• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    六神丸對口腔潰瘍小鼠IL-6、IL-8 水平及MAPK/ERK 通路的影響

    2023-11-24 12:39:28周麗俐張婷王佳
    現(xiàn)代藥物與臨床 2023年10期
    關鍵詞:西瓜霜六神丸口腔潰瘍

    周麗俐,張婷,王佳*

    1.南昌大學 撫州醫(yī)學院,江西 撫州 344000

    2.雷允上藥業(yè)集團有限公司,江蘇 蘇州 215009

    六神丸是百草霜為衣的水丸,由麝香、牛黃、珍珠、冰片、蟾酥和雄黃組成[1],在臨床中應用廣泛。中醫(yī)學認為其具有清涼解毒、消炎止痛的功效,可用于治療喉風喉癰、癰瘍疔瘡、無名腫毒等癥[2]。近年來隨著對六神丸藥效成分的深入研究,證實了其主要成分具有廣譜的抗炎鎮(zhèn)痛作用。除此之外,隨著相關臨床療效評價的開展,六神丸在臨床中的適應證不斷擴大,廣泛涉及皮膚科、內(nèi)科、口腔科等各科。但是在治療各類型口腔潰瘍時,其研究結果及臨床數(shù)據(jù)基本是基于六神丸聯(lián)合其他藥物治療,如六神丸聯(lián)合黃連素[3]、大慶霉素[4]、利多卡因[5]等。因此推測六神丸可能對口腔潰瘍在各種配伍用藥過程中起到重要作用。本研究制備小鼠口腔潰瘍模型,觀察六神丸對口腔潰瘍的治療作用,并探討其可能的機制。

    1 材料

    1.1 實驗動物

    5 周齡C57BL/6JGpt 雄性小鼠,SPF 級,體質(zhì)量18~22 g,由江蘇集萃藥康生物科技股份有限公司提供。實驗動物許可證號SCXK(蘇)2018-0008。飼養(yǎng)環(huán)境溫度為(23±2)℃,濕度為(60±10)%,自由飲水進食。動物實驗得到南京中醫(yī)藥大學實驗動物倫理委員會的批準(批號202207A053),遵守實驗動物倫理要求。

    1.2 藥品及試劑

    六神丸(雷允上藥業(yè)集團有限公司,規(guī)格:10粒/支,批號SA18034A);桂林西瓜霜(桂林三金藥業(yè)股份有限公司,規(guī)格:2.5 g,批號210973);白細胞介素(IL)-6、IL-8 ELISA 檢測試劑盒(江蘇酶免實業(yè)有限公司,批號 MM-0047R1、MM-0190R1);NaOH(廣東光華化學廠有限公司,批號20100113);水合氯醛(中國藥品生物制品檢定研究院,批號100121-199903);生理鹽水(Beyotime);異氟烷(深圳瑞沃德,批號R510-22-10);β-actin antibody(美國proteintech 公司);ERK 抗體、抗p-ERK 抗體(Cell Signaling Technology,批號#4695、#4370);羊抗兔多克隆抗體(北京博爾西科技有限公司,批號BHR101)。

    1.3 儀器

    多功能酶標儀(BioTEK Instruments,Inc.);高速冷凍離心機(塞洛捷克D3024R);勻漿機(拓赫茨THR 勻漿機);離心機(AndyBio);垂直電泳槽(美國Rio-Rad 公司);電泳儀(Biometra);紫外切膠儀(上海勤翔儀器);水平脫色搖床(海門市其林貝爾儀器制造有限公司);凝膠自動成像系統(tǒng)(美國Rio-Rad 公司)。

    2 方法

    2.1 藥液制備

    取六神丸120 粒,滴加生理鹽水碾碎并研成細粉,再烘干得到六神丸粉末0.375 g。稱取桂林西瓜霜粉末0.375 g,備用。挑選大小約3 mm×3 mm 的氫氧化鈉片狀晶體于試管中備用,保持干燥。

    2.2 分組與給藥

    將32 只C57BL/6JGpt 小鼠隨機分為對照組、模型組、六神丸組、桂林西瓜霜組,每組各8 只。采用化學灼燒法[6]。于造模前12 h 禁食,正常飲水。除對照組外,小鼠經(jīng)4%水合氯醛(0.20 mL/只)麻醉,將3 mm×3 mm 氫氧化鈉片狀晶體放在小鼠口腔左側(cè)頰部黏膜處灼燒20 s,之后迅速移開并用生理鹽水沖洗20 s,2 d 內(nèi)可見3 mm 左右直徑大小的紅白色損傷,傷口轉(zhuǎn)化為中央凹陷并覆以白色偽膜,并伴有口角邊潮濕,臉頰腫脹,甚至口腔內(nèi)出現(xiàn)膿液,即可判定為造模成功。

