蒼附導(dǎo)痰湯對(duì)多囊卵巢綜合征大鼠oatp4a1、代謝紊亂與腸道菌群的影響*

馬思明，閆穎，張晗，哈虹

（天津中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院婦科，天津 301617）

多囊卵巢綜合征（PCOS）是一種內(nèi)分泌代謝異常的綜合性疾病，主要發(fā)病人群為青春期和育齡期女性，占育齡婦女的6%～20%，該病是導(dǎo)致患者不孕的主要原因，給患者及其家庭帶來(lái)了沉重的心理負(fù)擔(dān)[1]。PCOS 因其有臨床癥狀特異、病因復(fù)雜、影響因素多樣的特點(diǎn)，其發(fā)病機(jī)制至今仍不明確，但研究證實(shí)該病不僅是最常見(jiàn)的婦科內(nèi)分泌疾病外，還是一種以肥胖、胰島素抵抗等為特點(diǎn)的代謝性疾病，影響患者一生[2]。中醫(yī)理論認(rèn)為，肥胖患者因長(zhǎng)期飲食肥甘厚膩，使之痰濁內(nèi)生、濕濁內(nèi)停，故肥胖患者多痰濕，而有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)多肽4a1（oatp4a1）作為機(jī)體關(guān)鍵的膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，在維持機(jī)體內(nèi)外水液代謝平衡中發(fā)揮著重要作用，可高效運(yùn)轉(zhuǎn)毒素、食物和藥物等代謝產(chǎn)物、內(nèi)分泌產(chǎn)物等“濕濁”，故可推測(cè)其可能在PCOS 中扮演重要角色[3]。PCOS 作為一種代謝綜合征，其代謝紊亂普遍存在，而PCOS 患者代謝紊亂主要表現(xiàn)為糖脂代謝紊亂，故如何改善其糖脂代謝紊亂一直是臨床工作的重中之重[4]。近年來(lái)隨著中國(guó)測(cè)序技術(shù)的不斷發(fā)展，研究發(fā)現(xiàn)腸道菌群的變化與人類多種代謝性疾病的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，PCOS 也不例外，因此近年來(lái)其已經(jīng)成為醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的研究焦點(diǎn)及熱點(diǎn)[5]。而蒼附導(dǎo)痰湯是治療形肥痰盛的經(jīng)典方劑，具有健脾行氣、化痰燥濕之功效，且已有研究證實(shí)其在PCOS 治療方面具有顯著效果[6]，但作用機(jī)制尚不明確。因此本文就蒼附導(dǎo)痰湯對(duì)多囊卵巢綜合征大鼠oatp4a1、代謝紊亂與腸道菌群的影響進(jìn)行研究探討，為臨床預(yù)防及治療PCOS 提供參考。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物材料 本實(shí)驗(yàn)選取南京君科生物工程有限公司提供的50 只SPF 級(jí)SD 雌性大鼠[合格證書(shū)為：SCXK（蘇）2019-0005]，平均體質(zhì)量190～250 g，大鼠單籠喂養(yǎng)，室溫生長(zhǎng)，模仿晝夜交替，晝夜各12 h，在常溫下進(jìn)行無(wú)菌自由進(jìn)食、飲水2 周，按照《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例》規(guī)定進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)方案獲得天津中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)（倫理審批號(hào)：20210314）。

1.2 實(shí)驗(yàn)材料 脫氫表雄酮（DHEA）（貨號(hào)：E03788，上海瓦蘭有限公司）；蒼附導(dǎo)痰湯（本院自制，為水煎劑，生藥含量為0．86 g/mL）；蘇木素染液（貨號(hào)：H9627，美國(guó)Sigma 公司）；伊紅染液（貨號(hào)：AG1100-100 mL，上海吉至有限公司）；光學(xué)顯微鏡（型號(hào)：CX-60，日本OLYMPUS 公司）；免疫組化試劑盒（貨號(hào)：YDDEF001，上海羽哚有限公司）；oatp4a1 抗體（貨號(hào)：BMP088，山東華博基因工程有限公司）；血糖儀（型號(hào)：KQT-6 型，北京安騰有限公司）；放射免疫試劑盒（貨號(hào)：SHXFFMDC01，上海信帆有限公司）；酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）試劑盒（貨號(hào)：446502，美國(guó)R＆D 公司）；多功能酶標(biāo)儀（美國(guó)Molecular D evices 公司，型號(hào)：BX-53）；腸球菌選擇性培養(yǎng)基（貨號(hào)：028961，廣東環(huán)凱有限公司）；腸桿菌選擇性培養(yǎng)基（貨號(hào)：028700，廣東環(huán)凱有限公司）；乳酸桿菌選擇性培養(yǎng)基（貨號(hào)：PJ0458，北京普非有限公司）；雙歧桿菌選擇性培養(yǎng)基（貨號(hào)：GRP0289，上海廣銳有限公司）。

