UPLC-Q-TOF-MS/MS 法分析欒樨葉的化學(xué)成分

肖觀林，江潔怡，程青云，張靖年，湯瑞茵，李冬梅，李養(yǎng)學(xué)*

（1.廣東省中醫(yī)藥工程技術(shù)研究院 廣東省中醫(yī)藥研究開發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東 廣州 510095；2.廣州中醫(yī)藥大學(xué)附屬中山中醫(yī)院/中山市中醫(yī)院，廣東 中山 528401；3.廣州中醫(yī)藥大學(xué) 第五臨床醫(yī)學(xué)院，廣東 廣州 510405）

闊苞菊Pluchea indica（L.） Less.又稱冬青菊或欒樨，屬菊科闊苞菊屬植物，在亞洲、非洲、美洲的熱帶和亞熱帶地區(qū)分布，在我國主要分布在南部沿海一帶，具有良好的開發(fā)前景［1］。其收錄于《廣西藥用植物名錄》《中藥辭海》《廣州植物志》和《嶺南采藥錄》，作為廣西民間常用藥，主要有抗氧化、抗炎和神經(jīng)藥理學(xué)作用，常用于治療小兒食積、癭瘤痰核、風(fēng)濕骨痛等癥［2-3］。中藥欒樨的藥用部位是其莖葉，具有溫中化食、軟堅(jiān)散結(jié)的功效，臨床上多用于治療淋巴結(jié)核、消腫解毒等病癥，在抗結(jié)核活性、抗炎活性、體外抗癌等方面具有積極作用［4-7］。目前，關(guān)于欒樨葉化學(xué)成分的定性鑒別鮮有報(bào)道，國內(nèi)也未見相關(guān)文獻(xiàn)，不利于欒樨葉的全面質(zhì)量控制和進(jìn)一步深入研究。

超高效液相色譜-四極桿-飛行時(shí)間高分辨質(zhì)譜（UPLC-Q-TOF-MS/MS）能同時(shí)對(duì)目標(biāo)物的母離子和子離子進(jìn)行數(shù)據(jù)采集并準(zhǔn)確分析，具有高分辨率、高靈敏度等優(yōu)點(diǎn)，在對(duì)照品不足的情況下可對(duì)成分進(jìn)行結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)分析，已成為當(dāng)前中藥復(fù)雜體系中化學(xué)成分定性分析的重要工具［8-11］。本研究采用UPLC-Q-TOF-MS/MS 技術(shù)對(duì)欒樨葉的化學(xué)成分進(jìn)行定性分析，根據(jù)各色譜峰的一級(jí)和二級(jí)質(zhì)譜信息、相關(guān)中藥質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫匹配及各成分的裂解規(guī)律進(jìn)行解譜鑒別，為欒樨葉的化學(xué)成分解析、藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究、質(zhì)量變化規(guī)律探討及開發(fā)利用提供了科學(xué)依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀 器

Milli-Q Advantage A10 純水系統(tǒng)，ExionLC AC 型液相色譜儀（島津公司），SCIEX X500R 飛行時(shí)間質(zhì)譜儀（AB Sciex 公司），XS205 型1/10 萬電子分析天平（Mettler-Toledo 公司），Sorvall Legend Micro 17R型離心機(jī)（Thermo Fisher Scientific 公司）。

1.2 試劑與藥材

對(duì)照品：咖啡酸（批號(hào)110885-201703，質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥98%）、異阿魏酸（批號(hào)111698-201904，質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥98%）、綠原酸（批號(hào)110753-202018，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為96.2%）、木犀草苷（批號(hào)111720-202111，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為96.6%）、毛蕊花糖苷（批號(hào)111530-201914，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為95.2%）購自中國食品藥品檢定研究院；蔓荊子黃素（批號(hào)M-037-180524）、隱綠原酸（批號(hào)Y-067-180425）、異綠原酸B（批號(hào)Y-069-180105）、新綠原酸（批號(hào)RFS-X01411804010）、異綠原酸A（批號(hào)Y-068-190329）購自成都瑞芬思生物科技公司；異綠原酸C（批號(hào)AF20121801）購自成都埃法生物技術(shù)有限公司。未標(biāo)明純度的對(duì)照品質(zhì)量分?jǐn)?shù)均大于98%。實(shí)驗(yàn)用水為屈臣氏蒸餾水，甲醇、乙腈、甲酸均為質(zhì)譜純（美國Fisher Chemical公司），其余試劑均為分析純。植物原料于2021年10月采自廣西省合浦縣，由廣東省第二中醫(yī)院劉法錦研究員鑒定為闊苞菊Pluchea indica（L.） Less.。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 對(duì)照品溶液制備分別精密稱取咖啡酸、異阿魏酸、綠原酸、木犀草苷、毛蕊花糖苷、蔓荊子黃素、隱綠原酸、異綠原酸B、新綠原酸、異綠原酸A、異綠原酸C 各對(duì)照品適量，置于10 mL量瓶中，用甲醇溶解稀釋至刻度，制備成含各成分40～100 μg?mL-1的混合對(duì)照品溶液，經(jīng)0.22 μm 微孔濾膜濾過備用，作為混合對(duì)照品溶液。

