沙棘果渣提取物對氧化應(yīng)激黃羽肉雞生長性能、抗氧化能力及免疫功能的影響

馮志鵬 李露宇 劉孟健 張 蕭 李璇玥 盧 妍 陳 勇

(新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院,烏魯木齊 830052)

沙棘(sea buckthorn)屬于胡頹子科,是一種多年生落葉灌木。早在8世紀(jì),沙棘就被蒙藥和藏藥所記錄,其含有豐富的黃酮、多酚、多糖等抗氧化物質(zhì),具有祛痰、健脾、養(yǎng)胃、止血等功效,在醫(yī)藥領(lǐng)域被廣泛應(yīng)用,作為抗衰老的保健品[1]。近年來,沙棘籽油和沙棘果渣等副產(chǎn)品被應(yīng)用于動物生產(chǎn)中作為抗氧化飼料添加劑[2]。研究表明,沙棘黃酮對家畜具有抗菌和抗氧化等作用,能夠顯著提高生長發(fā)育、飼料轉(zhuǎn)化率和免疫功能,同時降低血脂和血糖含量,減輕肝臟氧化損傷,預(yù)防血脂代謝紊亂。沙棘的副產(chǎn)品能夠提高機體對超氧陰離子的清除能力和抗氧化能力,降低丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量[3]。研究表明,添加沙棘提取物不會影響肉雞的生長性能[4],但能顯著提高肝臟中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽過氧化物酶(glutathione-peroxidase,GSH-Px)活性和總抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC),降低MDA含量。當(dāng)前,針對沙棘在動物生產(chǎn)中的研究,主要聚焦于沙棘黃酮的應(yīng)用方面,而從沙棘副產(chǎn)品中提取的混合物在動物生產(chǎn)中的應(yīng)用研究較為缺乏。本實驗室前期研究顯示,沙棘果渣提取物(SBPE)含有豐富的總酚,并具有較強的自由基清除能力。在氧化應(yīng)激條件下,添加SBPE對黃羽肉雞生長性能、免疫功能和抗氧化能力有何作用尚未見報道。因此,本研究在飼喂氧化大豆油的基礎(chǔ)上添加不同劑量的SBPE,以研究其對黃羽肉雞生長性能、免疫功能和抗氧化能力的影響,為沙棘副產(chǎn)品在肉雞生產(chǎn)中的應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 SBPE的制備

自然風(fēng)干的沙棘果渣(沙棘果榨汁后的副產(chǎn)物)經(jīng)100目篩粉碎,按1∶20的料液比加入去離子水,置入水浴搖床中,75 ℃,180 r/min提取2.5 h,重復(fù)提取2次后使用8層紗布過濾除去大顆粒殘渣,2次所得濾液混勻,置入5～10 μm濾布正壓過濾器中過濾1次,得到的提取液轉(zhuǎn)移到旋轉(zhuǎn)蒸儀中65 ℃濃縮至糖漿狀,再轉(zhuǎn)移至烘箱中65 ℃烘干,制成粉末狀,-20 ℃冰箱備用。SBPE中總黃酮、總酚、總還原性糖含量和自由基清除力分別采用硝酸鋁顯色法、Folin-Ciocalteu比色法、硫酸-苯酚法和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼清除試驗進(jìn)行測定[5]。經(jīng)測定,本方法制備的SBPE總酚含量為94.54 mg/g,總還原性糖含量為585.32 mg/g,總黃酮含量為26.75 mg/g,自由基清除力為95.69%。

1.2 氧化大豆油的制備

新鮮大豆油置于廣口瓶中,并通過通入空氣的方式,暴露于90 ℃水浴中持續(xù)加熱24 h。在此期間,每隔2 h,進(jìn)行過氧化值(peroxide value,POV)和MDA含量的測定。當(dāng)POV>120 meq/kg時,制備完成。將氧化大豆油密封,室溫、避光保存。氧化大豆油POV參照LS/T 6106—2012 《動植物油脂 過氧化值測定 自動滴定分析儀法》[6]測定,MDA含量參照GB 5009.181—2016[7]中方法測定。經(jīng)測定,氧化大豆油的POV為125.78 meq/kg,MDA含量為3.77 mg/kg;新鮮大豆油POV<12 meq/kg,MDA含量為0.23 mg/kg。

