淡豆豉化學(xué)成分及抗抑郁作用研究進(jìn)展

劉爽，齊英，翁浪仁，王秋紅，2

（1.廣東藥科大學(xué)中藥學(xué)院/廣東省中藥飲片規(guī)范化炮制工程技術(shù)研究中心，廣東 廣州 510006；2.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)/教育部北藥基礎(chǔ)與應(yīng)用研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/黑龍江省中藥及天然藥物藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，黑龍江 哈爾濱 150040）

淡豆豉是豆科植物大豆Glycine max（L.）Merr.的干燥成熟種子（黑豆）經(jīng)發(fā)酵形成的加工品，其味苦、涼，歸肺、胃經(jīng)，有抗抑郁、解表、宣發(fā)郁熱之功效，對(duì)感冒、寒熱頭痛、煩躁胸悶有很好的療效。淡豆豉出自《名醫(yī)別錄》[1]：“主傷寒頭痛寒熱，瘴氣惡毒，煩躁滿悶，虛勞喘吸，兩腳疼冷。又殺六畜胎子諸毒?！钡刽钚猿煞种饕獮榇蠖巩慄S酮、大豆低聚糖、大豆皂苷、大豆多肽、褐色素、γ-氨基丁酸、豆豉纖溶酶等[2]。

從中醫(yī)理論及中藥使用的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)，淡豆豉具有一定的抗抑郁作用。任佳秀等[3]首次發(fā)現(xiàn)中藥淡豆豉中存在較高含量的γ-氨基丁酸（γ-aminobutyric acid，GABA），陳青峰等[4]在此基礎(chǔ)上發(fā)現(xiàn)淡豆豉可明顯改善小鼠出現(xiàn)的快感缺失、行為無助等抑郁癥狀，表明其具有良好的抗抑郁作用并推測(cè)發(fā)揮作用的強(qiáng)弱與γ-氨基丁酸含量有關(guān)。中藥抗抑郁注重整體治療，具有多成分、多靶點(diǎn)、多效應(yīng)協(xié)同作用的特點(diǎn)，淡豆豉在防治抑郁癥方面具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。因此，其改善現(xiàn)代廣泛存在的焦慮、抑郁等精神系統(tǒng)疾病的作用以及機(jī)制值得進(jìn)一步深入探討。本文將從其化學(xué)成分和抗抑郁作用這兩方面及其關(guān)系進(jìn)行綜述。

1 淡豆豉的化學(xué)成分

淡豆豉含有多種天然活性成分，如大豆異黃酮、豆豉多糖、大豆皂苷、大豆低聚糖、維生素以及發(fā)酵過程中產(chǎn)生的纖溶酶、γ-氨基丁酸等[5]，下面簡(jiǎn)要介紹這幾類化合物的研究進(jìn)展。

1.1 異黃酮類

淡豆豉富含異黃酮是一種植物性雌激素，目前被許多學(xué)者認(rèn)可為淡豆豉的主要活性物質(zhì)[6-8]。大豆異黃酮主要有2種存在形式，一種是結(jié)合型糖苷，如大豆苷和染料木苷等，不易被人體吸收：另一種是游離型苷元，如大豆苷元和染料木素等，易被人體吸收[9]；具有抗癌、預(yù)防骨質(zhì)疏松癥、抗菌、改善胰島素抵抗、抗糖尿病、預(yù)防更年期、預(yù)防乳腺癌以及改善骨質(zhì)疏松，預(yù)防心血管疾病、阿爾茨海默病等藥理活性[10]。

林王敏等[2]通過系統(tǒng)檢索淡豆豉已報(bào)道的文獻(xiàn)，總結(jié)出淡豆豉中含有12 種異黃酮，其苷元類成分有大豆苷元、黃豆黃素、染料木素，當(dāng)苷元C-7 位被葡萄糖基取代時(shí)，形成對(duì)應(yīng)的苷類成分，如大豆苷、黃豆黃苷及染料木苷，異黃酮苷類成分的葡萄糖C-6位乙?；虮；嘈纬蓪?duì)應(yīng)的?；疹惓煞郑姳?。

表1 淡豆豉中的異黃酮及其苷類Table 1 Isoflavones and glycosides in Sojae Semen Praeparatum

陳岑等[11]采用加速溶劑萃取提取技術(shù)，結(jié)合較高靈敏度的高效液相色譜-電噴霧-離子阱質(zhì)譜聯(lián)用（HPLC-ESI-IT/MS）技術(shù)，建立了一套簡(jiǎn)單迅速、靈敏度較高的提取和分離鑒定大豆異黃酮的方法，并在此基礎(chǔ)上對(duì)大豆異黃酮類化合物的具體結(jié)構(gòu)進(jìn)行推測(cè)。

