茶樹(shù)精油對(duì)白羽肉雞免疫功能和血清生化指標(biāo)的影響

董淑紅，張海濤，陳永亮，呂顏枝，薛 忠

（徐州生物工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院，江蘇徐州 221006）

為做好動(dòng)物源性食品安全工作，遏制動(dòng)物源細(xì)菌耐藥等問(wèn)題，我國(guó)在2020 年正式實(shí)施飼料禁抗。植物精油是一類從植物中提取的次生代謝物質(zhì)，主要成分是單萜和倍半萜類化合物，以及含有多種生物活性化學(xué)物質(zhì)的苯丙類化合物，具有可揮發(fā)和抗水解（毛紅霞等，2012），無(wú)毒、無(wú)副作用、無(wú)耐藥性、無(wú)殘留等特點(diǎn)，是一種具有發(fā)展前景的天然飼料添加劑（薛萍，2020）。茶樹(shù)精油是植物體內(nèi)的次生代謝產(chǎn)物，儲(chǔ)存于分泌細(xì)胞中，具有揮發(fā)性和芳香氣味，有很強(qiáng)的抑菌和殺菌能力（周洪彬等，2020）。本試驗(yàn)研究日糧中茶樹(shù)精油對(duì)白羽肉雞免疫功能和血清生化指標(biāo)的影響，旨為肉雞安全健康養(yǎng)殖提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 試驗(yàn)用茶樹(shù)精油原液，由天津中澳嘉喜諾生物科技有限公司提供，主要成分為35% 4- 松油醇。試驗(yàn)肉仔雞購(gòu)由徐州益客食品有限公司提供。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)將200 只1 日齡體重相近、健康的愛(ài)拔益加白羽肉雞隨機(jī)分為4 組，每組5 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10 只雞。4 個(gè)處理組分別飼喂基礎(chǔ)日糧（對(duì)照組），基礎(chǔ)日糧+200 mg/kg（試驗(yàn)Ⅰ組）、500 mg/kg（試驗(yàn)Ⅱ組）和800 mg/kg（試驗(yàn)Ⅲ組）的茶樹(shù)精油，試驗(yàn)分為1 ～21 d 和22 ～42 d 兩個(gè)階段，共42 d?；A(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1，茶樹(shù)精油先添加于少量飼料中，攪拌均勻后再逐漸按比例添加，每天現(xiàn)拌現(xiàn)喂。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平（干物質(zhì)基礎(chǔ)）

試驗(yàn)于2022 年9 ～11 月在徐州生物工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院動(dòng)物工程學(xué)院進(jìn)行，試驗(yàn)雞使用立式雞籠飼養(yǎng)，育雛前雞舍徹底清掃、沖刷和消毒，控制舍內(nèi)溫濕度，自然采光和人工照明相結(jié)合，雞群自由采食和飲水，按常規(guī)程序進(jìn)行免疫，每天詳細(xì)記錄雞只行為及飼料消耗等情況。

1.3 測(cè)定指標(biāo)和方法

1.3.1 免疫器官指數(shù) 21 和42 日齡時(shí)，每組隨機(jī)抽取體重相近且健康的肉雞10 只，空腹屠宰后取出脾臟、胸腺和法氏囊，按照公式計(jì)算各免疫器官與體重之間的相對(duì)重量。

免疫器官指數(shù)（g/kg）=免疫器官鮮重（g）/ 活體重（kg）。

1.3.2 免疫球蛋白和溶菌酶 42 日齡，每組隨機(jī)抽取體重相近且健康的肉雞10 只，翅靜脈采血5 mL，12000 轉(zhuǎn)/min 離心1 min 分離血清，后置于-20℃冰箱中保存，采用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）和溶菌酶含量，試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所，各指標(biāo)由徐州市銅山區(qū)家禽技術(shù)指導(dǎo)站協(xié)助完成。

1.3.3 血清生化指標(biāo) 42 日齡時(shí)翅靜脈采血，離心獲得血清后，采用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血清中的總蛋白、白蛋白、球蛋白、尿素氮、堿性磷酸酶、鈣、無(wú)機(jī)磷、甘油三酯和膽固醇的含量。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 20.0軟件進(jìn)行單因子方差分析，采用Duncan's 法進(jìn)行多重比較，試驗(yàn)結(jié)果用“平均值± 標(biāo)準(zhǔn)誤”表示，P＜0.05 表示組間差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 日糧中添加茶樹(shù)精油對(duì)白羽肉雞免疫器官指數(shù)的影響 由表2 可知，21 日齡時(shí)，各試驗(yàn)組肉雞的免疫器官指數(shù)與對(duì)照組相比差異不顯著（P＞0.05）；試驗(yàn)Ⅰ～Ⅲ組42 日齡時(shí)肉雞法氏囊指數(shù)顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），日糧中添加茶樹(shù)精油對(duì)肉雞的脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)差異不顯著（P＞0.05）。

表2 日糧中添加茶樹(shù)精油對(duì)白羽肉雞免疫器官指數(shù)的影響g/kg

2.2 日糧中添加茶樹(shù)精油對(duì)白羽肉雞免疫球蛋白和溶菌酶的影響 由表3 可知，在42 日齡時(shí)，試驗(yàn)Ⅱ組IgA 的含量比對(duì)照組顯著提高1.03mg/mL（P＜0.05），試驗(yàn)Ⅱ組IgG 含量顯著高于對(duì)照組和試驗(yàn)Ⅰ組（P＜0.05），與試驗(yàn)Ⅲ組差異不顯著（P＞0.05）；對(duì)照組和試驗(yàn)各組的IgM 含量和溶菌酶活力差異均不顯著（P＞0.05）。

