外周血載脂蛋白A1、載脂蛋白B、脂蛋白(a)在頸動脈粥樣硬化斑塊易損性評價中的價值研究

周世敏,曹 雷,孫 悅,丁 偉

(合肥市第八人民醫(yī)院檢驗科,安徽 合肥 238000)

頸動脈粥樣硬化斑塊實際上是全身性動脈粥樣硬化疾病在頸動脈處的表現(xiàn),主要是由于血管內(nèi)膜損傷造成脂質(zhì)、膽固醇、纖維蛋白與鈣質(zhì)沉積形成[1]。易損性斑塊是指在動脈粥樣硬化發(fā)生過程中發(fā)展迅速、具有形成血栓傾向以及可能快速進展成為罪犯斑塊的不穩(wěn)定性的高危斑塊,容易誘發(fā)急性心腦血管事件,嚴(yán)重威脅患者生命安全[2]。目前臨床在診斷頸動脈斑塊及其性質(zhì)方面缺乏有效的實驗室相關(guān)檢查指標(biāo),常應(yīng)用超聲造影檢查、CT血管造影等影像學(xué)檢查,但由于此類檢查有創(chuàng)以及造影劑的潛在不良反應(yīng)限制其應(yīng)用[3]。因此,需探究一種安全且有效的方法對頸動脈粥樣硬化斑塊的易損性進行準(zhǔn)確評估。載脂蛋白A1(Apolipoprotein A1,ApoA1)可將外周細(xì)胞多余的膽固醇逆運行至肝臟及周圍組織經(jīng)代謝排出體外,影響血脂的利用和代謝[4],從而參與頸動脈粥樣硬化斑塊易損性的發(fā)展過程。載脂蛋白B(Apolipoprotein B,ApoB)可表示動脈粥樣硬化的總粒子數(shù),被氧化的ApoB會釋放大量炎性產(chǎn)物蔓延至動脈粥樣硬化的動脈壁上,加快頸動脈粥樣硬化斑塊易損性的進展[5]。脂蛋白(a)[Lipoprotein (a),LP(a)]可促進平滑肌細(xì)胞增殖,抑制纖溶系統(tǒng)活性,參與頸動脈粥樣硬化斑塊的發(fā)生和發(fā)展[6]。鑒于此,本研究檢測頸動脈粥樣硬化患者外周血ApoA1、ApoB、LP(a)表達水平,分析三者單獨及聯(lián)合對頸動脈粥樣硬化斑塊易損性的評估價值,以期為臨床防治心腦血管疾病提供參考依據(jù),現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本院2020年8月至2022年8月收治的156例頸動脈粥樣硬化患者作為疾病組,另選取150例同期在本院體檢的健康人群作為對照組。疾病組男96例,女60例;年齡40～85歲,平均(59.86±9.12)歲,體重指數(shù)(BMI)為19.34～29.34 kg/m2,平均(24.03±1.74)kg/m2;頸動脈狹窄情況:單側(cè)102例,雙側(cè)54例;狹窄程度:輕度狹窄72例,中度狹窄51例,重度狹窄33例。對照組男86例,女64例;年齡41～83歲,平均(58.65±9.37)歲,BMI為19.64～29.01 kg/m2,平均(24.26±1.62)kg/m2;兩組患者性別、年齡、BMI比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(均P>0.05),本研究經(jīng)倫理委員會審核批準(zhǔn)。病例納入標(biāo)準(zhǔn):①臨床診斷為頸動脈粥樣硬化患者;②患者均接受彩色勒多普超聲造影檢查;③患者均簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn):①伴有嚴(yán)重心、肝、腎功能障礙者;②伴有感染或有慢性感染史者;③有心腦血管疾病病史者;④伴有頸部腫塊等器質(zhì)性病變者;⑤超聲造影劑使用禁忌者;⑥伴有呼吸系統(tǒng)合并癥者;⑦惡性腫瘤、動脈炎、梅毒患者;⑧既往行放射性治療者。

1.2 研究方法

1.2.1 頸動脈粥樣硬化斑塊易損性的判定[7]:采取PHILIPS-IU22彩色多普勒超聲進行檢測,受檢者取仰臥位,探查頸內(nèi)動脈顱外段、雙側(cè)頸動脈起始段、中段及分叉部,做出初步判斷。于患者右肘靜脈注入混勻的造影劑,造影劑為六氟化硫凍干粉(批號20201087),實時觀察斑塊情況并采集圖像。根據(jù)超聲圖像將斑塊分為等回聲、高回聲、低回聲以及異質(zhì)回聲斑塊。將異質(zhì)回聲斑塊內(nèi)含有斑塊內(nèi)出血、壞死物質(zhì)、脂質(zhì)成分的斑塊歸為易損性斑塊,將高回聲富含纖維成分或多鈣化的斑塊歸為非易損性斑塊。

