一例關(guān)于羊細(xì)菌性腸炎的流行病學(xué)調(diào)查報告

張育紅

羊群在養(yǎng)殖管理期間經(jīng)常會出現(xiàn)各種疫病，羊腸炎是一種常見、多發(fā)性的疫病，根據(jù)發(fā)病原因可以將其分為原發(fā)性腸炎和繼發(fā)性腸炎，原發(fā)性腸炎致病原因大多為養(yǎng)殖環(huán)境的問題導(dǎo)致的，而繼發(fā)性羊腸炎的發(fā)病原因通常比較復(fù)雜，并且具有一定的傳染性。羊腸炎在診斷防治期間，原發(fā)性羊腸炎的臨床癥狀較為簡單，易于診斷，對癥治療即可。但是繼發(fā)性腸炎除了應(yīng)用臨床診斷之外，為了提升診斷的精準(zhǔn)性，還需要采取實驗室診斷才能夠分析出致病原，從而對癥治療。2021 年7 月23 日，青海省同仁市地區(qū)畜牧獸醫(yī)單位辦公室人員接到當(dāng)?shù)啬承⌒脱蛉吼B(yǎng)殖場負(fù)責(zé)人反映，此養(yǎng)殖場內(nèi)共計存欄羊只82 只，自7 月18 日起，有28 只羊相繼開始了不同程度的腹瀉癥狀，自行進(jìn)行治療，連續(xù)治療2～3 天后無較為顯著的療效，并且患病羊只還出現(xiàn)死亡的現(xiàn)象。在收到羊只疫病的相關(guān)報告信息后，青海省同仁市畜牧獸醫(yī)站快速反應(yīng)，及時派流行病學(xué)調(diào)查的專業(yè)技術(shù)人員及當(dāng)?shù)氐墨F醫(yī)專業(yè)技術(shù)人員一起對此起羊群腹瀉疾病開展現(xiàn)場緊急流行病學(xué)的調(diào)查和分析，通過對當(dāng)?shù)丨h(huán)境觀察、患病羊只臨床癥狀表現(xiàn)、致死羊只的剖檢分析、現(xiàn)場養(yǎng)殖工作人員的詢問以及采樣送至實驗室診斷等操作。最后將此起羊群腹瀉疾病的致病原因分析為是由于近期氣候環(huán)境不良、飼養(yǎng)管理條件差、以及養(yǎng)殖戶的自身技術(shù)經(jīng)驗不足導(dǎo)致羊群出現(xiàn)細(xì)菌性的腸炎?，F(xiàn)將本次羊群腹瀉的流行病學(xué)調(diào)查情況報告如下。

一、羊群腹瀉基本情況

1、現(xiàn)場詢問基本情況

依照養(yǎng)殖場負(fù)責(zé)人的反應(yīng)，本養(yǎng)殖場共有羊只82 只，自2022 年7 月18 日起，在養(yǎng)殖場內(nèi)相繼有12 只羊出現(xiàn)了腹瀉的癥狀，截止7 月18 日共有28 只羊出現(xiàn)患病。如圖1

圖1 該養(yǎng)殖場羊只患病數(shù)據(jù)

該養(yǎng)殖場羊只的排泄物顏色為褐色、稀便，內(nèi)容物無血絲，患病羊只的體表溫度在38℃～39℃之間?；几篂a的羊只大多出現(xiàn)脫水、消瘦、虛弱的癥狀，極個別的腹瀉羊只伴有流淚、流鼻涕的現(xiàn)象。觀察圖1，7 月20 日，距離首只患病羊只發(fā)病的第3 天，出現(xiàn)了1 只患病羊只死亡的現(xiàn)象，7 月22 日，距離首只患病羊只發(fā)病的第5 天清晨，出現(xiàn)1 只患病羊只死亡，7 月23 日，距離首只患病羊只發(fā)病的第6 天，出現(xiàn)1 只患病羊只死亡。截止2021年的7 月23 日，養(yǎng)殖場內(nèi)的發(fā)病羊只已經(jīng)增加至28 只，死亡患病羊只共3 只，發(fā)病情況呈現(xiàn)上升的趨勢。

