食用農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥多殘留高通量非靶向檢測能力驗(yàn)證研究

雷思佳，謝瑜杰，余麗波，卜丹丹，霍思宇，陳 輝，陳冬東，彭 濤,*

（1.中國檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院，北京 100176；2.中檢科（北京）測試認(rèn)證有限公司，北京 100176；3.檢科院（北京）科學(xué)技術(shù)有限公司，北京 100176）

目前，世界上常用的農(nóng)藥高達(dá)1800 多種[1]。由于農(nóng)藥的具體使用過程多數(shù)未知，再加上交叉污染，不同種類的農(nóng)藥可能在農(nóng)產(chǎn)品中同時(shí)出現(xiàn)，這就要求方法除了足夠靈敏外還需檢測盡可能多的農(nóng)藥，才能對產(chǎn)品質(zhì)量進(jìn)行有效監(jiān)管?，F(xiàn)階段，常用的農(nóng)殘檢測方法主要有氣相色譜法（GC）[2]、氣相色譜-質(zhì)譜法（GC-MS）[3]、氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（GC-MS/MS）[4]、液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（LC-MS/MS）[5-6]以及飛行時(shí)間串聯(lián)質(zhì)譜法（Q-TOF）[7-8]等。其中GC 和GC-MS檢出限偏高，定性能力不足；GC-MS/MS 和LC-MS/MS 的靶向性強(qiáng)，靈敏度高，但分辨力低，只適合已知化合物的檢測，對大范圍非靶向化合物的篩查能力有限，在多種農(nóng)藥篩查時(shí)需建立多個(gè)檢測方法，配制大量標(biāo)準(zhǔn)溶液，耗時(shí)費(fèi)力[9]。Q-TOF 技術(shù)基于精確質(zhì)量數(shù)和內(nèi)源碎裂離子等條件對農(nóng)藥進(jìn)行定性測定，具有高通量、非靶向的優(yōu)點(diǎn)，在無標(biāo)準(zhǔn)品的前提下，可準(zhǔn)確、高效地同時(shí)對復(fù)雜樣品中大量化合物篩查[10-11]，為我國農(nóng)產(chǎn)品中多農(nóng)殘風(fēng)險(xiǎn)評估和風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測提供了一種快速有效的方法。相關(guān)檢測實(shí)驗(yàn)室提高其高通量非靶向檢測能力迫在眉睫。

能力驗(yàn)證作為實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可的重要評判標(biāo)準(zhǔn)，被越來越多的認(rèn)可機(jī)構(gòu)和管理部門重視。當(dāng)前對食用農(nóng)產(chǎn)品中多農(nóng)殘檢測主要還是停留在常規(guī)實(shí)驗(yàn)室檢測層面，為了增加檢測實(shí)驗(yàn)室間的結(jié)果可比性，能力驗(yàn)證的開展顯得非常必要，可以及時(shí)發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室存在的問題并動態(tài)監(jiān)測。能力驗(yàn)證在實(shí)施時(shí)根據(jù)組織項(xiàng)目的不同通常分為定量、定性和半定量結(jié)果項(xiàng)目，農(nóng)藥殘留項(xiàng)目基本上采用的是定量分析，重點(diǎn)研究各類項(xiàng)目的特點(diǎn)及指定值的確定方法，以及如何選取適宜的統(tǒng)計(jì)方法進(jìn)行結(jié)果評定。隨著高通量非靶向檢測技術(shù)的發(fā)展，單純的定量分析并不能全面客觀的反映檢測實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用多殘留方法的整體水平，在確定合格和不合格實(shí)驗(yàn)室時(shí)可能會造成一些混淆。目前國際上已出現(xiàn)通過主成分分析[12]、分層聚類分析[13]、z 值平方和[14]和3A 法[15-16]等方式對多分析物結(jié)果的總體實(shí)驗(yàn)室性能評價(jià)。本文通過能力驗(yàn)證的組織實(shí)施，提出并評估了一種新的評價(jià)方法，將定性分析和定量分析結(jié)合起來進(jìn)行評價(jià)，目的是將其應(yīng)用于未來的能力驗(yàn)證中，從而獲得更具信息性、可靠性的實(shí)驗(yàn)室評價(jià)，提高風(fēng)險(xiǎn)發(fā)現(xiàn)能力。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品 純度≥98%，德國Dr.Ehrenstorfer公司；乙腈、甲苯、乙酸乙酯、甲酸、乙酸銨 色譜純，美國Fisher 公司；乙酸、氯化鈉、無水硫酸鎂、無水硫酸鈉 分析純，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；試驗(yàn)用水為Milli-Q 超純水；有機(jī)蘋果 購自北京某超市。