1.3 試驗設(shè)計

選取400只1日齡健康的黃羽肉雞(快速型),將其隨機分為2個對照組和3個試驗組,分別為空白對照組(BC組)、氧化對照組(OX組)和3個試驗組,每組10個重復(fù),每個重復(fù)8只,公母各占1/2。BC組飼喂基礎(chǔ)飼糧,OX組將基礎(chǔ)飼糧中的普通大豆油全部更換為氧化大豆油,試驗組飼喂OX組的飼糧,并在此基礎(chǔ)上分別添加0.1%、0.2%和0.4%的SBPE?；A(chǔ)飼糧參考《中國飼料成分及營養(yǎng)價值表(2019年第30版)》[8]和《雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》(NY/T 33—2004)[9]進(jìn)行配制,其組成及營養(yǎng)水平見表1。試驗期63 d。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

續(xù)表1項目 Items含量 Contents0～3周齡0 to 3 weeks of age4～6周齡4 to 6 weeks of age7～9周齡7 to 9 weeks of age全脂大豆 Full fat soybean6.003.802.97大豆油 Soybean oil2.002.503.00棉籽粕 Cottonseed meal9.005.103.37磷酸氫鈣 CaHPO42.192.001.70石粉 Limestone1.231.101.05食鹽 NaCl0.350.350.35預(yù)混料 Premix1)0.500.500.50DL-蛋氨酸 DL-Met0.120.090.07L-賴氨酸 L-Lys0.10合計 Total100.00100.00100.00營養(yǎng)水平 Nutrient levels2)代謝能 ME/(MJ/kg)12.1212.5412.96粗蛋白質(zhì) CP20.4518.4616.03鈣 Ca1.291.401.22總磷 TP0.810.820.72DL-蛋氨酸 DL-Met0.460.380.34蛋氨酸+半胱氨酸 Met+Cys0.850.720.65L-賴氨酸 L-Lys1.050.980.85

1.4 飼養(yǎng)管理

試驗前對地面和墻面進(jìn)行清洗,采用甲醛-高錳酸鉀熏蒸法進(jìn)行3 d的消毒。消毒后通風(fēng)5 d,并使用4%碘溶液對雞籠擦拭,使用5%新潔爾滅對食盤和水線浸泡消毒,確保雞籠衛(wèi)生狀況。試驗采用3層籠養(yǎng),雛雞入籠后,圈舍內(nèi)保持38 ℃溫度和40%～60%相對濕度,24 h人工照明。3日齡后,每隔24 h溫度下調(diào)1 ℃,光照每日減少1 h。試驗期間,雛雞自由采食和飲水。按照嚴(yán)格的免疫程序?qū)θ怆u進(jìn)行疫苗接種。飼養(yǎng)流程按照《黃羽肉雞飼養(yǎng)管理技術(shù)規(guī)程》[10]進(jìn)行。

1.5 樣品采集與指標(biāo)測定

1.5.1 生長性能測定

1日齡的雛雞入籠前稱取空腹體重,每日記錄采食量,于21、42、63日齡時全群禁食給水12 h稱量空腹重,并計算平均日采食量、平均日增重及料重比。

1.5.2 營養(yǎng)物質(zhì)表觀代謝率測定

分別在16、37、58日齡連續(xù)收集5 d各重復(fù)的全部糞便。收集糞便時,清理羽毛、皮屑和飼糧殘渣。將樣本均勻噴灑10 mL 10%鹽酸固氮,并置于干凈通風(fēng)的室內(nèi)自然陰干,粉碎并過100目篩,室溫密封保存以測定糞便中干物質(zhì)(dry matter,DM)、有機物(organic matter,OM)、粗蛋白質(zhì)(crude protein,CP)、鈣(calcium,Ca)、磷(phosphorus,P)、粗脂肪(ether extract,EE)的含量。每階段采集飼糧樣本200 g進(jìn)行常規(guī)營養(yǎng)物質(zhì)含量的測定,并計算營養(yǎng)物質(zhì)表觀代謝率[11],計算公式如下:

營養(yǎng)物質(zhì)表觀代謝率(%)=100×[飼糧
采食量(g)×飼糧中營養(yǎng)物質(zhì)含量(%)-
糞排泄量(g)×糞中營養(yǎng)物質(zhì)含量(%)]/
[飼糧采食量(g)×飼糧中營養(yǎng)
物質(zhì)含量(%)]。