此養(yǎng)殖戶的羊只養(yǎng)殖模式為放養(yǎng)與圈養(yǎng)結(jié)合的模式，圈養(yǎng)位置位于同仁市加吾鄉(xiāng)加吾崗村自家庭院中，放養(yǎng)位置在村西120m 處草地。該養(yǎng)殖場對成年羊只通常不飼喂干飼料，羔羊的飼喂少量的飼料，飼料在當(dāng)?shù)孬F藥店自行購買。購買后不進(jìn)行大量存放，購買后一個月內(nèi)喂食完畢，再進(jìn)行購入。至2021 年以來，本養(yǎng)殖場沒有開展過外部引進(jìn)羊只，外銷情況暫無，繁殖模式為自繁自養(yǎng)。取食用水為自來水資源，參與養(yǎng)殖活動的飼養(yǎng)人員近三個月未進(jìn)入過其他的養(yǎng)殖場、活畜禽交易市場，沒有跟獸醫(yī)藥銷售工作人員及獸醫(yī)進(jìn)行接觸，無野生動物接觸歷史，同養(yǎng)殖區(qū)域以及其他的養(yǎng)殖場內(nèi)的羊群表現(xiàn)均正常化。

二、現(xiàn)場情況調(diào)查

1、羊舍的基本環(huán)境

此養(yǎng)殖場為當(dāng)?shù)爻Ｒ姷募彝ヰB(yǎng)殖模式，羊舍的位置于自家簡易房，簡易房與自家院子連接，在內(nèi)部共飼養(yǎng)羊只82 只。由于本月陰雨天氣較多，羊舍內(nèi)部的養(yǎng)殖環(huán)境衛(wèi)生條件差，糞土混合潮濕堆積，內(nèi)部地面、墊料出現(xiàn)潮濕霉變?，F(xiàn)場所有羊只混合喂養(yǎng)，羊群夜間休息地點潮濕陰冷，濕度較大。

2、患病羊只臨床癥狀

在羊舍內(nèi)部觀察羊群，發(fā)現(xiàn)該養(yǎng)殖區(qū)域的羊群出現(xiàn)集體偏瘦的現(xiàn)象。患病羊只精神狀態(tài)不良、身形消瘦、毛發(fā)無光澤，且凌亂、取食量較少、發(fā)病嚴(yán)重的患病羊只不取食，觀察其舌苔發(fā)現(xiàn)有增厚、呼氣有異味；觀察患病羊只的排便情況，多數(shù)羊只的糞便為水樣、糊樣，無血便，在排泄物中混合少量的黏液以及脫落腸黏膜組織物。其中有8 只患病羊只觀察其肛門出現(xiàn)松弛，在其肛門周邊有糞便的污染，并且周邊沾滿羊毛，同時伴有大便失禁癥狀。有6 只患病羊只出現(xiàn)體表溫度的上升、呼吸短深急促、眼結(jié)膜位置出現(xiàn)潮紅、發(fā)紺，眼窩位置出現(xiàn)凹陷下去，伴有流淚。發(fā)病羊只的皮膚彈性減差、排尿量少。發(fā)病時間較長，較為嚴(yán)重的患病羊有5 只，其體表溫度降低、四肢無力、臥地不起、精神狀態(tài)沉郁，隨著病情的發(fā)展，其機(jī)體功能出現(xiàn)衰竭，最終倒地抽搐直至死亡。發(fā)病羊只集中在羊群中的成年母羊、妊娠期羊只，極少數(shù)患病羊只出現(xiàn)異食的現(xiàn)象。

3、剖檢診斷分析

取一只具有典型癥狀的患病致死的羊只進(jìn)行剖檢觀察，可以發(fā)現(xiàn)患病羊只的胃部、腸道位置有顯著的病變，腸道黏膜充血嚴(yán)重、伴有腫脹，在黏膜上方還有大小不一的血塊依附。此外，在患病羊只的膽囊黏膜部位也有不同程度的水腫，在心包膜上方有大小不一的出血點，脾臟顏色為紅色或黑紫色，并且伴有顯著的充血、腫大等不良現(xiàn)象。在其腎臟與心外膜之間有針尖大小出血點，部分患病羊只表現(xiàn)出皮下水腫，腸壁位置也存有出血點。

三、實驗室診斷方式

依據(jù)患病羊只所表現(xiàn)出的臨床癥狀及剖檢觀察進(jìn)行分析，初步將其診斷為羊細(xì)菌性腸炎，致病細(xì)菌為沙門氏菌。為了進(jìn)一步的驗證致病原，收集病死羊只的腸系膜淋巴及母羊的分泌物至專業(yè)實驗室進(jìn)行開展實驗室技術(shù)鑒定，從而達(dá)到精確確診的效果。對于疑似的患病羊只，采集其腹瀉病死羊的腸道淋巴、脾臟、膽囊等組織樣品，或收集患病母羊的排泄物及血清等開展實驗室的診斷。

