別在1～6 孔和8～10 孔內(nèi)加入25 μL 診斷液。加樣完畢后，把血凝板置于振蕩器上振蕩1 min，然后在室溫下靜置2 h。

3）實驗結(jié)果。根據(jù)豬瘟正向間接血凝診斷試劑使用說明書要求，陰性血清稀釋液對照孔無凝集現(xiàn)象或者呈（+）的輕度凝集為合格，陽性血清對照呈（+++）凝集為合格，待檢血清呈（++）凝集的最大稀釋度為其血凝價，血凝價1 ∶16 為免疫合格。實驗結(jié)果表明，10 頭份母豬血清中只有6 頭份抗體效價大于1 ∶16，10 頭份架子豬血清中有8 頭份抗體血清效價大于1 ∶16，受試發(fā)病仔豬血清中只有2 頭份抗體血清效價大于1 ∶16。

通過豬瘟正向間接血凝實驗結(jié)果可以看出，兩江鎮(zhèn)某豬場豬的整體豬瘟抗體偏低。母豬豬瘟抗體水平低，產(chǎn)出的仔豬吃初乳后得到的母源抗體就少，仔豬感染豬瘟病毒的概率就會增加。架子豬豬瘟抗體的有效效價也只有80%，沒有達到規(guī)定的85%以上的要求，并且80%的有效效價也可能是在用豬瘟三聯(lián)苗免疫后得到的結(jié)果。仔豬有效血清抗體效價只有20%，產(chǎn)生這20%有效抗體效價的可能是母源抗體，也可能是免疫后產(chǎn)生的，還可能是實驗條件限制導(dǎo)致出現(xiàn)了較大誤差。

1.4 診斷結(jié)果

根據(jù)現(xiàn)場調(diào)查詢問、病豬臨床表現(xiàn)、病死豬剖檢病變、動物實驗診斷及豬瘟正向間接血凝檢測結(jié)果判定，兩江鎮(zhèn)某豬場暴發(fā)豬偽狂犬病并混合感染了豬瘟病毒。

2 病因分析

1）兩江鎮(zhèn)某豬場在母豬懷孕85～90 d 注射偽狂犬滅活疫苗時，使用的是12×15（針管外徑1.2 mm、長15 mm）的針頭，針頭過短。豬偽狂犬滅活苗是油性疫苗，接種針頭過短會導(dǎo)致免疫注射時疫苗只注射到母豬皮下而沒有到達深部肌肉部位，沒有被肌肉吸收，因此無法很好地發(fā)揮作用。通過母豬頸部出現(xiàn)膿包這一現(xiàn)象也可以確定疫苗的注射未達到肌肉注射的效果，免疫失敗，導(dǎo)致豬偽狂犬病發(fā)生。

2）在對母豬進行每年春秋2 次的豬瘟常規(guī)免疫、對仔豬采取7 日齡、60 日齡2 次免疫接種程序的情況下，依然出現(xiàn)此次豬瘟，筆者考慮是由于母豬是在懷孕期間注射的豬瘟疫苗，雖然母豬不表現(xiàn)感染豬瘟的癥狀，但大量豬瘟疫苗病毒可以通過胎盤屏障感染胎兒，使胎兒帶毒，產(chǎn)下不健康的仔豬。10 日齡以上的仔豬雖然在7 日齡后注射了豬瘟疫苗，但抗體水平還是不高，這可能是由于仔豬體內(nèi)還存在母源抗體，注射的豬瘟抗原結(jié)合了部分母源抗體，使仔豬日后感染豬瘟病毒的可能性大大增加。母豬群里存在的“帶毒母豬”和低毒豬瘟毒株掩蓋了豬瘟的存在，這可能是本次發(fā)病的直接原因。

3）豬偽狂犬病病毒可以通過破壞豬機體免疫系統(tǒng)干擾豬瘟抗體的產(chǎn)生，從而使正常免疫接種豬群的整體豬瘟抗體水平大幅度下降，使豬群易受豬瘟病毒的感染，造成豬偽狂犬病和仔豬豬瘟病毒混合感染且發(fā)病率和病死率較高。

