柴胡加龍骨牡蠣湯對(duì)2型糖尿病合并抑郁大鼠炎癥因子及單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的影響

李浩經(jīng),吳圓圓,蔡英杰,王 彤,王 雪,李文麗,張卓輝,余真真,蔡蕭君

(1. 黑龍江省中醫(yī)藥科學(xué)院,黑龍江 哈爾濱 150036;2. 溫州市中醫(yī)院,浙江 溫州 325000)

流行病學(xué)調(diào)查顯示,2型糖尿病與抑郁互為風(fēng)險(xiǎn)因素[1],2型糖尿病患者抑郁患病率可達(dá)24.7%[2],遠(yuǎn)高于健康人群。目前研究表明,抑郁癥的發(fā)生與免疫系統(tǒng)的失衡密切相關(guān),抑郁可通過影響多巴胺(DA)、五羥色胺(5-HT)等單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的活性導(dǎo)致2型糖尿病的產(chǎn)生[3]。2型糖尿病胰島素抵抗與胰島的長期輕度炎癥存在一定聯(lián)系,炎癥反應(yīng)會(huì)對(duì)2型糖尿病及抑郁癥預(yù)后產(chǎn)生不利影響[4]。柴胡加龍骨牡蠣湯系《傷寒論》經(jīng)方,既往研究證實(shí)該方劑可通過影響患者代謝水平來治療2型糖尿病[5],同時(shí)可有效治療情志病[6],但其作用機(jī)制尚未明確。本研究通過構(gòu)建2型糖尿病合并抑郁大鼠模型,觀察了柴胡加龍骨牡蠣湯對(duì)大鼠行為、血清炎癥因子及海馬組織單胺類神經(jīng)遞質(zhì)五羥色胺2A受體(5-HT2aR)、多巴胺受體D2(DRD2)的影響,探討其治療2型糖尿病合并抑郁的機(jī)制,以為臨床治療提供依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 SPF級(jí)SD雄性大鼠50只,體重(200±20)g,8周齡,購于哈爾濱醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)部,動(dòng)物許可證號(hào):SCXK(黑)2019-0001,于黑龍江省中醫(yī)藥科學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心適應(yīng)性飼養(yǎng)1周。本實(shí)驗(yàn)方案符合公平性、安全性原則,并經(jīng)黑龍江省中醫(yī)藥科學(xué)院動(dòng)物倫理委員會(huì)批準(zhǔn)[SYXK(黑)2-016-008]。

1.2藥物 柴胡加龍骨牡蠣湯由柴胡25g、龍骨25 g、牡蠣25 g、人參10 g、桂枝15 g、茯苓15 g、清半夏10 g、黃芩10 g、大黃6 g、生姜10 g、大棗5 g組成,采用江陰天江藥業(yè)生產(chǎn)中藥免煎顆粒,根據(jù)大鼠體重計(jì)算給藥量,依照說明書按比例換算備齊顆粒劑,研缽碾碎,加蒸餾水置100 ℃恒溫水浴鍋中加熱,充分?jǐn)嚢柚镣耆芙?定容至360 mL,生藥量為0.26 g/mL,分裝密封后于4 ℃冰箱保存?zhèn)溆?。鹽酸氟西汀分散片為法國禮來有限公司產(chǎn)品,批號(hào):9492AA,規(guī)格:20 mg/片。

1.3試劑與儀器 血清白細(xì)胞介素-1β(IL-1β,貨號(hào):H002)、白細(xì)胞介素-2(IL-2,貨號(hào):H003)、白細(xì)胞介素-6(IL-6,貨號(hào):H007)、白細(xì)胞介素-17A(IL-17A,貨號(hào):H014-1-1)、白細(xì)胞介素-18(IL-18,貨號(hào):H015-1-1)ELISA試劑盒(南京建成生物工程研究所);Anti-DRD2、Anti-5-HT2aR(北京博奧森生物技術(shù)有限公司,貨號(hào):bs1008R,bs1056R);蘇木素、伊紅染液(南京建成生物工程研究所);免疫組化試劑盒(北京中杉金橋生物技術(shù)公司);DAB試劑(Thermo公司)。鏈脲佐菌素(STZ,北京索萊寶科技有限公司);玻璃桶(30 cm×40 cm×5 mm)、懸尾、攝像頭、動(dòng)物行為學(xué)分析軟件(江蘇賽昂斯生物科技有限公司);自制敞箱(100 cm×100 cm×40 cm);三諾血糖儀(金準(zhǔn)型)、血糖試紙(三諾生物傳感股份有限公司);M200多功能酶標(biāo)儀(奧地利Tecan公司);DP72熒光顯微鏡(日本Olympus公司);Line Gene 9600 Real-Time PCR儀(杭州博日科技股份有限公司)。