1、使用涂片鏡檢

在實驗室無菌的條件下，將病死羊的腸系黏膜淋巴組織、母羊的分泌物等病料，進(jìn)行涂片鏡檢。運(yùn)用革蘭氏染色、鏡檢兩種方式進(jìn)行觀察?？梢姶思?xì)菌的革蘭氏染色表現(xiàn)為陰性短棒桿菌，菌體的兩側(cè)為鈍圓形、菌體無莢膜、菌株大部分的周邊有鞭毛，少部分無鞭毛，菌株在無外力的作用下，可以自行的進(jìn)行運(yùn)動。

2、分離培養(yǎng)

在實驗室無菌的條件下，將收集到的病死羊膽囊組織、患病母羊的排泄物等病料置于普通的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上進(jìn)行接種觀察，接種后將培養(yǎng)基置于35℃下的恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)進(jìn)行長達(dá)24小時的靜置培養(yǎng)。經(jīng)過24 小時后觀察發(fā)現(xiàn)，在瓊脂培養(yǎng)基上生長出多個中間凸起的圓形菌落，菌落的顏色為無色半透明狀，外表光滑。將菌落挑取后接種置于強(qiáng)選擇性培養(yǎng)基上，置于35℃的恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)。在經(jīng)過一段時間的培養(yǎng)觀察可以發(fā)現(xiàn)，培養(yǎng)基內(nèi)生長出中心部位顏色為黑色的菌落，并且隨著時間的推移，培養(yǎng)基內(nèi)的液體顏色變的渾濁、且均勻。

3、生化鑒定

從普通瓊脂培養(yǎng)基中挑取疑似菌落接種置于三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基內(nèi)，將其放置在恒溫35℃的恒溫箱中進(jìn)行觀察培養(yǎng)24 小時。如果在試管底層產(chǎn)酸產(chǎn)氣或僅為產(chǎn)酸，或者在試管底層產(chǎn)生硫化氫，底層顏色變黑，可以依據(jù)此反應(yīng)判斷出此疫病的感染細(xì)菌為沙門氏菌。

4、熒光抗體檢測方式

使用已經(jīng)消毒后的接種環(huán)接觸到收集的病死羊病料或患病母羊病料制作增菌培養(yǎng)液，將其制成較薄的涂片，將其置于35℃恒溫箱中或者是置于室溫中使其自然晾干。使用甲醛10mL、三氯甲烷30mL、乙醇60mL 充分混合制成固定液，并利用固定液將涂片進(jìn)行長達(dá)5～10 分鐘的固定，隨后使用95%乙醇充分的浸泡清洗，最后自然晾干備用。

在病料涂片上滴入幾滴沙門氏菌熒光抗體，并將其置于盒內(nèi)環(huán)境中處理30 分鐘，環(huán)境溫度控制在35℃。處理結(jié)束后取出濃度為0.01mL/L、pH 值為9.0 的磷酸鹽緩沖液將多余的熒光抗體沖洗掉，隨后使用相同濃度的磷酸鹽緩沖液浸洗10 分鐘，取出后使用蒸餾水再次沖洗，等待其自然晾干后滴入pH 值為9.0的碳酸鹽緩沖甘油，隨后蓋上蓋玻片進(jìn)行封片，置于熒光顯微鏡下進(jìn)行觀察判斷。

為了確保熒光抗體檢測方式的準(zhǔn)確性，在觀察涂片時要觀察至少10 個視野。發(fā)現(xiàn)在涂片內(nèi)有黃綠色的發(fā)亮桿菌，在其他位置有橙黃色的熒光。橙黃色熒光為其他種類的雜菌和無關(guān)雜質(zhì)，而黃綠色的發(fā)亮桿菌為沙門氏菌。

二、調(diào)查結(jié)果

1、現(xiàn)場情況的調(diào)查

①養(yǎng)殖區(qū)域的分布

經(jīng)過技術(shù)人員的現(xiàn)場調(diào)查，該羊養(yǎng)殖場的位置位于青海省同仁市加吾鄉(xiāng)加吾崗村，屬于家庭養(yǎng)殖散戶模式，羊舍為一間大房間所隔離出的三間簡易房，在房子的門口為家庭庭院，也是羊群的日?；顒訁^(qū)域。養(yǎng)殖戶的門口與村村通公路相臨，在村西處120m 處有草地，也是該養(yǎng)殖場的羊群放牧主要地點。

