• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    遮陰脅迫對兩種野牛草抗氧化系統(tǒng)的影響

    2017-07-30 11:29:02任藝慈孫小玲
    草地學報 2017年6期
    關鍵詞:清液抗壞血酸抗氧化劑

    任藝慈, 劉 潔, 李 茂, 陳 晨,孫小玲

    (天津農(nóng)學院園藝園林學院,天津 300384)

    在逆境脅迫下,植物體內(nèi)的活性氧數(shù)量劇增,作為應激反應,抗氧化酶活性和抗氧化劑含量會迅速升高,以清除氧自由基,維持細胞內(nèi)氧自由基的平衡。植株內(nèi)的抗氧化系統(tǒng)包括兩類:酶促清除系統(tǒng)和非酶促清除系統(tǒng),酶促清除系統(tǒng)包括抗氧化酶如超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、過氧化氫酶(catalase, CAT)、過氧化物酶(peroxidase,POD)和抗壞血酸過氧化物酶(ascorbate peroxidase, APX)等;非酶促系統(tǒng)即抗氧化劑,包括抗壞血酸(ascorbic acid, AsA)、類胡蘿卜素和一些含巰基的低分子化合物,如谷胱甘肽等(reduced glutathione, GSH)。而在長期或重度的遮陰脅迫條件下,這種平衡會被破壞,抗氧化酶活性和抗氧化劑含量不再隨著脅迫程度的加重而增加,抗氧化系統(tǒng)清除活性氧的能力下降,導致活性氧積累,對細胞造成傷害。如在遮陰初期,Arid3高羊茅(Festucaarundinacea)和沿階草(Ophiopogonjaponicus)體內(nèi)MDA含量和抗氧化酶活性(SOD,POD和CAT)均迅速增加,而隨著遮陰時間的延長,抗氧化酶活性則又開始降低[5-6]。經(jīng)過3到4個月的遮陰脅迫處理后,不同遮陰強度的假儉草(Eremochloaophiuroides)抗氧化酶活性均顯著降低[7-8]。

    1 材料與方法

    1.1 試驗材料

    本研究以Spark野牛草和Texoka野牛草為試驗材料,種子由北京綠冠集團提供。2015年5月14日播種在直徑18 cm,高15 cm的花盆中,基質(zhì)為草炭:蛭石=1:1。2016年3月15日選出長勢良好的野牛草進行遮陰處理,遮陰梯度包括中光(40%遮陰)、低光 (80%遮陰)以及全光照(無遮陰處理)。試驗過程中,定期澆水,保證植物不受水分脅迫。每周澆15 mL的全能Hoagland營養(yǎng)液 (4.373 g NH4NO3·L-1, 2.063 g NaH2PO4·L-1和2.876 g KCl·L-1),保證植物對養(yǎng)分的基本需求[12]。每個處理6個重復。

    1.2 試驗方法

    H2O2含量的測定參考蔡永萍[13]的方法稍加修改,稱取0.2 g新鮮的野牛草葉片,加入5 mL 4℃預冷的丙酮和少許石英砂研磨成勻漿,3000 r·min-1離心10 min,取1 mL上清液加入0.1 mL 5%的硫酸鈦和0.2 mL濃氨水,再以3000 r·min-1離心10 min,棄上清液,沉淀加入5 mL 2 mol·L-1的硫酸,待完全溶解后在415 nm下比色。

    MDA和AsA含量,以及SOD、POD和CAT 活性的測定均參考陳建勛和王曉峰[15]的方法并稍加修改。

    MDA含量的測定:稱取0.5 g新鮮葉片,加入2 mL 5%的三氯乙酸(trichloroacetic acid, TCA)研磨勻漿,在3000 r·min-1離心10 min,取上清液2 mL(對照用2 mL蒸餾水),再加入3 mL 0.5%的硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid, TBA),混勻后在沸水浴中反應30 min,迅速冷卻后離心,取上清液分別于532 nm,600 nm及450 nm波長下測定OD值。MDA含量用如下公式計算:MDA濃度(μmol·L-1)=6.46×(OD532-OD600)-0.56×OD450