    六神丸組給予局部外敷六神丸,給藥處理前先用異氟烷將小鼠麻醉,將消毒棉簽用生理鹽水潤濕,再用已經(jīng)制備好的六神丸粉末0.375 g,蘸取涂抹于患處,以完全覆蓋創(chuàng)面為標準,2 次/d,連續(xù)治療5 d。桂林西瓜霜組用同樣的方式給予局部外敷桂林西瓜霜粉末0.375 g,2 次/d,涂抹于小鼠口腔潰瘍處,連續(xù)治療5 d。模型組不給予藥物。六神丸與桂林西瓜霜組給藥前使用生理鹽水沖洗口腔,所有小鼠在給藥后禁食禁水0.5 h。實驗過程中所有小鼠均給予正常飲食,自由飲水,所有小鼠均存活并造模成功。

    2.3 指標檢測

    2.3.1 一般狀態(tài) 每天上午10∶00 時記錄各小鼠體質(zhì)量并觀察各小鼠外觀形態(tài)變化、對外界反應、采食行為等。

    2.3.2 潰瘍病理變化 給藥期間觀察潰瘍病理變化和恢復情況。潰瘍表面感染情況分級及評分規(guī)則為0 級:肉眼觀察潰瘍恢復至正常狀態(tài),記0 分;Ⅰ級:表面無明顯假膜,記1 分;Ⅱ級:潰瘍表面有薄層黃白色假膜,周圍無水腫,記2 分;Ⅲ級:潰瘍表面假膜較厚,且周圍伴有炎性水腫,記3 分。顯效:潰瘍表面感染情況評分0、Ⅰ級。有效:潰瘍表面感染情況評分Ⅱ級。無效:潰瘍表面感染情況評分Ⅲ級[7]。

    總愈合率=(顯效例數(shù)+有效例數(shù))/總例數(shù)

    2.3.3 生理生化指標 在治療第5 天后,采用摘眼球取血的方式采集靜脈血0.5 mL,室溫自然凝固20 min,3 000 r/min、4 ℃離心20 min,分離上層血清于離心管中,采用酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)法測定小鼠血清IL-6、IL-8 水平,具體步驟按照ELISA試劑盒說明書來操作。

    2.3.4 ERK1/2 磷酸化水平 取小鼠的口腔上皮組織,提取總蛋白,通過二喹啉酸(BCA)方法定量蛋白濃度并配制成2 μg/μL 蛋白濃度,金屬浴煮5 min 使蛋白變性。用β-actin 作為內(nèi)標,取樣品5 μg進行蛋白質(zhì)印跡分析??辜毎庹{(diào)節(jié)蛋白激酶(ERK)抗體和抗 p-ERK 抗體(Cell Signaling Technology,批號#4695、#4370),1∶1 000 稀釋,二抗用羊抗兔多克隆抗體(北京博爾西科技有限公司,批號BHR101),1∶10 000 稀釋。

    2.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計

    數(shù)據(jù)采用GraphPad Prism 8.0 軟件進行處理分析。兩組連續(xù)性計量數(shù)據(jù)采用獨立樣本t檢驗比較,計量資料以表示,檢驗方法采用單因素方差分析(One way-AVONA)。

    3 結果

    3.1 一般情況及體質(zhì)量變化

    造模第1 天對照組小鼠活動敏捷,步態(tài)、行為及對外界反應情況正常,無死亡。模型組、六神丸組和西瓜霜組小鼠皮毛光澤變得黯淡,體質(zhì)量開始減少,活力降低(P<0.05)。給藥第5 天,對照組小鼠體質(zhì)量保持穩(wěn)定,一般狀態(tài)與實驗開始前無明顯變化,且無小鼠死亡。六神丸組和桂林西瓜霜組小鼠活力較造模2 d 已經(jīng)有所恢復,體質(zhì)量逐漸增長,但仍未恢復到初始體質(zhì)量(P<0.05)。提示六神丸對氫氧化鈉誘導的口腔潰瘍具有一定的促進恢復作用,見圖1。

    圖1 六神丸對口腔潰瘍小鼠體質(zhì)量的影響Fig.1 Influence of Liushen Pills on body mass of mice with oral ulcer