1.5.3 血漿采集及相關(guān)指標(biāo)測定

分別在21、42、63日齡時,從每個重復(fù)中挑選體重相當(dāng)?shù)娜庾须u公、母各1只,采用翅下靜脈采血法采集5 mL血液,肝素鈉抗凝制備血漿,用于測定T-AOC、SOD、過氧化氫酶(catalase,CAT)和GSH-Px的活性及MDA含量,以及血清中的免疫球蛋白M(immunoglobulin M,IgM)、免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)和免疫球蛋白A(immunoglobulin A,IgA)及干擾素-γ(interferon-γ,IFN-γ)和白細(xì)胞介素-2(interleukin-2,IL-2)的含量。所有指標(biāo)均使用北京華英生物技術(shù)研究所試劑盒進(jìn)行測定,并用Infinite M200全波長酶標(biāo)儀進(jìn)行測定。

1.5.4 免疫器官指數(shù)測定

肉雞生長至21、42、63日齡時,每個重復(fù)屠宰公、母各1只雞,稱取胸腺、脾臟和法氏囊的重量并計算各免疫器官指數(shù),計算公式如下:

免疫器官指數(shù)(%)=[免疫器官重量(g)/
活重(g)]×100。

1.6 數(shù)據(jù)整理與分析

數(shù)據(jù)使用SPSS 20.0統(tǒng)計軟件中的單因素方差分析(one-way ANOVA)進(jìn)行統(tǒng)計分析,并采用Duncan氏法進(jìn)行多重比較,檢驗組間差異顯著性,結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示,顯著水平為P<0.05,極顯著水平為P<0.01。

2 結(jié)果與分析

2.1 SBPE對氧化應(yīng)激黃羽肉雞生長性能的影響

由表2可知,與BC組相比,OX組1～21日齡的ADFI和ADG、42日齡的BW、22～42日齡的ADG顯著降低(P<0.05)。與OX組相比,添加0.1%的SBPE可顯著提高1～21日齡肉雞的ADFI(P<0.05),添加0.2%和0.4%的SBPE可顯著提高21日齡的BW以及1～21日齡肉雞的ADFI和ADG(P<0.05),添加0.4%的SBPE可顯著提高22～42日齡肉雞的ADFI(P<0.05)。氧化大豆油及添加SBPE對各階段F/G、63日齡的BW、43～63日齡ADFI和ADG均無顯著影響(P>0.05)。SBPE各組與BC組各指標(biāo)均無顯著差異(P>0.05)。

表2 SBPE對氧化應(yīng)激黃羽肉雞生長性能的影響

續(xù)表2項目Items時間TimeBC組BC groupOX組OX groupSBPE添加量 SBPE addition level/%0.10.20.4料重比F/G1～21日齡1 to 21 days of age1.60±0.121.68±0.111.65±0.101.63±0.191.62±0.1422～42日齡22 to 42 days of age2.03±0.102.17±0.292.13±0.082.09±0.132.12±0.0843～63日齡43 to 63 days of age2.99±0.293.17±1.662.94±0.172.91±0.392.72±0.81

2.2 SBPE對氧化應(yīng)激黃羽肉雞營養(yǎng)物質(zhì)表觀代謝率的影響

由表3可知,與BC組相比,OX組16～21日齡CP表觀代謝率顯著降低(P<0.05)。與OX組相比,添加0.2%的SBPE可顯著提高OM表觀代謝率(P<0.05)。氧化大豆油及添加SBPE對16～21日齡DM、EE、Ca、P以及37～42日齡、58～63日齡營養(yǎng)物質(zhì)表觀代謝率均無顯著影響(P>0.05)。0.1%、0.2%和0.4% SBPE添加組營養(yǎng)物質(zhì)的表觀代謝率與BC組無顯著差異(P>0.05)。

表3 SBPE對氧化應(yīng)激黃羽肉雞營養(yǎng)物質(zhì)表觀代謝率的影響

2.3 SBPE對氧化應(yīng)激黃羽肉雞免疫器官指數(shù)的影響

由表4可知,BC組和OX組在3個日齡的器官指數(shù)均無顯著差異(P>0.05)。相較于OX組,添加0.4%的SBPE可降低21日齡肉雞脾臟指數(shù)(P<0.05),其他指標(biāo)無顯著差異(P>0.05)。此外,0.2% SBPE組63日齡脾臟指數(shù)以及0.4% SBPE組21日齡脾臟指數(shù)顯著低于BC組(P<0.05)。