    AsA含量的測定:稱取0.5 g新鮮葉片,加入15 mL 5%的TCA研磨勻漿,在15000 r·min-1離心10 min,取上清液定容至5 mL。取上清液0.2 mL,分別加入0.2 mL 150 mmol·L-1的NaH2PO4(pH 7.4),0.2 mL H2O,混合均勻,1 min后加入0.4 mL 10%的TCA,0.4 mL 44%的H3PO4,0.4 mL 4%的2,2-二聯(lián)吡啶溶液,和0.2 mL 3%的FeCl3。混合后37℃中水浴保溫1 h,最后測得525 nm處的吸光度值酶液制備:稱取0.5 g葉片加入2.5 mL 50 mmol·L-1pH 7.8的磷酸緩沖液(含0.1 mmol·L-1EDTA),冰浴研磨勻漿,4℃ 8000 r·min-1離心20 min,取上清液用于SOD,POD和CAT活性的測定。

    SOD活性測定:3 mL反應體系中含1.5 mL 50 mmol·L-1pH 7.8的磷酸緩沖液,0.3 mL 130 mmol·L-1甲硫氨酸,0.3 mL 750 μmol·L-1氯化硝基四氮唑藍(nitroblue tetrazolium, NBT),0.3 mL 100 μmol·L-1EDTA-Na2,0.3 mL 20 μmol·L-1核黃素,H2O 0.2 mL,最后加入0.1 mL酶液搖勻,在日光燈下反應30 min,測定560 nm處的吸光度值。SOD活性單位以抑制NBT光化還原的50%為一個酶活性單位表示。

    POD活性測定:3 mL反應混合液中含0.3%的H2O21 mL, 0.2%愈創(chuàng)木酚0.95 mL,50 mmol·L-1pH 7.0的磷酸緩沖液1 mL, 酶液0.05 mL啟動反應,記錄1 min內(nèi)470 nm下光吸收值的變化,POD活性單位以每分鐘光密度增加0.01定義為1個活力單位。

    CAT活性測定:3 mL反應混合液中含0.3%的H2O21 mL,H2O 1.95 mL,最后加入0.05 mL酶液啟動反應,記錄3 min內(nèi)240 nm下光吸收值的變化,CAT活性單位以每分鐘光密度減少0.01定義為1個活力單位。

    1.3 數(shù)據(jù)分析

    使用SPSS 20.0對試驗數(shù)據(jù)進行單因素方差分析,并用Duncan法進行多重比較,顯著性差異水平P<0.05,所有測定值均表示為均值±標準誤。由于該試驗持續(xù)了34天,從3月到4月溫度等外部條件變化較大,因此統(tǒng)一以全光照對照為分母,采用相對含量、相對產(chǎn)生速率和相對活性的表示方法。最后以Sigma Plot 10.0作圖。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 遮蔭脅迫對兩種野牛草葉片MDA和H2O2的相對含量及相對產(chǎn)生速率的影響

    MDA是衡量膜脂過氧化損傷的重要指標。由圖1可知,在遮陰處理第5天時,低光處理Texoka和Spark野牛草MDA的相對含量均迅速增加為對照的5.17和5.69倍。中光處理的Texoka和Spark野牛草MDA含量分別為對照的2.71和2.79倍。遮陰處理10天時,低光和中光處理的Spark野牛草的MDA含量回落至對照的2.47和1.84倍,之后便無顯著變化;而低光和中光處理的Texoka野牛草在遮陰處理15天后MDA含量又再次達到一個新的更高峰,分別為對照的10倍和4.8倍,遮陰處理20天又回落至對照的1.83和1.66倍,之后則無顯著變化。

    圖1 遮陰脅迫下Texoka和Spark野牛草MDA(A)和H2O2(B)的相對含量以及的相對產(chǎn)生速率Fig.1 The relative content of MDA (A) and H2O2 (B), and the relative production rate of (C) in leaves of Texoka and Spark buffalograss under shading stress

    2.2 遮蔭脅迫對兩種野牛草葉片SOD,POD,CAT活性和AsA含量的影響

    POD和CAT同為清除H2O2的關鍵酶。低光和中光處理的Spark野牛草POD的相對活性在遮陰過程中出現(xiàn)了兩次高峰,第一次是遮陰處理第15天時,分別為對照3.91和2.41倍;第二個高峰出現(xiàn)在遮陰處理第27天時,峰值不及第一次高峰(圖2)。Texoka野牛草POD的相對活性第一個高峰出現(xiàn)的時間與Spark野牛草相似,低光處理的Texoka野牛草POD的峰值稍高于低光處理的Spark野牛草(圖2)。同SOD相似,Spark野牛草CAT的相對活性出現(xiàn)高峰的時間比Texoka野牛草更遲。如圖2所示,低光和中光處理的Texoka野牛草在遮陰處理第10天時CAT的相對活性達到頂峰,分別為對照的4.12和3.81倍。低光和中光處理的Spark野牛草CAT的相對活性分別在遮陰處理第15天和20天時達到頂峰,分別為對照的4.94和3.52倍。