1.4實(shí)驗(yàn)方法 隨機(jī)取10只大鼠作為空白組,其余40只大鼠制備2型糖尿病合并抑郁模型。具體造模方法:高脂飼料連續(xù)喂養(yǎng)大鼠4周后禁食水24 h,以STZ 35 mg/kg溶于新鮮配制的0.1 mol/L檸檬酸緩沖液(pH 4.5)中,于腹直肌與腹股溝之間注射,正常飲食72 h后禁食不禁水8 h,測定空腹血糖,從中選取空腹血糖>16.7 mmol/L的大鼠,采用慢性不可預(yù)知溫和應(yīng)激結(jié)合孤養(yǎng)模式進(jìn)行抑郁造模,即采用夾尾1 min、禁水24 h、禁食24 h、束縛5 min、晝夜顛倒24 h、電擊1 min、4 ℃冰水游泳5 min這7種不可預(yù)知的刺激方式,于每天不同時(shí)間采取一種的頻率交替應(yīng)激大鼠,使之無法預(yù)測下一次壓力的類型和時(shí)間,共刺激28 d。采用數(shù)字表法,隨機(jī)將造模成功的30只2型糖尿病合并抑郁大鼠分為3組各10只,空白組、模型組大鼠給予蒸餾水6.3mL/(kg·d)灌胃,氟西汀組大鼠給予鹽酸氟西汀3.17 mg/(kg·d)灌胃,柴胡加龍骨牡蠣湯組大鼠給予柴胡加龍骨牡蠣湯1.638g/(kg·d)灌胃,均1次/d,連續(xù)灌胃8周。

1.5檢測指標(biāo)及方法

1.5.1體重和空腹血糖水平 分別在造模結(jié)束及灌胃結(jié)束并禁食8 h后測量各組大鼠體重,尾靜脈采血,以血糖儀測定空腹血糖水平。

1.5.2行為學(xué)實(shí)驗(yàn) 分別在造模結(jié)束及灌胃結(jié)束后進(jìn)行行為學(xué)實(shí)驗(yàn)。曠場試驗(yàn)(OFT):采用攝像機(jī)及行為學(xué)分析軟件記錄分析各大鼠在箱內(nèi)的運(yùn)動(dòng)情況,記錄5 min內(nèi)活動(dòng)總路程,整個(gè)過程保證環(huán)境安靜,每只大鼠測試完成后均使用75%乙醇清潔設(shè)備;懸尾實(shí)驗(yàn):用醫(yī)用膠布將大鼠尾部距末端約1/3處纏繞固定于懸尾儀上,使大鼠呈倒掛狀態(tài),觀察并記錄3 min內(nèi)大鼠掙扎靜止情況,計(jì)算懸尾不動(dòng)時(shí)間。強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn):在強(qiáng)迫游泳透明玻璃桶中加溫度(20±1)℃的水至30 cm處,將大鼠單獨(dú)且平穩(wěn)放入水中,使用攝像機(jī)及行為學(xué)分析軟件記錄5 min內(nèi)大鼠水中表現(xiàn),計(jì)算強(qiáng)迫游泳漂浮時(shí)間。

1.5.3血清炎癥因子水平 末次灌胃結(jié)束后,腹腔注射2%戊巴比妥鈉麻醉大鼠,腹主動(dòng)脈采血,血液于常溫下靜置2h后,高速低溫冷凍離心機(jī)(4℃,3 000 r/min)離心10 min,取上清液,嚴(yán)格按照相應(yīng)ELISA試劑盒檢測上清液中IL-1β、IL-2、IL-6、IL-17A、IL-18水平。

