樹(shù)突狀細(xì)胞在新型冠狀病毒感染中的功能和機(jī)制①

范志國(guó) 吳 忌 古源楷 陳 娟 劉 娟

（海軍軍醫(yī)大學(xué)免疫學(xué)研究所暨免疫與炎癥全國(guó)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，上海 200433）

新型冠狀病毒（SARS-CoV-2）引起的新型冠狀病毒肺炎（COVID-19）疫情持續(xù)不斷地蔓延至全球。截至2022 年11 月14 日，全球新冠肺炎累計(jì)感染人數(shù)已超過(guò)6.35 億，死亡人數(shù)超過(guò)66.10 萬(wàn)，給人類健康和公共衛(wèi)生安全造成極大傷害，也給免疫學(xué)研究提出了巨大挑戰(zhàn)［1］。SARS-CoV-2 感染導(dǎo)致以呼吸道癥狀為主的臨床表現(xiàn)，部分重癥患者可發(fā)展為急性呼吸窘迫綜合征甚至多器官功能衰竭，從而導(dǎo)致患者死亡［2-3］。

免疫系統(tǒng)是機(jī)體抵御病毒感染的有力武器，其中樹(shù)突狀細(xì)胞（dendritic cells，DCs）作為機(jī)體功能最強(qiáng)大的天然免疫細(xì)胞，是機(jī)體抵抗感染、維持健康的關(guān)鍵因素。但重癥患者中，DCs 也可能參與免疫損傷和病理性炎癥的發(fā)生而導(dǎo)致病情加?。?］。因而，DCs 在新冠病毒造成的感染過(guò)程中發(fā)揮“雙刃劍”作用。本文將闡述DCs在SARS-CoV-2入侵人體時(shí)的變化及發(fā)揮的功能，探討DCs 在新冠肺炎不同病程階段的作用機(jī)制，并討論相關(guān)研究對(duì)解釋新冠肺炎發(fā)病機(jī)制和尋找潛在臨床靶標(biāo)中的意義。

1 DCs的分類與功能

1.1 DCs 分類 DCs 是一類高度異質(zhì)性的免疫細(xì)胞，廣泛分布于機(jī)體所有組織和器官，具有多樣化的免疫功能。DCs根據(jù)細(xì)胞亞型分為傳統(tǒng)DCs（conventional DCs，cDCs）和非傳統(tǒng)DCs（non-conventional DCs，ncDCs）兩種［5］。其中cDCs 又包括遷移性DCs（migratory DCs）和淋巴樣DCs（lymphoid DCs）兩類，而ncDCs 包括漿細(xì)胞樣DCs（plasmacytoid DCs，pDCs）、單核細(xì)胞來(lái)源DCs（monocyte-derived DCs，moDCs）、朗格漢斯細(xì)胞（langerhans cells）或表皮DCs（epidermal DCs）等。其中cDCs 和pDCs 是兩種最主要的功能DCs 亞群，在機(jī)體抗病毒免疫應(yīng)答和感染性疾病中發(fā)揮重要作用，其分化來(lái)源、表型特點(diǎn)和功能調(diào)控研究是免疫學(xué)研究熱點(diǎn)［6］。

感染或損傷發(fā)生時(shí)，未成熟DCs（immature DCs，iDCs）識(shí)別抗原并逐步發(fā)育為成熟DCs（mature DCs，mDCs），遷移至次級(jí)淋巴組織，激活免疫應(yīng)答，激活并調(diào)控T 細(xì)胞和B 細(xì)胞活化以清除病原體［7］。DCs異?；罨蚓奂瘎t可能誘發(fā)過(guò)度炎癥反應(yīng)和組織病理?yè)p傷。不同DCs亞群在病毒感染過(guò)程中發(fā)揮多樣化且具備高度可塑性的調(diào)控作用，是當(dāng)前免疫學(xué)研究重點(diǎn)［8］。

