血清人巨細(xì)胞病毒免疫球蛋白G與原發(fā)性閉角型青光眼的相關(guān)性研究

吳佳寧 李圣杰 湯荔 曹文俊

(復(fù)旦大學(xué)附屬眼耳鼻喉科醫(yī)院檢驗(yàn)科 200031 上海)

青光眼是全球范圍內(nèi)首位不可逆致盲性眼病，其較高的致盲率嚴(yán)重影響患者生活質(zhì)量[1]。隨著社會(huì)發(fā)展和人口老齡化進(jìn)程加速，我國青光眼的患病率將逐年增加。根據(jù)前房角結(jié)構(gòu)病變差異及發(fā)病機(jī)制的不同，傳統(tǒng)上主要將原發(fā)性青光眼分為閉角型和開角型兩大類[2]。在我國，原發(fā)性閉角型青光眼(primary angle-closure glaucoma,PACG)是最常見的青光眼類型，人群患病率約為1.4%，女性發(fā)病率較高，多數(shù)45 歲以上發(fā)病[3]。PACG 的發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜，目前較為大眾的解釋包括機(jī)械壓力學(xué)說、血流動(dòng)力學(xué)說、免疫損傷學(xué)說和基因遺傳學(xué)說[4]。此外，也有部分學(xué)者認(rèn)為焦慮和抑郁這類情緒也會(huì)導(dǎo)致閉角型青光眼的形成[5]。但是，PACG 的發(fā)病機(jī)制仍未闡明。

近年來相關(guān)研究[6-8]發(fā)現(xiàn)，人巨細(xì)胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)感染與青光眼-睫狀體綜合征、葡萄膜炎及視網(wǎng)膜炎等眼科疾病具有相關(guān)性。HCMV 屬于皰疹病毒β 亞型，是皰疹病毒屬中基因組最大的病毒。HCMV 感染后可在宿主體內(nèi)長期、持續(xù)存在，具有潛伏和再激活的感染特性[9]。感染早期，機(jī)體會(huì)快速產(chǎn)生HCMV 免疫球蛋白M (HCMV immunoglobulin M,HCMV IgM)抗體并在體內(nèi)存在8～18 周，同時(shí)也逐步產(chǎn)生HCMV IgG 抗體?；颊唧w內(nèi)HCMV IgG 抗體的水平可在感染后 2 個(gè)月達(dá)到高峰，并終身以低水平持續(xù)存在。HCMV 感染是我國一項(xiàng)較為嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)，以上海為例，1～3 歲感染率為60.37%，隨年齡增長感染率迅速增加，到25 歲時(shí)該值便已增長至97.03%[10]。在HCMV 感染率近100%的背景下，本研究采用回顧性病例對照研究方法，探討血清HCMV IgG 水平在PACG 中的變化及意義，為臨床診療提供參考。

1 資料與方法

1.1 資料

采用回顧性病例對照研究。收集2019 年6 月—2020 年6 月于復(fù)旦大學(xué)附屬眼耳鼻喉科醫(yī)院眼科就診并確診為PACG 的患者66 例。所有患者均經(jīng)過詳細(xì)眼科檢查。病例組納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合PACG診斷標(biāo)準(zhǔn)；②病史資料和檢查資料明確。病例組排除標(biāo)準(zhǔn)：①患有其他眼科疾?。虎谘鄄扛腥臼?；③眼外傷史或接受過眼科手術(shù)；④有全身系統(tǒng)性疾病(腫瘤，感染，肝、腎功能不全等)；⑤血液系統(tǒng)疾??；⑥HCMV IgM 呈陽性。同時(shí)收集與病例組年齡、性別匹配的正常體檢者88 例作為對照組。對照組納入標(biāo)準(zhǔn)：①體檢正常人群；②排除青光眼及其他眼科疾??；③眼壓(intraocular pressure,IOP)＜21 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)，杯盤比(cup-to-disc ratio,CDR)＜0.5；④肝、腎功能正常；⑤排除全身系統(tǒng)疾病和血液系統(tǒng)疾病。本研究經(jīng)我院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，遵循《赫爾辛基宣言》原則。

根據(jù)視野平均缺損(mean defect,MD)大小，將PACG 患者分為輕度(MD ≤6 dB)、中度(6 dB＜MD ≤12 dB)和重度(MD＞12 dB)3 個(gè)PACG 亞組[11]。