1.3.2 供試品溶液制備將真空干燥的欒樨葉粉碎過二號(hào)篩，稱取約0.25 g粉末于50 mL具塞錐形瓶中，加入50%甲醇25 mL，25 ℃下超聲（頻率40 kHz，功率300 W）提取30 min，放冷，混勻，于13 000 r/min離心5 min。移取上層清液，過0.22 μm微孔濾膜，置于樣品瓶中，即得。

1.3.3 色譜條件Waters UPLC BEH C18色譜柱（2.1 mm×100 mm，1.7 μm），流速：0.25 mL/min，柱溫：40 ℃，進(jìn)樣量：1 μL。流動(dòng)相為乙腈（A）-0.1%甲酸水溶液（B），洗脫梯度：0～3 min，5%～20% A；3～7 min，20%～43% A；7～14 min，43%～55% A；14～17 min，55%～98% A。

1.3.4 質(zhì)譜條件采用電噴霧離子源（ESI），正、負(fù)離子模式掃描，MS掃描范圍：m/z100～1 500，霧化氣壓（GS1）：379.2 kPa，輔助氣壓（GS2）：379.2 kPa，氣簾氣壓（Cur）：241.3 kPa，離子源溫度：500 ℃。正離子模式：離子噴霧電壓為5.5 kV，簇裂解電壓為100 V，MS2碰撞能量為35 eV；負(fù)離子模式：離子噴霧電壓為-4.5 kV，簇裂解電壓為-80 V，MS2碰撞能量為35 eV。

2 結(jié)果與討論

2.1 化學(xué)成分分析

在上述色譜、質(zhì)譜條件下對(duì)欒樨葉進(jìn)行正、負(fù)離子全掃描，獲得基峰色譜圖（BPC圖）見圖1。對(duì)色譜圖中各色譜峰進(jìn)行精確質(zhì)量數(shù)識(shí)別，通過對(duì)照品、精確準(zhǔn)分子離子峰、二級(jí)譜圖等信息，結(jié)合文獻(xiàn)數(shù)據(jù)、數(shù)據(jù)庫及裂解規(guī)律等信息進(jìn)行比對(duì)，從欒樨葉中共鑒別出52 個(gè)化學(xué)成分（見表1），包括2 個(gè)香豆素類（化合物12、17），15 個(gè)黃酮類（化合物20～21、23～30、34、41、44、46、48），16 個(gè)苯丙素類（化合物11、13～15、18～19、22、31～33、36～38、40、42～43），5 個(gè)生物堿類（化合物2、6～7、16、39），5個(gè)脂肪酸類（化合物45、47、49～50、52），3個(gè)有機(jī)酸類（化合物4～5、35），3個(gè)氨基酸類（化合物1、8～9），1 個(gè)酚酸類（化合物10）和2 個(gè)其他類化合物（化合物3、51）。其中23 個(gè)成分為欒樨葉中首次報(bào)道，11個(gè)化合物通過與對(duì)照品進(jìn)行比對(duì)后得到明確識(shí)別。

表1 欒樨葉化學(xué)成分的UPLC-Q-TOF-MS/MS鑒定與分析Table 1 Qualitative analysis of chemical constituents in the leaves of Pluchea indica（L.） Less.by UPLC-Q-TOF-MS/MS

圖1 欒樨葉在負(fù)（A）、正（B）離子模式下的基峰色譜圖Fig.1 Base peak chromatograms of the leaves of Pluchea indica（L.） Less.in negative（A） and positive（B） ion modes