1.2 DCs 的功能 DCs 作為一種專職抗原提呈細(xì)胞（antigen presenting cells，APCs），在天然免疫過(guò)程中發(fā)揮關(guān)鍵的啟動(dòng)作用。DCs通過(guò)表達(dá)多種模式識(shí)別受體（pattern recognition receptors，PRRs）識(shí)別病原體或損傷相關(guān)分子模式（包括PAMP 與DAMP），并在識(shí)別后逐漸成熟，觸發(fā)炎癥反應(yīng)和天然免疫應(yīng)答［9］。病毒感染后，攜帶病毒抗原的DCs 遷移進(jìn)入淋巴結(jié)，與T、B 細(xì)胞相互作用，激活CD4+T細(xì)胞產(chǎn)生保護(hù)性炎癥應(yīng)答，或激活CD8+T 細(xì)胞殺傷病毒感染細(xì)胞保護(hù)宿主細(xì)胞，同時(shí)可促進(jìn)B 細(xì)胞分泌中和性抗體中和病毒或病原體毒素。pDCs 主要通過(guò)TLR7和TLR9 識(shí)別病毒核酸并分泌Ⅰ型干擾素（IFN-Ⅰ）攻擊病毒，也可通過(guò)環(huán)狀GMP-AMP合成酶（cGAS）、干擾素基因刺激物（STING）和視黃酸誘導(dǎo)基因Ⅰ（RIG-Ⅰ）通路參與對(duì)DNA 與RNA 病毒的識(shí)別和應(yīng)答［10-11］。

除免疫活化外，DCs 在中樞免疫耐受和外周免疫耐受中也起重要作用［12］。中樞免疫耐受發(fā)生于胸腺，DCs 通過(guò)克隆選擇參與清除自身反應(yīng)性T 細(xì)胞。另一方面，在無(wú)感染和炎癥穩(wěn)態(tài)情況下，iDCs或調(diào)節(jié)性DCs能夠通過(guò)誘導(dǎo)Treg細(xì)胞介導(dǎo)針對(duì)無(wú)害抗原或自身抗原的免疫耐受［13］。調(diào)節(jié)性DCs具有多種耐受性表型和特點(diǎn)，如產(chǎn)生TGF-β 和IL-10，將自身抗原特異的T 細(xì)胞誘導(dǎo)分化為Treg 細(xì)胞，或誘導(dǎo)效應(yīng)性T細(xì)胞凋亡［14-15］。因此，DCs可抑制其他免疫細(xì)胞如CD8+T 細(xì)胞反應(yīng)，并最終阻止自身免疫性疾病和炎癥性疾病發(fā)生。

DCs功能或數(shù)量異常與病毒感染性疾病密切相關(guān)，免疫活化缺陷或非正常的免疫耐受可能導(dǎo)致病毒感染持續(xù)遷延，免疫活化過(guò)度則可能引發(fā)不必要的組織損害和炎癥。不同的DCs亞群在抗感染免疫應(yīng)答中也具有不同的調(diào)節(jié)作用，其中cDC1 可產(chǎn)生IL-12p70 激活Th1 細(xì)胞、分泌大量IFN-Ⅰ、IFN-Ⅲ和TNF-α 以及誘導(dǎo)CD8+T 細(xì)胞應(yīng)答，cDC2 則可有效啟動(dòng)CD8+T細(xì)胞、濾泡T輔助細(xì)胞應(yīng)答和誘導(dǎo)Th1、Th2和Th17 細(xì)胞；pDCs 通過(guò)IFN-Ⅰ信號(hào)通路促進(jìn)DCs分化成熟，具有募集NK 細(xì)胞抗病毒、產(chǎn)生IFN-Ⅰ、產(chǎn)生趨化因子以募集CD4+T 細(xì)胞和CD8+T 細(xì)胞至感染部位并誘導(dǎo)CD4+T 細(xì)胞和CD8+T 細(xì)胞免疫應(yīng)答和觸發(fā)B 細(xì)胞分化為分泌免疫球蛋白的漿細(xì)胞等作用，但其誘導(dǎo)CD4+T 細(xì)胞和CD8+T 細(xì)胞免疫應(yīng)答的效果低于cDCs；而moDCs 則具有產(chǎn)生IL-6、TNF-α和IL-1β 等炎癥細(xì)胞因子和激活CD4+T 細(xì)胞、CD8+T和Th17細(xì)胞的作用［16-17］。

