神經(jīng)誘導(dǎo)損傷蛋白1聯(lián)合CK-MB檢測(cè)在急性心肌梗死中的診斷價(jià)值*

張林敏,張凱楠,伏建峰

1.石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院,新疆石河子 832000;2.新疆軍區(qū)總醫(yī)院全軍臨床檢驗(yàn)診斷中心,新疆烏魯木齊 830000;3.新疆醫(yī)科大學(xué)研究生院,新疆烏魯木齊 830017

急性心肌梗死(AMI)是因突發(fā)心肌缺血缺氧導(dǎo)致的嚴(yán)重心血管疾病,發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)[1]。臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)相關(guān)生物標(biāo)志物檢測(cè)是AMI實(shí)驗(yàn)室診斷的常規(guī)模式,其中以心肌損傷標(biāo)志物,如肌鈣蛋白,以及心肌酶學(xué)指標(biāo),如肌酸激酶同工酶(CK-MB)檢測(cè)的應(yīng)用最為廣泛。相關(guān)資料顯示,傳統(tǒng)心肌損傷標(biāo)志物在AMI的診斷方面存在一定的局限性,如CK-MB,其活性通常在AMI患者出現(xiàn)胸痛癥狀6～8 h后才升高[2-3],影響和制約AMI的早診斷、早治療。因此,新型AMI診斷生物標(biāo)志物的探尋成為本學(xué)科關(guān)注的焦點(diǎn)和熱點(diǎn)。神經(jīng)誘導(dǎo)損傷蛋白1(Ninj1)是由152個(gè)氨基酸組成的進(jìn)化保守表面蛋白,其相對(duì)分子質(zhì)量約為16.3×103,基因定位于人類染色體9q22,包括4個(gè)外顯子和3個(gè)內(nèi)含子,具有2個(gè)跨膜區(qū)域,在細(xì)胞質(zhì)外部具有N和C末端。其中Pro26和Asn37之間的12個(gè)殘基區(qū)域?yàn)镹inj1的同源黏附結(jié)構(gòu)域,參與了細(xì)胞與細(xì)胞間、細(xì)胞與組織間的嗜同性黏附[4]。有研究表明,Ninj1水平升高與患者左心房容積呈正相關(guān),與左室射血分?jǐn)?shù)呈負(fù)相關(guān),有可能成為具有評(píng)估心功能標(biāo)志物的潛力[5]。有研究報(bào)道顯示,高水平Ninj1與冠狀動(dòng)脈粥樣硬化患者冠狀動(dòng)脈狹窄程度呈正相關(guān),并且對(duì)病情嚴(yán)重程度有提示意義[6]。本研究擬觀察AMI患者血清Ninj1的表達(dá)水平,分析Ninj1與AMI病情的相關(guān)性,并評(píng)估其在AMI中的臨床診斷效能,以期獲得可用于AMI診斷的新型生物標(biāo)志物,現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2022年7月至2023年3月新疆軍區(qū)總醫(yī)院心內(nèi)科收治的以胸痛為首發(fā)癥狀、在胸痛24 h內(nèi)入院的確診為AMI的29例患者作為AMI組,其中入院時(shí)胸痛時(shí)間6 h內(nèi)共13例;根據(jù)冠狀動(dòng)脈造影結(jié)果將AMI組患者按照Gensini評(píng)分中位數(shù)(45分)分為輕度狹窄組(≤45分,n=15)和中重度狹窄組(>45分,n=14)。另選取29例非AMI患者作為對(duì)照組,為同期住院行冠狀動(dòng)脈造影術(shù)確認(rèn)為冠狀動(dòng)脈正常的患者。納入標(biāo)準(zhǔn):(1)年齡≥18歲;(2)符合美國(guó)心臟病學(xué)會(huì)聯(lián)合委員會(huì)發(fā)布的AMI診斷標(biāo)準(zhǔn)[7];(3)臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)合并惡性腫瘤、精神分裂癥和心理疾病;(2)各種原因?qū)е碌男募〔?、急慢性心?nèi)膜炎及心肌炎;(3)肺源性心臟病、先天性心臟病、急慢性感染、血液病、自身免疫系統(tǒng)紊亂性疾病;(4)無法配合本研究的患者。所有研究對(duì)象均知情同意并簽署知情同意書。本研究經(jīng)新疆軍區(qū)總醫(yī)院倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)(倫理審批號(hào):2023RR0602)。

1.2儀器與試劑 ADVIA Centaur XP全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀(德國(guó)西門子股份公司)及配套CK-MB試劑(批號(hào):69403201);ELX800酶標(biāo)儀(美國(guó)BioTek儀器有限公司);Ninj1檢測(cè)試劑盒(批號(hào):CSB-EL015808HU,武漢華美生物工程有限公司)。