    3.2 小鼠口腔潰瘍部位組織病理變化的觀察

    觀察各組小鼠口腔潰瘍面的基本狀態(tài),結果顯示對照組無潰瘍癥狀出現(xiàn)。其余組別在使用氫氧化鈉灼燒過后可出現(xiàn)明顯的口腔潰瘍,肉眼觀察潰瘍面的黏膜出現(xiàn)大小3 mm×3 mm、覆蓋黃白色偽膜,左側(cè)臉頰充血水腫,說明口腔潰瘍模型制備成功。連續(xù)給藥5 d,對小鼠口腔潰瘍表面進行連續(xù)觀察,結果發(fā)現(xiàn),對照組口腔黏膜始終保持完整、光滑,無明顯損傷。其他各組潰瘍隨時間的推移均有不同程度的恢復趨勢。有關文獻報道指出[3]小鼠口腔潰瘍模型具有一定自愈性,隨著時間的延長,潰瘍面積逐漸減小,創(chuàng)面組織表面逐步恢復。在給藥第2、5 天觀察,與模型組比較,六神丸組和桂林西瓜霜組小鼠口腔潰瘍組織顯著恢復。給藥5 d,模型組潰瘍表面仍存在假膜、膿液,六神丸組小鼠潰瘍面假膜基本消失、恢復情況良好,桂林西瓜霜組小鼠基本愈合。結果表明,六神丸可以改善氫氧化鈉誘導的口腔潰瘍病理狀態(tài)并在一定程度上促進恢復,見圖2。

    圖2 六神丸對小鼠口腔潰瘍部位組織病理變化的影響Fig.2 Effect of Liushen Pills on pathological changes of oral ulcer in mice

    3.3 六神丸對小鼠口腔潰瘍等級評分的影響

    根據(jù)潰瘍表面感染情況分級、評分規(guī)則,造模前模型組、六神丸組、桂林西瓜霜組小鼠口腔潰瘍感染評分無顯著性差異;在給藥第1、3、5 天,與模型組比較,六神丸組和桂林西瓜霜組小鼠口腔潰瘍等級評分均顯著減?。≒<0.05)。此外,六神丸組和桂林西瓜霜組小鼠的治愈率明顯高于模型組(P<0.05),見表1。結果提示六神丸可以顯著加快氫氧化鈉誘導的口腔潰瘍的愈合作用。

    表1 六神丸治療小鼠口腔潰瘍的等級評分和治愈率(,n=8)Table 1 Grade scores and cure rate of oral ulcers treated by Liushen Pills in mice (,n=8)

    表1 六神丸治療小鼠口腔潰瘍的等級評分和治愈率(,n=8)Table 1 Grade scores and cure rate of oral ulcers treated by Liushen Pills in mice (,n=8)

    與對照組比較:*P<0.05;與模型組比較:#P<0.05*P <0.05 vs control group;#P <0.05 vs model group

    3.4 六神丸對口腔潰瘍小鼠血液中IL-6、IL-8 水平的影響

    與對照組比較,模型組小鼠血清中IL-6、IL-8水平顯著升高(P<0.05)。與模型組比較,六神丸組和桂林西瓜霜組小鼠血清中IL-6 水平顯著降低,六神丸組小鼠血清中的IL-8 水平顯著下降(P<0.05),而桂林西瓜霜組小鼠的IL-8 水平無顯著性差異,見圖3。結果提示,六神丸可以降低口腔潰瘍小鼠血清中IL-6、IL-8 炎癥因子的水平,可能是其治療氫氧化鈉誘導的口腔潰瘍的作用機制之一。

    圖3 六神丸對口腔潰瘍小鼠血清中IL-6、IL-8 水平的影響(,n=8)Fig.3 Effect of Liushen Pills on serum IL-6 and IL-8 levels in oral ulcer mice (,n=8)

    3.5 六神丸對口腔潰瘍小鼠口腔黏膜ERK1/2 磷酸化水平的影響

    與對照組比較,模型組小鼠口腔黏膜組織中ERK1/2 磷酸化水平明顯升高,但總ERK1/2 沒明顯變化,桂林西瓜霜組和六神丸組小鼠口腔黏膜組織中ERK1/2 磷酸化水平明顯降低,六神丸組降低幅度較桂林西瓜霜組明顯,而桂林西瓜霜并未引起模型小鼠口腔黏膜組織中總的ERK1/2 水平,見圖4。

    圖4 六神丸對口腔潰瘍小鼠血清中ERK1/2 磷酸化水平的影響Fig.4 Effect of Liushen Pills on ERK1/2 phosphorylation in serum of oral ulcer mice

    4 討論

    口腔潰瘍是臨床上常見的口腔疾病,近年來該病的患病率呈顯著的上升趨勢。其發(fā)病機制至今尚未完全清楚,口腔潰瘍的發(fā)病誘因比較多,包括但不限于遺傳因素、維生素缺乏、精神壓力與內(nèi)分泌紊亂、系統(tǒng)性疾病、創(chuàng)傷等[8]。臨床中以促進潰瘍創(chuàng)面愈合,縮短康復周期,防止復發(fā)等作為主要治療原則?,F(xiàn)有針對口腔潰瘍治療的專一、特效方法仍然有待探索。傳統(tǒng)的方法如給予維生素C,可一定程度促進瘡面愈合;噴涂西瓜霜粉末有清熱解毒,消腫止痛的功效,但治療效果受限,不利于快速康復[9]。除此之外還有抗菌類的藥物,但是在實際臨床應用中都存在一定的缺陷,如會產(chǎn)生耐藥性、對真菌感染無效且伴有顯著的不良反應、停藥后容易復發(fā)等諸多問題。針對上述的各種情況,在中醫(yī)學理論中有著完整的論述和治療方向??谇粷冊谥嗅t(yī)學中又稱“口瘡”,其發(fā)生原因的闡述與現(xiàn)代的醫(yī)學研究較為相近。但是在治療方法上以清熱解毒、祛腐生肌、消腫止痛為主要原則。