Agilent 1290 Infinity II LC-6545 Q-TOF/MS 液質(zhì)聯(lián)用儀、Agilent 7890B-7250 Q-TOF/MS 氣質(zhì)聯(lián)用儀 美國Agilent 公司；AH-30 全自動均質(zhì)儀、Fotector Plus 高通量全自動固相萃取儀、MPE 高通量真空平行濃縮儀 ?？萍瘓F(tuán)股份有限公司；BSA224S電子天平 德國Sartorius 公司；T50 digital ULTRATURRAX 均質(zhì)儀 德國IKA 公司；LS-80A 全自動灌裝機(jī) 武漢優(yōu)凱盛機(jī)械設(shè)備有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 能力驗(yàn)證樣品制備 參照NY/T 789-2004[17]和JJF 1343-2022[18]。取有機(jī)蘋果（去蒂、去芯）可食部分約25 kg，經(jīng)組織攪碎機(jī)粉碎，混勻，用四分法分成兩批：一批均質(zhì)后直接灌裝，作為空白樣品；一批加入配制好的目標(biāo)農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液，預(yù)計(jì)添加濃度30～180 μg/kg（目標(biāo)濃度水平在各化合物定量限和最大殘留限量之間），充分?jǐn)嚢?，均質(zhì)后灌裝，作為添加樣品。用經(jīng)充分洗滌、烘干的100 mL 棕色玻璃瓶分裝，空白樣品和添加樣品的重量保持一致，約為50 g，封口膜密封并加貼樣品編號后-20 ℃條件下保存。

1.2.2 高通量非靶向檢測

1.2.2.1 樣品前處理 參照文獻(xiàn)[19]方法對1.2.1中制備的樣品進(jìn)行提取與凈化。濃縮液氮吹后加入2 mL 乙腈:甲苯（3:1，v/v）超聲混勻，各取1 mL 吹干，一份加入1 mL 乙腈:水（3:2，v/v）定容液經(jīng)0.22 μm濾膜過濾后供LC-Q-TOF/MS 測定；另一份加入1 mL 乙酸乙酯定容液經(jīng)0.2 μm 濾膜過濾后供GCQ-TOF/MS 測定。

1.2.2.2 LC-Q-TOF/MS 儀器條件 色譜柱：ZORBAX SB-C18柱（100 mm×2.1 mm，3.5 μm）；柱溫：40 ℃；流動相A：0.1%甲酸水溶液，流動相B：乙腈；流速：0.4 mL/min；進(jìn)樣體積：5 μL；梯度洗脫程序：0 min，1% B；3 min，30% B；6～9 min，40% B；15 min，60% B；19～23 min，90% B；23.01～27.01 min，1% B。離子源：Dual AJS ESI 源；霧化氣體：氮?dú)?；鞘氣溫度?75 ℃；鞘氣流速：11.0 L/min；正離子全掃描范圍：m/z 50～1000。

1.2.2.3 GC-Q-TOF/MS 儀器條件 色譜柱：HP-5 MS UI（30 m×0.25 mm，0.25 μm）；柱溫：40 ℃保持1 min，以30 ℃/min 升溫至130 ℃，再以5 ℃/min 升溫至250 ℃，最后以10 ℃/min 升溫至300 ℃，保持7 min；進(jìn)樣口溫度：270 ℃；進(jìn)樣量：1.0 μL；載氣：氦氣；流速：1.2 mL/min；不分流進(jìn)樣。四極桿溫度：180 ℃；EI 離子源溫度：280 ℃；溶劑延遲：3 min；全掃描范圍：m/z 45～550。

1.2.2.4 定性和定量方法 使用Agilent MassHunter Qualitative workflows 軟件，設(shè)置加合離子保留時(shí)間偏差、質(zhì)量偏差、信噪比、共流出得分、二級碎片離子選擇個(gè)數(shù)和峰高等參數(shù)，和個(gè)人化合物數(shù)據(jù)庫與譜庫（PCDL）中的信息進(jìn)行匹配后得到定性結(jié)果。