1.2 方法

1.2.1 臨床資料收集

檢索病史資料庫，收集PACG 患者眼部檢查資料。資料包括IOP、CDR、前房深度(anterior chamber depth,ACD)、MD 及視野平均敏感度(mean sensitivity,MS)。眼部檢查均由復(fù)旦大學(xué)附屬眼耳鼻喉科醫(yī)院眼科檢查室完成，使用瑞士Goldmann 壓平眼壓計(jì)測量IOP，使用美國Topcon 數(shù)字眼底相機(jī)進(jìn)行眼底分析，使用眼科A 超檢測ACD 水平，使用Octopus 全自動(dòng)視野計(jì)測量MD 及MS。

1.2.2 血液檢測

空腹采血，促凝管采集全血4.5 mL，3 000 r/min ×10 min 離心分離得到血清。采用全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀(羅氏Cobas e601，德國)對血清HCMV IgG 和HCMV IgM 進(jìn)行檢測，檢測系統(tǒng)均使用原裝試劑和質(zhì)控。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

數(shù)據(jù)復(fù)核后錄入Excel 365 軟件，采用R x64 4.3.0及SPSS 23.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。采用Kolmogorov-Smirnov 進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)。根據(jù)數(shù)據(jù)的分布類型，分別采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差或中位數(shù)(四分位數(shù)：P25，P75)表示；根據(jù)數(shù)據(jù)的分布類型，2 組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)或Wilcoxon 檢驗(yàn)；3 組間變量比較采用Kruskal-Wallis 檢驗(yàn)。應(yīng)用Spearman 相關(guān)性分析HCMV IgG 與PACG 眼部參數(shù)的相關(guān)性。校正年齡、性別因素后，采用Logistic 回歸模型分析HCMV IgG 與PACG 的關(guān)聯(lián)性。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般資料

本研究共納入PACG 患者66 例，其中男性23 例、女性43 例，平均年齡(57.92±13.30)歲；對照組88 例，其中男性28 例、女性60 例，平均年齡(54.41±11.18)歲。2 組間年齡(t=1.736，P=0.850)、性別(χ2=0.585，P=0.883)差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.2 2 組間血清HCMV IgG 水平比較

PACG 組血清HCMV IgG 水平(M=508.00，四分位數(shù)：313.40，780.75)顯著高于對照組水平(M=318.80，四分位數(shù)：164.33，498.40)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.001)。

2.3 3 組PACG 患者一般資料及眼部參數(shù)的比較

3 組間視力、IOP、CDR、ACD 及MS 比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；輕度PACG 組視力優(yōu)于中度PACG 組和重度PACG 組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；中度PACG 組IOP 低于輕度PACG 組和重度PACG 組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；重度PACG 組CDR 顯著高于輕度PACG 組和中度PACG 組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；中度PACG 組ACD 低于輕度PACG 組和重度PACG 組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；重度PACG 組MS顯著低于輕度PACG 組和中度PACG 組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。詳見表1。

表1 3組PACG患者一般資料及眼部參數(shù)的比較

2.4 3 組PACG 患者血清HCMV IgG 水平比較

輕度PACG 組血清HCMV IgG 水平顯著低于中度PACG 組和重度PACG 組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，中度PACG 組和重度PACG 組間血清HCMV IgG 水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，見圖1。

圖1 3組PACG患者血清HCMV IgG水平比較

2.5 血清HCMV IgG 水平與眼部參數(shù)的相關(guān)性分析

Spearman 相關(guān)性分析顯示，PACG 患者HCMV IgG 水平與MD(r=-0.24,P=0.034 2)及IOP(r=0.28,P=0.025 3)呈正相關(guān)、與MS(r=-0.25,P=0.049 3)呈負(fù)相關(guān)，PACG 患者HCMV IgG 水平與年齡、性別、視力、CDR、ACD 無相關(guān)性(P＞0.05)，見圖2。

圖2 PACG患者HCMV IgG水平與眼部參數(shù)相關(guān)性分析

2.6 PACG 危險(xiǎn)因素的Logistic 回歸分析

以外周血血清HCMV IgG 水平指標(biāo)作為自變量，PACG 發(fā)生與否(有=1，無=0)作為因變量，進(jìn)行Logistic 回歸分析。校正年齡及性別指標(biāo)后，結(jié)果顯示HCMV IgG 水平升高是PACG 發(fā)病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P＜0.001,OR=1.003,95%CI為1.002～1.005)，見表2。