2 SARS-CoV-2與機(jī)體免疫應(yīng)答

2.1 SARS-CoV-2結(jié)構(gòu) SARS-CoV-2全長(zhǎng)約30 kb，是一種擁有α、β、γ、δ、Omicron等多種變異體的單鏈RNA 病毒［18］。目前β 型的基因結(jié)構(gòu)得到了相對(duì)深入的研究，包括5′端非翻譯區(qū)（5′UTR）、復(fù)制酶復(fù)合體（ORF1ab，編碼16 種非結(jié)構(gòu)蛋白）、結(jié)構(gòu)蛋白編碼基因（S、E、M、N）、3′端非翻譯區(qū)（3′UTR），編碼了非結(jié)構(gòu)蛋白、結(jié)構(gòu)蛋白及輔助蛋白［19］。非結(jié)構(gòu)蛋白中的3-胰凝乳蛋白酶樣蛋白酶、木瓜蛋白酶樣蛋白酶、解旋酶、RNA 依賴性RNA 聚合酶為病毒生命周期中的關(guān)鍵酶。結(jié)構(gòu)蛋白包含4 種：刺突蛋白（Spike protein，S）、包膜蛋白（E）、膜蛋白（M）和核衣殼蛋白（N），其中S蛋白在病毒與細(xì)胞受體識(shí)別過(guò)程中具有重要作用。S 蛋白具有S1、S2 2 個(gè)亞單位，S1與細(xì)胞表面受體結(jié)合，S2 則可發(fā)生構(gòu)象改變，從而拉近病毒與細(xì)胞的距離將S 蛋白錨定于細(xì)胞膜表面，促進(jìn)病毒入侵［20-21］。研究表明，γ、δ、Omicron 等類型均在β型的基礎(chǔ)上發(fā)生了表面結(jié)構(gòu)蛋白位點(diǎn)突變［22］。Omicron 突變株具有高度變異性，導(dǎo)致病毒感染能力和免疫逃逸能力不斷增強(qiáng)，對(duì)疫苗和抗體藥物研發(fā)提出了挑戰(zhàn)［23-26］。

2.2 SARS-CoV-2入侵細(xì)胞的過(guò)程 病毒進(jìn)入人體后，宿主的弗林蛋白酶（Furin）在S1～S2 位點(diǎn)預(yù)切割SARS-CoV-2 S 蛋白導(dǎo)致S1 亞基暴露［27］。S1 亞基受體結(jié)構(gòu)域（receptor binding domain，RBD）識(shí)別并結(jié)合宿主細(xì)胞表面的血管緊張素轉(zhuǎn)換酶（angiotensin converting enzyme 2，ACE2）受體，誘導(dǎo)S蛋白S1亞基構(gòu)象變化，暴露S2亞基中的S2裂解位點(diǎn)［28-29］。SARS-CoV-2 進(jìn)入細(xì)胞的途徑根據(jù)S2 亞基被蛋白酶切割位點(diǎn)的不同主要分為兩種：一是細(xì)胞膜表面存在跨膜蛋白酶絲氨酸2（TMPRSS2），S2 亞基裂解直接發(fā)生于細(xì)胞表面，病毒與細(xì)胞膜直接融合進(jìn)入細(xì)胞，是病毒進(jìn)入細(xì)胞的主要途徑［30-32］；二是靶細(xì)胞未表達(dá)TMPRSS2，或病毒-ACE2 復(fù)合體在細(xì)胞表面未識(shí)別TMPRSS2，病毒-ACE2 復(fù)合體則通過(guò)誘導(dǎo)內(nèi)吞作用進(jìn)入胞內(nèi)，通過(guò)內(nèi)體中的組織蛋白酶尤其是組織蛋白酶L 完成S2 亞基裂解，值得注意的是病毒對(duì)內(nèi)體途徑的依賴性較低［33-34］。通過(guò)這兩種途徑完成S2亞基位點(diǎn)裂解后暴露S蛋白的融合肽（fusion peptide，F(xiàn)P），S1與S2解離同時(shí)誘導(dǎo)S2亞基發(fā)生一系列構(gòu)象變化，推動(dòng)融合肽近端區(qū)（fusion-peptide proximal region，F(xiàn)PPR）向前與細(xì)胞膜融合，融合孔形成后病毒RNA 從此處釋放至宿主細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)，進(jìn)行脫殼和復(fù)制［35］。