1.3方法

1.3.1臨床基礎(chǔ)信息資料 收集所有研究對(duì)象性別、年齡、吸煙史、飲酒史、既往病史、收縮壓、舒張壓等臨床基礎(chǔ)信息資料。

1.3.2血液標(biāo)本采集及前處理 采集所有研究對(duì)象靜脈血4 mL,在室溫下放置30 min,然后以3 000 r/min的速度離心10 min,分離血清,置于-80 ℃冰箱保存待測(cè)。

1.3.3血清Ninj1、CK-MB水平檢測(cè) 采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)血清Ninj1水平,采用全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及配套試劑檢測(cè)血清CK-MB水平,檢測(cè)步驟嚴(yán)格按照Ninj1及CK-MB配套試劑盒說明書進(jìn)行。

2 結(jié) 果

2.1AMI組和對(duì)照組臨床基礎(chǔ)信息資料比較 兩組性別、年齡、吸煙史、飲酒史、糖尿病史、收縮壓、舒張壓比較,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);兩組高脂血癥比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見表1。

表1 AMI組和對(duì)照組臨床基礎(chǔ)信息資料比較或n/n或M(P25,P75)]

2.2AMI組和對(duì)照組血清CK-MB、Ninj1水平比較 AMI組血清CK-MB、Ninj1水平均明顯高于對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見表2。AMI組6 h內(nèi)胸痛的13例患者CK-MB水平為[20.46(5.27,29.50)]ng/mL,Ninj1水平為[179.14(88.69,302.78)]pg/mL。

表2 AMI組和對(duì)照組血清CK-MB、Ninj1水平比較[M(P25,P75)]

2.3Ninj1水平與Gensini評(píng)分的相關(guān)性 中重度狹窄組Ninj1水平明顯高于輕度狹窄組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);中重度狹窄組和輕度狹窄組CK-MB水平比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見表3。Spearman相關(guān)分析結(jié)果顯示,血清Ninj1水平與Gensini評(píng)分呈正相關(guān)(r=0.587,P=0.001),CK-MB水平與Gensini評(píng)分無相關(guān)性(r=0.128,P=0.525)。

表3 輕度狹窄組和中重度狹窄組血清Ninj1與CK-MB水平比較[M(P25,P75)]

2.4Ninj1、CK-MB對(duì)AMI的診斷效能 ROC曲線分析結(jié)果顯示,Ninj1最佳截?cái)嘀禐?3.82 pg/mL時(shí),診斷AMI的曲線下面積(AUC)為0.657,低于CK-MB診斷AMI的AUC(0.946);Ninj1診斷AMI的靈敏度為62.10%,特異度為72.40%,也低于CK-MB(86.20%、93.10%);Ninj1與CK-MB聯(lián)合檢測(cè)診斷AMI的AUC為0.989,靈敏度為93.10%,特異度為96.60%。見表4。29例AMI患者中有13例入院胸痛時(shí)間在6 h內(nèi),基于AMI早診斷、早治療利于患者康復(fù)的共識(shí),進(jìn)一步對(duì)Ninj1及早(6 h內(nèi))診斷AMI的效能進(jìn)行評(píng)估,結(jié)果顯示,當(dāng)胸痛時(shí)間在6 h內(nèi),Ninj1最佳截?cái)嘀禐?4.45 pg/mL時(shí),診斷AMI的AUC為0.812,靈敏度為84.60%,特異度為75.90%,診斷效能明顯提升,尤其是靈敏度趨近于同時(shí)段CK-MB的靈敏度(86.60%);此時(shí)段Ninj1與CK-MB聯(lián)合檢測(cè)診斷AMI的AUC為0.989,靈敏度為92.30%,特異度為96.60%。見表5。

表4 血清Ninj1、CK-MB對(duì)AMI的診斷效能評(píng)估

表5 血清Ninj1、CK-MB對(duì)AMI發(fā)病6 h內(nèi)的診斷效能

3 討 論

有研究表明,AMI發(fā)生的主要機(jī)制與不穩(wěn)定的冠狀動(dòng)脈粥樣硬化斑塊破裂有關(guān),從而促進(jìn)大量血小板聚集及血栓形成[8]。在AMI的發(fā)展進(jìn)程中,梗死區(qū)域持續(xù)擴(kuò)張可導(dǎo)致冠狀動(dòng)脈閉塞和血流減慢,引發(fā)全身微循環(huán)紊亂,以及左心室進(jìn)行性擴(kuò)張和心臟功能減退[9]。盡管目前藥物治療和介入治療已取得明顯進(jìn)展,但每年因AMI死亡的患者仍居高不下,嚴(yán)重威脅人們的生命健康。因此,對(duì)AMI的早診斷、早治療至關(guān)重要。