1.2 大豆皂苷

大豆皂苷屬三萜類齊墩果酸型皂苷，是一種豆科植物的重要生物學(xué)活性成分。現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，大豆皂苷具有抗誘變、抗衰老、降血糖、降血脂、抗感染、抗凝血、腎素抑制劑、抗腫瘤等藥理活性[12]。根據(jù)苷元不同，目前所知的大豆皂苷分為A、B、E、DDMP 族等。在C-3 位或C-22 位連接糖鏈的糖苷中，其中A 族大豆皂苷為含有多個(gè)糖鏈的皂苷，在C-3 位以及C-22 位上均有糖鏈取代，而B、E和DDMP 族的大豆皂苷則僅有1 個(gè)糖鏈取代，且處于C-3位[13]。

李迎春等[14]運(yùn)用紫外分光光度法、高效液相色譜法對(duì)黑豆不同炮制品進(jìn)行了大豆皂苷的質(zhì)量分?jǐn)?shù)測(cè)定，發(fā)現(xiàn)經(jīng)發(fā)酵后，大豆皂苷質(zhì)量分?jǐn)?shù)相對(duì)降低，說明除了部分成分溶出的原因，有一些皂苷成分轉(zhuǎn)化成其他物質(zhì)。淡豆豉中雖明確含有大豆皂苷成分，但是尚未分離出明確的單體化合物，仍有很大的研究空間。

1.3 γ-氨基丁酸

γ-氨基丁酸分子式是C?H?NO?，別名4-氨基丁酸（γ-aminobutyric acid，簡(jiǎn)稱GABA），是一種重要的中樞神經(jīng)系統(tǒng)抑制性神經(jīng)遞質(zhì)，于淡豆豉自然發(fā)酵“再悶”過程中，在谷氨酸脫羧酶的催化下，由谷氨酸脫羧而成。研究表明γ-氨基丁酸具有抗焦慮、增強(qiáng)記憶力、鎮(zhèn)痛、抗驚厥、促進(jìn)睡眠作用，符合典籍中記載淡豆豉的“除煩”功效[15-18]。

任佳秀等[3]首次發(fā)現(xiàn)中藥淡豆豉中存在較高質(zhì)量分?jǐn)?shù)的γ-氨基丁酸，并建立了適用于淡豆豉中γ-氨基丁酸提取工藝的柱前在線衍生-高效液相色譜檢測(cè)法。陳青峰等[4，19]在此基礎(chǔ)上做了一系列研究，推測(cè)淡豆豉炮制過程中pH、溫度、谷氨酸脫羧酶、中性及堿性蛋白酶等因素對(duì)γ-氨基丁酸的形成有重要影響；還檢測(cè)了淡豆豉炮制過程中γ-氨基丁酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)變化，發(fā)現(xiàn)黑豆發(fā)酵6 d 的樣本不含γ-氨基丁酸，而經(jīng)過“再悶”6～15 d 樣品中γ-氨基丁酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)迅速增加且隨時(shí)間延長(zhǎng)而增加。

1.4 纖溶酶

豆豉纖溶酶是在發(fā)酵過程中產(chǎn)出一種活性較高的纖維蛋白酶。這種酶具有較強(qiáng)的溶解血栓纖維蛋白能力，對(duì)人體無毒害作用，不會(huì)引起內(nèi)出血，可以有效預(yù)防血栓的形成，具有溶血栓、抗氧化、降血脂等藥理活性[20]。豆豉纖溶酶通過對(duì)體內(nèi)的纖溶酶原進(jìn)行激活，而使內(nèi)源性纖溶酶的活性提高，它還具有溶栓能力強(qiáng)、安全、半衰期長(zhǎng)等優(yōu)勢(shì)，是一種值得深度研究的溶血栓、抗血栓的新型藥物[21]。張敏等[22]通過利用纖維蛋白平板法，對(duì)淡豆豉纖溶酶的活力進(jìn)行了檢測(cè)。結(jié)果表明，在發(fā)酵之后，大豆會(huì)生成一種纖溶酶，這種酶不僅具有很高的纖溶活性，還具有很好的抗凝、溶栓作用，并且可以被消化道直接吸收，具有良好的應(yīng)用和開發(fā)前景。