宿主細(xì)胞受體除ACE2 外，還有多種分子可作為SARS-CoV 和SARS-CoV-2 的替代受體。如免疫細(xì)胞中的C-型凝集素受體（C-type lectin receptors，CLR）、CD209（DC-specific ICAM-grabbing non-integrin，DC-SIGN）、CD209L（L-SIGN）、巨噬細(xì)胞半乳糖型凝集素（macrophage galactose-type lectin，MGL）、T細(xì)胞免疫球蛋白黏蛋白1（TIM-1）等［6，36-40］。其中DC-SIGN 廣泛表達(dá)于DCs，用于識(shí)別甘露糖含量較高的病毒蛋白，在SARS-CoV-2 感染中作為替代受體，以ACE2 依賴或獨(dú)立方式參與SARS-CoV-2 感染［41］：表達(dá)DC-SIGN 的DCs 可攜帶病毒轉(zhuǎn)移至表達(dá)ACE2 的細(xì)胞，一定程度上幫助病毒傳播［42-45］；若DCs 同時(shí)表達(dá)DC-SIGN 和ACE2（如肺間質(zhì)DCs），則病原體直接侵入DCs，是新冠病毒感染DCs 的重要途徑（圖1）。而其他替代受體還包括腎損傷分子-1（KIM-1）、酪氨酸蛋白激酶受體（tyrosine-protein kinase receptor UFO，AXL）、神經(jīng)纖毛蛋白1（Neuropilin-1，NRP-1）、CD147等［40，46-48］。這些替代受體中，凝集素受體和磷脂酰絲氨酸受體家族（TIM、TAM）在沒(méi)有ACE2 的情況下難以與冠狀病毒結(jié)合接受感染，因此稱為“附著因子”（attachment factors）［49］。

圖1 SARS-CoV-2侵入過(guò)程Fig.1 Invasion process of SARS-CoV-2

2.3 SARS-CoV-2 導(dǎo)致的組織損傷 由于ACE2、TMPRSS2、Furin 在肺和支氣管細(xì)胞中均有表達(dá)，因此SARS-CoV-2 將主要感染肺組織從而導(dǎo)致嚴(yán)重的呼吸道感染癥狀和肺損傷，也是病毒通過(guò)呼吸道傳播的主要原因［50-51］。而部分免疫細(xì)胞也表達(dá)ACE2和替代受體，直接損害免疫系統(tǒng)，導(dǎo)致免疫功能下降、紊亂及炎癥損傷，如肺DCs。SARS-CoV 侵入細(xì)胞后影響細(xì)胞ACE2 表達(dá)從而影響ACE2 調(diào)節(jié)的腎素-血管緊張素系統(tǒng)（RASS系統(tǒng)）［52］。已有動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明這一影響會(huì)導(dǎo)致血壓和電解質(zhì)平衡改變、增強(qiáng)氣道炎癥和血管通透性從而更易導(dǎo)致急性肺損傷［53］。研究證明SARS-CoV-2 可能也采用了類似作用機(jī)制，且比SARS-CoV 導(dǎo)致的肺損傷癥狀更嚴(yán)重，也更易引發(fā)血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷、血栓、炎癥從而造成肺外系統(tǒng)和器官嚴(yán)重?fù)p傷［54-57］。