    六神丸來源于《雷允上誦芬堂方》,是我國著名的傳統(tǒng)國藥精粹。六神丸具有清熱解毒、消腫止痛、斂瘡生肌之功效,以及無論內(nèi)服、外敷,對紅腫癰癤、口咽糜爛等癥均有奇效[10],這都符合前文所述對于口腔潰瘍的治療原則。這提示了可以進一步探索六神丸對于口腔潰瘍的療效。有臨床報道[11-12],六神丸與多種藥物聯(lián)合使用對各類型的口腔潰瘍患者具有較好的治療效果,對口腔黏膜損傷有一定的保護作用。研究表明六神丸具有很好的抑制炎癥和鎮(zhèn)痛效果,對非感染性和感染性炎癥均具有良好的抑制作用[13],且對于口腔內(nèi)黏膜的治療,采用含服給藥方式的效果比傳統(tǒng)給藥方式更突出,藥物有效濃度持續(xù)時間更長,對人體的不良反應也更小。

    本研究結果顯示,與模型組相比,六神丸組與桂林西瓜霜組小鼠的體質(zhì)量顯著增高,表明六神丸通過對小鼠口腔潰瘍感染處的鎮(zhèn)痛作用,減輕潰瘍所帶來的疼痛感對小鼠進食、情緒等方面的影響,進而可降低口腔潰瘍對小鼠體質(zhì)量的影響,也提示六神丸可以緩解進食、正常生理活動下因潰瘍面的造成的疼痛、改善小鼠精神狀態(tài)、促進體質(zhì)量的恢復。多項實驗研究均采用潰瘍面積大小或者愈合時間作為衡量指標[10,14-16]。本研究采用潰瘍表面感染分級作為評價指標,以此對數(shù)據(jù)進行初步的量化處理,使結果更具直觀性和對比性。結果顯示,治療第5 天,六神丸組和桂林西瓜霜組小鼠的口腔潰瘍等級評分顯著低于模型組。

    急性的創(chuàng)傷可以導致口腔黏膜上皮水腫和早期炎癥細胞浸潤[9],故小鼠血清中的炎性因子如IL-6、IL-8 在口腔潰瘍的發(fā)生中扮演著重要的角色。其中IL-6 能夠促進機體釋放多種炎癥因子,從而造成炎性損傷[17];IL-8 能夠促進機體巨噬細胞釋放多種趨化因子,導致機體的局部炎癥反應,從而引起黏膜損傷[18]。結果顯示,與模型組相比,六神丸組與桂林西瓜霜組小鼠血清IL-6、IL-8 水平顯著降低。實驗造模成功小鼠會出現(xiàn)高炎癥狀態(tài),六神丸可以通過抗炎作用對小鼠口腔潰瘍起到顯著的保護作用。ERK1/2 是MAPK 蛋白家族成員之一,是調(diào)節(jié)正常細胞增殖、存活和分化的關鍵信號通路。本研究顯示,六神丸組小鼠口腔黏膜組織中ERK1/2 磷酸化水平明顯降低,表明六神丸可以通過降低ERK1/2 磷酸化水平調(diào)控正常細胞增殖,保護黏膜細胞、緩解潰瘍損傷,促進小鼠恢復。

    綜上所述,六神丸能緩解口腔潰瘍小鼠口腔組織損傷,抑制炎性因子的釋放,促進小鼠恢復,其對小鼠的療效觀察較為滿意,提供了一定的實驗基礎和理論依據(jù),具有良好的應用前景。