表2 PACG患者危險(xiǎn)因素的Logistic回歸分析

3 討論

PACG 是一類發(fā)病機(jī)制極其復(fù)雜的疾病，臨床上對PACG 的治療主要集中在對IOP 的控制和降低，但仍有部分青光眼患者的IOP 無法得到有效控制[2]。因此，本研究采用回顧性病例對照研究，探討血清HCMV IgG 水平在PACG 中的變化及意義。本研究發(fā)現(xiàn)PACG 患者HCMV IgG 水平顯著升高，與MD和IOP 具有顯著的正相關(guān)；Logistic 回歸分析發(fā)現(xiàn)HCMV IgG 水平升高是PACG 發(fā)病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。

據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)分析，我國25 歲以上人口的HCMV IgG 陽性率已超過95%[10]。這在以往并不被認(rèn)為具有臨床致病意義，然而近年來多位學(xué)者研究認(rèn)為，HCMV 的血清學(xué)陽性現(xiàn)象并非以往認(rèn)知中的無害。有研究[12-13]發(fā)現(xiàn)，HCMV 的血清學(xué)陽性與死亡率、免疫衰老、疫苗反應(yīng)性、心血管疾病和癌癥都有所關(guān)聯(lián)。潛伏狀態(tài)的HCMV 再活化過程中可能發(fā)生免疫激活，使白細(xì)胞介素-6 (IL-6)和腫瘤壞死因子-α (TNF-α)水平增高，誘導(dǎo)炎癥、感染和損傷激活的途徑觸發(fā)。同時(shí)，免疫因素、血管功能缺損和氧化應(yīng)激可能也在慢性視神經(jīng)損傷中發(fā)揮著重要作用。法國學(xué)者[14]對動(dòng)物青光眼模型和人體患病眼樣本進(jìn)行了深入的研究，表明視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層和視乳頭存在副炎癥功能障礙，認(rèn)為副炎癥是維持體內(nèi)平衡的必要條件之一，而青光眼的發(fā)生可能是炎癥平衡失調(diào)而向促炎方向傾斜所導(dǎo)致的結(jié)果。因此，HCMV 持續(xù)感染患者體內(nèi)存在炎癥系統(tǒng)的紊亂，進(jìn)而導(dǎo)致PACG 的發(fā)生和發(fā)展。

在此前的研究[7,8,13,15]中，已知HCMV 感染會(huì)引起眼內(nèi)炎癥，包括青光眼-睫狀體綜合征、葡萄膜炎及視網(wǎng)膜炎等。2006 年相關(guān)研究[16]發(fā)現(xiàn)，在免疫功能正常人群中，HCMV 感染可導(dǎo)致角膜內(nèi)皮炎。該角膜內(nèi)皮炎的主要特征為角膜內(nèi)皮由外周向中央推進(jìn)的損傷和丟失。該研究提示，角膜周圍的小梁網(wǎng)組織有可能是HCMV 的儲(chǔ)存庫。國外學(xué)者[17]對HCMV 親和力進(jìn)行了研究，認(rèn)為其在角膜內(nèi)皮細(xì)胞和小梁網(wǎng)細(xì)胞的陽性結(jié)果會(huì)引起角膜內(nèi)皮細(xì)胞密度降低與急性小梁網(wǎng)炎相關(guān)的房水流出障礙。

本研究首次發(fā)現(xiàn)HCMV 感染可能與PACG 具有相關(guān)性。但仍存在一些缺陷：①本研究為回顧性病例對照研究，無法探討HCMV 感染與PACG 的因果關(guān)系；②本研究納入的樣本例數(shù)有限。期待大樣本、多中心的研究來進(jìn)一步驗(yàn)證我們的研究結(jié)果。

綜上所述，本研究發(fā)現(xiàn)PACG 患者HCMV IgG水平顯著升高，與PACG 嚴(yán)重程度具有顯著的正相關(guān)性；HCMV IgG 水平升高是PACG 發(fā)病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。本研究結(jié)果提示HCMV 持續(xù)性感染可能在PACG 的發(fā)生、發(fā)展中具有重要作用。