1.3 實(shí)驗(yàn)步驟

1.3.1 造模 選取40 只SPF 級(jí)SD 雌性大鼠，于背部皮下注射5 mg/100 g DHEA，每日1 次，且每日以特制高脂飼料進(jìn)行喂養(yǎng)，連續(xù)30 d，在建模15 d 后，開(kāi)始對(duì)大鼠進(jìn)行連續(xù)陰道涂片用以觀察其動(dòng)情期，當(dāng)大鼠陰道上皮細(xì)胞持續(xù)角化，始終處于動(dòng)情間期，失去規(guī)律的動(dòng)情周期變化時(shí)，則視為造模成功，造模過(guò)程中無(wú)大鼠死亡，全部造模成功。

1.3.2 分組及給藥 從造模成功的大鼠中隨機(jī)選取30 只，將其分為模型（M）組，低劑量蒼附導(dǎo)痰湯（D）組，高劑量蒼附導(dǎo)痰湯（H）組，每組10 只，同時(shí)選取剩余正常大鼠10 只作為正常（N）組，對(duì)D 組灌胃1．42 g/kg 蒼附導(dǎo)痰湯，對(duì)H 組灌胃5．68 g/kg 蒼附導(dǎo)痰湯，兩組均每日1 次，連續(xù)2 周，N 組、M 組同期給予同體積生理鹽水灌胃。從第6 天開(kāi)始，每天8：00、15：00、22：00 對(duì)4 組均進(jìn)行陰道涂片，持續(xù)15 d，觀察并記錄大鼠動(dòng)情期、動(dòng)情前期。

1.3.3 標(biāo)本采集 實(shí)驗(yàn)完成后，收集新鮮糞便樣本置于滅菌的離心管內(nèi)，于-80 ℃冰箱保存，然后禁食12 h，腹腔注射40 mg/kg 戊巴比妥鈉麻醉處死并稱質(zhì)量，取出雙側(cè)卵巢組織稱質(zhì)量，按照公式計(jì)算，卵巢指數(shù)=兩側(cè)卵巢總質(zhì)量（mg）/大鼠體質(zhì)量（g），固定、洗凈后放入冰箱密封保存，同時(shí)腹主動(dòng)脈取血，在4 000 r/min 條件下離心10 min，離心半徑10 cm，取上清液，放入-80 ℃冰箱中密封保存。

1.3.4 蘇木精-伊紅（HE）染色法檢測(cè)卵巢組織病理形態(tài) 取右側(cè)卵巢，進(jìn)行常規(guī)石蠟包埋、切片，60 ℃烤箱中1 h 行微波抗原修復(fù)，脫蠟、透明、脫水，蒸餾水清洗1 min，用蘇木素染液進(jìn)行HE 染色，中性樹(shù)膠封片后，用光學(xué)顯微鏡進(jìn)行組織病理學(xué)觀察。

1.3.5 免疫組化法檢測(cè)oatp4a1 蛋白表達(dá) 取左側(cè)卵巢，進(jìn)行常規(guī)石蠟包埋、切片、脫蠟、水化處理后，用過(guò)氧化氫溫室孵育10 min，磷酸緩沖鹽溶液（PBS）沖洗3 次，微波熱修復(fù)后，在37 ℃，2%BSA 條件下封閉30 min，加入稀釋的oatp4a1 一抗（1∶100），4 ℃搖床振蕩孵育過(guò)夜后洗膜，加入稀釋的生物素標(biāo)記的二抗（1∶100），37 ℃輕搖室溫孵育30 min 洗膜，用二氨基聯(lián)苯胺（DAB）進(jìn)行顯色，顯色完成后，PBS 洗滌3 次，蘇木精復(fù)染5 min，中性樹(shù)膠封片后，用光學(xué)顯微鏡進(jìn)行觀察。

