液質(zhì)聯(lián)用法檢測蘋果中多菌靈的殘留量

楊力，畢思彤，苗嘉敏，種一碧，趙大洲*

（1.西安航天城第一小學(xué)，陜西西安，710100；2.陜西學(xué)前師范學(xué)院化學(xué)化工學(xué)院，陜西西安，710100）

0 引言

蘋果的營養(yǎng)價值十分均衡，深受人們的喜愛，人們對于蘋果的需求也就相對來說比較高［1-3］。由于在蘋果的生長中會發(fā)生各類病蟲害，果農(nóng)往往選擇使用農(nóng)藥［4］。但這些農(nóng)藥在帶來經(jīng)濟效益的同時，過量使用也會對人體產(chǎn)生不可逆的損傷。有些不法商家為了提高產(chǎn)量會過量地使用農(nóng)藥，或者使用一些被禁止的農(nóng)藥，所以分析蘋果中農(nóng)藥殘留的情況就尤為重要［5-7］。殺蟲劑在現(xiàn)代農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中起到了非常關(guān)鍵的作用，特別是蘋果生產(chǎn)中使用，可以極大地改善蘋果的生產(chǎn)條件與質(zhì)量［8］。在種植蘋果過程中，多菌靈是最常用的農(nóng)藥之一，它可以有效地抑制農(nóng)作物的多種真菌病害，在中國被廣泛使用，但其殘留物可引起肝病和染色體異常，對哺乳動物有毒［9］。

1 實驗部分

1.1 試劑與儀器

液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀，1290Ⅱ-6470型號；固定式混勻儀，MX-F型號；渦旋混合器，PS-20型號；離心機，TDL-80-2B型號；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，RE-52AA型號。

蘋果，超市購買；甲酸，甲醇，乙腈，冰醋酸，丙酮，均購自國藥集團化學(xué)試劑有限公司；無水硫酸鈉，乙酸銨，正己烷，乙酸乙酯，均購自北京化工廠；多菌靈，購自上海壇墨質(zhì)檢科技有限公司。

1.2 實驗內(nèi)容

蘋果用研磨機進行充分的粉碎并攪拌均勻。樣品需要長期保存在-18℃環(huán)境中備用。稱取20 g蘋果樣品，置于150 mL燒杯中，加入60 mL乙酸乙酯，勻漿提取2 min后用濾紙過濾，收集濾液于100 mL具塞量筒中，繼續(xù)加入40 mL乙酸乙酯，室溫下靜置10 min，使乙酸乙酯和水相分層，加入飽和無水硫酸鈉溶液，繼續(xù)靜置分層，準確吸取乙酸乙酯層溶液50.00 mL，于40℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中濃縮至近干。

固相萃取柱分別通過10 mL丙酮、5 mL正己烷預(yù)處理，加入得到丙酮-正己烷溶液，舍棄流出液。20 mL甲醇+丙酮溶液分4次加入洗脫，收集洗脫濃縮至約2 mL，用氮吹儀吹干后，加入2 mL甲醇溶解定容。

2 結(jié)果測定

2.1 多菌靈

2.1.1 標準曲線及線性范圍

用濃度為1.0 μg/mL 多菌靈標準溶液配制濃度為10.0 ng/mL、50 ng/mL、100 ng/mL、200 ng/mL、300 ng/mL、500 ng/mL的不同濃度多菌靈溶液，并繪制標準曲線。其結(jié)果如圖1。

圖1 多菌靈標準曲線與線性方程

結(jié)果表明，多菌靈在濃度10.0 ng/mL～500.0 ng/mL之間呈線性相關(guān)，線性系數(shù)為0.99965990，滿足線性要求。

2.1.2 多菌靈檢出限及空白值計算

參考標準NY/T 1453—2007對空白樣品加標，加標量為45.0 ng，得出多菌靈含量為0.0023 mg/kg，測定條件和色譜峰響應(yīng)度及分離度良好，此定量限結(jié)果小于標準NY/T 1453—2007給出的檢出限要求，故此方法滿足條件。

表1 多菌靈檢出限數(shù)據(jù)

2.1.3 精密度的測定

分別稱取6份蘋果試樣按照標準NY/T 1453—2007進行試樣處理，測定結(jié)果如表2，表3。

表2 多菌靈精密度測試數(shù)據(jù)1

表3 多菌靈精密度測試數(shù)據(jù)2

結(jié)論：分別對樣品蘋果進行加標量為400.0ng和1400.0ng的加標，其精密度分別為2.20%和0.75%，滿足GB 27404—2008附錄F中關(guān)于精密度的要求。

2.1.4 多菌靈樣品加標測試

根據(jù)NY/T 1453—2007對空白樣品加入多菌靈標準溶液進行加標測試，加標量分別200ng、1200ng，加標結(jié)果見表2、表3、表4：

表4 多菌靈實際樣品加標測試數(shù)據(jù)

經(jīng)加標測定，樣品中多菌靈的回收率均在GB 27404—2008附錄F 要求的范圍之內(nèi)，符合要求。

結(jié)論：經(jīng)驗證，此方法多菌靈的檢出限為0.023mg/kg，小于SN/T 1453—2007中給出的檢出限0.02mg/kg，蘋果中多菌靈精密度為2.20%、0.75%，符合GB 27404—2008附錄F中關(guān)于精密度的要求。對樣品進行低、高兩種濃度的加標，其回收率均滿足GB 27404—2008中的要求。通過對多菌靈測定方法的線性范圍、檢出限、精密度和準確度的評價，本方法測定多菌靈數(shù)據(jù)準確，結(jié)果真實可靠，可用于蘋果中多菌靈的測定。

3 結(jié)論

本實驗首先確定了操作條件，其次驗證了方法的可行性，驗證結(jié)果均為良好，同時對方法精密度、準確度進行了測定，結(jié)果均在范圍之內(nèi)。實驗通過對蘋果中多菌靈農(nóng)藥殘留含量的測定，確定了所選蘋果所測農(nóng)藥殘留的含量均在國家標準范圍之內(nèi)，均可以安全食用。