    圖2 遮陰脅迫下Texoka和Spark野牛草的SOD(A),POD(B)和CAT(C)的相對活性及AsA(D)的相對含量Fig.2 The relative activities of SOD(A), POD(B), CAT(C), and the relative content of AsA (D) in leaves of Texoka and Spark buffalograss under shading stress

    3 討論與結(jié)論

    3.1 野牛草抗氧化反應系統(tǒng)的特點

    植物受到逆境脅迫時,內(nèi)源H2O2含量會迅速升高,促使植物體內(nèi)的抗氧化系統(tǒng)活性增強以抵御逆境脅迫[16]。在本研究中,低光和中光處理的Spark野牛草H2O2的相對含量出現(xiàn)高峰的時間比Texoka野牛草更遲,但峰值更高(圖1B),這一響應與SOD、CAT和AsA的響應相似(圖2),說明在Spark野牛草中H2O2含量的增高有效的促進了抗氧化酶(SOD和CAT)活性的增高和抗氧化物(AsA)含量的增加。Spark野牛草H2O2的相對含量峰值雖然稍高于Texoka野牛草,但H2O2還有一個作用是需要在生長素信號通道和氧化還原作用的信號通道之間做出靈活的響應,因此不能簡單的以H2O2的濃度判斷植物受脅迫的程度[17],且有報道表明,植物可以耐受高濃度的H2O2(102~2×105μmol·L-1)[18]??梢娭参锟寡趸磻到y(tǒng)設計的目的是為了控制細胞氧化還原電位的狀態(tài),而不是將H2O2完全清除。

    抗氧化酶系統(tǒng)是一個容易隨外界變化而改變的復雜系統(tǒng),一般呈現(xiàn)先升后降的變化趨勢,因為超出細胞的承受能力之后,環(huán)境脅迫的時間延長和強度加大造成細胞膜脂過氧化程度的加深和細胞傷害增強,影響了細胞內(nèi)蛋白質(zhì)等物質(zhì)的合成,導致抗氧化酶活性降低[10]。在本研究中其活性變化也是非線性的,除了“先升后降”的變化趨勢之外,后續(xù)還會出現(xiàn)幾個小高峰(圖2A,2B,2C)。這是因為植物對逆境的應答不止包括抗氧化系統(tǒng),還與植物的其它系統(tǒng)和分子應答機制相關聯(lián)。如熱休克應答對抗氧化酶的保護作用,在高溫和重金屬脅迫條件下,熱激蛋白的轉(zhuǎn)錄和翻譯增強,作為分子伴侶其可以防止蛋白聚集,對抗正常的細胞死亡,因此才會出現(xiàn)抗氧化酶活性下降又上升的情況[4]。

    Spark野牛草POD活性的峰值出現(xiàn)在遮陰處理第15和27天(圖2B),CAT活性的峰值出現(xiàn)在遮陰處理第15和20天(圖2C),AsA含量的峰值出現(xiàn)在遮陰處理第15和34天(圖2D)。CAT和POD為清除H2O2的抗氧化酶,而AsA是植物體內(nèi)清除H2O2重要的非酶促系統(tǒng)。在一定強度的環(huán)境脅迫下,這些酶促和非酶促系統(tǒng)之間的互補作用可以保證無論H2O2濃度高低,都可以高效將其清除[19]。

    3.2 Spark野牛草的耐陰性優(yōu)于Texoka野牛草

    在長達34天的遮陰脅迫處理下,Spark野牛草的表現(xiàn)優(yōu)于Texoka野牛草。無論中光還是低光處理,Spark野牛草MDA的相對含量均較低。如前所述抗氧化系統(tǒng)一般呈現(xiàn)先升后降的變化趨勢,因此可以通過脅迫處理過程中抗氧化酶活性或抗氧化劑含量拐點的脅迫條件推測植物耐受脅迫的時間和能力[10]。Spark野牛草SOD,CAT活性和AsA含量最高峰出現(xiàn)的時間均比Texoka野牛草推遲5~10天,而峰值則高于相同遮陰梯度處理的Texoka野牛草。這些結(jié)果說明Spark野牛草可以通過提高抗氧化酶活性和抗氧化劑含量的方式減少膜脂過氧化的傷害,其耐陰性要優(yōu)于Texoka野牛草。