在Agilent MassHunter 定量軟件中建立定量方法，用外標(biāo)法對根據(jù)定性結(jié)果確證的化合物進(jìn)行準(zhǔn)確定量。

1.2.3 均穩(wěn)性檢驗(yàn)

1.2.3.1 均勻性檢驗(yàn) 隨機(jī)抽取分裝好的添加樣品，按照1.2.1 的方法進(jìn)行前處理及檢測，采用單因子方差分析法（F檢驗(yàn)）進(jìn)行均勻性評估。結(jié)果回收后，通過不均勻性偏差法（SS≤0.3σ 準(zhǔn)則）[20]對樣品均勻性進(jìn)行核驗(yàn)。

1.2.3.2 穩(wěn)定性檢驗(yàn) 運(yùn)輸穩(wěn)定性檢驗(yàn)：根據(jù)參加者情況，選擇地理位置最南邊和最北邊的地址寄送，到達(dá)目的地后立即召回。收到寄回樣品后立即進(jìn)行檢測，采用平均值一致性檢驗(yàn)法（t檢驗(yàn)）[20]評估樣品的運(yùn)輸穩(wěn)定性。

儲存穩(wěn)定性檢驗(yàn)：分別于樣品發(fā)放前、檢測過程中和結(jié)果回收后隨機(jī)抽樣，按照與均勻性檢驗(yàn)相同的測試條件進(jìn)行檢測，采用|x -y|≤0.3σ 準(zhǔn)則[20]評估樣品的儲存穩(wěn)定性。

1.2.4 能力驗(yàn)證項(xiàng)目實(shí)施 每套樣品包含農(nóng)藥添加樣和同一來源的空白樣各一份。樣品編碼由隨機(jī)數(shù)字組成，相互之間沒有可比性，每個(gè)參加者賦予一個(gè)唯一性代碼，凡說明檢測結(jié)果和能力評價(jià)時(shí)均以代碼表示[21]。實(shí)驗(yàn)室在收到樣品后應(yīng)用高通量非靶向技術(shù)篩查蘋果樣品中的農(nóng)藥種類，并對添加樣品中篩查出的農(nóng)藥準(zhǔn)確定量。

1.3 數(shù)據(jù)處理

能力驗(yàn)證評價(jià)依據(jù)ISO 13528:2015[22]和GB/T 28043-2019[23]要求，參加者上報(bào)數(shù)據(jù)為扣除空白后的結(jié)果，從定性和定量兩個(gè)維度出發(fā)：以實(shí)驗(yàn)室對樣品中指定農(nóng)藥檢出率評價(jià)定性篩查能力；以直方圖示法評價(jià)計(jì)劃的有效性，采用穩(wěn)健統(tǒng)計(jì)方式確定穩(wěn)健平均值和穩(wěn)健標(biāo)準(zhǔn)差，以z 值評價(jià)實(shí)驗(yàn)室對樣品中添加農(nóng)藥的定量檢測能力，|z|≤2.0 代表定量結(jié)果滿意，2＜|z|＜3 代表定量結(jié)果可疑，|z|≥3 代表定量結(jié)果不滿意。采用Microsoft Excel 2019 軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析及繪圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 添加農(nóng)藥的選擇與確認(rèn)

根據(jù)國際上農(nóng)殘監(jiān)測動向，結(jié)合我國食用農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥的施用情況，依據(jù)以下原則選擇農(nóng)藥種類：a.已公布的禁限用農(nóng)藥；b.毒性較大、不易降解的常用農(nóng)藥；c.國內(nèi)外標(biāo)準(zhǔn)均列入監(jiān)控范圍的農(nóng)藥。擬在樣品中添加17 種農(nóng)藥：唑嘧菌胺、苯霜靈、毒死蜱、噻蟲胺、二嗪磷、三唑磷、多殺霉素、甲基嘧啶磷、嘧菌胺、稻瘟靈、氟唑菌酰胺、咪唑菌酮、氯蟲苯甲酰胺、敵敵畏、氟苯脲、五氯硝基苯和殺螟硫磷。