（續(xù)表1）

2.2 欒樨葉中各類化合物的質(zhì)譜分析

2.2.1 香豆素類作為一大類植物次生代謝產(chǎn)物，香豆素類化合物多在正離子模式下響應(yīng)好，在質(zhì)譜裂解過程中常丟失一系列CO 的碎片離子峰。在正離子模式下，17 號(hào)峰的準(zhǔn)分子離子峰為m/z163.038 9 ［M+H］+，失去1分子H2O產(chǎn)生碎片離子m/z145.029 1 ［M+H-H2O］+，然后失去1分子CO產(chǎn)生碎片離子m/z117.033 5 ［M+H-H2O-CO］+；m/z163.038 9 ［M+H］+還可失去1 分子CO 產(chǎn)生碎片離子m/z135.044 0 ［M+H-CO］+，繼而失去1分子CO和H2O產(chǎn)生m/z89.038 5 ［M+H-2CO-H2O］+碎片離子。結(jié)合質(zhì)譜裂解規(guī)律和文獻(xiàn)［8］報(bào)道，推測(cè)其為傘形花內(nèi)酯，可能的裂解途徑見圖2A。12號(hào)峰的準(zhǔn)分子離子峰為m/z179.034 0 ［M+H］+，其二級(jí)碎片離子有明顯丟失H2O、CO 產(chǎn)生的離子碎片m/z151.038 5 ［M+HCO］+、m/z133.029 0 ［M+H-CO-H2O］+、m/z123.044 2 ［M+H-2CO］+和m/z105.033 2 ［M+ H-CO-H2OCO］+，通過對(duì)比質(zhì)譜裂解規(guī)律以及文獻(xiàn)［9］報(bào)道，推測(cè)其為秦皮乙素，可能的裂解途徑見圖2B。

圖2 傘形花內(nèi)酯（A）和秦皮乙素（B）的質(zhì)譜裂解途徑Fig.2 Fragment pathways of 7-hydroxycoumarine（A） and esculetin（B）

2.2.2 黃酮及其苷類黃酮類化合物具有C6-C3-C6的基本骨架，其主要裂解方式是丟失中性離子，例如CO、CO2等以及RDA 裂解重排、糖苷鍵斷裂、糖環(huán)裂解等。黃酮氧苷類化合物的裂解方式主要是糖苷鍵斷裂，多見各種糖基如鼠李糖基（Rha）、葡萄糖基（Glc）和蕓香糖基（Rutinose）等的丟失。在負(fù)離子模式下，20號(hào)峰的準(zhǔn)分子離子峰為m/z609.146 1 ［M-H］-，失去1分子葡萄糖基和1分子鼠李糖基，產(chǎn)生m/z301.035 8 ［M-H-C6H10O4-C6H10O5］-和m/z300.027 7 ［M-H-C6H10O4-C6H10O5-H］-，而其苷元再次RDA 裂解產(chǎn)生m/z151.004 3［M-H-C6H10O4-C6H10O5-C8H5O3］-和m/z271.024 5［M-H-C6H10O4-C6H10O5-CH2O］-，結(jié)合質(zhì)譜裂解規(guī)律及文獻(xiàn)［9］報(bào)道，推測(cè)其為蘆丁，可能的裂解途徑見圖3A。負(fù)離子模式下，23號(hào)峰的準(zhǔn)分子離子峰為m/z463.087 8 ［M-H］-，二級(jí)特征碎片離子有m/z301.035 4 ［M-H-C6H10O5］-、m/z300.027 6 ［M-H-C6H10O5-H］-和m/z271.025 3 ［M-H-C6H10O5-H-CO］-，通過分析其質(zhì)譜裂解規(guī)律并結(jié)合文獻(xiàn)［9］報(bào)道，推測(cè)其為金絲桃苷，可能的質(zhì)譜裂解途徑見圖3B。

圖3 蘆丁（A）和金絲桃苷（B）的質(zhì)譜裂解途徑Fig.3 Fragment pathways of rutin（A） and hyperoside（B）