    3.3 Spark野牛草較高的AsA含量幫助其對抗遮陰脅迫

    APX主要存在于葉綠體基質(zhì)中,是清除葉綠體中抗壞血酸-谷胱甘肽(AsA-GSH)循環(huán)所產(chǎn)生的H2O2的關鍵酶。且APX與H2O2的親和力較強,而AsA是APX專一的電子供體。除此之外,AsA還是植物體內(nèi)主要的抗氧化劑,存在于所有組織中,尤其以光合細胞葉綠體周圍濃度最高。外源AsA可緩解環(huán)境脅迫對植物的傷害,例如外源AsA可減緩鎘對蒜(Alliumsatvium)根生長的毒害[21]。AsA可以自身合成,也可以通過AsA-GSH循環(huán)系統(tǒng)再生。抗壞血酸有3種存在形式,還原型抗壞血酸(AsA),單脫氫抗壞血酸(monodehydroascorbate, MDHA)和脫氫抗壞血酸(dehydroascorbate, DHA),但由于DHA不穩(wěn)定,90%以上的抗壞血酸以AsA的形式存在[22]。AsA的氧化還原狀態(tài)反映了植物受脅迫的情況,例如適度的干旱脅迫時蘋果樹(Malusdomestica)葉片內(nèi)AsA含量升高,而重度的干旱脅迫時AsA含量下降[23]。低光處理的Texoka野牛草只在遮陰處理第10天時AsA的相對含量有一個高峰,也僅為對照的5.16倍,此后便降為對照的1.32倍,且再無顯著的增長,再次說明低光處理對Texoka野牛草造成了不可逆轉(zhuǎn)的傷害。低光處理的Spark野牛草在遮陰處理第34天時AsA含量增長為對照的8.28倍(圖2D),H2O2含量也隨即回落到對照的1.12倍水平(圖1B)。因此我們認為相對于Texoka野牛草,Spark野牛草中的AsA無論是作為抗氧化劑,還是作為APX的電子供體,維持APX活性,都是清除H2O2的重要物質(zhì),在保護膜系統(tǒng)方面起了關鍵性的作用。