為了找到合適的空白基質(zhì)，實(shí)驗(yàn)開始前對市場上的食用農(nóng)產(chǎn)品品種進(jìn)行了篩選。原料采集后粉碎勻漿，利用實(shí)驗(yàn)室之前建立的方法[24-25]進(jìn)行農(nóng)藥多殘留高通量非靶向篩查，最終選擇某品牌有機(jī)蘋果作為原料，并經(jīng)專家實(shí)驗(yàn)室聯(lián)合確認(rèn)，蘋果空白樣品本底中含有啶蟲脒和多菌靈兩種農(nóng)藥，確定不含有本次實(shí)驗(yàn)涉及的目標(biāo)農(nóng)藥，所選原料合適。隨后按預(yù)設(shè)濃度加入農(nóng)殘混標(biāo)進(jìn)行樣品制備并精準(zhǔn)定量，將樣品保存于-20 ℃的冰箱中以待進(jìn)行均穩(wěn)性檢驗(yàn)及樣品發(fā)放。結(jié)果回收后，對參加者反饋的其他假陽性結(jié)果以及未檢測到的假陰性結(jié)果進(jìn)一步復(fù)核，確定考核樣品中只存在2 種本底含有的農(nóng)藥以及17 種制備時(shí)添加的農(nóng)藥，能力驗(yàn)證樣品滿足要求。

2.2 能力驗(yàn)證樣品均穩(wěn)性分析

2.2.1 樣品均勻性檢驗(yàn)分析 樣品發(fā)放前，根據(jù)GB/T 10111-2008[26]中隨機(jī)抽樣原則，選出10 個(gè)樣品，確定其樣品編號，隨后按照ISO GUIDE 35:2017[27]和CNAS-GL003:2018[20]的要求進(jìn)行組間及組內(nèi)均勻性檢驗(yàn)。采用1.2.2 中的方法由相同人員在重復(fù)性條件下平行測定兩次，對得到的數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析，以組間及組內(nèi)方差判斷樣品中添加農(nóng)藥的含量是否有顯著性差異，從而檢驗(yàn)其均勻性。結(jié)果回收后，以參加者結(jié)果統(tǒng)計(jì)分析所得的能力評定標(biāo)準(zhǔn)差作為σ，再用SS≤0.3σ 準(zhǔn)則核驗(yàn)均檢測試結(jié)果。樣品均勻性檢驗(yàn)結(jié)果見表1。

表1 均勻性檢驗(yàn)結(jié)果Table 1 Uniformity test results

樣品間自由度為9，樣品內(nèi)自由度為10，查F檢驗(yàn)臨界值表可知F0.05（9,10）=3.02，由表1 可知，統(tǒng)計(jì)量F 值均小于F0.05（9,10），說明在0.05 顯著水平時(shí)能力驗(yàn)證樣品的均勻性良好，可以進(jìn)行樣品發(fā)送。本次能力驗(yàn)證樣品均檢核驗(yàn)結(jié)果都符合Ss≤0.3σ 準(zhǔn)則，表明樣品之間的差異對隨后的統(tǒng)計(jì)評價(jià)沒有顯著影響。

2.2.2 樣品穩(wěn)定性檢驗(yàn)分析 穩(wěn)定性檢驗(yàn)主要考察運(yùn)輸和時(shí)間對樣品中農(nóng)藥含量的影響，在均勻性檢驗(yàn)合格后模擬運(yùn)輸條件（采用與能力驗(yàn)證樣品發(fā)放使用的快遞公司，將樣品郵寄到?？诤秃诤雍笤俜謩e寄回進(jìn)行檢測）進(jìn)行運(yùn)輸穩(wěn)定性檢驗(yàn)。在項(xiàng)目實(shí)施周期內(nèi)前中后三個(gè)時(shí)間段抽取樣品進(jìn)行儲存穩(wěn)定性檢驗(yàn)，每次均按照隨機(jī)數(shù)表從剩余樣品中各抽取6 個(gè)樣品，測試過程中所依據(jù)的標(biāo)準(zhǔn)、所用試劑、測試條件等與均勻性測試時(shí)相同。