1.3.6 代謝紊亂相關(guān)指標(biāo)檢測(cè) 取各組大鼠血清，血糖儀檢測(cè)空腹血糖（FBG），嚴(yán)格按照儀器說(shuō)明說(shuō)進(jìn)行檢測(cè)；放射免疫試劑盒測(cè)定空腹胰島素（FINS），嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行檢測(cè)，當(dāng)檢測(cè)完成后，測(cè)定放射性強(qiáng)度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并計(jì)算其含量；ELISA 試劑盒檢測(cè)脂聯(lián)素（APN），嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)完成后，立即在波長(zhǎng)450 nm 處用酶標(biāo)儀，測(cè)定每孔吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并計(jì)算其含量；并按公式[胰島素抵抗脂數(shù)（HOMA-IR）=FBG（mmol/L）×FINS（mU/L）÷22．5]計(jì)算胰島素抵抗指數(shù)。

1.3.7 腸道菌群檢測(cè) 取各組大鼠糞便（每次取0.1 g），用生理鹽水稀釋100 倍，然后進(jìn)行10 倍系列稀釋，稀釋為10-3、10-4、10-5、10-6的稀釋液，采用微量加樣器吸取10-3、10-4、10-5稀釋程度的標(biāo)本滴加至腸球菌選擇性培養(yǎng)基，吸取10-3、10-4、10-5稀釋程度的標(biāo)本分別滴加至腸桿菌選擇性培養(yǎng)基、乳酸桿菌選擇性培養(yǎng)基、雙歧桿菌選擇性培養(yǎng)基，腸桿菌及腸球菌在37 ℃、需氧條件下培養(yǎng)24 h，乳酸桿菌及雙歧桿菌在37 ℃。厭氧條件下培養(yǎng)48 h，培養(yǎng)完成后，用平板菌落計(jì)數(shù)法計(jì)算各個(gè)稀釋平板內(nèi)的菌落數(shù)，計(jì)算結(jié)果以對(duì)數(shù)形式表示。實(shí)驗(yàn)在天津中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)室等級(jí)為1 級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室，實(shí)驗(yàn)時(shí)注意事項(xiàng)：1）檢測(cè)需要無(wú)菌操作。2）每次檢測(cè)都需要陰性對(duì)照。3）注意觀察氣體是否排完全。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用GraphPad Prism8.0 對(duì)各組大鼠oatp4a1、代謝紊亂與腸道菌群相關(guān)指標(biāo)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）多組間比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)，P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠動(dòng)情期及卵巢指數(shù)結(jié)果 與N 組比較，M 組大鼠動(dòng)情前期、卵巢指數(shù)明顯升高（P＜0.05），動(dòng)情期明顯降低（P＜0.05），與M 組比較，D 組、H 組大鼠動(dòng)情前期、卵巢指數(shù)顯著降低（P＜0.05），動(dòng)情期顯著升高（P＜0.05），且H 組比D 組變化明顯（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

表1 各組大鼠動(dòng)情期及卵巢指數(shù)（±s）Tab.1 Estrus and ovarian index of rats in each group（±s）

表1 各組大鼠動(dòng)情期及卵巢指數(shù)（±s）Tab.1 Estrus and ovarian index of rats in each group（±s）

注：N 組為正常組，M 組為模型組，D 組為蒼附導(dǎo)痰湯低劑量組，H 組為蒼附導(dǎo)痰湯高劑量組。與N 組相比，*P＜0.05；與M 組相比，#P＜0.05；與D 組相比，△P＜0.05。

組別 動(dòng)物數(shù)動(dòng)情期（h）動(dòng)情前期（h）卵巢指數(shù)N 組1012.35±2.1218.38±1.6624.36±2.13 M 組105.81±1.52*29.37±2.25*35.31±3.15*D 組108.25±1.35*#25.25±2.01*#29.96±2.47*#H 組1011.23±1.85*#△ 19.23±1.84*#△ 25.44±2.25*#△