表3 茶樹(shù)精油對(duì)42d 白羽肉雞免疫球蛋白和溶菌酶的影響

2.3 日糧中添加茶樹(shù)精油對(duì)白羽肉雞血清生化指標(biāo)的影響 由表4 可知，各組肉雞血清總蛋白、白蛋白、總膽紅素、無(wú)機(jī)磷、甘油三酯和膽固醇的含量均差異不顯著（P＞0.05）；試驗(yàn)Ⅰ組球蛋白含量顯著高于試驗(yàn)Ⅱ和Ⅲ組（P＜0.05），與對(duì)照組無(wú)顯著差異（P＞0.05）；試驗(yàn)Ⅱ組尿素氮的含量顯著低于對(duì)照組（P＜0.05）；試驗(yàn)各組的堿性磷酸酶活性和對(duì)照組相比均有提高，其中試驗(yàn)Ⅱ組的堿性磷酸酶活性顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）；試驗(yàn)各組的鈣含量均高于對(duì)照組，其中試驗(yàn)Ⅱ組與對(duì)照組相比差異顯著（P＜0.05）。

表4 日糧中添加茶樹(shù)精油對(duì)白羽肉雞血清生化指標(biāo)的影響

3 討論

3.1 飼料中添加茶樹(shù)精油對(duì)白羽肉雞免疫器官指數(shù)的影響 肉雞免疫器官的發(fā)育指數(shù)是評(píng)價(jià)肉雞免疫器官發(fā)育好壞的重要參考，是宏觀觀測(cè)肉雞免疫功能的重要指標(biāo)（王亞鍇，2015）。研究表明，肉仔雞胸腺和法氏囊指數(shù)在18 日齡時(shí)達(dá)到最大，脾臟在35 日齡達(dá)到最大（王錫樂(lè)等，2004）。Amad 等（2011）研究發(fā)現(xiàn)，日糧中添加植物精油可提高肉仔雞脾臟、腎臟、心臟指數(shù)。肉雞日糧中添加茶樹(shù)精油能促進(jìn)肉雞胸腺、法氏囊、脾臟的發(fā)育，但不同飼喂周期其促進(jìn)作用存在差異。

3.2 茶樹(shù)精油對(duì)白羽肉雞免疫球蛋白和溶菌酶的影響 本研究發(fā)現(xiàn)，不同水平的茶樹(shù)精油能提高白羽肉雞42 日齡時(shí)血清中IgA、IgG、IgM 含量，增強(qiáng)體液免疫機(jī)能。Mathlouthi 等（2012）研究表明，牛至精油對(duì)肉雞42 d 血清IgG 無(wú)顯著影響，但有提高趨勢(shì)。朱曉磊（2014）研究發(fā)現(xiàn)，在麻花雞日糧中添加0.25 mg/kg 百里香精油（主要成分為香荊芥酚、百里酚等）可顯著提高肉雞血清IgA、IgG 和IgM 含量。周美玲等（2014）研究發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組相比，紫蘇精油可以顯著提高小鼠免疫血清中溶菌酶含量，說(shuō)明植物精油可以提高機(jī)體的免疫水平，增強(qiáng)肉雞的血清殺菌能力。

3.3 茶樹(shù)精油對(duì)白羽肉雞血清生化指標(biāo)的影響 血清生化指標(biāo)是檢驗(yàn)機(jī)體生理機(jī)能的重要參照，對(duì)臨床診斷具有重要意義（楊恒偉等，2010）。研究表明，日糧中添加適量的百里香精油可顯著提高麻花雞前期血清中總蛋白和球蛋白含量（朱曉磊，2014），在本試驗(yàn)中，各試驗(yàn)組的總蛋白與白蛋白含量均有增加趨勢(shì)。孫海濤等（2018）研究發(fā)現(xiàn)，牛至油能顯著降低血清尿素氮含量，本試驗(yàn)結(jié)果為尿素氮含量在添加油茶樹(shù)精油后有降低，但無(wú)顯著降低趨勢(shì)。膽紅素是肝臟代謝的重要物質(zhì)，如果肝細(xì)胞功能障礙會(huì)導(dǎo)致血液中的膽紅素升高（夏夢(mèng)芳，2017），本試驗(yàn)在日糧中添加茶樹(shù)精油后，試驗(yàn)組膽紅素含量均低于對(duì)照組。堿性磷酸酶由成骨細(xì)胞和肝膽合成分泌，能反映骨組織的新陳代謝情況（張勇等，2016），在本試驗(yàn)中，與對(duì)照組相比，其他各組血清堿性磷酸酶的活性均有提高，說(shuō)明在適當(dāng)劑量下使用茶樹(shù)精油對(duì)肉雞骨骼發(fā)育有一定作用。

4 結(jié)論

茶樹(shù)精油能增強(qiáng)肉雞免疫能力，提高血清中白蛋白與總蛋白的含量，增強(qiáng)血清堿性磷酸酶活性，綜合試驗(yàn)結(jié)果，茶樹(shù)精油在肉雞日糧中適宜添加量為500 mg/kg，可為肉雞應(yīng)用提供參考。