1.5.4海馬組織HE染色表現(xiàn) 取大鼠海馬組織,進(jìn)行石蠟包埋,制成石蠟切片,后脫蠟、水化,蘇木精染色,自來水清洗,置于鹽酸乙醇分化,并用純水沖洗。乙醇伊紅染色,純水沖洗,再脫水,分別放入二甲苯Ⅰ、Ⅱ中透明。將切片取出,于組織上滴加中性樹脂,覆蓋玻片,拍照觀察。

1.5.5海馬組織中5-HT2aR、DRD2陽性表達(dá)情況 取大鼠海馬組織,放入4%多聚甲醛磷酸鹽緩沖液內(nèi)固定12 h,脫水、包埋、切片,常規(guī)脫蠟至水,PBS緩沖液沖洗,H2O2阻斷內(nèi)源性過氧化氫酶,枸櫞酸緩沖液進(jìn)行抗原修復(fù),分別滴加5-HT2aR(1∶150)、DRD2(1∶100)一抗,4 ℃孵育過夜,PBS沖洗后分別滴加反應(yīng)增強(qiáng)液二抗,DAB染色,封片。400倍顯微鏡下觀察5-HT2aR、DRD2陽性表達(dá)情況。

1.5.6海馬組織中5-HT2aR、DRD2 mRNA表達(dá)情況 采用Real-Time PCR法檢測: 收集各組大鼠海馬組織,加入TRIzol試劑以提取RNA,經(jīng)M200多功能酶標(biāo)儀檢測濃度后,選取純度為1.9～2.0的RNA提取液稀釋至100 ng/μL。實(shí)驗(yàn)反應(yīng)體系:1 μL組織RNA,上下游引物各1 μL,17 μL反應(yīng)液(按照PCR試劑盒說明書配制)。擴(kuò)增條件:95 ℃ 10 min、95 ℃ 10 s、60 ℃ 30 s、72 ℃ 30 s,40個(gè)循環(huán);溶解曲線分析:95 ℃ 10 s,臺(tái)階采樣,臺(tái)階溫度0.5 ℃。引物序列:5-HT2aR上游引物為5’-AGCTCTGTGCGATCTGGATT-3’,下游引物為5’-CCCCTCCTTAAAGACCTTCG-3’,長度為20 bp;DRD2上游引物為5’-CCTTGCTGTGGCTGATCTTCTGG-3’,下游引物為5’-CCTTGCTGTGGCTGATCTTCTGG-3’,長度為23 bp。采用2-ΔΔCT分析方法計(jì)算5-HT2aR、DRD2 mRNA相對(duì)表達(dá)量。

2 結(jié) 果

2.1各組大鼠體重及空腹血糖水平比較 造模結(jié)束后,各造模組大鼠體重均明顯輕于空白組(P均<0.05),空腹血糖水平均明顯高于空白組(P均<0.05),各造模組間大鼠體重及空腹血糖水平比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)。灌胃結(jié)束后,空白組和氟西汀組大鼠體重均明顯高于同組造模結(jié)束后及模型組(P均<0.05),柴胡加龍骨牡蠣湯組大鼠空腹血糖水平明顯低于同組造模結(jié)束后及模型組(P均<0.05),氟西汀組和柴胡加龍骨牡蠣湯組大鼠體重及空腹血糖水平比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)。見表1。

表1 空白組和2型糖尿病合并抑郁各組大鼠體重和空腹血糖水平比較

2.2各組大鼠行為學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果比較 造模結(jié)束后,各造模組大鼠曠場試驗(yàn)活動(dòng)總路程均明顯短于空白組(P均<0.05),懸尾不動(dòng)時(shí)間、強(qiáng)迫游泳漂浮時(shí)間均明顯長于空白組(P均<0.05),各造模組間各指標(biāo)比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)。灌胃結(jié)束后,氟西汀組和柴胡加龍骨牡蠣湯組大鼠活動(dòng)總路程均明顯長于同組造模結(jié)束后及模型組(P均<0.05),懸尾不動(dòng)時(shí)間、強(qiáng)迫游泳漂浮時(shí)間均明顯短于同組造模結(jié)束后及模型組(P均<0.05),氟西汀組和柴胡加龍骨牡蠣湯組間各指標(biāo)比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)。見表2。