2.2 各組HE 染色結(jié)果 N 組大鼠卵巢組織及卵泡生長(zhǎng)正常，可見(jiàn)多個(gè)黃體和不同發(fā)育時(shí)期卵泡，且間質(zhì)正常，間質(zhì)中可見(jiàn)深染的肥大細(xì)胞，M 組大鼠可見(jiàn)卵巢皮質(zhì)呈多囊樣改變，黃體數(shù)量明顯減少，可見(jiàn)較多的閉鎖卵泡，卵泡細(xì)胞多為壞死、增厚，D 組、H 組大鼠卵巢病理顯著改善，黃體數(shù)量逐漸增多。見(jiàn)圖1。

圖1 各組大鼠卵巢組織結(jié)構(gòu)病理形態(tài)（HE 染色，×400）Fig.1 Pathological morphology of ovarian tissue structure in each group of rats(HE staining，×400)

2.3 各組大鼠oatp4a1 蛋白表達(dá)結(jié)果 大鼠卵巢組織oatp4a1 蛋白表達(dá)量分別為N 組（2.33±0.21）、M 組（1.14±0.11）、D 組（1.68±0.15）、H 組（2.24±0.19）（F=15.870，P＜0.001），與N 組比較，M 組大鼠卵巢組織oatp4a1 蛋白表達(dá)顯著降低（P＜0.05），與M 組比較，D 組、H 組大鼠卵巢組織oatp4a1 蛋白表達(dá)明顯升高（P＜0.05），且H 組比D 組顯著升高（P＜0.05）。見(jiàn)圖2。

圖2 各組大鼠卵巢組織oatp4a1 蛋白表達(dá)（免疫組化染色，×400）Fig.2 Oatp4a1 protein expression in ovarian tissue of rats in each group(immunohistochemical staining，×400)

2.4 各組大鼠代謝紊亂相關(guān)指標(biāo)結(jié)果 與N 組比較，M 組血清中FBG、FINS、HOMA-IR 顯著升高（P＜0．05），APN 顯著降低（P＜0．05），與M 組比較，D 組、H 組血清中FBG、FINS、HOMA-IR 顯著降低（P＜0．05），APN 顯著升高（P＜0．05），且H 組比D 組變化顯著（P＜0．05）。見(jiàn)表2。

表2 各組大鼠血清中FBG、FINS、APN、HOMA-IR水平（±s）Tab.2 FBG，F(xiàn)INS，APN，HOMA-IR levels in serum of rats in each group（±s）

表2 各組大鼠血清中FBG、FINS、APN、HOMA-IR水平（±s）Tab.2 FBG，F(xiàn)INS，APN，HOMA-IR levels in serum of rats in each group（±s）

注：N 組為正常組，M 組為模型組，D 組為蒼附導(dǎo)痰湯低劑量組，H 組為蒼附導(dǎo)痰湯高劑量組。與N 組相比，*P＜0．05；與M 組相比，#P＜0．05；與D 組相比，△P＜0．05。

組別 動(dòng)物數(shù)FBG（mmoL/L）FINS（μIU/mL）APN（mg/L）HOMA-IR N 組10 4．36±0．8323．09±2．016．36±1．635．36±1．13 M 組10 6．31±1．65* 35．31±3．15* 3．31±0．85* 9．31±1．75*D 組10 5．25±1．35*# 29．25±2．35*# 4．55±1．35*# 7．25±1．35*#H 組10 4．43±1．05*#△24．23±2．15*#△6．23±1．57*#△5．83±1．25*#△

2.5 各組大鼠腸道菌群結(jié)果 與N 組比較，M 組大鼠腸桿菌數(shù)量顯著升高（P＜0．05），腸球菌、乳酸桿菌、雙歧桿菌數(shù)量明顯降低（P＜0．05），與M 組比較，D 組、H 組大鼠腸桿菌數(shù)量顯著降低（P＜0．05），腸球菌、乳酸桿菌、雙歧桿菌數(shù)量明顯升高（P＜0．05），且H 組比D 組變化顯著（P＜0．05）。見(jiàn)表3。

表3 各組大鼠腸道菌群結(jié)果（±s）Tab.3 Results of gut microbiota of rats in each group（±s） Log CFU/g

表3 各組大鼠腸道菌群結(jié)果（±s）Tab.3 Results of gut microbiota of rats in each group（±s） Log CFU/g

注：A 為正常組，B 為模型組，C 為蒼附導(dǎo)痰湯低劑量組，D 為蒼附導(dǎo)痰湯高劑量組。與N 組相比，*P＜0．05；與M 組相比，#P＜0．05；與D 組相比，△P＜0．05。