    利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突

    猜你喜歡
    西瓜霜六神丸口腔潰瘍
    三金牌桂林西瓜霜廣告
    新中醫(yī)(2024年7期)2024-04-16 12:26:54
    三金牌桂林西瓜霜廣告
    新中醫(yī)(2024年3期)2024-03-07 09:47:24
    三金牌桂林西瓜霜
    新中醫(yī)(2023年19期)2023-10-18 08:47:46
    三金牌桂林西瓜霜廣告
    新中醫(yī)(2023年15期)2023-08-17 09:05:08
    六神丸聯(lián)合鹽酸米諾環(huán)素片治療2型糖尿病并發(fā)牙周炎的臨床觀察
    重視六神丸的合理使用
    外敷加內(nèi)服六神丸治帶狀皰疹好
    反復口腔潰瘍,是可忍孰不可忍
    補充維C治不了口腔潰瘍
    六神丸外敷治8種病
    日韩中文字幕欧美一区二区| 女同久久另类99精品国产91| 色噜噜av男人的天堂激情| 九九热线精品视视频播放| 免费搜索国产男女视频| 成人18禁在线播放| 岛国在线观看网站| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 国产亚洲欧美在线一区二区| 国产欧美日韩一区二区精品| 国产伦精品一区二区三区四那| 一个人看的www免费观看视频| 国产真实伦视频高清在线观看 | 国产一区在线观看成人免费| 99国产精品一区二区蜜桃av| 久久伊人香网站| 日韩精品中文字幕看吧| av欧美777| 一夜夜www| 亚洲成a人片在线一区二区| a级一级毛片免费在线观看| 一级黄色大片毛片| 国产精品免费一区二区三区在线| 高清毛片免费观看视频网站| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 免费av不卡在线播放| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 夜夜爽天天搞| 亚洲天堂国产精品一区在线| 欧美日韩黄片免| 宅男免费午夜| 精品一区二区三区视频在线 | a级毛片a级免费在线| 久久久国产成人免费| 日本一本二区三区精品| 日韩欧美 国产精品| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 性色avwww在线观看| 在线观看免费午夜福利视频| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 日本精品一区二区三区蜜桃| 99热只有精品国产| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 91在线精品国自产拍蜜月 | 欧美三级亚洲精品| 国产精品影院久久| 99久久精品热视频| 国产三级黄色录像| 69av精品久久久久久| 久99久视频精品免费| 亚洲欧美精品综合久久99| 精品国内亚洲2022精品成人| 国产毛片a区久久久久| 我的老师免费观看完整版| 国产真实伦视频高清在线观看 | 在线十欧美十亚洲十日本专区| 亚洲中文字幕日韩| 最好的美女福利视频网| 国产伦人伦偷精品视频| 成人18禁在线播放| 我的老师免费观看完整版| 十八禁网站免费在线| 给我免费播放毛片高清在线观看| 国产伦精品一区二区三区四那| 中文字幕av成人在线电影| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 国产中年淑女户外野战色| 中文字幕高清在线视频| 一本久久中文字幕| 天堂网av新在线| 国产一级毛片七仙女欲春2| 99精品欧美一区二区三区四区| 亚洲av免费高清在线观看| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 亚洲一区二区三区色噜噜| 色综合亚洲欧美另类图片| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 欧美国产日韩亚洲一区| 一级黄色大片毛片| 久久香蕉国产精品| 午夜激情福利司机影院| 国产精品亚洲美女久久久| 色在线成人网| 最近最新免费中文字幕在线| 怎么达到女性高潮| 亚洲真实伦在线观看| 欧美一区二区国产精品久久精品| 老司机午夜福利在线观看视频| 国产精品乱码一区二三区的特点| 最新中文字幕久久久久| 欧美乱妇无乱码| 脱女人内裤的视频| 亚洲成人精品中文字幕电影| 亚洲精品影视一区二区三区av| av黄色大香蕉| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 成年女人永久免费观看视频| 在线看三级毛片| 国产伦一二天堂av在线观看| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 亚洲国产色片| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 男人舔女人下体高潮全视频| 男人的好看免费观看在线视频| 天堂网av新在线| 午夜福利高清视频| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 欧美丝袜亚洲另类 | 少妇的逼水好多| 日韩欧美国产一区二区入口| 啪啪无遮挡十八禁网站| 啦啦啦韩国在线观看视频| 亚洲 国产 在线| 极品教师在线免费播放| 精品久久久久久久久久久久久| 午夜两性在线视频| 一个人免费在线观看的高清视频| 内地一区二区视频在线| 国产老妇女一区| 91麻豆精品激情在线观看国产| 精品免费久久久久久久清纯| 亚洲av成人精品一区久久| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 