    猜你喜歡
    清液抗壞血酸抗氧化劑
    清液回配對酒精發(fā)酵的影響研究
    釀酒科技(2023年10期)2023-11-23 11:09:42
    豆清液不同超濾組分體外抗氧化活性研究
    建筑施工廢棄泥漿環(huán)保型分離技術的研究與探討
    名城繪(2019年4期)2019-10-21 05:09:13
    天然抗氧化劑對冷榨火麻油保質(zhì)期的影響
    抗壞血酸的電化學研究
    高效液相色譜法同時測定水果蔬菜中L-抗壞血酸、D-異抗壞血酸、脫氫抗壞血酸及總維生素C的含量
    抗氧化劑2-吲哚啉酮衍生物對NF-κB信號通路的抑制作用
    乳酸菌及其相應的上清液對凡納濱對蝦存活率、生長性能、免疫反應和抗病性的影響
    飼料博覽(2015年12期)2015-04-04 04:28:36
    3
    抗壞血酸-(熒光素+CTMAB+Cu2+)化學發(fā)光檢測尿液的尿酸
    應用化工(2014年11期)2014-08-16 15:59:13
    www.色视频.com| 人体艺术视频欧美日本| 91国产中文字幕| 少妇人妻 视频| 色视频在线一区二区三区| 毛片一级片免费看久久久久| 国产深夜福利视频在线观看| 黑丝袜美女国产一区| 22中文网久久字幕| 欧美另类一区| 好男人视频免费观看在线| 简卡轻食公司| 日本欧美视频一区| 边亲边吃奶的免费视频| 多毛熟女@视频| 一级毛片我不卡| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 黑人猛操日本美女一级片| 国产综合精华液| 精品一区在线观看国产| 亚洲国产欧美在线一区| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图 | 精品卡一卡二卡四卡免费| 国产精品久久久久成人av| 丝袜脚勾引网站| 丝袜在线中文字幕| 国产乱来视频区| 中文字幕亚洲精品专区| 国产日韩欧美在线精品| 熟女电影av网| 国产男人的电影天堂91| 日本欧美国产在线视频| 精品一区二区三卡| 免费观看av网站的网址| 亚洲av福利一区| 亚洲精品国产av成人精品| 十八禁高潮呻吟视频| .国产精品久久| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 亚洲色图综合在线观看| 日日啪夜夜爽| 国产成人精品久久久久久| 亚洲国产av新网站| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 中国三级夫妇交换| 亚洲国产日韩一区二区| 在线观看一区二区三区激情| 亚洲精品日本国产第一区| 51国产日韩欧美| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 亚洲第一av免费看| 亚洲经典国产精华液单| 国产成人精品无人区| 91国产中文字幕| 亚洲精品色激情综合| 国产精品久久久久成人av| 国产一区有黄有色的免费视频| 99精国产麻豆久久婷婷| 美女大奶头黄色视频| 久久久午夜欧美精品| 久久99蜜桃精品久久| 亚洲国产av影院在线观看| 色哟哟·www| 亚洲高清免费不卡视频| 一级爰片在线观看| 亚洲av国产av综合av卡| 久久影院123| 青春草国产在线视频| 久久av网站| 欧美日韩在线观看h| 18禁在线播放成人免费| 久久久久久久国产电影| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 亚洲国产av影院在线观看| 能在线免费看毛片的网站| 高清在线视频一区二区三区| 久久人妻熟女aⅴ| 亚洲国产欧美在线一区| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 另类亚洲欧美激情| 国产精品无大码| 亚洲精品久久午夜乱码| 97在线人人人人妻| a级毛片在线看网站| av天堂久久9| 久久久精品区二区三区| 色网站视频免费| 色吧在线观看| 亚洲中文av在线| 亚洲国产av影院在线观看| 能在线免费看毛片的网站| 十八禁高潮呻吟视频| 九九在线视频观看精品| 欧美少妇被猛烈插入视频| 亚洲精品第二区| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 成人国产麻豆网| 丰满少妇做爰视频| 成人午夜精彩视频在线观看| 成人手机av| 黄片播放在线免费| 久久精品国产a三级三级三级| 人体艺术视频欧美日本| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 亚洲av综合色区一区| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 桃花免费在线播放| 最近2019中文字幕mv第一页| 免费大片黄手机在线观看| 一区二区av电影网| 欧美日韩av久久| 热99久久久久精品小说推荐| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 免费观看的影片在线观看| 欧美97在线视频| 日韩一本色道免费dvd| 一级二级三级毛片免费看| 美女视频免费永久观看网站| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 午夜激情久久久久久久| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 午夜福利,免费看| 欧美精品一区二区大全| 哪个播放器可以免费观看大片| 日本vs欧美在线观看视频| 亚洲美女视频黄频| 这个男人来自地球电影免费观看 | 国产一区二区三区av在线| 91aial.com中文字幕在线观看| 91久久精品国产一区二区三区| av国产久精品久网站免费入址| 最近2019中文字幕mv第一页| 欧美 日韩 精品 国产| 久久久久久久久久久丰满| 