表4 SBPE對氧化應(yīng)激黃羽肉雞免疫器官指數(shù)的影響

2.4 SBPE對氧化應(yīng)激黃羽肉雞血漿免疫指標(biāo)的影響

由表5可知,與BC組相比,OX組3個日齡血漿中IgG、IgA和IgM及IFN-γ、IL-2含量均極顯著升高(P<0.01)。與OX組相比,添加0.1%的SBPE后,對21和42日齡血漿IFN-γ和IL-2含量無顯著影響(P>0.05),63日齡血漿IgA含量極顯著降低(P<0.01),其他免疫指標(biāo)均極顯著降低(P<0.01);添加0.2%的SBPE后,對21日齡血漿IgG、IgM含量以及63日齡血漿IgA、IgG含量均無顯著影響(P>0.05),21日齡血漿IgA和IFN-γ含量顯著降低(P<0.05),其他免疫指標(biāo)均極顯著降低(P<0.01);添加0.4%的SBPE后,21和63日齡血漿IgA、IgG、IgM含量無顯著變化(P>0.05),其他免疫指標(biāo)均極顯著降低(P<0.01)。

與BC組相比,添加0.1%的SBPE可極顯著升高3個日齡血漿中IFN-γ和IL-2含量、21日齡血漿IgG含量以及63日齡血漿IgA含量(P<0.01),對其他指標(biāo)無顯著影響(P>0.05);添加0.2%的SBPE可極顯著提高3個日齡血漿中IFN-γ和IL-2含量(P<0.01),極顯著升高21日齡血漿IgG含量和63日齡血漿IgA含量(P<0.01),顯著提高21日齡血漿IgM含量(P<0.05),對其他指標(biāo)無顯著影響(P>0.05);添加0.4%的SBPE對42日齡血漿IgA含量和63日齡血漿IL-2含量無顯著影響(P>0.05),顯著提高21日齡血漿IgM含量和63日齡血漿IgM、IL-2含量(P<0.05),其他指標(biāo)均極顯著提高(P<0.01)。由此可見,添加SBPE可有效緩解氧化大豆油引起的抗體水平和炎癥因子的波動,但與正常大豆油相比仍有明顯差異。

2.5 SBPE對氧化應(yīng)激黃羽肉雞血漿抗氧化指標(biāo)的影響

由表6可知,與BC組相比,OX組3個日齡血漿的SOD、GSH-Px、CAT活性及T-AOC、MDA含量極顯著升高(P<0.01)。與OX組相比,添加0.1%的SBPE可極顯著降低3個日齡血漿SOD、GSH-Px、CAT活性、T-AOC(P<0.01),對MDA含量無顯著影響(P>0.05);添加0.2%的SBPE可極顯著降低3個日齡的血漿SOD、GSH-Px、CAT活性、T-AOC及MDA含量(P<0.01);添加0.4%的SBPE可極顯著降低21和42日齡血漿中SOD、GSH-Px、CAT活性、T-AOC和MDA含量(P<0.01),極顯著降低63日齡血漿中SOD活性、T-AOC及MDA含量(P<0.01),對GSH-Px和CAT活性無顯著影響(P>0.05)。

與BC組相比,添加0.1%的SBPE對21日齡血漿GSH-Px活性、T-AOC,42日齡血漿SOD、GSH-Px、CAT活性,63日齡血漿T-AOC均無顯著影響(P>0.05),顯著提高21日齡血漿SOD、CAT活性,63日齡血漿GSH-Px、CAT活性(P<0.05),極顯著提高21日齡血漿MDA含量、42日齡血漿T-AOC及MDA含量、63日齡血漿SOD活性和MDA含量(P<0.01);添加0.2%的SBPE后21日齡血漿抗氧化指標(biāo)均極顯著提高(P<0.01),42日齡血漿GSH-Px活性無顯著變化(P>0.05),其他抗氧化指標(biāo)均極顯著提高(P<0.01),63日齡血漿GSH-Px活性和MDA含量顯著提高(P<0.05),其他抗氧化指標(biāo)均極顯著提高(P<0.01);添加0.4%的SBPE后,63日齡血漿MDA含量顯著提高(P<0.05),其他抗氧化指標(biāo)均極顯著提高(P<0.01)。