2.2.3 苯丙素類苯丙素類化合物主要以負(fù)離子［M-H］-的準(zhǔn)分子離子峰形式存在，在高能碰撞下易發(fā)生18 Da（H2O）、45 Da（COOH）、44 Da（CO2）等中性分子丟失，從而產(chǎn)生相應(yīng)的特征碎片離子峰。負(fù)離子模式下，18 號(hào)峰的準(zhǔn)分子離子峰為m/z179.034 9 ［M-H］-，二級(jí)碎片離子有明顯丟失CO2、H2O、CO 產(chǎn)生的離子碎片m/z135.044 7 ［M-H-CO2］-、m/z117.035 1 ［M-H-CO2-H2O］-、m/z107.049 7 ［MH-CO2-CO］-和m/z89.038 8 ［M-H-CO2-CO-H2O］-，與對(duì)照品比對(duì)，可確證其為咖啡酸，可能的質(zhì)譜裂解行為見圖4A。13 號(hào)峰的準(zhǔn)分子離子峰為m/z353.087 0 ［M-H］-，二級(jí)質(zhì)譜存在失去咖啡?；奶卣魉槠x子m/z191.055 2 ［M-H-C9H6O3］-，丟失奎寧酸的特征碎片離子m/z179.034 6 ［M-H-C7H10O5］-，以及二級(jí)碎片m/z173.045 3 ［M-H-C9H6O3-H2O］-、m/z161.024 5 ［M-H-C7H12O6］-和m/z135.044 9 ［MH-C7H12O6-CO2］-，與對(duì)照品比對(duì)，可確證其為綠原酸，可能的質(zhì)譜裂解行為見圖4B。32號(hào)峰的準(zhǔn)分子離子峰為m/z515.118 6 ［M-H］-，失去1 個(gè)分子的咖啡?；卣魉槠x子m/z353.088 4 ［M-H-C9H6O3］-和單咖啡?？鼘幩岬奶卣魉槠x子m/z191.055 6［M-H-2C9H6O3］-、m/z179.034 3 ［M-H-C9H6O3-C7H10O5］-，以及二級(jí)碎片m/z173.045 7 ［M-H-2C9H6O3-H2O］-和m/z135.044 8 ［M-H-C9H6O3-C7H10O5-CO2］-，與對(duì)照品比對(duì)，可確證其為異綠原酸A，可能的質(zhì)譜裂解行為見圖4C。峰31、33 與32 具有相同的分子式且碎片離子相似，推斷這3 個(gè)化合物應(yīng)為同分異構(gòu)體，經(jīng)對(duì)照品比對(duì)，確證峰31 為異綠原酸B，峰32 為異綠原酸A，峰33 為異綠原酸C。峰36 的一級(jí)質(zhì)譜信息顯示，準(zhǔn)分子離子峰為m/z529.135 1 ［M-H］-，其二級(jí)特征碎片離子包括m/z367.104 4 ［M-H-C9H6O3］-、m/z353.088 7 ［M-HC9H6O3-CH2］-、m/z191.055 9 ［M-H-C9H6O3-CH3-C9H6O3］-、m/z179.035 0 ［M-H-C9H6O3-CH3-C7H10O5］-和m/z135.045 3 ［M-H-C9H6O3-CH3-C7H10O5-CO2］-，結(jié)合裂解規(guī)律及文獻(xiàn)報(bào)道［5］，推斷其為3，4-二-O-咖啡酰奎寧酸甲酯，可能的質(zhì)譜裂解行為見圖4D。36 號(hào)峰和38 號(hào)峰有相同的質(zhì)譜裂解規(guī)律，結(jié)合文獻(xiàn)［5］報(bào)道，推測(cè)其為4，5-二-O-咖啡?？鼘幩峒柞ァ７?0的準(zhǔn)分子離子峰為m/z677.150 6 ［M-H］-，連續(xù)失去1 個(gè)分子的咖啡酰基生成碎片離子m/z515.120 0 ［M-H-C9H6O3］-、m/z353.087 5 ［M-H-2C9H6O3］-、m/z191.055 9 ［M-H-3C9H6O3］-及m/z179.034 6 ［M-H-2C9H6O3-C7H10O5］-，結(jié)合裂解規(guī)律及文獻(xiàn)［5］報(bào)道，推斷其為3，4，5-三-O-咖啡?？鼘幩?。峰42 的準(zhǔn)分子離子峰為m/z839.181 6 ［M-H］-，其二級(jí)質(zhì)譜中同樣出現(xiàn)連續(xù)失去咖啡酰基生成的碎片離子m/z677.151 4 ［M-H-C9H6O3］-、m/z515.118 6［M-H-2C9H6O3］-、m/z353.087 3 ［M-H-3C9H6O3］-和m/z179.034 6 ［M-H-3C9H6O3-C7H10O5］-，結(jié)合裂解規(guī)律及文獻(xiàn)［5］報(bào)道，推斷其為1，3，4，5-四-O-咖啡?？鼘幩帷?/p>