日本黄大片高清| 国产欧美日韩一区二区三| 精品久久久久久久毛片微露脸| 亚洲五月天丁香| 一级作爱视频免费观看| 成熟少妇高潮喷水视频| 啦啦啦韩国在线观看视频| 国产乱人伦免费视频| 欧美又色又爽又黄视频| 波多野结衣高清作品| 天天躁日日操中文字幕| aaaaa片日本免费| 国产精品永久免费网站| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 身体一侧抽搐| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 在线观看美女被高潮喷水网站 | 国产黄a三级三级三级人| 国产亚洲av嫩草精品影院| 日韩大尺度精品在线看网址| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 最近最新免费中文字幕在线| 亚洲午夜理论影院| 久久精品国产清高在天天线| av女优亚洲男人天堂| 欧美日本视频| av欧美777| 欧美成狂野欧美在线观看| 少妇的逼水好多| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 午夜老司机福利剧场| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 欧美又色又爽又黄视频| 亚洲精品久久国产高清桃花| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 又粗又爽又猛毛片免费看| 亚洲av第一区精品v没综合| 亚洲精品乱码久久久v下载方式 | 90打野战视频偷拍视频| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 12—13女人毛片做爰片一| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 亚洲av成人av| 90打野战视频偷拍视频| 欧美色视频一区免费| 国产久久久一区二区三区| 国产精品99久久久久久久久| 我的老师免费观看完整版| 少妇丰满av| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 欧美一级毛片孕妇| 亚洲国产欧美网| 在线天堂最新版资源| 婷婷六月久久综合丁香| 免费看美女性在线毛片视频| 观看免费一级毛片| 精品久久久久久,| 国产精品 国内视频| 亚洲人成网站高清观看| eeuss影院久久| 一本一本综合久久| 少妇熟女aⅴ在线视频| 久久精品国产清高在天天线| aaaaa片日本免费| 黄色成人免费大全| 老汉色av国产亚洲站长工具| 色av中文字幕| 神马国产精品三级电影在线观看| 青草久久国产| 婷婷亚洲欧美| 久久久精品欧美日韩精品| 欧美中文综合在线视频| 午夜福利在线在线| 午夜免费激情av| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 成年人黄色毛片网站| 韩国av一区二区三区四区| 丰满的人妻完整版| 国产69精品久久久久777片| 亚洲成人免费电影在线观看| 一夜夜www| 高潮久久久久久久久久久不卡| 日本与韩国留学比较| www.www免费av| netflix在线观看网站| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 在线观看免费午夜福利视频| 日本熟妇午夜| 国产伦精品一区二区三区视频9 | 久久久久久久久中文| 热99在线观看视频| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 久久伊人香网站| 亚洲成人久久性| 亚洲av免费在线观看| 欧美色视频一区免费| 免费看光身美女| 五月玫瑰六月丁香| 国产精品亚洲av一区麻豆| 欧美三级亚洲精品| 99久久无色码亚洲精品果冻| 在线观看舔阴道视频| 91麻豆精品激情在线观看国产| 99久久精品国产亚洲精品| 女同久久另类99精品国产91| 69av精品久久久久久| 可以在线观看毛片的网站| 亚洲片人在线观看| 日本黄色片子视频| 成人国产一区最新在线观看| 嫁个100分男人电影在线观看| 免费av观看视频| 国产免费av片在线观看野外av| 国产麻豆成人av免费视频| av天堂中文字幕网| 性色av乱码一区二区三区2| 亚洲人成网站高清观看| 他把我摸到了高潮在线观看| 免费看日本二区| 我的老师免费观看完整版| 91在线精品国自产拍蜜月 | 亚洲欧美一区二区三区黑人| 欧美最黄视频在线播放免费| 他把我摸到了高潮在线观看| 欧美成人免费av一区二区三区| 精品一区二区三区人妻视频| 在线观看午夜福利视频| 成年版毛片免费区| 日韩欧美免费精品| 9191精品国产免费久久| 欧美黄色片欧美黄色片| 99久久成人亚洲精品观看| 国产av在哪里看| 男人和女人高潮做爰伦理| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 听说在线观看完整版免费高清| 精品一区二区三区av网在线观看| 少妇丰满av| 亚洲人与动物交配视频| 亚洲成人久久性| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 国产伦精品一区二区三区四那| 99久久精品热视频| 欧美另类亚洲清纯唯美| 此物有八面人人有两片| 精品一区二区三区视频在线 | 麻豆成人午夜福利视频| 在线观看免费视频日本深夜| 啪啪无遮挡十八禁网站| 国产探花极品一区二区| 综合色av麻豆| 一级毛片女人18水好多| 亚洲精品色激情综合| 婷婷丁香在线五月| 91av网一区二区| 女警被强在线播放| 亚洲成人久久性| 成人无遮挡网站| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 