組別 動(dòng)物數(shù)腸桿菌腸球菌乳酸桿菌雙歧桿菌N 組106．75±0．849．59±1．6810．88±1．849．66±1．71 M 組109．88±1．72* 6．34±0．81*7．26±1．03* 6．14±0．84*D 組108．01±1．31*# 7．22±1．21*#8．15±1．26*# 7．18±1．35*#H 組106．92±1．02*#△9．21±1．63*#△10．61±1．68*#△9．45±1．59*#△

3 討論

PCOS 是臨床常見(jiàn)疾病，近年來(lái)隨著人們生活方式的不斷變化，該病的就診率不斷增高，且正在向年輕化發(fā)展，因此早預(yù)防、早診斷、早治療就顯得尤為重要，這將對(duì)提高患者生存質(zhì)量，降低家庭及社會(huì)負(fù)擔(dān)具有積極意義[7]。而近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，中醫(yī)藥在治療PCOS 方面發(fā)揮重要作用，故中醫(yī)藥越來(lái)越受到廣大醫(yī)學(xué)專家的重視[8]。因此，文章就蒼附導(dǎo)痰湯對(duì)多囊卵巢綜合征大鼠oatp4a1、代謝紊亂與腸道菌群的影響進(jìn)行研究探討，為臨床治療PCOS 提供理論基礎(chǔ)。

本研究發(fā)現(xiàn)，蒼附導(dǎo)痰湯可有效改善大鼠動(dòng)情周期及卵巢病理形態(tài)，降低卵巢指數(shù)，并促進(jìn)oatp4a1 蛋白表達(dá)，療效顯著。PCOS 在中醫(yī)中雖無(wú)具體名稱，但根據(jù)其疾病特征可歸屬于中醫(yī)“閉經(jīng)”“月經(jīng)過(guò)少”“不孕”“月經(jīng)后期”等范疇，中醫(yī)認(rèn)為該病病機(jī)在于腎虛、脾虛、肝郁、痰濕等，故治療多以補(bǔ)腎調(diào)經(jīng)、補(bǔ)氣健脾、疏肝解郁、燥濕化痰為主[9]。眾所周知，肥胖是PCOS 的典型特征，其可使患者病程持續(xù)加重，而肥胖的病理基礎(chǔ)是水液代謝平衡紊亂導(dǎo)致的痰濕，因此如何改善機(jī)體水液代謝是近年來(lái)醫(yī)學(xué)領(lǐng)域關(guān)注的焦點(diǎn)之一[10]。oatp4a1 是溶質(zhì)載體超家族的重要成員，可高效運(yùn)轉(zhuǎn)多種異體代謝產(chǎn)物，在維持機(jī)體水液代謝平衡方面發(fā)揮重要作用，研究發(fā)現(xiàn)，其功能失調(diào)可引起“痰濁”的分布、吸收以及排泄障礙，從而導(dǎo)致多種疾病的發(fā)生，PCOS 也不例外，故其越來(lái)越受到臨床的重視[11]。蒼附導(dǎo)痰湯來(lái)源于《葉天士女科診治秘方》，方中香附、蒼術(shù)為君藥，具有健脾燥濕、疏肝解郁、行氣寬中，共奏調(diào)和肝脾之功；茯苓健脾滲濕，助脾運(yùn)化水濕，使之無(wú)以生痰，陳皮、枳殼理氣行滯，以助健脾消痰，膽南星清熱化痰，以治痰瘀化熱，共為臣藥；生姜、神曲為佐藥，溫中化痰、消積導(dǎo)滯；甘草健脾益氣祛痰，調(diào)和諸藥，可解半夏、南星之毒，全方共達(dá)健脾祛濕化痰之功效，在治療痰濕型閉經(jīng)、肥胖方面具有顯著療效[12]。對(duì)于PCOS 大鼠，蒼附導(dǎo)痰湯通過(guò)其健脾燥濕，理氣化痰之功效，調(diào)節(jié)胃腸功能穩(wěn)態(tài)，從而抑制炎癥反應(yīng)、抑制氧化應(yīng)激、改善機(jī)體代謝水平，進(jìn)而有效促進(jìn)oatp4a1 合成及分泌，達(dá)到改善水液代謝平衡的目的，最終有效改善臨床癥狀。