圖4 咖啡酸（A）、綠原酸（B）、異綠原酸A（C）、3，4-二O-咖啡?？鼘幩峒柞ィ―）的質(zhì)譜裂解途徑Fig.4 Fragment pathways of caffeic acid（A），chlorogenic acid（B），isochlorogenic acid A（C） and 3，4-di-Ocaffeoylquinic acid methyl ester（D）

2.2.4 生物堿類本實(shí)驗(yàn)結(jié)合二級(jí)碎片特征及文獻(xiàn)報(bào)道，從欒樨葉中共篩查出1個(gè)原小檗堿類生物堿及1個(gè)四氫原小檗堿類生物堿。同時(shí)，還篩查出鳥苷、腺苷與甜菜堿3個(gè)其他類生物堿。生物堿類化合物多以正離子形式存在。在正離子模式下，峰16 的準(zhǔn)分子離子峰為m/z342.170 3 ［M+H］+，其中m/z為192.102 3 的碎片離子來自于母核發(fā)生RDA 裂解或B 環(huán)發(fā)生裂解，進(jìn)一步失去—CH3產(chǎn)生m/z為177.078 1的碎片離子，結(jié)合裂解規(guī)律及文獻(xiàn)［11］報(bào)道，推斷其為黃柏堿，可能的質(zhì)譜裂解行為見圖5A。峰39 的準(zhǔn)分子離子峰為m/z336.123 4 ［M+H］+，其產(chǎn)生特征碎片離子m/z321.099 4 ［M+H-CH3］+、m/z320.092 1 ［M+H-CH3-H］+和m/z306.077 2 ［M+H-2CH3］+，在二級(jí)質(zhì)譜中還可觀察到由m/z320.092 1相繼失去CO 和CH3產(chǎn)生的碎片離子m/z292.096 5 ［M+H-CH4-CO］+與m/z278.080 8 ［M+H-2CH3-CO］+，根據(jù)以上裂解方式，結(jié)合文獻(xiàn)［9，11］報(bào)道，推斷其為小檗堿，可能的質(zhì)譜裂解行為見圖5B。峰2 的準(zhǔn)分子離子峰為m/z118.086 0 ［M+H］+，二級(jí)碎片離子包括m/z59.072 7 ［M+H-N（CH3）3］+和58.064 8 ［M+H-CH3COOH］+，根據(jù)以上裂解方式，結(jié)合文獻(xiàn)［9］報(bào)道，推斷其為甜菜堿。

圖5 黃柏堿（A）和小檗堿（B）的質(zhì)譜裂解途徑Fig.5 Fragment pathways of phellodendrine（A） and berbine（B）

2.2.5 脂肪酸類脂肪酸類化合物結(jié)構(gòu)包含脂肪鏈和羧基或酯基基團(tuán)，易發(fā)生α-裂解產(chǎn)生［M-HCO］-、［M-H-CO2］-、［M-H-H2O］-、［M-H-COOH］-、［M-H-CH］-和［M-H-CH2］-等類型的特征碎片離子。在負(fù)離子模式下，峰35 的準(zhǔn)分子離子峰為m/z187.097 6 ［M-H］-，二級(jí)質(zhì)譜中可觀察到準(zhǔn)分子離子峰脫去1 分子H2O 得到碎片離子m/z169.086 6 ［M-H-H2O］-，準(zhǔn)分子離子峰脫去1 分子CO2得到碎片離子m/z143.107 9 ［M-H-CO2］-，繼續(xù)丟失1 分子H2O 得到碎片離子m/z125.097 2 ［M-H-CO2-H2O］-，繼續(xù)脫去C2H4得到碎片m/z97.065 5 ［M-H-CO2-H2O-C2H4］-，連續(xù)再脫去C2H4得到碎片m/z69.035 0［M-H-CO2-H2O-2C2H4］-，結(jié)合裂解規(guī)律及文獻(xiàn)［9］報(bào)道，推斷其為壬二酸，可能的質(zhì)譜裂解行為見圖6。峰49 的準(zhǔn)分子離子峰為m/z293.212 2 ［M-H］-，二級(jí)質(zhì)譜碎片離子包括m/z275.202 1 ［M-H-H2O］-、m/z171.029 0 和m/z121.102 8，將這些特征離子與MassBank 數(shù)據(jù)庫比對(duì)，推斷峰49 為9（R）-羥基-10（E），12（Z），15（Z）-十八碳三烯酸。同理，根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量、碎片離子與MassBank 數(shù)據(jù)庫比對(duì)結(jié)果，推斷峰45、47、50、52 分別為9（S），12（S），13（S）-三羥基十八碳-10-烯酸、9（S），12（S），13（S）-三羥基十八碳-10（E），16（Z）-二烯酸、13（S）-羥基-9（Z），11（E），15（Z）-十八碳三烯酸和9-羥基-10，12-十八碳二烯酸。