免费看美女性在线毛片视频| 看黄色毛片网站| 欧美黑人欧美精品刺激| 日本在线视频免费播放| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 国产麻豆成人av免费视频| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 最近最新免费中文字幕在线| 国产毛片a区久久久久| 一个人免费在线观看的高清视频| 成人欧美大片| 麻豆国产97在线/欧美| 久久伊人香网站| 91av网一区二区| 国产麻豆成人av免费视频| 国产午夜福利久久久久久| 亚洲国产精品成人综合色| 国产伦在线观看视频一区| 国产一区二区激情短视频| 国产 一区 欧美 日韩| 亚洲片人在线观看| 成人亚洲精品av一区二区| 国产男靠女视频免费网站| 成年人黄色毛片网站| 欧美日韩精品网址| 国产高清有码在线观看视频| 日韩国内少妇激情av| 久久久久久国产a免费观看| 男女那种视频在线观看| 免费电影在线观看免费观看| 久久人妻av系列| 一a级毛片在线观看| 日本黄色片子视频| 人人妻人人澡欧美一区二区| 免费在线观看亚洲国产| 日韩精品青青久久久久久| 1024手机看黄色片| 12—13女人毛片做爰片一| 久久性视频一级片| 久久精品91蜜桃| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 少妇人妻一区二区三区视频| 国产高潮美女av| 热99在线观看视频| 久久中文看片网| 午夜福利在线观看吧| 久久久久精品国产欧美久久久| 我的老师免费观看完整版| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 国产v大片淫在线免费观看| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 久久这里只有精品中国| 午夜免费激情av| 午夜免费男女啪啪视频观看 | 亚洲av免费在线观看| av片东京热男人的天堂| 欧美激情久久久久久爽电影| 国产精品,欧美在线| 亚洲成人久久爱视频| 欧美+日韩+精品| 亚洲,欧美精品.| 99久久成人亚洲精品观看| 色噜噜av男人的天堂激情| 日本黄色片子视频| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区 | 日韩高清综合在线| 国产视频一区二区在线看| 69av精品久久久久久| 日日夜夜操网爽| 国产真人三级小视频在线观看| 国产成人影院久久av| 99热精品在线国产| 精品久久久久久,| 亚洲精品久久国产高清桃花| 免费一级毛片在线播放高清视频| 亚洲精品日韩av片在线观看 | 国产成人a区在线观看| 国产精品影院久久| 欧美黑人巨大hd| 可以在线观看毛片的网站| 美女免费视频网站| 午夜精品在线福利| 老司机深夜福利视频在线观看| 他把我摸到了高潮在线观看| 国产中年淑女户外野战色| 欧美精品啪啪一区二区三区| 亚洲av美国av| 又爽又黄无遮挡网站| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 美女高潮的动态| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 国产成人aa在线观看| 91久久精品电影网| 成人av在线播放网站| 身体一侧抽搐| 久99久视频精品免费| 大型黄色视频在线免费观看| 精品无人区乱码1区二区| 91字幕亚洲| 亚洲成人久久爱视频| 亚洲 国产 在线| 国产成人aa在线观看| 久久精品人妻少妇| 免费在线观看亚洲国产| 久久人人精品亚洲av| 国产69精品久久久久777片| 男女午夜视频在线观看| 国产精品久久久久久久久免 | 99热只有精品国产| 怎么达到女性高潮| 麻豆国产97在线/欧美| 成人欧美大片| av在线天堂中文字幕| 国产精品亚洲美女久久久| 国产伦人伦偷精品视频| 一个人看的www免费观看视频| 老鸭窝网址在线观看| 婷婷精品国产亚洲av| 性色avwww在线观看| 午夜两性在线视频| 国产欧美日韩一区二区精品| 神马国产精品三级电影在线观看| 最新在线观看一区二区三区| 男人舔女人下体高潮全视频| 国产精品永久免费网站| 国产精品一区二区三区四区久久| 啦啦啦韩国在线观看视频| 久久香蕉国产精品| 韩国av一区二区三区四区| 叶爱在线成人免费视频播放| 窝窝影院91人妻| 男女午夜视频在线观看| 一a级毛片在线观看| 免费看十八禁软件| 国产亚洲精品综合一区在线观看| 国产一区二区在线观看日韩 | 国产v大片淫在线免费观看| 嫩草影视91久久| 国产成人影院久久av| 午夜免费男女啪啪视频观看 | 黄色视频,在线免费观看| 天堂影院成人在线观看| 午夜影院日韩av| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 黄色成人免费大全| 超碰av人人做人人爽久久 | 中文字幕av成人在线电影| 最近最新免费中文字幕在线| 国产亚洲精品一区二区www| 亚洲激情在线av| 色视频www国产| 一区二区三区高清视频在线| 欧美日韩国产亚洲二区| 我要搜黄色片| 欧美最新免费一区二区三区 | 热99re8久久精品国产| 老熟妇仑乱视频hdxx| 午夜激情福利司机影院| 国产一区二区在线观看日韩 | 国产一区二区在线观看日韩 | 18禁黄网站禁片免费观看直播| 亚洲不卡免费看| 88av欧美| 久久精品国产综合久久久| 51午夜福利影视在线观看| 亚洲专区国产一区二区| 欧美色视频一区免费| 欧美又色又爽又黄视频| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 久久久成人免费电影| 