表2 空白組和2型糖尿病合并抑郁各組大鼠行為學(xué)比較

2.3各組大鼠血清炎癥因子水平比較 與空白組比較,模型組大鼠血清IL-1β、IL-6、IL-18水平均明顯增高(P均<0.05),血清IL-2水平明顯降低(P<0.05),血清IL-17A水平無明顯變化(P>0.05);與模型組比較,氟西汀組大鼠血清IL-1β、IL-6、IL-18水平和柴胡加龍骨牡蠣湯組大鼠血清IL-1β、IL-6水平均明顯降低(P均<0.05),柴胡加龍骨牡蠣湯組大鼠血清IL-2、IL-17A水平和氟西汀組大鼠血清IL-2水平均明顯升高(P均<0.05);與氟西汀組比較,柴胡加龍骨牡蠣湯組大鼠血清IL-1β水平更低(P均<0.05),血清IL-6、IL-17A水平更高(P均<0.05)。見表3。

表3 空白組和2型糖尿病合并抑郁各組大鼠血清IL-1β、IL-2、IL-6、IL-17A和IL-18水平比較

2.4各組大鼠海馬組織HE染色表現(xiàn) 空白組大鼠海馬區(qū)組織結(jié)構(gòu)、神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)均正常,細(xì)胞排列整齊,細(xì)胞質(zhì)飽滿,細(xì)胞核清晰;模型組大鼠神經(jīng)細(xì)胞數(shù)目相對(duì)減少,體積變小,細(xì)胞核出現(xiàn)皺縮;與模型組比較,柴胡龍骨牡蠣湯組和氟西汀組大鼠神經(jīng)細(xì)胞數(shù)目減少、體積變小、細(xì)胞核皺縮情況均有不同程度減輕,其中柴胡龍骨牡蠣湯組改善更明顯。見圖1。

圖1 空白組和2型糖尿病合并抑郁各組大鼠海馬組織HE染色表現(xiàn)(×400,箭頭處為海馬CA1區(qū)神經(jīng)元)

2.5各組大鼠海馬組織中5-HT2aR、DRD2陽性表達(dá)情況 模型組大鼠海馬結(jié)構(gòu)神經(jīng)元細(xì)胞體積變小,排列紊亂,棕黃色染色顆粒少且染色淺,5-HT2aR、DRD2陽性表達(dá)平均光密度值均明顯低于空白組(P均<0.05);氟西汀組及柴胡加龍骨牡蠣湯組大鼠海馬結(jié)構(gòu)神經(jīng)元細(xì)胞體積、排列紊亂均較模型組明顯改善,棕黃色染色顆粒明顯增多,5-HT2aR、DRD2陽性表達(dá)平均光密度值均明顯高于模型組(P均<0.05),柴胡加龍骨牡蠣湯組5-HT2aR、DRD2陽性表達(dá)平均光密度值與氟西汀組比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)。見圖2及圖3。

圖2 空白組和2型糖尿病合并抑郁各組大鼠海馬組織中5-HT2aR、DRD2陽性表達(dá)情況(免疫組化染色,×400,箭頭處為海馬CA1區(qū)神經(jīng)元,細(xì)胞膜黃染)

圖3 空白組和2型糖尿病合并抑郁各組大鼠海馬組織中5-HT2aR、DRD2 陽性表達(dá)平均光密度值比較

2.6各組大鼠海馬組織中5-HT2aR、DRD2 mRNA相對(duì)表達(dá)量比較 模型組大鼠海馬組織中5-HT2aR、DRD2 mRNA相對(duì)表達(dá)量均明顯低于空白組(P均<0.05);氟西汀組及柴胡加龍骨牡蠣湯組大鼠海馬組織中5-HT2aR、DRD2 mRNA相對(duì)表達(dá)量均明顯高于模型組(P均<0.05),但柴胡加龍骨牡蠣湯組5-HT2aR、DRD2 mRNA相對(duì)表達(dá)量均明顯低于氟西汀組(P均<0.05)。見表4。