表5 SBPE對氧化應(yīng)激黃羽肉雞血漿免疫指標(biāo)的影響

續(xù)表6項目ItemsBC組BC groupOX組OX groupSBPE添加量 SBPE addition level/%0.10.20.4過氧化氫酶 CAT/(U/mL)29.70±3.14Dd45.14±7.78Aa32.86±4.12CDcd35.52±5.13BCc39.94±5.64Bb丙二醛 MDA/(nmol/mL)4.16±0.12Cc6.04±0.41Aa5.74±0.56Aa5.30±0.16Bb5.14±0.19Bb63日齡 63 days of age超氧化物歧化酶 SOD/(U/mL)40.31±2.15Ee58.93±3.68Aa45.71±2.99Dd51.96±3.20Cc54.65±2.49Bb谷胱甘肽過氧化物酶 GSH-Px/(U/mL)248.88±30.23Ce325.80±38.58Aa256.02±33.02Ccd281.02±28.96BCbc302.11±40.30ABab總抗氧化能力 T-AOC/(U/mL)4.97±0.77Dd7.35±0.64Aa5.22±0.24CDcd5.69±0.39BCc6.21±0.51Bb過氧化氫酶 CAT/(U/mL)19.12±4.22Dd33.48±2.82Aa21.48±5.62CDc26.42±2.90BCb31.25±3.23ABab丙二醛 MDA/(nmol/mL)5.75±0.42Cd7.01±0.44Aa6.65±0.19ABb6.17±0.51BCc6.00±0.13Cc

3 討 論

3.1 SBPE對氧化應(yīng)激黃羽肉雞生長性能的影響

研究表明,當(dāng)黃羽肉雞飼喂POV>120 meq/kg的氧化大豆油后可造成氧化應(yīng)激[12]。本試驗的研究結(jié)果表明,飼糧中添加氧化大豆油顯著降低了1～21日齡和22～42日齡肉雞的采食量,與Anjum等[13]的研究結(jié)果一致。沙棘果渣中含有較多的有機酸[14],有機酸對肉雞的采食具有促進(jìn)作用[15]。研究表明,飼糧中添加沙棘果渣能夠提高肉雞的日增重[16],與本試驗的結(jié)果相似。然而姚炳濃等[17]的研究發(fā)現(xiàn),飼糧中添加0.05%～0.15%的沙棘黃酮對廣西小麻鴨的生長性能無顯著影響。這說明沙棘黃酮在促進(jìn)動物生長上的作用有限。另外,本試驗結(jié)果還表明,飼糧中添加SBPE和氧化大豆油均對42～63日齡肉雞生長性能無顯著影響。其原因可能是在肉雞快速的生長過程中,其消化和免疫功能逐漸發(fā)育成熟,能夠有效應(yīng)對油脂酸敗后的負(fù)面作用,并且提取物的積極作用也逐步穩(wěn)定。因此,在生長性能上表現(xiàn)出較小的差異性。

3.2 SBPE對氧化應(yīng)激黃羽肉雞營養(yǎng)物質(zhì)表觀代謝率的影響

本研究結(jié)果顯示,添加氧化大豆油會顯著降低肉雞的CP表觀代謝率。這可能是因為氧化大豆油影響了腸道絨毛的發(fā)育,導(dǎo)致營養(yǎng)物質(zhì)的可吸收面積減少,影響消化酶的降解作用,從而降低了CP等有機物的代謝率[18]。同時,含有大量自由基的氧化油脂還會引起腸道絨毛細(xì)胞的損傷,引起細(xì)胞炎癥反應(yīng),誘發(fā)腸道細(xì)胞膜通透性增加[19],導(dǎo)致肉雞腹瀉、嘔吐,降低DM表觀代謝率,從而降低營養(yǎng)物質(zhì)利用率。因此,添加氧化大豆油會對肉雞的生產(chǎn)性能產(chǎn)生負(fù)面影響。

本研究結(jié)果顯示,隨著SBPE添加量的增加,肉雞的OM表觀代謝率逐漸上升,呈正相關(guān)關(guān)系。這表明SBPE能夠緩解氧化大豆油對肉雞營養(yǎng)物質(zhì)表觀代謝率的負(fù)面影響。與此前的研究結(jié)果[20]相似;添加沙棘果渣可以促進(jìn)肉雞的消化功能,提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率。