SARS-CoV-2在細(xì)胞內(nèi)完成裝配后，通過(guò)細(xì)胞焦亡直接導(dǎo)致細(xì)胞死亡和組織損傷［58］。同時(shí)SARSCoV-2 也可誘導(dǎo)高細(xì)胞因子血癥（細(xì)胞因子風(fēng)暴）高炎癥反應(yīng)從而對(duì)機(jī)體造成損害，高水平的炎癥細(xì)胞因子可能導(dǎo)致休克和心臟、肝臟和腎臟組織損傷以及呼吸衰竭或多器官衰竭，還介導(dǎo)廣泛的肺部病變，導(dǎo)致中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞大量浸潤(rùn)，彌漫性肺泡損傷，形成透明膜，肺泡壁彌漫性增厚［59-61］。宿主病毒清除能力受損及失控的炎癥反應(yīng)導(dǎo)致疾病加重和惡性循環(huán)，其中的免疫學(xué)機(jī)制非常復(fù)雜，可能與異常的免疫細(xì)胞數(shù)量及功能變化有關(guān)，DCs 作為連接多種免疫應(yīng)答和過(guò)程的核心在SARS-CoV-2感染與損傷中發(fā)揮雙面作用［62-63］。病毒感染的肺DCs 分泌IFN-Ⅲ破壞SARS-CoV-2 感染患者肺上皮屏障，從而增加肺部易感性［4］。SARS-CoV-2 還可通過(guò)DC-SIGN 等替代分子感染DCs，并通過(guò)DCs 遷徙和細(xì)胞間接觸進(jìn)行傳播，被感染的DCs 也難以發(fā)揮正常的免疫調(diào)節(jié)功能，從而導(dǎo)致感染和病情惡化［39］。

3 DCs在SARS-CoV-2感染和免疫病理中的作用

3.1 DCs 產(chǎn)生的IFN-Ⅰ是早期抗病毒免疫的有力武器 DCs在病毒感染后的免疫應(yīng)答有賴于宿主細(xì)胞PRRs 快速激活。冠狀病毒感染時(shí)，DCs 表達(dá)的TLR7、維甲酸誘導(dǎo)基因Ⅰ（RIG-Ⅰ）、黑色素瘤分化相關(guān)基因5（MDA-5）能被病毒RNA 激活，從而觸發(fā)天然免疫應(yīng)答［64-65］。這些關(guān)鍵PRRs 的激活可啟動(dòng)下游信號(hào)級(jí)聯(lián)，如干擾素反應(yīng)調(diào)控因子（IRF3）、IRF7 和核因子κB（NF-κB），誘導(dǎo)IFN-Ⅰ和其他促炎細(xì)胞因子產(chǎn)生［66-67］。

SARS-CoV-2感染患者中，被感染的宿主細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞焦亡募集包括DCs在內(nèi)的各種免疫細(xì)胞浸潤(rùn)肺組織并促進(jìn)細(xì)胞因子分泌［9］。pDCs 被招募至肺部組織后，通過(guò)TLR7 識(shí)別SARS-CoV-2 后開(kāi)始活化和聚集，釋放IFN-Ⅰ等抗病毒IFN 和IL-6、IL-8 等炎癥細(xì)胞因子限制病毒復(fù)制［68-72］。新冠肺炎早期感染患者中，激活的DCs浸潤(rùn)于肺部，大量干擾素刺激基因（ISGs）表達(dá)，表現(xiàn)出強(qiáng)大的IFN 反應(yīng)［73］。IFN-Ⅰ是增強(qiáng)機(jī)體抗病毒免疫應(yīng)答必需的免疫調(diào)節(jié)因子，以上證據(jù)證明DCs 在病毒感染早期成功識(shí)別了SARS-CoV-2 并釋放了大量IFN-Ⅰ，DCs 在新冠肺炎早期感染中可能起重要的保護(hù)作用。