研究結(jié)果顯示，與M 組比較，D 組、H 組血清中FBG、FINS、HOMA-IR 顯著降低，APN 顯著升高，且H 組比D 組變化顯著，這說(shuō)明蒼附導(dǎo)痰湯可顯著改善大鼠代謝紊亂。PCOS 在生育年齡的早期，主要癥狀表現(xiàn)為月經(jīng)紊亂，尤其是月經(jīng)稀發(fā)，高雄激素血癥和不孕，然而到生育年齡晚期以及圍絕經(jīng)期，代謝綜合征將替代不孕影響33．4%～47．3%的患者，故代謝紊亂已被普遍認(rèn)為是PCOS 的關(guān)鍵病理、生理改變[13]。而研究表明，糖脂代謝紊亂在PCOS 患者中最為常見(jiàn)，其中糖代謝紊亂主要表現(xiàn)為糖代謝異常及胰島素抵抗，數(shù)據(jù)顯示，胰島素抵抗存在于50%～80%的PCOS 患者，是促進(jìn)代謝綜合征發(fā)展的重要因素，故本研究選擇FBG、FINS、HOMA-IR 作為反映糖代謝水平的指標(biāo)；APN 作為唯一由脂肪組織分泌的蛋白質(zhì)，其不僅對(duì)卵巢功能具有潛在性作用，PCOS患者肥胖、高雄激素血癥、脂肪分布異常等也都與其密切相關(guān)，故其可作為反映脂代謝紊亂的有效指標(biāo)[14-15]。而對(duì)于PCOS 大鼠，蒼附導(dǎo)痰湯可能是通過(guò)健脾祛濕化痰功效，來(lái)維持機(jī)體代謝平衡，從而抑制卵巢雄性激素相關(guān)合成酶StAR 表達(dá)、促進(jìn)胰島素信號(hào)傳遞、調(diào)控生殖激素分泌，進(jìn)而改善胰島素代謝功能、血糖、血脂指標(biāo)，最終有效改善代謝紊亂及疾病癥狀。

本文研究表明，與M 組比較，D 組、H 組大鼠腸桿菌數(shù)量顯著降低，腸球菌、乳酸桿菌、雙歧桿菌數(shù)量明顯升高，且H 組比D 組變化顯著，這說(shuō)明蒼附導(dǎo)痰湯可顯著改善大鼠腸道菌群。腸道菌群被稱為“被遺忘的器官”，是環(huán)境因素影響人類健康以及疾病的重要媒介之一，正常的腸道菌群對(duì)維持機(jī)體健康極為重要，其可有效抵御病原菌入侵，分解并排出毒害物質(zhì)，此外其還與機(jī)體代謝、內(nèi)分泌、神經(jīng)系統(tǒng)關(guān)系密切[16]。近年來(lái)國(guó)內(nèi)外研究發(fā)現(xiàn)，PCOS 患者中存在腸道菌群紊亂，其構(gòu)成與正常人群具有顯著差異，腸桿菌數(shù)量有下降趨勢(shì)，腸球菌、乳酸桿菌、雙歧桿菌有上升趨勢(shì)，這提示其可能在PCOS 發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮重要作用，且還可能是引起胰島素抵抗的主要因素[17]。而對(duì)于PCOS 大鼠，蒼附導(dǎo)痰湯可能是通過(guò)改善胃腸道功能，來(lái)改善胃腸黏膜通透性，從而維持腸道免疫平衡、抑制炎癥反應(yīng)、抑制內(nèi)毒素產(chǎn)生等，進(jìn)而達(dá)到改善腸道菌群的目的，最終有效抑制PCOS 的發(fā)生、發(fā)展。

綜上所述，蒼附導(dǎo)痰湯可顯著促進(jìn)多囊卵巢綜合征大鼠oatp4a1 蛋白表達(dá)，改善大鼠代謝紊亂和腸道菌群。但本研究仍然存在一定不足，比如樣本量、研究指標(biāo)較少，只對(duì)oatp4a1 蛋白表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)等，研究?jī)?nèi)容需進(jìn)一步完善，在今后的研究中應(yīng)該增加實(shí)驗(yàn)樣本，通過(guò)多元化實(shí)驗(yàn)方案為臨床治療提供有力的臨床依據(jù)。