②羊群發(fā)病及死亡基本情況調(diào)查

2022 年7 月18 日該養(yǎng)殖戶在放養(yǎng)羊群時觀察發(fā)現(xiàn)，有12只羊出現(xiàn)拉稀的癥狀、取食量減少、精神沉郁、排泄物為褐色的稀便、伴有血絲、具有脫水的臨床癥狀。發(fā)現(xiàn)羊群患病后，該養(yǎng)殖戶立即至當(dāng)?shù)孬F藥店購買用于治療羊群腹瀉的藥物，由于該養(yǎng)殖戶對化學(xué)藥劑了解不足，其無法準(zhǔn)確的將使用劑量及藥物名稱進(jìn)行復(fù)述。在采取皮下注射治療后，治療效果并不顯著。觀察出現(xiàn)感病癥狀后的第3 天，7 月20 日死亡1 只成年母羊，隨后同羊舍內(nèi)部的羊只表現(xiàn)出陸續(xù)發(fā)病的癥狀，其中發(fā)病最多的為成年羊只和母羊。在此期間，該養(yǎng)殖戶除了在獸藥店自行購買藥劑進(jìn)行皮下注射治療后，并未使用其他措施用于輔助治療。7 月18 日～7 月23 日，共有發(fā)病羊只28 只，死亡羊只3 只，其中死亡2 只母羊、1 只成年羊，發(fā)病概率為34%，病死概率為11%。7 月23 日，同仁市畜牧獸醫(yī)站流行學(xué)調(diào)查技術(shù)人員在對該養(yǎng)殖現(xiàn)場的情況、羊群發(fā)病癥狀、病理觀察及實驗室診斷后，立即對此羊群采取防控管理措施，對于已發(fā)病的羊群實施緊急隔離治療。并且依據(jù)實際的發(fā)病癥狀制定相應(yīng)的治療方案，對癥用藥，截止7月26 日以來，該羊群患病情況得到了基本的控制，并且逐漸好轉(zhuǎn)。

2、追溯流行病學(xué)調(diào)查

依據(jù)羊群患病的流行病學(xué)問詢調(diào)查、現(xiàn)場觀察分析、臨床癥狀資料的查閱及實驗室診斷結(jié)果進(jìn)行分析，排除羊群患大腸桿菌病及小反芻獸疫等可能性。在經(jīng)過當(dāng)?shù)貏游镆卟〉念A(yù)防控制中心人員的分析交流后，診斷為由于當(dāng)月的陰雨天氣較多、該養(yǎng)殖戶在飼喂羊群期間多喂養(yǎng)未經(jīng)充分發(fā)酵的濕草，并且水分含量較多。同時，此養(yǎng)殖戶接觸羊群養(yǎng)殖的時間短，對于飼養(yǎng)技術(shù)了解不夠深入，導(dǎo)致飼養(yǎng)管理出現(xiàn)眾多不規(guī)范的地方，羊舍內(nèi)部衛(wèi)生條件差、濕度大等等因素，造成了本次羊群細(xì)菌性腸炎的發(fā)生。養(yǎng)殖戶在羊群患病后，雖然立即的進(jìn)行購藥治療，但是購買藥品時描述不夠明確，購買藥物不對癥，起不到較好的治療效果。同時，該養(yǎng)殖場內(nèi)羊群生長瘦弱，患病病程較長、機(jī)體素質(zhì)差的羊只后期出現(xiàn)脫水，機(jī)體衰竭致死。

3、應(yīng)用防治管理措施

①緊急措施

對于已經(jīng)患病的羊只需要加強(qiáng)護(hù)理，并且將其立即進(jìn)行隔離治療。對已經(jīng)出現(xiàn)病死的羊只必須采取焚燒、深埋等無害化處理。羊舍內(nèi)部的糞便、被糞便所污染的墊料等要全部清理出，并使用消毒藥劑進(jìn)行全面消毒后深埋無害化處理。對羊舍內(nèi)部的地面、墻壁、工具全部消毒，增強(qiáng)通風(fēng)效果，降低羊舍內(nèi)部濕度。同時，由于該養(yǎng)殖場羊舍空間較小，每天在羊舍內(nèi)部進(jìn)行至少1次的噴霧消毒，連續(xù)消毒1 周，在消毒期間輪換使用至少3 種消毒藥劑。