表4 空白組和2型糖尿病合并抑郁各組大鼠海馬組織中5-HT2aR、DRD2 mRNA相對(duì)表達(dá)量比較

3 討 論

2型糖尿病屬于中醫(yī)“消渴病”范疇,抑郁屬于中醫(yī)“郁證”范疇,2型糖尿病合并抑郁屬于消渴郁證范疇。柴胡加龍骨牡蠣湯方中人參、茯苓、大棗益氣養(yǎng)血安神,柴胡、桂枝補(bǔ)土疏木,大黃、生姜、半夏瀉熱降濁,龍骨、牡蠣斂魂補(bǔ)虛鎮(zhèn)逆,全方具有安神定志之功,臨床用于治療抑郁有較好療效[7]。但中藥成分復(fù)雜,作用靶點(diǎn)較多,為了明確柴胡加龍骨牡蠣湯治療2型糖尿病合并抑郁的機(jī)制,本實(shí)驗(yàn)采用高脂飲食飼養(yǎng)聯(lián)合STZ注射復(fù)制2型糖尿病大鼠模型,后續(xù)以慢性不可預(yù)知溫和應(yīng)激結(jié)合孤養(yǎng)模式復(fù)制2型糖尿病合并抑郁模型進(jìn)行了相關(guān)研究。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,灌胃結(jié)束后與模型組比較,柴胡加龍骨牡蠣湯組大鼠空腹血糖水平明顯降低,大鼠活動(dòng)總路程明顯延長,懸尾不動(dòng)時(shí)間、強(qiáng)迫游泳漂浮時(shí)間均明顯縮短,海馬區(qū)神經(jīng)元數(shù)量、形態(tài)均明顯改善。證實(shí)柴胡加龍骨牡蠣湯可降低2型糖尿病合并抑郁大鼠血糖,保護(hù)海馬區(qū)神經(jīng)元,從而減輕大鼠抑郁行為。

目前研究認(rèn)為,促炎信號(hào)通路的激活、單胺類神經(jīng)遞質(zhì)分泌異常與2型糖尿病合并抑郁的發(fā)病密切相關(guān)[8]。當(dāng)機(jī)體發(fā)生免疫失衡時(shí),如IL-1β、IL-6、IL-17、IL-18升高而IL-2下降可導(dǎo)致體內(nèi)色氨酸代謝異常,使單胺類神經(jīng)遞質(zhì)功能障礙、生成減少,從而產(chǎn)生抑郁癥狀[9]。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí),2型糖尿病大鼠血清IL-1β、IL-18、IL-6水平升高,并且與其并發(fā)癥的發(fā)生存在密切聯(lián)系[10-11];在慢性應(yīng)激刺激后小鼠體內(nèi),促炎細(xì)胞因子IL-1β、IL-18、IL-6表達(dá)升高,同時(shí)誘發(fā)小鼠的抑郁樣行為[12]。相關(guān)臨床研究發(fā)現(xiàn),慢性高血糖刺激使IL-1β、IL-18、IL-6過度釋放,導(dǎo)致機(jī)體胰島素分泌減少,損害胰島素信號(hào)通路,加速胰島素抵抗的發(fā)展[13];另外壓力刺激導(dǎo)致NLRP聚集激活,IL-1β、IL-18、IL-6產(chǎn)生增多觸發(fā)炎癥反應(yīng),損傷大腦神經(jīng)元,干預(yù)神經(jīng)重塑,影響神經(jīng)元的相互作用及認(rèn)知功能,導(dǎo)致抑郁,而激活DRD2可導(dǎo)致NLRP被抑制,減少IL-1、IL-6的產(chǎn)生[14-15]。IL-17水平與2型糖尿病胰島素抵抗相關(guān),IL-17與IL-17R結(jié)合可激活核因子-κB蛋白(NF-κB)通路,上調(diào)其他炎癥因子基因表達(dá),刺激促炎細(xì)胞因子IL-1β、IL-6的產(chǎn)生,從而導(dǎo)致胰島素抵抗[16]。然而IL-17與抑郁的相關(guān)性存有爭議,有研究顯示抑郁癥患者血清中IL-17水平增高,且與患者抑郁情緒呈正相關(guān)[17];而Saraykar等[18]觀察發(fā)現(xiàn)晚年抑郁患者血清IL-17A(IL-17家族代表成員)水平與抑郁癥狀無顯著相關(guān)性,但與認(rèn)知功能障礙相關(guān)。IL-2生成分泌的減少以及IL-2信號(hào)通路受阻、抑炎作用的減弱均與2型糖尿病的發(fā)生發(fā)展相關(guān)[19]。抑郁患者體內(nèi)IL-2水平降低時(shí),抑郁癥狀加劇,且病程進(jìn)展加快[20]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,柴胡加龍骨牡蠣湯組大鼠血清IL-1β、IL-6水平均明顯低于模型組,血清IL-2、IL-17A水平均明顯高于模型組,血清IL-18水平與模型組比較變化不明顯。提示柴胡加龍骨牡蠣湯可通過調(diào)節(jié)IL-1β、IL-6、IL-2、IL-17A的表達(dá)而減輕海馬神經(jīng)損傷,發(fā)揮抗抑郁作用。本研究中中藥上調(diào)了IL-17A的表達(dá)而沒有促進(jìn)IL-1β、IL-6釋放,這可能是中藥多靶點(diǎn)雙重作用的結(jié)果,炎癥因子具體通過何種機(jī)制、何種通路如何發(fā)揮作用最終導(dǎo)致出現(xiàn)此結(jié)果有待于后續(xù)研究。