然而SARS-CoV-2 感染能夠降低機(jī)體IFN-Ⅰ轉(zhuǎn)錄表達(dá)［74］。SARS-CoV-2 持續(xù)感染過(guò)程中，IFN-Ⅰ產(chǎn)生明顯受損，pDCs 產(chǎn)生IFN-Ⅰ的能力明顯下降，抑制moDCs 和pDCs 中STAT1 磷酸化，從而抑制和延遲IFN-Ⅰ產(chǎn)生，導(dǎo)致pDCs僅能產(chǎn)生較少的細(xì)胞因子以應(yīng)對(duì)持續(xù)感染和不相關(guān)的二次刺激［75-76］。因此新冠肺炎重癥和危重患者中，哪怕病毒復(fù)制量很高卻仍表現(xiàn)出IFN-Ⅰ轉(zhuǎn)錄反應(yīng)不足，同時(shí)pDCs 數(shù)量下降，加劇IFN-Ⅰ不足的情況［74，77］。新冠肺炎患者中IFN-Ⅰ抗病毒反應(yīng)的關(guān)鍵蛋白TLR3 和IRF7 遺傳性缺陷增多，這些缺陷導(dǎo)致功能喪失，是重癥SARSCoV-2 感染的基礎(chǔ)［78］。而女性病毒感染相對(duì)男性較輕的部分原因是雌激素增加了pDCs中TLR7途徑的IFN-α（IFN-Ⅰ的一種）分泌［79］。這些研究側(cè)面反映了DCs 分泌的IFN-Ⅰ對(duì)控制COVID-19 感染、維持機(jī)體健康具有關(guān)鍵作用。

另一方面，部分證據(jù)顯示新冠肺炎患者IFN-Ⅲ會(huì)破壞肺上皮屏障，DCs 可能參與病理性炎癥發(fā)生而導(dǎo)致病情加劇，說(shuō)明了DCs 在免疫保護(hù)和免疫病理過(guò)程中的復(fù)雜作用［4］。

3.2 DCs 功能失調(diào)可能引發(fā)細(xì)胞因子風(fēng)暴 細(xì)胞因子風(fēng)暴的產(chǎn)生和臨床特征可能與炎癥細(xì)胞因子過(guò)度產(chǎn)生息息相關(guān)，如IL-1、TNF-α 和IL-6 等，其中IL-6 可能對(duì)新冠肺炎病情惡化起重要作用［80-81］。一項(xiàng)150 例新冠肺炎患者的回顧性研究中發(fā)現(xiàn)，68例死亡患者的IL-6水平顯著高于正常值，而82例治愈病例的IL-6水平則處于正常范圍［82］。國(guó)內(nèi)一項(xiàng)對(duì)29 例新冠肺炎患者的臨床特征分析中也發(fā)現(xiàn)，5 例危重型患者IL-6 水平高于9 例重型患者，9 例重癥病例的IL-6 水平高于15例普通型病患［83］。同時(shí)，一項(xiàng)關(guān)于新冠肺炎患者血清中細(xì)胞因子和趨化因子水平的研究也發(fā)現(xiàn)，相較于IL-1 和TNF-α，體內(nèi)IL-6 增加更顯著且與疾病嚴(yán)重程度相關(guān)［84］。IL-6 異常升高引起了研究人員注意，2020 年研究人員就已開(kāi)始嘗試使用IL-6 受體抗體治療急性呼吸窘迫綜合征并取得了良好效果［85］。2021 年則開(kāi)始使用IL-6 受體抗體聯(lián)合療法，如使用托珠單抗聯(lián)合恢復(fù)期血漿治療危重癥患者炎癥損傷，發(fā)現(xiàn)IL-6 可作為一種穩(wěn)定指標(biāo)呈現(xiàn)病毒感染期間炎癥狀況，高水平IL-6患者預(yù)后普遍較差［86］。

以上可以看出IL-6 與嚴(yán)重的炎癥損傷存在明顯聯(lián)系，且可能對(duì)細(xì)胞炎癥風(fēng)暴惡化起重要作用。雖然并未在體外實(shí)驗(yàn)中明確發(fā)現(xiàn)IL-6 的具體來(lái)源［87］，但YOUSIF 等［88］發(fā)現(xiàn)小鼠體內(nèi)cDCs 衍生的sIL-6R 可捕獲中和細(xì)菌或病毒感染后體內(nèi)釋放的IL-6，說(shuō)明DCs 在IL-6 平衡調(diào)節(jié)中可能起重要作用，但DCs與炎癥反應(yīng)加劇和消退的具體聯(lián)系和機(jī)制還需進(jìn)一步研究。