圖6 壬二酸的質(zhì)譜裂解途徑Fig.6 Fragment pathways of azelaic acid

2.2.6 其他類除以上化合物外，本實(shí)驗(yàn)還從欒樨葉中鑒定出 2個(gè)核苷類化合物（腺苷和鳥苷）、3個(gè)氨基酸類化合物（精氨酸、亮氨酸和苯丙氨酸）及3種其他化合物（原兒茶酸、甘露醇和姜糖脂B）。

2.3 討 論

欒樨葉的化學(xué)成分眾多，類別主要包括黃酮類、苯丙素類、生物堿類、脂肪酸類和香豆素類化合物，其中不同類型、不同來源的活性成分可通過協(xié)同或互補(bǔ)作用，實(shí)現(xiàn)多成分、多通路、多靶點(diǎn)綜合治療。欒樨葉的主要化學(xué)成分為苯丙素類化合物，在本研究中苯丙素類主要包含咖啡酰奎寧酸類化合物，其多具有熱不穩(wěn)定性，易分解或異構(gòu)化，臨床上多用于抗菌、消炎、抗氧化、抗病毒、止咳、保肝等方面，而且對(duì)當(dāng)前人們所關(guān)注的病癥有極大潛力，如降血糖、降血脂、抗腫瘤等［5，12-14］。研究發(fā)現(xiàn)咖啡?？鼘幩嵫苌铮ǚ?2、38、40、42～43）為腸道麥芽糖酶抑制劑，奎寧酸部分的甲基酯化以及分子中咖啡基的數(shù)量有助于抑制活性［5］。同時(shí)，最新研究發(fā)現(xiàn)咖啡?？鼘幩犷惢衔锞哂幸种萍仔土鞲胁《旧窠?jīng)氨酸酶的作用［15］。本研究利用UPLC-Q-TOF-MS/MS 技術(shù)對(duì)欒樨葉中化學(xué)成分進(jìn)行分析，總結(jié)出不同化學(xué)成分的裂解規(guī)律，并構(gòu)建了欒樨葉的化學(xué)成分?jǐn)?shù)據(jù)庫，為后續(xù)欒樨葉的開發(fā)利用、藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究、質(zhì)量控制及臨床應(yīng)用提供了依據(jù)。此外，欒樨葉中某些已知成分未在此次分析中檢測(cè)到，可能與ESI的離子化效率有關(guān)，一些難區(qū)分的同分異構(gòu)體的精確結(jié)構(gòu)僅依靠QTOF進(jìn)行指認(rèn)存在一定局限，還需進(jìn)一步結(jié)合核磁共振等波譜分析技術(shù)進(jìn)行確證。

3 結(jié) 論

本研究利用超高效液相色譜-四極桿-飛行時(shí)間高分辨質(zhì)譜技術(shù)分析欒樨葉中的化學(xué)成分，通過精確相對(duì)分子質(zhì)量篩選分析，比較一級(jí)精確質(zhì)荷比和二級(jí)碎片離子，并結(jié)合二級(jí)質(zhì)譜裂解規(guī)律、化學(xué)對(duì)照品質(zhì)譜信息、相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道及Scifinder、MassBank 和ChemSpider 等數(shù)據(jù)庫，從欒樨葉的50%甲醇提取物中分離和鑒定出52個(gè)化學(xué)成分，其中23個(gè)成分為首次在欒樨葉中發(fā)現(xiàn)，進(jìn)一步豐富和完善了欒樨葉的化學(xué)成分庫，為欒樨葉的質(zhì)量控制及藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究奠定了基礎(chǔ)。