2、藥物治療措施

對于已患病的羊只使用土霉素注射液治療，依照患病羊只的體重每公斤用藥0.05～0.1mL，注射時采取肌肉注射的方式，每天注射治療1 次，連續(xù)治療3 天。同時，對于已患病的羊只，每天灌服0.2g 胃蛋白酶用于輔助治療。部分羊只出現(xiàn)嚴(yán)重脫水時，可以采取靜脈滴注的方式，使用5%葡萄糖生理鹽水50～80mL、5%碳酸氫鈉30～50mL 充分混合，每天注射1 次，連續(xù)使用3 天。

3、提升日常飼養(yǎng)管理條件

經(jīng)過現(xiàn)場觀察與問詢發(fā)現(xiàn)，在該養(yǎng)殖場內(nèi)飼養(yǎng)管理條件差，而至于不良環(huán)境中的羊群其自身抗病性較低。因此，為了提升羊群的抗病性，避免后續(xù)長期出現(xiàn)不良反應(yīng)或致病，該養(yǎng)殖戶在管理期間，應(yīng)當(dāng)注重對羊舍內(nèi)部的消毒、飼養(yǎng)條件、多為羊群補(bǔ)充礦物質(zhì)、在缺乏草料期間飼喂優(yōu)質(zhì)飼料，從而增強(qiáng)羊群的抗病性，確保羊舍環(huán)境的空氣清新，增強(qiáng)通風(fēng)效果，同時降低空氣濕度水平。該養(yǎng)殖戶在外出放養(yǎng)羊群時，應(yīng)當(dāng)推遲放養(yǎng)的時間，避免羊群在外出取食時食用過多的水分含量過多的青草，從而導(dǎo)致出現(xiàn)致病性腹瀉。

4、重視預(yù)防管理

在開展羊群養(yǎng)殖期間，養(yǎng)殖戶應(yīng)當(dāng)遵循“防重于治、養(yǎng)防并重”的相關(guān)原則，散戶養(yǎng)殖時，如果采取全進(jìn)全出的飼養(yǎng)模式，應(yīng)當(dāng)在管理期間注重生物安全性避免致病原入侵感染。定期對羊群進(jìn)行驅(qū)蟲，避免出現(xiàn)寄生蟲感染，同時依照當(dāng)?shù)氐囊咔榱餍幸?guī)律，做好免疫接種程序，避免出現(xiàn)重大疫病的感染傳播。

三、討論分析

依據(jù)本次疫病的發(fā)生流行學(xué)調(diào)查情況、臨床癥狀分析、剖檢觀察、實驗室診斷及防控措施和治療的效果，綜合判斷為本次疫病的發(fā)生為羊細(xì)菌性腸炎，由感染沙氏門菌所引起的。

1、感病因素分析

依據(jù)上文中的流行病學(xué)調(diào)查數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)本次羊群感染細(xì)菌性腸炎的主要發(fā)病原因有以下幾點；第一，此養(yǎng)殖戶的羊群飼養(yǎng)管理模式為傳統(tǒng)的家庭散養(yǎng)模式，養(yǎng)殖條件相對簡陋，羊舍內(nèi)部的飼養(yǎng)環(huán)境條件衛(wèi)生性差，羊舍濕度大，污染物較多等。第二，該養(yǎng)殖戶家中的羊群其自身營養(yǎng)條件不足，羊群整體體形偏瘦，機(jī)體抗性較差，易出現(xiàn)感病。第三，由于當(dāng)月天氣陰雨天較多，羊群外出放養(yǎng)時食用了較多含水量大的青草，導(dǎo)致羊群出現(xiàn)消化功能異常，增加感病性。

2、應(yīng)對措施

依據(jù)本次該羊群發(fā)病的因素，建議養(yǎng)殖戶后期做好如下管理措施；第一，在飼喂羊群期間，對羊群飼料的蛋白質(zhì)、能量、、礦物質(zhì)、維生素等營養(yǎng)成分的含量進(jìn)行均衡把握，提升飼喂條件，在清晨有露水或雨水的情況下，減少外出散養(yǎng)放牧。第二，確保養(yǎng)殖環(huán)境的衛(wèi)生性，對于羊舍地面應(yīng)當(dāng)做好防潮準(zhǔn)備，屋頂做好隔熱防水，及時清理地面，定期做好消毒工作，確保墊料的干凈衛(wèi)生性。第三，減少對羊群的轉(zhuǎn)群、換料，做好疫病的免疫接種工作，減少應(yīng)激。第四，養(yǎng)殖戶應(yīng)當(dāng)加強(qiáng)自身的養(yǎng)殖技術(shù)學(xué)習(xí)，增強(qiáng)管理技術(shù)水平，做好日常疫病防治，確保養(yǎng)殖的健康可持續(xù)性。