另外，細(xì)胞因子風(fēng)暴可能是免疫系統(tǒng)未能清除病毒從而“過(guò)度補(bǔ)償”的結(jié)果，因?yàn)榇罅炕颊弑憩F(xiàn)出低水平的IFN-Ⅰ、IFN-Ⅲ與高濃度的趨化因子、IL-6同時(shí)存在的情況［74，89-91］。SARS-CoV-2 感染過(guò)程中，在低水平IFN-Ⅰ和高載量病毒情況下，SARS-CoV-2過(guò)度激活NF-κB及其依賴的TNF-α和IL-6產(chǎn)生和信號(hào)傳導(dǎo)，導(dǎo)致長(zhǎng)時(shí)間的炎癥反應(yīng)［91-92］。SARS-CoV-2具有激活NF-κB 通路的能力，而DCs 可通過(guò)NF-κB激活信號(hào)通路參與促炎細(xì)胞分裂，在正反饋回路作用下，IL-1β、IL-6和TNF-α等細(xì)胞因子加強(qiáng)了NF-κB激活和炎癥小體組裝，進(jìn)而促進(jìn)炎癥反應(yīng)［93-94］。證明SARS-CoV-2 感染的肺部，NF-κB 水平較高，而抑制該通路可增強(qiáng)IFN 介導(dǎo)的抗病毒免疫，改善感染結(jié)局［95-96］。

總之，抵抗肺部病毒感染依賴于IFN 和炎癥細(xì)胞因子的作用，而細(xì)胞炎癥因子風(fēng)暴可能與異常的免疫細(xì)胞數(shù)量及功能變化密切相關(guān)，DCs 在其中起重要作用：DCs 數(shù)量、功能下調(diào)時(shí)，IFN-Ⅰ抗病毒免疫削弱，高濃度的病毒激活了NF-κB 過(guò)度反應(yīng)，從而誘發(fā)以IL-6 和TNF-α 升高為特征的細(xì)胞因子風(fēng)暴。

3.3 DCs 數(shù)量和功能缺陷引發(fā)病毒免疫逃逸 研究顯示SARS-CoV-2 感染DCs 將直接導(dǎo)致DCs 數(shù)量減少，SARS-CoV-2 感染可使moDCs 數(shù)量減少10%～20%［75］。而急性期和恢復(fù)期新冠肺炎患者cDCs 和pDCs 數(shù)量均減少，同時(shí)cDCs/pDCs 升高，意味著pDCs 減少情況更嚴(yán)重，而pDCs 減少將引起IFN-Ⅰ分泌減少?gòu)亩档腿梭w抗病毒效應(yīng)，導(dǎo)致疾病難以控制。而DCs 分泌的IFN-α 可活化并誘導(dǎo)B 細(xì)胞成熟，從而幫助啟動(dòng)新冠肺炎患者體內(nèi)的B細(xì)胞應(yīng)答，產(chǎn)生IgM、IgG 和IgA 等特異性中和抗體，因此IFN-Ⅰ減少可能影響B(tài) 細(xì)胞免疫應(yīng)答［97-98］。且DCs 數(shù)量減少在癥狀嚴(yán)重的患者中表現(xiàn)更顯著［77］。研究顯示新冠肺炎患者體內(nèi)cDCs和pDCs數(shù)量下降的情況甚至可持續(xù)7 個(gè)月［99］。SARS-CoV-2 感染也會(huì)導(dǎo)致DCs 成熟度受損，研究發(fā)現(xiàn)新冠肺炎患者高病毒載量的彌漫性肺泡損傷標(biāo)本中髓系DCs（mDCs）的成熟標(biāo)志MHCⅡ分子并未顯著上調(diào)，未成熟的mDCs最終導(dǎo)致T 細(xì)胞應(yīng)答不足［100］。同時(shí)DCs 成熟的標(biāo)志HLA-DR 和CD80 表達(dá)降低，STAT2 活性降低，導(dǎo)致DCs 激活CD8+T 細(xì)胞能力降低［101］。SARS-CoV-2感染過(guò)程中，T 細(xì)胞發(fā)揮消除病毒的重要作用，而DCs可誘導(dǎo)產(chǎn)生CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞，且DCs刺激T 細(xì)胞的能力取決于其成熟狀態(tài)，因此，DCs數(shù)量減少和成熟度降低也可能導(dǎo)致新冠肺炎患者CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞數(shù)量降低［16，42，102］。

