◎ 謝海玉
(天水市麥積區(qū)食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)中心,甘肅 天水 741020)
食品中砷含量測(cè)定的前處理方法主要有濕法消解和微波消解,不同的消解方法對(duì)不同類型的食品中總砷的測(cè)定各有優(yōu)缺點(diǎn)[1-2]。目前,花椒中總砷的前處理報(bào)道很少,本文主要是依照GB 5009.11—2014《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中總砷及無(wú)機(jī)砷的測(cè)定》[3],研究2種不同的前處理方法對(duì)測(cè)定花椒中砷的影響,建立適合花椒中總砷的測(cè)定方法,以期得到更準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
花椒(選用花椒皮):麥積區(qū)元龍鎮(zhèn)農(nóng)戶。
硝酸:國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;氫氧化鉀:天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司;硼氫化鉀:天津傲然精細(xì)化工研究所;鹽酸:四川西隴化工有限公司;抗壞血酸、硫脲:天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所;過(guò)氧化氫:北京化工廠;高氯酸:北京化學(xué)試劑廠。以上試劑均為優(yōu)級(jí)純;砷儲(chǔ)備液,質(zhì)量濃度1 000 μg·mL-1,國(guó)家有色金屬及電子材料分析測(cè)試中心。
原子熒光光譜儀(SK-2003A):北京金索坤技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司;微波消解儀(MD6M):奧普勒儀器有限公司;石墨趕酸儀(GS-12):奧普勒儀器有限公司;數(shù)顯智能電熱板(DB-3):天津市心雨儀器有限公司;食品粉碎機(jī)(800C):永康市金穗機(jī)械制造廠;玻璃器皿。
1.3.1 樣品前處理
樣品用粉碎機(jī)粉碎,裝入干凈的聚乙烯瓶中密封,備用。
1.3.1.1 濕法消解的單因素試驗(yàn)
稱取試樣1.000 g(精確到0.001 g),置于100 mL錐形瓶中,加入適量硝酸和高氯酸,加蓋放置過(guò)夜,次日置于電熱板上加熱消解。若消解液剩2 mL左右還有未消解的物質(zhì),取下冷卻后補(bǔ)加硝酸5 mL,如此反復(fù)直至消解完全,待白煙散盡,消解液剩2 mL時(shí),冷卻,用水將內(nèi)容物轉(zhuǎn)入25 mL容量瓶中,加入硫脲異抗壞血酸溶液2 mL,補(bǔ)加水至刻度,混勻,放置30 min待測(cè)。按同一操作方法做空白試驗(yàn)。
(1)電熱板設(shè)定溫度:100 ℃、130 ℃、160 ℃,加入25 mL硝酸進(jìn)行試驗(yàn),探究電熱板溫度對(duì)花椒中砷檢測(cè)值的影響。
(2)設(shè)定電熱板的溫度為130 ℃,硝酸使用量:10 mL、15 mL、20 mL和25 mL進(jìn)行試驗(yàn),探究硝酸使用量對(duì)花椒中砷測(cè)定值的影響。
(3)設(shè)定電熱板的溫度為130 ℃,硝酸使用量為20 mL,高氯酸使用量為1 mL、2 mL和3 mL進(jìn)行試驗(yàn),探究高氯酸使用量對(duì)花椒中砷測(cè)定值的影響。
1.3.1.2 微波消解的單因素實(shí)驗(yàn)
稱取試樣0.300 0 g(不超過(guò)0.300 0 g,)置于消化罐中,加入適量硝酸和過(guò)氧化氫,擰上消解罐蓋均勻放置在放置板上,設(shè)置微波消解的分析條件進(jìn)行消解,消解完全后將消解罐放置在石墨趕酸儀內(nèi)趕酸,待消解液剩1~2 mL時(shí),將其全部轉(zhuǎn)移到25 mL容量瓶中,用少量水分3次洗滌內(nèi)罐內(nèi)蓋,洗滌液合并于容量瓶中,加2 mL硫脲+抗壞血酸溶液,并定容至刻度,搖勻后放置30 min待測(cè)。同時(shí)作主控罐空白試驗(yàn)。
(1)硝酸使用量5 mL、6 mL、7 mL和8 mL,設(shè)定分析條件試驗(yàn):控制溫度為100 ℃→120 ℃→160 ℃;升溫時(shí)間每次為5 min;恒溫時(shí)間為5 min→10 min→30 min;功率為60%,探究硝酸使用量對(duì)花椒中砷測(cè)定值的影響。
(2)硝酸使用量6 mL,過(guò)氧化氫使用量為0.2 mL、0.5 mL和1 mL,設(shè)定分析條件試驗(yàn):控制溫度為100 ℃→120 ℃→160 ℃;升溫時(shí)間每次為5 min;恒溫時(shí)間5 min→10 min→30 min;功率為60%,探究過(guò)氧化氫使用量對(duì)花椒中砷測(cè)定值的影響。