需要注意的是,SBPE雖然能促進(jìn)肉雞的消化功能,但對Ca、P的吸收卻沒有影響。這可能是因為飼料中Ca、P主要以無機化合物的形式添加,而小腸細(xì)胞對Ca的吸收大多為順濃度梯度,僅依靠載體進(jìn)行跨膜運輸,不需要ATP的直接參與。因此,Ca的轉(zhuǎn)運并不受細(xì)胞狀態(tài)的直接影響。另外,無機磷在腸道中的吸收率較高[21],高達(dá)70%。因此,Ca、P在小腸中的吸收率受腸道環(huán)境的影響較小。這表明SBPE對營養(yǎng)物質(zhì)消化和吸收的影響有一定選擇性。

3.3 SBPE對氧化應(yīng)激黃羽肉雞免疫器官指數(shù)的影響

在家禽生產(chǎn)中,肉雞免疫器官的發(fā)育是衡量其健康狀態(tài)的重要指標(biāo)。評估肉雞免疫功能通常采用免疫器官形態(tài)和大小的變化,例如胸腺、法氏囊、脾臟指數(shù)。脾臟作為家禽的外周免疫器官,在肉雞對逆境環(huán)境的抵抗中起著重要作用[22]。研究表明,腸道炎癥反應(yīng)會引起小鼠脾臟指數(shù)的增加[23]。本試驗的結(jié)果顯示,SBPE的添加對不同年齡的黃羽肉雞脾臟指數(shù)影響不同,在21日齡時,SBPE能夠降低肉雞脾臟指數(shù),然而,隨著日齡的增長,SBPE的攝入量逐漸增加,在63日齡時SBPE則能夠刺激脾臟的發(fā)育,這一結(jié)果表明,SBPE對緩解肉雞脾臟細(xì)胞的增殖作用,存在一定的既定范圍,過量的攝入SBPE可能刺激脾臟細(xì)胞的增殖,因此表現(xiàn)為脾臟指數(shù)增加的現(xiàn)象。另一研究表明,通過注射氧化誘導(dǎo)劑可降低小鼠脾臟指數(shù)[24],與本試驗結(jié)果有不同之處,原因可能是,本試驗中的試驗動物處于正常生長狀態(tài),誘導(dǎo)劑的攝入是通過消化道的吸收作用逐漸進(jìn)入血液刺激脾臟細(xì)胞增殖產(chǎn)生應(yīng)答,導(dǎo)致脾臟指數(shù)升高,屬于慢性應(yīng)激,與Sun等[25]研究結(jié)果相似。

本試驗結(jié)果顯示,法氏囊和胸腺指數(shù)各組之間無顯著差異,這表明氧化大豆油并未影響中樞免疫器官的發(fā)育。綜上所述,SBPE可以改善氧化大豆油對外周免疫器官的負(fù)面作用,提高外周循環(huán)系統(tǒng)的免疫功能,而氧化大豆油對中樞免疫系統(tǒng)無顯著影響,與熊兆龍[26]的研究結(jié)果一致。

3.4 SBPE對氧化應(yīng)激黃羽肉雞免疫功能的影響

在免疫系統(tǒng)受抗原攻擊時,外周循環(huán)系統(tǒng)中主要的抗體蛋白IgA、IgG和IgM最先分泌,它們能夠結(jié)合抗原,形成一道屏障,減少細(xì)胞的損傷。免疫應(yīng)答的最初階段,血漿中IgA、IgG和IgM含量受循環(huán)系統(tǒng)中抗原濃度的影響,隨著抗原濃度的增加而降低。當(dāng)循環(huán)系統(tǒng)中抗體蛋白下降時,代表屏障功能減弱,導(dǎo)致細(xì)胞受抗原感染,進(jìn)而引起自然殺傷細(xì)胞(NK)、巨噬細(xì)胞免疫功能增強,分泌大量的促炎因子。此時,血液中IFN-γ、IL-2含量增加,激活核因子-κB(NF-κB)基因結(jié)合通路,細(xì)胞產(chǎn)生炎癥和應(yīng)激反應(yīng)。研究表明,口服適宜濃度的抗原可以誘導(dǎo)小鼠炎癥反應(yīng),從而引起血漿中抗體水平的增加[27]。此外,Bai等[28]研究表明,通過腸道外源感染抗原,可以顯著增加血漿中白細(xì)胞介素及促炎因子的含量。另外,Wang等[29]研究表明,在氧化應(yīng)激狀態(tài)下,血液中IgM含量有上升的趨勢。