性高湖久久久久久久久免费观看| 成人手机av| 国产亚洲最大av| 国产老妇伦熟女老妇高清| 美女视频免费永久观看网站| 黄色欧美视频在线观看| 在线看a的网站| 亚洲av男天堂| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 国模一区二区三区四区视频| 日本黄色片子视频| 中文字幕亚洲精品专区| 欧美精品高潮呻吟av久久| 久久婷婷青草| 少妇被粗大的猛进出69影院 | 91成人精品电影| 99国产综合亚洲精品| 如日韩欧美国产精品一区二区三区 | 在线观看免费日韩欧美大片 | 在线观看免费视频网站a站| 久久免费观看电影| 男女边吃奶边做爰视频| 国产精品一区www在线观看| 国产色婷婷99| 在线看a的网站| 亚洲伊人久久精品综合| 日日爽夜夜爽网站| 色婷婷久久久亚洲欧美| av在线app专区| 十八禁网站网址无遮挡| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 久久久亚洲精品成人影院| 亚洲av男天堂| 亚洲精品国产色婷婷电影| 久久午夜福利片| 欧美精品亚洲一区二区| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 久久久欧美国产精品| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 日本与韩国留学比较| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 国产亚洲最大av| 成年人午夜在线观看视频| 午夜精品国产一区二区电影| 国产欧美亚洲国产| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 欧美日韩成人在线一区二区| 777米奇影视久久| 能在线免费看毛片的网站| 国产成人精品一,二区| 国产精品久久久久久久电影| 极品人妻少妇av视频| 色视频在线一区二区三区| 麻豆乱淫一区二区| 在线观看免费视频网站a站| 一级,二级,三级黄色视频| 中文字幕最新亚洲高清| 青春草国产在线视频| 不卡视频在线观看欧美| 欧美日韩精品成人综合77777| 精品久久国产蜜桃| 简卡轻食公司| 亚洲国产精品国产精品| 免费大片黄手机在线观看| av播播在线观看一区| 中国国产av一级| a 毛片基地| 亚洲第一av免费看| 午夜福利网站1000一区二区三区| av国产精品久久久久影院| 中文字幕久久专区| 搡女人真爽免费视频火全软件| 熟女人妻精品中文字幕| 最近中文字幕2019免费版| 日韩强制内射视频| 免费少妇av软件| 免费人妻精品一区二区三区视频| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 大香蕉久久网| 久久久精品94久久精品| 91成人精品电影| 91国产中文字幕| 大香蕉97超碰在线| 十八禁网站网址无遮挡| 久久ye,这里只有精品| 老熟女久久久| av在线观看视频网站免费| 最近手机中文字幕大全| av有码第一页| 久久综合国产亚洲精品| 久久久国产欧美日韩av| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 久久精品久久久久久久性| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 国产成人av激情在线播放 | 免费高清在线观看视频在线观看| 久久久久网色| 免费大片黄手机在线观看| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 国产高清三级在线| 视频区图区小说| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 亚洲欧美精品自产自拍| 亚洲,一卡二卡三卡| av专区在线播放| 亚洲伊人久久精品综合| 午夜精品国产一区二区电影| 这个男人来自地球电影免费观看 | 一区二区三区精品91| 我要看黄色一级片免费的| 久久久久久久久久成人| 久久ye,这里只有精品| 亚洲图色成人| 黑丝袜美女国产一区| 中国三级夫妇交换| 美女cb高潮喷水在线观看| av在线app专区| 熟女电影av网| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 99久国产av精品国产电影| 天天影视国产精品| 国产熟女欧美一区二区| 成人国语在线视频| 国产在视频线精品| 国产日韩欧美在线精品| 国产免费福利视频在线观看| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 美女国产高潮福利片在线看| 午夜免费观看性视频| 22中文网久久字幕| 欧美性感艳星| 久热久热在线精品观看| 免费看光身美女| 国产成人免费观看mmmm| 亚洲欧美一区二区三区国产| 寂寞人妻少妇视频99o| 一二三四中文在线观看免费高清| 午夜福利,免费看| 日韩av免费高清视频| 高清毛片免费看| 国产精品偷伦视频观看了| 久久国内精品自在自线图片| 亚洲成人av在线免费| 最近中文字幕高清免费大全6| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 精品国产露脸久久av麻豆| 综合色丁香网| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 精品人妻偷拍中文字幕| 夜夜骑夜夜射夜夜干| av有码第一页| 亚洲,一卡二卡三卡| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 亚洲成人av在线免费| 亚洲欧洲日产国产| 成年女人在线观看亚洲视频| 777米奇影视久久| 日日啪夜夜爽| 国产极品粉嫩免费观看在线 | 寂寞人妻少妇视频99o| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 