4）養(yǎng)殖密度大、豬場環(huán)境衛(wèi)生差加快了病毒的傳播蔓延，導(dǎo)致大量豬只發(fā)病。

3 控制措施

為了快速有效地控制豬場疫情，盡可能減少損失，嚴格采取以下措施控制疫情。

3.1 控制并消滅傳染源

1）及時對重病仔豬進行撲殺并做無害化深埋處理。2）對輕癥病豬和可疑豬只進行隔離，并由專人集中飼養(yǎng)，嚴禁無關(guān)人員進入病豬舍。3）對每天產(chǎn)生的豬糞用燒堿和石灰進行消毒處理，防止病毒傳播。

3.2 切斷傳播途徑

1）對豬舍場地及用具每天用戊二醛進行帶豬消毒1 次。2）對豬場周圍環(huán)境用1 ∶10 的燒堿和石灰進行消毒。3）對豬場進行滅鼠滅蚊行動，以防老鼠、蚊子擴散病原菌。

3.3 保護好易感豬群

對剛出生的仔豬，用1.5 頭份豬瘟脾淋苗加2 mL新必妥進行超前免疫接種，免疫1～2 h 后再吃初乳。對哺乳期的仔豬，使用能快速產(chǎn)生抗體的豬瘟脾淋苗加4 mL 新必妥進行3 頭份的豬瘟脾淋苗免疫接種。對空懷母豬和肉豬進行2～3 頭份豬瘟脾淋苗加6 mL新必妥免疫接種。豬瘟疫苗免疫3 d 后，對全場60 日齡以下豬只進行1.5 頭份的豬偽狂犬基因缺失苗加3 mL 新必妥免疫接種。剛出生的仔豬用滴鼻的方式做豬偽狂犬基因缺失苗超前免疫。

3.4 加強飼養(yǎng)管理

在發(fā)生疫情后，加強豬群的飼養(yǎng)管理和提高飼料營養(yǎng)水平，從而提高豬群的抗病能力。1）穩(wěn)定飼料配方，切忌經(jīng)常變動配方，以穩(wěn)定豬的食量、保證豬健康發(fā)育、提高豬自身的免疫力。還可在飼料里添加電解多維，補充電解質(zhì)、水分、營養(yǎng)等，同時發(fā)揮輔助治療作用。要嚴格把好原料關(guān)，切實保證混合飼料的品質(zhì)，充分滿足豬群對營養(yǎng)的需求。2）改善豬群的飲用水質(zhì)量，對飲用水進行消毒、過濾，保證飲用水無色、無味。3）嚴禁豬群調(diào)換欄舍，避免趕動豬群，防止豬群應(yīng)激。

采取消滅傳染源、切斷傳播途徑、緊急免疫接種等綜合性應(yīng)急防控措施后，豬場疫情得到了有效控制，15 d 左右豬場基本恢復(fù)正常，無豬只死亡現(xiàn)象。

4 結(jié)語

在豬場的日常養(yǎng)殖管理過程中，通過控制飼養(yǎng)密度、加強豬舍及周圍環(huán)境衛(wèi)生、加強飼養(yǎng)管理、定時給豬場做免疫監(jiān)測、建立起適合本場豬群的免疫程序及盡量選用大廠和正規(guī)廠商的疫苗，都可以有效避免豬瘟的暴發(fā)。在母豬懷孕后期注射豬偽狂犬疫苗時，建議選用規(guī)格16×38（針管外徑1.6 mm、長38 mm）的長針頭注射，確保疫苗能被注射到肌肉深部，提高免疫效果。在發(fā)生豬瘟病時，盡量使用豬瘟脾淋苗；在發(fā)生偽狂犬病時，盡量用豬偽狂犬基因缺失活疫苗進行緊急免疫接種，可以有效防治豬偽狂犬病毒和豬瘟病毒混合感染癥。