2.2.2.1 運(yùn)輸穩(wěn)定性檢驗(yàn)分析 樣品的運(yùn)輸穩(wěn)定性檢驗(yàn)結(jié)果如表2 所示。

表2 運(yùn)輸穩(wěn)定性檢驗(yàn)結(jié)果Table 2 Transport stability test results

運(yùn)輸穩(wěn)定性測試結(jié)果以t檢驗(yàn)法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，取6 個(gè)樣品寄往海口，6 個(gè)樣品寄往黑河，查臨界值表可知t0.05（24）=2.06。由表2 中數(shù)據(jù)可知，t 值均小于t0.05（24），說明在0.05 顯著水平時(shí)，運(yùn)輸過程對樣品穩(wěn)定性無影響。

2.2.2.2 儲存穩(wěn)定性檢驗(yàn)分析 樣品的儲存穩(wěn)定性檢驗(yàn)結(jié)果如表3 所示。

表3 儲存穩(wěn)定性檢驗(yàn)結(jié)果Table 3 Storage stability test results

參加者反饋數(shù)據(jù)回收之后，依據(jù)|x -y|≤0.3σ 準(zhǔn)則進(jìn)行穩(wěn)定性核驗(yàn)。由表3 中數(shù)據(jù)可知，三次穩(wěn)定性檢驗(yàn)分別得到的均值與均勻性檢驗(yàn)均值的差值除以參加者檢測數(shù)據(jù)匯總統(tǒng)計(jì)得出的標(biāo)準(zhǔn)偏差σ，比值均小于0.3，表明在整個(gè)測試期間，樣品中的被測物質(zhì)是穩(wěn)定的，達(dá)到了能力驗(yàn)證樣品要求。

2.3 能力驗(yàn)證數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)及結(jié)果分析

2.3.1 定性篩查能力評價(jià) 本次能力驗(yàn)證計(jì)劃共有20 家實(shí)驗(yàn)室參加，全部按要求返回結(jié)果，以各實(shí)驗(yàn)室對空白樣品本底中確定含有的農(nóng)藥數(shù)量和添加樣品中指定農(nóng)藥的檢出數(shù)量來評估其定性篩查能力，見表4。

表4 實(shí)驗(yàn)室定性篩查能力Table 4 Laboratory qualitative screening capability

2.3.2 定量檢測能力評價(jià)

2.3.2.1 實(shí)驗(yàn)室定量檢測結(jié)果分布情況 匯總各實(shí)驗(yàn)室返回的定量結(jié)果后繪制頻率分布直方圖，發(fā)現(xiàn)考核樣品中添加農(nóng)藥的檢測結(jié)果滿足單峰、近似正態(tài)分布條件[28]，因此后續(xù)可采用穩(wěn)健統(tǒng)計(jì)方法對檢測項(xiàng)目進(jìn)行定量分析評價(jià)，見圖1。

圖1 定量檢測結(jié)果頻率分布直方圖Fig.1 Histogram of frequency distribution of quantitative detection results

2.3.2.2 實(shí)驗(yàn)室定量檢測結(jié)果統(tǒng)計(jì) 實(shí)驗(yàn)室在定量過程提交的數(shù)據(jù)為扣除基質(zhì)本底后的結(jié)果，采用穩(wěn)健統(tǒng)計(jì)技術(shù)分析項(xiàng)目的穩(wěn)健平均值、穩(wěn)健標(biāo)準(zhǔn)差和結(jié)果不確定度。以穩(wěn)健平均值作為指定值，穩(wěn)健標(biāo)準(zhǔn)差作為能力評定標(biāo)準(zhǔn)差[29]。因樣品中添加的17 種農(nóng)藥的指定值的標(biāo)準(zhǔn)不確定度均小于能力評定標(biāo)準(zhǔn)差的1/3，故本次能力驗(yàn)證中的不確定度可忽略不計(jì)，檢測結(jié)果的主要統(tǒng)計(jì)量匯總情況見表5。

表5 定量檢測結(jié)果統(tǒng)計(jì)量Table 5 Statistics of quantitative detection results

2.3.2.3 實(shí)驗(yàn)室定量評價(jià)的z 值分布情況 對于本次能力驗(yàn)證參加者的定量結(jié)果，采用z 比分?jǐn)?shù)進(jìn)行評價(jià)：

式中：x 為參加者結(jié)果；X 為指定值；σ為能力評定標(biāo)準(zhǔn)差。

為了清晰表示參加者的結(jié)果，以實(shí)驗(yàn)室代碼為橫坐標(biāo)，參加者經(jīng)統(tǒng)計(jì)計(jì)算的z 值為縱坐標(biāo)，并按由小到大的順序排列作柱狀圖，見圖2。