日本一本二区三区精品| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 99久久九九国产精品国产免费| 成人无遮挡网站| 色哟哟哟哟哟哟| 在线看三级毛片| 亚洲真实伦在线观看| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 免费在线观看影片大全网站| 国产三级中文精品| 丰满乱子伦码专区| 亚洲天堂国产精品一区在线| 日韩欧美 国产精品| 91久久精品国产一区二区成人 | 老熟妇乱子伦视频在线观看| 乱人视频在线观看| 99热精品在线国产| 深夜精品福利| 午夜久久久久精精品| 色噜噜av男人的天堂激情| 免费看日本二区| 午夜影院日韩av| 亚洲欧美激情综合另类| 日韩精品青青久久久久久| 亚洲成人久久爱视频| 不卡一级毛片| 男插女下体视频免费在线播放| 又紧又爽又黄一区二区| 午夜福利在线观看吧| 欧美最新免费一区二区三区 | 久久精品影院6| 真实男女啪啪啪动态图| 丰满人妻一区二区三区视频av | 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 国产伦人伦偷精品视频| 一级毛片高清免费大全| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 免费看日本二区| 日本五十路高清| 热99re8久久精品国产| 嫩草影视91久久| 午夜激情欧美在线| 国产乱人视频| 国产成人aa在线观看| 国产乱人视频| 美女 人体艺术 gogo| 精品电影一区二区在线| 午夜激情福利司机影院| 日本免费一区二区三区高清不卡| 久久久国产成人免费| 国产一区二区三区视频了| 桃红色精品国产亚洲av| 欧美日韩国产亚洲二区| 午夜免费观看网址| 最近最新中文字幕大全电影3| 啦啦啦免费观看视频1| 99精品久久久久人妻精品| 日本黄大片高清| 熟女人妻精品中文字幕| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 久久九九热精品免费| 亚洲电影在线观看av| 18美女黄网站色大片免费观看| 久久久久久九九精品二区国产| 中出人妻视频一区二区| 美女黄网站色视频| 国产伦一二天堂av在线观看| 美女cb高潮喷水在线观看| 国产av在哪里看| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美 | 亚洲国产精品合色在线| 欧美成狂野欧美在线观看| 亚洲成人精品中文字幕电影| 国产精品一区二区免费欧美| 深爱激情五月婷婷| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 国产欧美日韩一区二区三| 欧美高清成人免费视频www| 国产精品久久视频播放| 国产精品影院久久| 亚洲天堂国产精品一区在线| 俄罗斯特黄特色一大片| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 首页视频小说图片口味搜索| 国产精品一区二区三区四区久久| 99国产精品一区二区三区| 久久午夜亚洲精品久久| 亚洲成人中文字幕在线播放| 99精品在免费线老司机午夜| 99久久无色码亚洲精品果冻| 97碰自拍视频| 欧美大码av| 偷拍熟女少妇极品色| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 欧美黄色淫秽网站| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 国内精品一区二区在线观看| 欧美日韩一级在线毛片| 草草在线视频免费看| 免费av观看视频| 久久久久九九精品影院| 亚洲精品日韩av片在线观看 | 91麻豆精品激情在线观看国产| 日韩欧美在线乱码| 嫁个100分男人电影在线观看| 无遮挡黄片免费观看| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 亚洲av熟女| 又粗又爽又猛毛片免费看| 久久久久精品国产欧美久久久| av在线天堂中文字幕| 国产午夜福利久久久久久| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 国产成人福利小说| 免费av不卡在线播放| 国产日本99.免费观看| 18禁国产床啪视频网站| 国产成年人精品一区二区| 高潮久久久久久久久久久不卡| 久久6这里有精品| 中文字幕av成人在线电影| av黄色大香蕉| 超碰av人人做人人爽久久 | 99国产精品一区二区蜜桃av| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 久久伊人香网站| 叶爱在线成人免费视频播放| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 色综合欧美亚洲国产小说| 有码 亚洲区| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 美女高潮的动态| 少妇的逼好多水| 精品福利观看| 色视频www国产| 少妇的逼好多水| 波野结衣二区三区在线 | 国产爱豆传媒在线观看| 高清在线国产一区| 香蕉丝袜av| 久久久久久九九精品二区国产| 欧美国产日韩亚洲一区| 我要搜黄色片| 久久久久久九九精品二区国产| 成人18禁在线播放| 欧美日韩乱码在线| 精品人妻偷拍中文字幕| 久久久久精品国产欧美久久久| 午夜亚洲福利在线播放| 亚洲专区中文字幕在线| 观看免费一级毛片| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 高潮久久久久久久久久久不卡| 天天躁日日操中文字幕| 亚洲自拍偷在线| 99久久精品一区二区三区| 一区二区三区免费毛片| 亚洲美女黄片视频|