1.2.2 ApoA1、ApoB、LP(a)水平檢測:患者均在入院后次日清晨采集空腹靜脈血5 ml,離心后取上清液備用。采用型號AU680和AU5800全自動生化分析儀(美國貝克曼公司),應(yīng)用比濁法測定ApoA1、ApoB、LP(a)表達水平,操作步驟嚴(yán)格按照試劑盒說明書進行。

1.2.3 資料的收集與整理:收集疾病組患者的一般資料,包括性別、年齡、BMI、吸煙史、飲酒史、高血壓史、入院時檢測實驗室指標(biāo)[空腹血糖(FBG)、纖維蛋白原(Fib)、尿酸(UA)、血肌酐(Scr)、C反應(yīng)蛋白(CRP)、總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)、ApoA1、ApoB、LP(a)等]。

1.3 觀察指標(biāo) 比較疾病組和對照組ApoA1、ApoB、LP(a)表達水平;比較非易損斑塊組和易損斑塊組ApoA1、ApoB、LP(a)表達水平;分析影響頸動脈粥樣硬化斑塊易損性的因素,觀察比值比(OR)、95%可信區(qū)間(95%CI)等;分析ApoA1、ApoB、LP(a)表達水平對頸動脈粥樣硬化斑塊易損性的評估價值。

2 結(jié) 果

2.1 疾病組和對照組ApoA1、ApoB、LP(a)表達水平比較 見表1。疾病組ApoA1表達水平低于對照組,ApoB、LP(a)表達水平高于對照組(均P<0.05)。

表1 疾病組和對照組ApoA1、ApoB、LP(a)表達水平比較

2.2 非易損斑塊組和易損斑塊組ApoA1、ApoB、LP(a)表達水平比較 見表2。易損斑塊組ApoA1表達水平低于非易損斑塊組,ApoB、LP(a)表達水平高于非易損斑塊組(均P<0.05)。

表2 非易損斑塊組和易損斑塊組ApoA1、ApoB、LP(a)表達水平比較

2.3 影響頸動脈粥樣硬化斑塊易損性的因素 見表3。易損斑塊組和非易損斑塊組年齡、性別、BMI、飲酒史、吸煙史、高血壓史和FBG、Fib、Scr、TC水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(均P>0.05),易損斑塊組糖尿病史占比和UA、CRP、LDL水平高于非易損斑塊組(均P<0.05)。

表3 影響頸動脈粥樣硬化斑塊易損性的因素

2.4 頸動脈粥樣硬化斑塊易損性的危險因素分析 將2.3中有統(tǒng)計學(xué)差異的資料行Logistics回歸分析,變量賦值見表4。采用向前LR法,結(jié)果顯示有糖尿病史、UA≥447.34 μmol/L、CRP≥13.52 mg/L、LDL≥3.87 mmol/L、ApoA1<1.09 g/L、ApoB≥1.51 g/L、LP(a)≥283.04 mg/L均為頸動脈粥樣硬化斑塊易損性的獨立危險因素(均P<0.05),見表5。

表4 變量賦值

表5 頸動脈粥樣硬化斑塊易損性危險因素的多因素Logistics回歸分析

2.5 ApoA1、ApoB聯(lián)合LP(a)表達水平對頸動脈粥樣硬化斑塊易損性的評估價值 見表6(圖1)。ApoA1、ApoB、LP(a)聯(lián)合評估頸動脈粥樣硬化斑塊易損性的特異度與單獨評估比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(均P>0.05),靈敏度高于單獨評估(χ2=13.016,P<0.001;χ2=9.698,P=0.002;χ2=6.686,P=0.010),AUC也高于單獨評估(Z=2.097,P=0.036;Z=2.475,P=0.013;Z=2.883,P=0.004)。

圖1 ApoA1、ApoB聯(lián)合LP(a)表達水平對頸動脈粥樣硬化斑塊易損性評估價值的ROC曲線

3 討 論

隨著人口老齡化和人們飲食結(jié)構(gòu)改變,頸動脈粥樣硬化發(fā)生率明顯增高[8]。隨著臨床對頸動脈粥樣硬化斑塊的深入研究,發(fā)現(xiàn)易損性斑塊具有斑塊內(nèi)出血、炎性細(xì)胞浸潤、斑塊內(nèi)存在新生血管以及脂質(zhì)核心等特征,且易損斑塊易脫落、破裂,隨著血流流向動脈遠(yuǎn)端,引發(fā)多種心腦血管疾病的發(fā)生[9]。因此及早發(fā)現(xiàn)頸動脈粥樣硬化斑塊的性質(zhì)對于預(yù)防臨床心腦血管疾病的發(fā)生和發(fā)展具有重大意義。