圖2 定量評價(jià)z 比分?jǐn)?shù)分布Fig.2 Quantitative evaluation of Z-score distribution

通過z 比分?jǐn)?shù)柱狀圖，可以看出發(fā)生正偏離和負(fù)偏離的參加者數(shù)量接近，未見明顯的正偏離或負(fù)偏離的傾向，同時(shí)絕大多數(shù)參加者的z 值落于|z|≤2 的滿意區(qū)間內(nèi)，符合統(tǒng)計(jì)規(guī)律。實(shí)驗(yàn)室可通過該圖將其定量能力與其他參加實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行比較，了解其結(jié)果在本次計(jì)劃中所處的水平[30]。

2.4 高通量非靶向檢測能力評定

對于實(shí)驗(yàn)室的定性、定量能力評定尚沒有可參照執(zhí)行的標(biāo)準(zhǔn)，本文建立二維（XY）評價(jià)，維度X 用于評估參加者應(yīng)用的多殘留分析方法對添加農(nóng)藥的定性檢出能力，維度Y 用于評估參加者對確定檢出農(nóng)藥中定量分析滿意情況，并引入c 值的概念，探討一種評價(jià)實(shí)驗(yàn)室高通量非靶向檢測能力的新方法，見表6。

表6 實(shí)驗(yàn)室高通量非靶向檢測能力Table 6 Laboratory high-throughput non-targeted detection capabilities

式中：a 為定性滿意率；b 為定量滿意率；c 為綜合滿意率。

以扣除空白后添加樣品定性定量結(jié)果對本次能力驗(yàn)證進(jìn)行考核。在20 家參加實(shí)驗(yàn)室中，有14 家實(shí)驗(yàn)室定性滿意率為100%，占參加人數(shù)的70%；有9 家實(shí)驗(yàn)室定量滿意率為100%，占參加人數(shù)的45%，有8 家實(shí)驗(yàn)室定性滿意率a 值和定量滿意率b 值均為100%，同時(shí)綜合滿意率c 值為0，占參加人數(shù)的40%，可見c 值評價(jià)嚴(yán)格于單一的定性評價(jià)或者定量評價(jià)，更能反映出實(shí)驗(yàn)室的綜合檢測能力。在分析完c 值后，需要進(jìn)一步對實(shí)驗(yàn)室的假陽性率和假陰性率進(jìn)行分析。由表6 可知，已檢測并量化測試項(xiàng)目中全部的農(nóng)藥且報(bào)告無假陽性的實(shí)驗(yàn)室有9 家；報(bào)告假陽性的實(shí)驗(yàn)室有7 家，其中2 家未能檢測出測試項(xiàng)目中全部的農(nóng)藥；未能檢測出測試項(xiàng)目中全部的農(nóng)藥，報(bào)告假陰性的實(shí)驗(yàn)室有6 家。為了更直觀的展現(xiàn)出實(shí)驗(yàn)室高通量非靶向檢測能力情況，本文以定性滿意率和定量滿意率繪制能力分布圖，見圖3。

圖3 實(shí)驗(yàn)室高通量非靶向檢測能力分布圖Fig.3 Distribution of high-throughput non-targeted detection capabilities in the laboratory