以上證據(jù)顯示SARS-CoV-2 感染會(huì)導(dǎo)致DCs 數(shù)量降低、成熟度受損，將嚴(yán)重影響DCs發(fā)揮正常免疫功能，繼而影響T 細(xì)胞和B 細(xì)胞介導(dǎo)的適應(yīng)性免疫應(yīng)答，最終導(dǎo)致疾病惡化，而惡化的疾病又將進(jìn)一步降低DCs 正常功能，這樣的惡性循環(huán)導(dǎo)致疾病不斷進(jìn)展。DCs 在SARS-CoV-2 感染中的調(diào)節(jié)作用見(jiàn)圖2。

圖2 DCs在機(jī)體抗SARS-CoV-2免疫中的調(diào)節(jié)作用Fig.2 DCs in host immunity to SARS-CoV-2

DCs 在SARS-CoV-2 感染后數(shù)量下降、成熟度減退和功能減退的發(fā)生機(jī)制尚不清楚?？赡芙忉尠ǎ孩賁ARS-CoV-2 侵入細(xì)胞后調(diào)控ACE2 影響RAAS系統(tǒng)，其中AngⅡ和醛固酮減少DCs數(shù)量并影響其成熟，間接導(dǎo)致DCs 功能障礙［52，103］；②DC-SIGN等DCs 表面蛋白作為SARS-CoV-2 入侵細(xì)胞的替代受體，使DCs 成為SARS-CoV-2 直接作用的靶細(xì)胞，病毒將直接破壞正常的DCs，降低DCs 數(shù)量［41］；③SARS-CoV-2也會(huì)直接影響DCs免疫功能，如抑制moDCs 和pDCs 中STAT1 磷酸化，從而抑制和延遲IFN-Ⅰ產(chǎn)生［75］。深入研究SARS-CoV-2 如何通過(guò)抑制DCs 功能和成熟進(jìn)而逃逸免疫攻擊，將為揭示病毒宿主相互作用帶來(lái)新的啟示。

4 總結(jié)與展望

SARS-CoV-2有著極強(qiáng)的傳染性與變異性，新冠肺炎發(fā)生發(fā)展的細(xì)胞和分子機(jī)制是免疫學(xué)研究必須解決的緊迫問(wèn)題。人體免疫系統(tǒng)中，作為專職APC 的DCs 是具有高度異質(zhì)性的譜系，在抗病毒天然免疫和炎癥反應(yīng)激活中至關(guān)重要。但SARS-CoV-2通過(guò)多種機(jī)制導(dǎo)致DCs 數(shù)量減少、抗原呈遞能力受損、成熟度下降，從而導(dǎo)致免疫系統(tǒng)功能障礙和細(xì)胞炎癥因子風(fēng)暴，實(shí)現(xiàn)病毒免疫逃逸。干擾素、炎癥細(xì)胞因子和適應(yīng)性免疫在消除SARS-CoV-2 中起重要作用，而DCs 在以上固有和適應(yīng)性免疫應(yīng)答啟動(dòng)和調(diào)節(jié)中發(fā)揮重要作用，具有免疫激活劑和天然佐劑特征，因此，以DC 為基礎(chǔ)的SARS-CoV-2 疫苗將具有很好的發(fā)展前景。未來(lái)研究中，通過(guò)高通量手段系統(tǒng)性研究不同疾病階段和部位的DCs在新冠肺炎發(fā)生發(fā)展中的作用以及DCs 的代謝調(diào)控、表觀調(diào)控、RNA-蛋白相互作用等過(guò)程如何影響患者臨床結(jié)局，將為解析DCs如何參與SARS-CoV-2感染的具體免疫應(yīng)答過(guò)程提供新的機(jī)制解釋，并為疾病診斷和治療提供潛在的生物標(biāo)志物和藥物靶標(biāo)。