目前,AMI的診斷指標(biāo)主要是心肌肌鈣蛋白和CK-MB,但其具有一定的局限性[10],難以滿足臨床早診斷、早治療所需。因此,探尋新型AMI診斷生物標(biāo)志物,為臨床早診斷AMI提供可靠的實(shí)驗(yàn)室參考依據(jù),具有重要的科學(xué)價(jià)值和應(yīng)用前景。

Ninj1是近年來發(fā)現(xiàn)的一種新型炎癥調(diào)控標(biāo)志物,在缺氧和高糖條件下,其水平升高,參與調(diào)控細(xì)胞趨化、遷移、黏附等多種生理病理過程[11-13]。有研究表明,Ninj1與心血管疾病密切相關(guān),大量Ninj1分泌不僅可促進(jìn)炎癥細(xì)胞間的黏附,還可促進(jìn)細(xì)胞活性氧簇的產(chǎn)生及機(jī)體炎癥介質(zhì)產(chǎn)生、活化,此外,炎癥介質(zhì)也可直接刺激Ninj1水平升高,并加速巨噬細(xì)胞聚集[14]。聚集的巨噬細(xì)胞可吞噬氧化型低密度脂蛋白形成脂質(zhì)泡沫細(xì)胞,而脂質(zhì)泡沫細(xì)胞增加反過來可進(jìn)一步加重炎癥反應(yīng),兩種效應(yīng)疊加造成內(nèi)皮細(xì)胞嚴(yán)重?fù)p傷并促進(jìn)斑塊形成,進(jìn)而引發(fā)心血管疾病[15]?；贜inj1在心血管疾病發(fā)生和發(fā)展進(jìn)程中的生物學(xué)效應(yīng)特點(diǎn)和臨床急需AMI早篩查、早診斷生物標(biāo)志物的迫切性,本課題組認(rèn)為Ninj1值得進(jìn)一步研究。

本研究結(jié)果顯示,AMI組血清 Ninj1水平明顯高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。CK-MB是目前臨床推薦AMI早篩查、早診斷的酶學(xué)指標(biāo),如前所述,CK-MB活性通常在AMI患者胸痛發(fā)作6～8 h后才升高。因此,在反映AMI發(fā)展進(jìn)程方面,Ninj1可能比CK-MB更具有早篩查、早診斷的優(yōu)勢(shì),當(dāng)然這需要更深層次的研究進(jìn)一步證實(shí)。Gensini評(píng)分可反映AMI患者冠狀動(dòng)脈的病變程度,Spearman相關(guān)分析結(jié)果顯示,血清Ninj1水平與Gensini評(píng)分呈正相關(guān)(P<0.05),而CK-MB水平與Gensini評(píng)分無相關(guān)性(P>0.05),提示在反映AMI預(yù)后方面,Ninj1也較CK-MB更具優(yōu)勢(shì)。ROC曲線分析結(jié)果顯示,血清Ninj1診斷AMI的AUC為0.657,低于CK-MB。進(jìn)一步分析顯示,Ninj1診斷AMI的靈敏度為62.10%,特異度為72.40%,也均低于CK-MB。究其原因可能是受限于方法學(xué):Ninj1檢測(cè)方法為酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),CK-MB檢測(cè)方法為全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析法,一般而言酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的檢測(cè)最低限和精密度均不及自動(dòng)化分析。隨著日后Ninj1檢測(cè)方法學(xué)的逐漸完善,Ninj1作為新型生物標(biāo)志物診斷AMI的潛力和前景可期。

近幾年來,新的臨床檢測(cè)指標(biāo)不斷出現(xiàn),相關(guān)檢測(cè)項(xiàng)目組合或聯(lián)合檢測(cè)取代過去單一指標(biāo)檢測(cè)應(yīng)用于臨床診療成為一種常規(guī)模式。為此,作者評(píng)估了Ninj1和CK-MB聯(lián)合檢測(cè)的臨床診斷效能,結(jié)果顯示,與各項(xiàng)指標(biāo)單獨(dú)檢測(cè)比較,2項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)診斷AMI的AUC為0.989,靈敏度為93.10%,特異度為96.60%。提示Ninj1有可能采用與CK-MB聯(lián)合檢測(cè)的模式,作為新型AMI診斷生物標(biāo)志物應(yīng)用于臨床。如前所述,受限于方法學(xué),單獨(dú)Ninj1檢測(cè)的診斷效能不及CK-MB。但當(dāng)胸痛時(shí)間在6 h內(nèi),Ninj1的診斷效能明顯提升。從臨床診斷效能角度映證了Ninj1作為新型AMI生物標(biāo)志物具有早篩查的優(yōu)勢(shì)。

綜上所述,Ninj1對(duì)AMI的臨床診斷,尤其是早期篩查及早期診斷具有一定價(jià)值,Ninj1與CK-MB聯(lián)合檢測(cè)可提高其臨床診斷效能,Ninj1有可能成為新型AMI診斷生物標(biāo)志物。