本研究結(jié)果顯示,疾病組ApoA1表達水平低于對照組,ApoB、LP(a)表達水平高于對照組,與張勁草等[10]研究報道一致,提示ApoA1、ApoB、LP(a)表達水平與頸動脈粥樣硬化斑塊的形成關(guān)系密切。本研究結(jié)果還顯示,易損斑塊組ApoA1表達水平低于非易損斑塊組,ApoB、LP(a)表達水平高于非易損斑塊組,且經(jīng)多因素回歸分析顯示,ApoA1、ApoB、LP(a)表達水平皆是頸動脈粥樣硬化斑塊易損性的影響因素。有研究[11]發(fā)現(xiàn),ApoA1與易損性粥樣硬化斑塊的形成密切相關(guān)。ApoA1是卵磷脂-膽固醇?；D(zhuǎn)移酶激活劑,可將膽固醇從血管壁等周圍組織轉(zhuǎn)移到肝臟進行代謝,增加對游離膽固醇的清除率,減少周圍組織脂質(zhì)沉積,在調(diào)節(jié)膽固醇和高密度脂蛋白轉(zhuǎn)運中發(fā)揮了重大作用[12],從而減緩了易損斑塊的形成。ApoB可促進泡沫細(xì)胞形成和膽固醇積聚,增加斑塊脂質(zhì)含量,促使表面纖維帽包繞富含膽固醇的脂質(zhì)核心的易損性斑塊的形成,還可將膽固醇運送到周圍組織,增加脂質(zhì)在血管壁的沉積,促使頸動脈粥樣硬化斑塊向易損性轉(zhuǎn)變[13-14]。毛荷蓮等[15]研究報道,在急性腦梗死患者中動脈粥樣硬化斑塊不穩(wěn)定性斑塊的LP(a)表達水平較穩(wěn)定性斑塊明顯升高。LP(a)可結(jié)合膠原蛋白、糖蛋白等形成復(fù)合物損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞,促使產(chǎn)生生長因子和細(xì)胞因子,誘導(dǎo)單核-巨噬細(xì)胞進入內(nèi)皮細(xì)胞吞噬,從而形成泡沫細(xì)胞參與粥樣硬化斑塊的形成,導(dǎo)致粥樣硬化斑塊易損破裂[16-17]。本研究結(jié)果還顯示,糖尿病史、CRP、UA、LDL均是頸動脈粥樣硬化斑塊易損性的危險因素,與既往研究報道一致[18-19]。糖尿病導(dǎo)致微血管結(jié)構(gòu)改變,造成內(nèi)皮功能障礙,破壞粥樣硬化斑塊的穩(wěn)定性,形成易損斑塊;LDL可損傷平滑肌細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞,導(dǎo)致血管壁發(fā)生炎性反應(yīng),促進易損性頸動脈粥樣硬化斑塊的形成;CRP通過趨化和激活循環(huán)中的單核細(xì)胞,紊亂血管內(nèi)皮功能,導(dǎo)致細(xì)胞外基質(zhì)重構(gòu),促進易損斑塊的發(fā)生和發(fā)展;UA會促進膽固醇及低密度脂蛋白等脂類沉積,增加氧自由基生成和增厚動脈內(nèi)膜,從而破壞內(nèi)皮細(xì)胞,加速易損動脈粥樣硬化斑塊的形成。

本研究為明確ApoA1、ApoB、LP(a)可作為評估頸動脈粥樣硬化斑塊易損性的敏感指標(biāo),通過擬合多種指標(biāo)建立多因素回歸方程,采用逐步篩選法進行分析,結(jié)果顯示ApoA1為保護因素,ApoB、LP(a)為危險因素,且影響絕對值更大,提示ApoA1、ApoB、LP(a)可分別從保護和危害機體兩個維度反映頸動脈粥樣硬化斑塊的狀態(tài)和性質(zhì),提高評估價值。本研究ROC結(jié)果顯示,ApoA1、ApoB聯(lián)合LP(a)表達對頸動脈粥樣硬化斑塊易損性的評估價值高于三者單獨評估,提示ApoA1、ApoB聯(lián)合LP(a)對頸動脈粥樣硬化斑塊易損性的評估價值更高。LP(a)作為獨立脂蛋白,機體正常時含量極其低微,但當(dāng)有組織損傷情況下升高,可作為獨特的標(biāo)記物檢測,且其與性別、年齡、脂代謝等無相關(guān)性,幾乎不受腎衰、急性免疫反應(yīng)影響[20],對動脈粥樣硬化斑塊易損性的發(fā)生具有良好的預(yù)知作用。單獨檢測ApoB可能存在假陰性,而聯(lián)合ApoA1、ApoB檢測可代表膽固醇在頸動脈壁的沉積和逆轉(zhuǎn)運過程的平衡[21],更能準(zhǔn)確反映頸動脈粥樣硬化斑塊的易損性。因此三者聯(lián)合檢測可更全面評價頸動脈粥樣硬化斑塊的易損性,顯著提高評價靈敏度,臨床可采用三者聯(lián)合檢測評價頸動脈粥樣硬化斑塊的易損性,提高評估價值。

綜上所述,在頸動脈粥樣硬化患者中ApoA1水平降低,ApoB、LP(a)水平升高,且三者均為頸動脈粥樣硬化斑塊易損性的影響因素,ApoA1、ApoB、LP(a)三者聯(lián)合檢測對頸動脈粥樣硬化斑塊易損性具有較高的評估價值。