(3)硝酸使用量6 mL,過(guò)氧化氫使用量為0.2 mL,設(shè)定分析條件試驗(yàn):控制溫度為100 ℃→120 ℃→160 ℃;升溫時(shí)間每次為5 min;功率為60%,試驗(yàn)1恒溫時(shí)間為5 min→10 min→20 min;試驗(yàn)2恒溫時(shí)間為5 min→5 min→20 min;試驗(yàn)3恒溫時(shí)間為5 min→5 min→30 min,探究微波消解分析條件對(duì)花椒中砷測(cè)定值的影響。
1.3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線
分別移取1.00 mL、3.00 mL、5.00 mL、7.00 mL和10.00 mL濃度100 ng·mL-1砷標(biāo)準(zhǔn)溶液置于100 mL容量瓶中,用空白介質(zhì)定容至刻度線,即可得到濃度為:1.00 ng·mL-1、3.00 ng·mL-1、5.00 ng·mL-1、7.00 ng·mL-1和10.00 ng·mL-1砷標(biāo)準(zhǔn)系列。按濃度由低到高順序依次手動(dòng)測(cè)定熒光度。以砷濃度為橫坐標(biāo),熒光度為縱坐標(biāo),建立工作曲線。
1.3.3 儀器參數(shù)
儀器設(shè)置參數(shù)為:負(fù)高壓300 V,燈流量80 mA,積分時(shí)間5 s,延遲時(shí)間15 s,泵轉(zhuǎn)速100 r·min-1,測(cè)試方式為多點(diǎn)曲線。
1.3.4 樣品中砷含量的計(jì)算
按照GB 5009.11—2014《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中總砷及無(wú)機(jī)砷的測(cè)定》[3]中的第二法氫化物原子熒光法(13),計(jì)算試樣中砷的含量。
在0~10 ng·mL-1范圍內(nèi),得到標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為y=34.006 5+220.702 3x,相關(guān)系數(shù)r=0.999 9。
由表1可見(jiàn),隨著電熱板溫度的升高,樣品中砷測(cè)定值逐漸增加,這是因?yàn)闃悠废膺^(guò)程中溫度越高,消解液的氧化性會(huì)增強(qiáng),消解樣品的能力也越強(qiáng)[4-5]。然而,硝酸的沸點(diǎn)是121 ℃,溫度太高會(huì)造成消解液沸騰、飛濺。因此,實(shí)驗(yàn)選擇電熱板的溫度為130 ℃。硝酸的添加量小于20 mL時(shí),樣品中砷測(cè)定值較低;當(dāng)硝酸添加量大于20 mL時(shí),砷測(cè)定值變化不大。這是因?yàn)橄膺^(guò)程中使用濃硝酸的目的就是酸化被消解物質(zhì),當(dāng)硝酸添加量較少時(shí),樣品不能被完全酸化,故選擇硝酸添加量為20 mL。在硝酸中添加適量的高氯酸可提高樣品中砷的檢測(cè)值。當(dāng)高氯酸的添加量為2 mL和3 mL時(shí),砷的檢測(cè)值變化不大,故選擇高氯酸添加量為2 mL。
表1 濕法消解條件對(duì)花椒中砷測(cè)定值的影響表
由表2可知,隨著硝酸的添加量增加,樣品中砷測(cè)定值也不斷增加,當(dāng)硝酸添加量為6 mL和7 mL時(shí),樣品中砷測(cè)定值變化不大;實(shí)驗(yàn)選擇硝酸添加量為6 mL。在消解罐中添加6 mL硝酸后,再添加不同量的過(guò)氧化氫,樣品中的砷檢測(cè)值比未添加過(guò)氧化氫的檢測(cè)值有明顯增加,但是砷測(cè)定值變化不大,故選擇過(guò)氧化氫添加量為0.2 mL。在微波消解過(guò)程中恒溫時(shí)間越長(zhǎng),樣品被消解的程度越徹底,故選擇分析條件3作為實(shí)驗(yàn)的消解程序。
表2 微波消解條件對(duì)花椒中砷測(cè)定值的影響表
以加標(biāo)回收率表示。在已知砷含量的樣品中加入3 ng·mL-1標(biāo)準(zhǔn)溶液,在最佳的消解條件下測(cè)定砷含量,計(jì)算回收率。
由表3可知,采用濕法消解處理樣品,本底樣加標(biāo)回收率為85.6%,空白加標(biāo)回收率為93.2%;微波消解處理樣品,本底樣加標(biāo)回收率為94.8%,空白加標(biāo)回收率為99.2%。由此可見(jiàn),微波消解處理樣品的回收率明顯高于濕法消解的回收率。
表3 不同前處理方法對(duì)樣品加標(biāo)回收率的影響表
試驗(yàn)優(yōu)化得到了原子熒光光譜法檢測(cè)花椒中總砷含量的2種前處理?xiàng)l件。在最佳消解條件下,濕法消解處理樣品后加標(biāo)回收率為85.6%;微波消解處理樣品后加標(biāo)回收率為94.8%。由此可見(jiàn),微波消解處理樣品的回收率明顯高于濕法消解的回收率。