c 值越小則越接近雙百分率，表明實(shí)驗(yàn)室的高通量非靶向檢測能力越強(qiáng)。由圖3 可以直觀地看出代碼為1，4，5，9，11，14，19，20 的實(shí)驗(yàn)室c 值為雙百分率，表明這8 家實(shí)驗(yàn)室的高通量非靶向檢測能力強(qiáng)。代碼為7 的實(shí)驗(yàn)室c 值最大，表明其高通量非靶向檢測能力偏弱，但定性滿意率和定量滿意率一致，均為41.2%，在定性篩查出的農(nóng)藥定量檢測后均獲得滿意結(jié)果，后續(xù)需要進(jìn)一步提升其高通量非靶向農(nóng)藥定性篩查能力。代碼為13 的實(shí)驗(yàn)室添加農(nóng)藥全部檢出，定性滿意率為100%，但只有5 個(gè)檢測項(xiàng)目|z|小于2，定量滿意率僅為29.4%，實(shí)驗(yàn)室需加強(qiáng)其高通量非靶向農(nóng)藥定量檢測能力。特別注意到代碼為14 的實(shí)驗(yàn)室，雖然其c 值為0，但其假陽性率為5.6%，仍不能說明其檢測能力達(dá)到滿意水平。故在高通量非靶向能力評定時(shí)，可將c 值作為一級評價(jià)指標(biāo)，假陽性率和假陰性率作為二級評價(jià)指標(biāo)，綜合進(jìn)行評價(jià)。在高通量非靶向檢測中，定性篩查是基礎(chǔ)，定量檢測是關(guān)鍵，二者缺一不可，故將定性分析和定量分析法聯(lián)合應(yīng)用于高通量非靶向農(nóng)藥殘留篩查能力驗(yàn)證結(jié)果評價(jià)，評價(jià)結(jié)果更加合理，對其他能力驗(yàn)證結(jié)果評價(jià)具有重要的參考意義。本機(jī)構(gòu)將在后續(xù)的能力驗(yàn)證活動中繼續(xù)推行該種評價(jià)方法以驗(yàn)證評價(jià)方式的可行性，并在獲得足夠的樣本量后，進(jìn)一步將c 值量化，區(qū)分出結(jié)果滿意、可疑和不滿意的臨界值標(biāo)準(zhǔn)。

3 結(jié)論

能力驗(yàn)證一般采用z 比分?jǐn)?shù)評價(jià)各實(shí)驗(yàn)室對單一特定參數(shù)的檢測能力，但對于多特性值的實(shí)驗(yàn)室間比對結(jié)果缺乏綜合評價(jià)的有效手段。XY 二維分析根據(jù)對各特性值的篩查和準(zhǔn)確定量情況進(jìn)行評價(jià)，既避免了報(bào)告假陽性被評判為“滿意”，又避免了篩查不全出現(xiàn)假陰性被評判為“滿意”，為評價(jià)實(shí)驗(yàn)室的綜合檢測能力提供了一種值得嘗試的相對科學(xué)、有效的方法。本文以實(shí)驗(yàn)室對蘋果基質(zhì)樣品中17 種農(nóng)藥的檢出情況評估其定性篩查能力，以穩(wěn)健統(tǒng)計(jì)獲得的z 比分?jǐn)?shù)落于|z|≤2 滿意區(qū)間的情況評估其定量準(zhǔn)確能力，結(jié)合假陽性和假陰性情況，探討了定性定量分析在評價(jià)實(shí)驗(yàn)室綜合檢測能力的應(yīng)用。

本方法仍有不足之處：a.需提高數(shù)據(jù)庫準(zhǔn)確度。在定性分析時(shí)，出現(xiàn)假陰性的實(shí)驗(yàn)室通常使用的是低分辨質(zhì)譜，可能未完全覆蓋農(nóng)藥目標(biāo)清單中的所有分析物，由于農(nóng)藥多數(shù)存在同分異構(gòu)體，實(shí)驗(yàn)室在建立數(shù)據(jù)庫時(shí)，要使用更多品種的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)以提高數(shù)據(jù)信息的可靠性。b.需考慮參加者的數(shù)量。由于從少量參加者測量結(jié)果獲得的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)可能不夠可靠，因而可能會依據(jù)不適當(dāng)?shù)膶φ战M對參加者進(jìn)行評估。c.需考慮指定值的離散性。在定量分析時(shí)，若實(shí)驗(yàn)室的檢測水平差別較大，來自參加者結(jié)果得到的能力評定標(biāo)準(zhǔn)差往往偏大，也有可能被評判為“滿意”，此時(shí)需考慮確定指定值和適當(dāng)?shù)碾x散性度量方法。d.需建立綜合評價(jià)指標(biāo)量化值。在后續(xù)能力驗(yàn)證活動中將繼續(xù)推行該種評價(jià)方法以驗(yàn)證評價(jià)方式的可行性，并區(qū)分出結(jié)果滿意、可疑和不滿意的臨界值標(biāo)準(zhǔn)。以上是多特性值結(jié)果綜合評價(jià)面臨的局限，有待進(jìn)一步研究、發(fā)展更加客觀公正、科學(xué)可行的高通量非靶向檢測能力評價(jià)方法。