女人久久www免费人成看片| 国产高清国产精品国产三级| 日韩视频在线欧美| 黑人高潮一二区| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 亚洲精品456在线播放app| 亚洲一区二区三区欧美精品| 亚洲人与动物交配视频| 久久免费观看电影| 久久久久国产精品人妻一区二区| 欧美精品一区二区大全| 丝袜脚勾引网站| 制服丝袜香蕉在线| 国产精品嫩草影院av在线观看| 久久女婷五月综合色啪小说| 久久99热这里只频精品6学生| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 97在线视频观看| 在线观看一区二区三区激情| 桃花免费在线播放| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 搡女人真爽免费视频火全软件| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 成人黄色视频免费在线看| 亚洲精品成人av观看孕妇| 中文天堂在线官网| 国产老妇伦熟女老妇高清| 日本免费在线观看一区| 国产在视频线精品| 欧美三级亚洲精品| 热99国产精品久久久久久7| 国产av精品麻豆| 亚洲高清免费不卡视频| 久久久久久久久久人人人人人人| 91在线精品国自产拍蜜月| 欧美97在线视频| 久久精品人人爽人人爽视色| 亚洲欧美成人精品一区二区| 欧美人与性动交α欧美精品济南到 | 在线 av 中文字幕| 熟女av电影| 久久久久久伊人网av| a级毛色黄片| 边亲边吃奶的免费视频| 美女福利国产在线| 夜夜爽夜夜爽视频| a级毛片在线看网站| 国产成人免费无遮挡视频| 久久久a久久爽久久v久久| 日韩av在线免费看完整版不卡| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 久久久久久久亚洲中文字幕| 久久久午夜欧美精品| 美女内射精品一级片tv| 亚洲人成网站在线观看播放| 成人国产麻豆网| 51国产日韩欧美| .国产精品久久| 日韩强制内射视频| 高清在线视频一区二区三区| freevideosex欧美| 精品国产国语对白av| 在线播放无遮挡| 99久久中文字幕三级久久日本| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 只有这里有精品99| 嘟嘟电影网在线观看| 日本av免费视频播放| 在线观看www视频免费| 日本与韩国留学比较| 韩国高清视频一区二区三区| 国产精品无大码| 蜜桃国产av成人99| 日韩精品有码人妻一区| 久久久久久久久久久丰满| a级毛色黄片| 大香蕉久久成人网| 亚洲精品中文字幕在线视频| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| a级毛片黄视频| 男的添女的下面高潮视频| 欧美日韩av久久| 久久久亚洲精品成人影院| 免费黄色在线免费观看| 亚洲美女黄色视频免费看| 亚洲精品中文字幕在线视频| 人人妻人人澡人人看| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 又大又黄又爽视频免费| 纯流量卡能插随身wifi吗| 久久精品国产自在天天线| 中文字幕亚洲精品专区| 色婷婷av一区二区三区视频| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 国产一区亚洲一区在线观看| 日韩欧美一区视频在线观看| 99九九线精品视频在线观看视频| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 永久网站在线| 精品人妻熟女av久视频| 久久久午夜欧美精品| 日本黄色片子视频| 26uuu在线亚洲综合色| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 国产一区二区在线观看av| 18禁观看日本| 在线观看免费日韩欧美大片 | 国产精品久久久久成人av| 午夜影院在线不卡| 国产精品成人在线| 人妻少妇偷人精品九色| 黑丝袜美女国产一区| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 少妇的逼水好多| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 在线观看www视频免费| 亚洲av欧美aⅴ国产| 午夜老司机福利剧场| 不卡视频在线观看欧美| 成人漫画全彩无遮挡| 日韩电影二区| 国产成人91sexporn| 久热久热在线精品观看| 免费人妻精品一区二区三区视频| 水蜜桃什么品种好| 亚洲欧美精品自产自拍| 国产日韩一区二区三区精品不卡 | 亚洲第一区二区三区不卡| 日日摸夜夜添夜夜爱| 国产av一区二区精品久久| xxx大片免费视频| 一个人免费看片子| 亚洲欧洲国产日韩| 中文字幕亚洲精品专区| 男人操女人黄网站| 少妇熟女欧美另类| 日韩人妻高清精品专区| 亚洲精品日本国产第一区| 熟女电影av网| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 青春草视频在线免费观看| 国产成人免费观看mmmm| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 大片电影免费在线观看免费| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 久久 成人 亚洲| 久久久久久久久久人人人人人人| 久久久久精品性色| 最新的欧美精品一区二区| 亚洲精品456在线播放app| 亚洲国产av新网站| 日韩精品免费视频一区二区三区 | 亚洲欧美日韩卡通动漫| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 