1.5 苯丙素類

苯丙素類是一種由一個(gè)或多個(gè)C6-C3基團(tuán)組成的天然產(chǎn)物，在中草藥中普遍存在。這種類型的化合物，大多是由莽草酸與苯丙氨酸、酪氨酸等芳香氨基酸，經(jīng)過脫氨、羥基化等一系列反應(yīng)而形成的，繼而生成阿魏酸、香豆素酸等中間物質(zhì)，又經(jīng)多種途徑進(jìn)而生成類黃酮、異黃酮等次生代謝產(chǎn)物[13]。文獻(xiàn)報(bào)道了淡豆豉中7 種苯丙素類化合物，分別為阿魏酸[23-25]、咖啡酸[23，25-26]、綠原酸[23，26]、肉桂酸[23，25-26]、原兒茶酸[23，25]、沒食子酸[23，25-26]、丁香醛[25]。然而黑豆中發(fā)現(xiàn)有13種苯丙素類化合物，因此有學(xué)者推測(cè)淡豆豉發(fā)酵過程中，苯丙素類化合物可能分解或進(jìn)一步轉(zhuǎn)化[2]。

1.6 多糖類

多糖是一種由10 個(gè)以上糖基組成的鏈狀聚合物，它的組成比較復(fù)雜，在植物和動(dòng)物的細(xì)胞中都有大量分布。有關(guān)研究顯示，淡豆豉多糖是淡豆豉中一種非常重要的生物活性成分，它可以降低血糖[27]，并且對(duì)糖尿病小鼠的腎臟和胰腺有一定的修復(fù)作用[28]。劉鋒等[29]對(duì)淡豆豉發(fā)酵過程不同發(fā)酵階段多糖的質(zhì)量分?jǐn)?shù)進(jìn)行動(dòng)態(tài)分析，結(jié)果表明多糖類成分隨著微生物代謝發(fā)生轉(zhuǎn)化，其質(zhì)量分?jǐn)?shù)在發(fā)酵前期隨著發(fā)酵時(shí)間延長(zhǎng)呈上升趨勢(shì)，在發(fā)酵過程中隨著發(fā)酵時(shí)間的增加逐漸下降，隨后呈逐漸上升趨勢(shì)。

黑豆經(jīng)發(fā)酵加工成淡豆豉，含有大量的大豆異黃酮、大豆皂苷、γ-氨基丁酸、豆豉纖溶酶、苯丙素類、多糖等化學(xué)成分，見表2。除上述成分外，淡豆豉還含有蛋白質(zhì)、脂肪、維生素B1、維生素B2、花色苷類、氨基酸類、核苷類、微量元素等成分[2]。

表2 淡豆豉化學(xué)成分及產(chǎn)生機(jī)制Table 2 Chemical constituents and production mechanism of Sojae Semen Praeparatum

2 淡豆豉的抗抑郁作用

抑郁癥是一種以持續(xù)、明顯的情緒低落、活動(dòng)能力下降、思維和認(rèn)知能力下降等為主要臨床表現(xiàn)的情感性心理疾病。近幾年來，中醫(yī)對(duì)抑郁癥的病因、治法等進(jìn)行了較多的研究。西醫(yī)認(rèn)為抑郁癥的發(fā)病機(jī)制十分復(fù)雜，目前以經(jīng)典的神經(jīng)遞質(zhì)學(xué)說占據(jù)主要地位[30]。中醫(yī)則將情志之郁作為抑郁癥的主要病因[31]；現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，抑郁癥屬于中醫(yī)學(xué)的郁病、失眠、善忘、癲證、百合病、梅核氣等范疇[30]。

2.1 歷代本草對(duì)淡豆豉除煩功效相關(guān)論述

淡豆豉因可藥食兩用，在古代藥方書中記載較多。通過查閱載有淡豆豉的歷代本草著作，對(duì)記載淡豆豉除煩功效的古籍進(jìn)行考證，并歸納總結(jié)，如表3 所示。經(jīng)考證，最早記載淡豆豉除煩功效的古籍是漢代陶弘景所著《名醫(yī)別錄》。淡豆豉除煩，歷來多有應(yīng)用，或單用，如《梅師集驗(yàn)方》治傷寒汗出不解，己三四日，胸中煩悶，單用豆豉煎服，以發(fā)散胸中之郁熱；或與其它藥配伍，如竹茹、芒硝等，其中最具代表性的是經(jīng)方桅子豉湯。歷代本草中淡豆豉使用的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)表明淡豆豉具有除煩功效。

表3 古籍中淡豆豉除煩功效相關(guān)論述Table 3 Discussions on the efficacy of Sojae Semen Praeparatum in removing nuisances in ancient books