研究表明,炎癥細(xì)胞因子可通過激活存在于巨噬細(xì)胞、大腦小膠質(zhì)細(xì)胞中的GTP環(huán)化水解酶1 (GCH1),使四氫生物蝶呤(BH4)向新蝶呤轉(zhuǎn)化,從而導(dǎo)致單胺類神經(jīng)遞質(zhì)DA、5-HT的生成減少[21]。同時(shí)GCH1的激活降低一氧化氮合酶(NOS)活性,導(dǎo)致機(jī)體產(chǎn)生自由基和氧化應(yīng)激反應(yīng),BH4氧化從而使DA、5-HT合成受阻,大腦神經(jīng)回路改變而產(chǎn)生情緒障礙[22]。Zemdegs等[23]報(bào)道,高脂肪飲食誘導(dǎo)的代謝紊亂會(huì)導(dǎo)致海馬區(qū)5-HT水平降低,引發(fā)抑郁行為;而降糖藥的使用可以增加抑郁大鼠5-HT的表達(dá),從而減輕抑郁癥狀[24]。DRD2、5-HT2aR在中樞系統(tǒng)中表達(dá)極為豐富,二者所介導(dǎo)的信號(hào)在高級(jí)腦部功能中存在重要作用,當(dāng)其發(fā)生異常時(shí)可導(dǎo)致精神疾病的發(fā)生。5-HT與小膠質(zhì)細(xì)胞的5-HT2aR結(jié)合可調(diào)節(jié)中樞系統(tǒng)炎癥刺激導(dǎo)致的趨化反應(yīng),可抑制炎癥的進(jìn)一步發(fā)生發(fā)展,改善抑郁[25]。DA可在胰島β細(xì)胞合成,并由其儲(chǔ)存和分泌,DA與胰島β細(xì)胞表面的DRD2結(jié)合,可調(diào)節(jié)機(jī)體胰島素分泌[26],而DRD2缺失則會(huì)抑制胰島素釋放,引發(fā)高血糖[27];另外大腦中DA濃度降低時(shí),機(jī)體的胰島素敏感性和β細(xì)胞功能均下降[28],這與2型糖尿病的發(fā)生密切相關(guān)。因此調(diào)節(jié)DRD2、5-HT2aR的表達(dá)水平在治療2型糖尿病合并抑郁的過程中尤為重要。 本實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明,2型糖尿病合并抑郁大鼠海馬組織中5-HT2aR、DRD2 mRNA表達(dá)明顯減少,柴胡加龍骨牡蠣湯組大鼠海馬組織中5-HT2aR、DRD2 mRNA表達(dá)明顯增加,提示柴胡加龍骨牡蠣湯可明顯上調(diào)2型糖尿病合并抑郁大鼠海馬組織中單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的表達(dá),從而降低血糖,減輕抑郁。

綜上所述, 柴胡加龍骨牡蠣湯可通過調(diào)控炎癥因子及單胺類神經(jīng)遞質(zhì)表達(dá)而明顯降低2型糖尿病合并抑郁大鼠血糖,減輕海馬神經(jīng)炎性損傷,促進(jìn)海馬神經(jīng)元的生成,改善大鼠抑郁行為。 然而柴胡加龍骨牡蠣湯對(duì)2型糖尿病合并抑郁大鼠炎癥因子及單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的調(diào)控是通過哪些酶和代謝途徑發(fā)揮作用的,有待結(jié)合生物分子學(xué)、網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)、代謝組學(xué)等研究手段進(jìn)一步明確。

利益沖突:所有作者均聲明不存在利益沖突。