本試驗的結(jié)果顯示,使用氧化大豆油可以誘導(dǎo)肉雞的免疫應(yīng)激反應(yīng),其血漿中的IgA、IgG、IgM、IFN-γ和IL-2含量均極顯著高于BC組。并且,隨著SBPE添加量的增加,肉雞血漿中的IgA、IgG、IgM含量逐漸上升,而IFN-γ和IL-2的含量則顯著下降,這一結(jié)果表明,SBPE可以提高肉雞的免疫功能,并緩解炎癥反應(yīng)。

然而,另一報道中提到,家畜在飼喂氧化油脂狀態(tài)下,氧化對照組血清的IgM和IgG含量顯著低于空白對照組和試驗組[30],這與本試驗的結(jié)果不一致。我們認(rèn)為其原因可能是這篇報道中所使用的氧化油脂的氧化程度與本試驗有所差異,該氧化油脂可能破壞了免疫系統(tǒng)的正常生理功能,進(jìn)而引起免疫應(yīng)激,免疫系統(tǒng)短時間內(nèi)難以恢復(fù)正常水平。而在本試驗中,OX組中抗體的水平極顯著高于BC組,表明氧化誘導(dǎo)劑并未對免疫系統(tǒng)造成破壞性損傷,僅引起了肉雞的炎癥反應(yīng),屬于慢性免疫應(yīng)激。綜上所述,本試驗的結(jié)果表明,氧化大豆油能夠誘導(dǎo)肉雞的炎癥反應(yīng),并提高血漿中抗體水平,而SBPE則能夠緩解氧化大豆油引起的細(xì)胞炎癥,降低血漿中促炎癥因子的含量。

3.5 SBPE對氧化應(yīng)激黃羽肉雞抗氧化能力的影響

動物擁有完整的抗氧化體系,其中包括SOD、GSH-Px、CAT、T-AOC。這些抗氧化物質(zhì)受自由基的影響[31],無論是急性還是慢性氧化應(yīng)激,都會導(dǎo)致抗氧化酶活性和MDA含量顯著增加。急性氧化應(yīng)激引起的抗氧化酶活性上升速度和活性比慢性誘導(dǎo)條件下更快,最終維持在比空白對照低的水平。慢性誘導(dǎo)指的是一種持續(xù)的刺激反應(yīng),抗氧化系統(tǒng)會出現(xiàn)緩慢上升、緩慢下降、再上升的現(xiàn)象,并最終維持在比空白對照水平更高的范圍內(nèi)[32]。然而,無論是急性還是慢性誘導(dǎo)都會導(dǎo)致抗氧化系統(tǒng)的不同程度損傷。高濃度誘導(dǎo)劑會降低血液中抗氧化酶的活性,并且隨著時間的推移會降至低于正常水平[33]。本試驗結(jié)果表明,添加SBPE后,血漿SOD、GSH-Px、CAT活性及T-AOC先降低后升高,而MDA含量則顯著下降。此外,OX組血漿抗氧化酶活性及MDA含量均極顯著高于BC組,這表明氧化大豆油可以作為低濃度誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)慢性氧化應(yīng)激,而SBPE的添加能夠緩解氧化大豆油引起的抗氧化酶活性升高,并且可以提高黃羽肉雞的抗氧化能力,這一結(jié)果與以往的研究結(jié)果[34-37]有相似之處。因此,在本試驗條件下,飼喂POV為125.78 meq/kg的氧化大豆油能夠誘導(dǎo)黃羽肉雞慢性氧化應(yīng)激,且不造成免疫器官損傷;添加SBPE則能夠緩解氧化大豆油引起的抗氧化酶活性升高,并且可以提高黃羽肉雞的抗氧化能力。綜上所述,我們認(rèn)為動物抗氧化體系在應(yīng)對氧化應(yīng)激時具有一定的修復(fù)能力,而SBPE則可以作為一種潛在的氧化應(yīng)激緩解劑應(yīng)用于動物生產(chǎn)中。

4 結(jié) 論

氧化大豆油可以降低黃羽肉雞的生長性能和飼糧營養(yǎng)物質(zhì)表觀代謝率,并誘導(dǎo)抗體和抗氧化水平升高;添加0.1%的SBPE可有效緩解肉雞因氧化大豆油誘發(fā)的抗體水平和抗氧化酶活性的升高;添加0.2%和0.4%的SBPE則可以提高肉雞的生長性能、免疫功能和抗氧化能力。