国产成人aa在线观看| 亚洲美女黄色视频免费看| 高清毛片免费看| 国产一区亚洲一区在线观看| 亚洲精品一二三| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 日本黄大片高清| 简卡轻食公司| 免费观看a级毛片全部| 亚洲精品一区蜜桃| 国产男女内射视频| 麻豆成人av视频| 国产免费视频播放在线视频| 国产免费福利视频在线观看| 久久久精品区二区三区| 精品久久久久久电影网| 亚洲丝袜综合中文字幕| 最近中文字幕高清免费大全6| 99精国产麻豆久久婷婷| 最近的中文字幕免费完整| 欧美日韩在线观看h| 亚洲精品一区蜜桃| 黑人猛操日本美女一级片| 免费看光身美女| 午夜福利影视在线免费观看| 视频在线观看一区二区三区| 熟妇人妻不卡中文字幕| 九色成人免费人妻av| 伦精品一区二区三区| 精品国产国语对白av| 边亲边吃奶的免费视频| 91精品国产九色| 久久久久久久久大av| 成人午夜精彩视频在线观看| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 天堂中文最新版在线下载| 久久精品夜色国产| 国产精品一国产av| 涩涩av久久男人的天堂| 成人影院久久| 久久女婷五月综合色啪小说| 日韩 亚洲 欧美在线| 精品久久久久久久久亚洲| 欧美精品高潮呻吟av久久| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图 | 在线观看美女被高潮喷水网站| 久久国产精品大桥未久av| 水蜜桃什么品种好| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 美女中出高潮动态图| 综合色丁香网| 久久人妻熟女aⅴ| 国产视频内射| av免费在线看不卡| 熟女av电影| 成人无遮挡网站| 久久免费观看电影| 高清毛片免费看| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 国产在线免费精品| 曰老女人黄片| 欧美bdsm另类| 男女无遮挡免费网站观看| 亚洲精品久久午夜乱码| 大话2 男鬼变身卡| 飞空精品影院首页| 一边亲一边摸免费视频| 免费看光身美女| 老司机亚洲免费影院| 街头女战士在线观看网站| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 中文字幕最新亚洲高清| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 欧美xxxx性猛交bbbb| 少妇人妻 视频| 两个人免费观看高清视频| 91在线精品国自产拍蜜月| 满18在线观看网站| 欧美成人精品欧美一级黄| 日韩三级伦理在线观看| 欧美激情国产日韩精品一区| 一本一本综合久久| 欧美日韩视频精品一区| 中文字幕久久专区| 高清不卡的av网站| 日韩人妻高清精品专区| 乱人伦中国视频| 国产高清国产精品国产三级| 九九在线视频观看精品| 国产69精品久久久久777片| 爱豆传媒免费全集在线观看| 国产探花极品一区二区| 国产精品熟女久久久久浪| 成人黄色视频免费在线看| 国产色婷婷99| 国产成人免费无遮挡视频| 精品人妻偷拍中文字幕| 久久精品国产a三级三级三级| 国产亚洲最大av| 人体艺术视频欧美日本| 欧美3d第一页| 一级片'在线观看视频| 久久久久国产网址| 欧美精品亚洲一区二区| 国产一区二区在线观看av| 97超碰精品成人国产| 亚洲综合精品二区| 91aial.com中文字幕在线观看| 免费少妇av软件| 高清不卡的av网站| 日韩av不卡免费在线播放| 日日啪夜夜爽| 人人澡人人妻人| 高清黄色对白视频在线免费看| 在线亚洲精品国产二区图片欧美 | av有码第一页| 亚洲精品第二区| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 久久精品国产亚洲av涩爱| 色婷婷久久久亚洲欧美| 日韩精品有码人妻一区| 免费看不卡的av| 高清欧美精品videossex| 免费人妻精品一区二区三区视频| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 97超视频在线观看视频| 热99久久久久精品小说推荐| 久久精品久久精品一区二区三区| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 香蕉精品网在线| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 亚洲久久久国产精品| 99久久精品国产国产毛片| 日本爱情动作片www.在线观看| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 国产精品久久久久久精品古装| 一级毛片 在线播放| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 黑人欧美特级aaaaaa片| 国产熟女欧美一区二区| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 久久久久精品久久久久真实原创| 在线观看免费视频网站a站| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 天天操日日干夜夜撸| 国产视频内射| av又黄又爽大尺度在线免费看| 99国产精品免费福利视频| 99久国产av精品国产电影| 久久99精品国语久久久| 国产在线一区二区三区精| 精品午夜福利在线看| 国产毛片在线视频| 插阴视频在线观看视频| 蜜臀久久99精品久久宅男| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 精品久久国产蜜桃| 少妇高潮的动态图| 国产 精品1| 少妇人妻 视频| 免费看不卡的av| 亚洲高清免费不卡视频|