2.2 淡豆豉的抗抑郁機(jī)制

2.2.1 調(diào)節(jié)神經(jīng)遞質(zhì) 抑郁患者發(fā)病機(jī)制與體內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)相關(guān)，抑郁患者下丘腦單胺類神經(jīng)遞質(zhì)含量明顯降低，抑制海馬區(qū)神經(jīng)元、杏仁核神經(jīng)元興奮，導(dǎo)致抑郁[32]?，F(xiàn)代藥理研究表明，γ-氨基丁酸具有促進(jìn)睡眠，增強(qiáng)記憶力，抗焦慮的作用[16-18]；GABA b受體激動(dòng)劑可抑制單胺能神經(jīng)遞質(zhì)的釋放，提示γ-氨基丁酸神經(jīng)遞質(zhì)參與抑郁癥的發(fā)病[33-34]。陳青峰等[4]發(fā)現(xiàn)淡豆豉炮制后期出現(xiàn)高含量γ-氨基丁酸，且能明顯改善小鼠的快感缺失、行為絕望等抑郁癥狀，表現(xiàn)出良好的抗抑郁作用，推測(cè)與γ-氨基丁酸含量有關(guān)。還有研究表明，情緒應(yīng)激誘導(dǎo)大鼠焦慮樣行為，伴隨著腦額葉皮質(zhì)NO 釋放下調(diào)，γ-氨基丁酸通過影響NO 的代謝，從而改善焦慮行為[35]。周春英等[36]發(fā)現(xiàn)γ-氨基丁酸具有改善慢性應(yīng)激抑郁大鼠的認(rèn)知功能的作用。周月等[37]研究表明L-茶氨酸和γ-氨基丁酸聯(lián)合干預(yù)對(duì)由溫和刺激誘發(fā)的慢性大鼠抑郁癥有一定的改善作用，且高劑量的作用更為顯著。張宇昕等[38]通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)得出結(jié)論：γ-氨基丁酸能神經(jīng)元功能異常與慢性應(yīng)激導(dǎo)致的抑郁相關(guān)。

2.2.2 調(diào)節(jié)腸道菌群 研究表明抑郁癥病理機(jī)制和腸道菌群變化有關(guān)，腸道菌群紊亂影響下丘腦-垂體-腎上腺（The hypothalamic-pituitary-adrenal axis，HPA）軸功能以及炎性因子水平，從而導(dǎo)致抑郁癥的發(fā)生[39-40]。有研究表明淡豆豉可通過調(diào)節(jié)腸道菌群改善大鼠抑郁行為，進(jìn)一步研究表明淡豆豉可以通過調(diào)節(jié)腸道微生物群中神經(jīng)遞質(zhì)相關(guān)系統(tǒng)型的組成來減輕抑郁癥狀[17]。范萬陽(yáng)等[41]應(yīng)用淡豆豉來調(diào)整小鼠腸道菌群，可以糾正林可霉素造成的菌群失調(diào)，增加腸道有益菌雙歧桿菌和乳酸桿菌的數(shù)量。陳麗艷等[42]研究結(jié)果顯示了淡豆豉對(duì)有益菌擬桿菌的促進(jìn)作用和對(duì)雙歧桿菌較弱的抑制作用，但對(duì)乳桿菌卻表現(xiàn)了較強(qiáng)的抑制作用；但對(duì)于有害菌，如產(chǎn)氣莢膜梭菌及條件致病菌腸桿菌和腸球菌均有較強(qiáng)的抑菌效果，其抑菌效果與淡豆豉異黃酮成分有關(guān)。

3 結(jié)語(yǔ)

目前，國(guó)內(nèi)外對(duì)淡豆豉抗抑郁作用及機(jī)制的研究主要集中于發(fā)酵過程中產(chǎn)生的γ-氨基丁酸含量的變化。綜合近年文獻(xiàn)可知，淡豆豉具有抗抑郁作用主要通過調(diào)節(jié)神經(jīng)遞質(zhì)、調(diào)節(jié)腸道微生物群中神經(jīng)遞質(zhì)相關(guān)系統(tǒng)型的組成來實(shí)現(xiàn)。也有推測(cè)淡豆豉具有多成分-多靶點(diǎn)-多通路的協(xié)同抗抑郁作用[43]。但總體來看，對(duì)于淡豆豉抗抑郁作用的研究還不夠深入，對(duì)于淡豆豉抗抑郁的確切靶點(diǎn)以及作用機(jī)制知之甚少。淡豆豉是我國(guó)重要的藥食兩用中藥，其抗抑郁作用值得進(jìn)一步深入探討，其食養(yǎng)作用也有待進(jìn)一步開發(fā)。本文可以為發(fā)掘淡豆豉作為一種副作用小、療效好的抗抑郁藥物、食品或保健品提供參考。