G4-RKD患者血清sFLC、LAMP-2及NGAL表達(dá)水平與病程發(fā)展及腎功能的相關(guān)性

喬玲

（新鄉(xiāng)和平醫(yī)院檢驗(yàn)科，河南 新鄉(xiāng) 453002）

IgG4相關(guān)性疾?。↖gG4-RD）是一種以纖維炎性病變?yōu)橹鞯南到y(tǒng)性自身免疫性疾病，可累及全身多處組織及器官[1]。IgG4相關(guān)性腎病指的是IgG4-RD累及腎臟，可分為IgG4相關(guān)的小管間質(zhì)性腎炎（IgG4-TIN）和IgG4相關(guān)的膜性腎病（IgG4-MN）兩類，以IgG4-TIN最為常見(jiàn)。IgG4-TIN的發(fā)病機(jī)制尚未完全明確[2]。

臨床主要以免疫球蛋白增高、外周血嗜酸性粒細(xì)胞增多及低補(bǔ)體血癥等實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果對(duì)IgG4-TIN進(jìn)行診斷。血清游離輕鏈（sFLC）的代謝主要依靠腎臟，其表達(dá)水平會(huì)隨著腎功能的改變而改變[3]。溶酶體相關(guān)膜蛋白2（LAMP-2）是一種主要表達(dá)與中性粒細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞之中的糖蛋白，在血管炎的活動(dòng)中起著極為重要的作用。LAMP-2水平在腎小球腎炎患者中顯著升高。中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白（NGAL）是一種急性腎損傷標(biāo)志物，可有效反映患者的腎功能損傷程度[4]。

現(xiàn)階段關(guān)于sFLC、LAMP-2及NGAL的研究大多集中于分析其與腎功能改變的聯(lián)系，鮮少研究其與腎功能指標(biāo)及病情發(fā)展的相關(guān)性。

基于此，本研究分析sFLC、LAMP-2及NGAL在IgG4-RKD 患者血清中的表達(dá)水平，探究其與病程發(fā)展和腎功能的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年2月～2021年2月我院收治的94例IgG4-RKD患者（κ型51例，λ型43例）設(shè)為觀察組。選擇50例同期于我院行健康體檢者作為對(duì)照組。

其中，觀察組中男性53例，女性41例，平均年齡為（62.18±14.09）歲；對(duì)照組中男性28例，女性22例，平均年齡為（61.89±13.74）歲。兩組的一般資料無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。

均知曉該研究方案且簽署同意書，我院倫理委員會(huì)已批準(zhǔn)本研究開展。

納入標(biāo)準(zhǔn)：均符合2015年中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)腎臟疾病專業(yè)委員會(huì)匯編的《IgG4相關(guān)小管間質(zhì)性腎炎的篩選及診斷標(biāo)準(zhǔn)的分析》[5]中關(guān)于IgG4-RKD的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)；均伴有不同程度尿液或腎功能檢查異常；未服用影響腎功能指標(biāo)的相關(guān)藥物；患者及其家屬均簽署知情同意書。

排除標(biāo)準(zhǔn)：排除合并神經(jīng)系統(tǒng)疾??；排除伴有肝、腎功能不全；合并其他惡性腫瘤；臨床資料不全；無(wú)法配合研究。

1.2 方法

1.2.1 血清指標(biāo)檢測(cè)

采集5 mL肘靜脈血，離心后分離血清，采用免疫散射比濁法檢測(cè)血清游離羥鏈（sFLC），檢測(cè)儀器采用IMMAGE800全自動(dòng)免疫散射濁度儀，由美國(guó)Beckman公司生產(chǎn)。SFLCκ、λ檢測(cè)試劑盒由美國(guó)The Binding Stie公司（Freelite TM）提供。通過(guò)酶聯(lián)免疫法（ELISA）檢測(cè)溶酶體相關(guān)膜蛋白2（LAMP-2）、中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白（NGAL）水平。LAMP-2試劑盒購(gòu)自南京凱基生物科技有限公司，NGAL檢測(cè)試劑盒由美國(guó)R&D公司提供。所有檢測(cè)操作均嚴(yán)格按照說(shuō)明書執(zhí)行。

1.2.2 腎功能檢測(cè)

應(yīng)用美國(guó)雅培Gi6200全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定血肌酐（Scr）、血尿素氮（BUN）水平，并評(píng)估24h尿蛋白定量。所有檢測(cè)操作均嚴(yán)格按照說(shuō)明書執(zhí)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

本采用spss19.0進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，以[n(%)]表示計(jì)數(shù)資料，行χ2檢驗(yàn)，以（±SD）表示計(jì)量資料，行t檢驗(yàn)，采用person相關(guān)性分析法分析偏態(tài)分布資料及等級(jí)資料相關(guān)性，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組血清游離輕鏈（SFLCκ、λ）結(jié)果及比值比較

κ型IgG4-RKD患者sFLCκ水平和SFLCκ/λ比值均顯著高于對(duì)照組，λ型IgG4-RKD患者sFLCκ、sFLCλ水平較對(duì)照組明顯偏高，SFLCκ/λ比值顯著低于對(duì)照組，詳見(jiàn)表2。

表1 不同型別IgG4-RKD患者sFLC檢測(cè)結(jié)果比較（±SD）

表1 不同型別IgG4-RKD患者sFLC檢測(cè)結(jié)果比較（±SD）

分組 例數(shù) sFLCκ(mg·L-1) sFLCλ(mg·L-1) SFLCκ/λ IgG4-RKDκ型 51 134.03±87.12 13.72±3.65 8.11±6.79 IgG4-RKDλ型 43 25.87±12.98 159.33±76.53 0.11±0.34對(duì)照組 50 7.44±9.34 14.01±12.87 0.26±1.13 F 84.238 176.602 61.396 P 0.000 0.000 0.000

表2 兩組血清LAMP-2及NGAL表達(dá)水平比較（±SD）

表2 兩組血清LAMP-2及NGAL表達(dá)水平比較（±SD）

分組 例數(shù) NCAL(μg·L-1) LAMP-2(μg·L-1)對(duì)照組 50 97.48±14.21 6.93±1.34觀察組 94 169.26±20.78 29.78±5.47 t 21.843 29.034 P 0.000 0.000

2.2 血清LAMP-2及NGAL水平比較

觀察組血清LAMP-2及NCAL水平均顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。詳見(jiàn)表3。

表3 不同程度腎功能損傷者血清sFLC、NACL、LAMP-2水平及腎功能指標(biāo)比較（±SD）

表3 不同程度腎功能損傷者血清sFLC、NACL、LAMP-2水平及腎功能指標(biāo)比較（±SD）

指標(biāo) 輕度(n=28) 中度(n=47) 重度(n=19) F P sFLCκ(mg·L-1) 18.92±5.13 69.12±11.09 1877.41±237.44 2256.694 0.000 sFLCλ(mg·L-1) 16.53±5.12 38.98±6,73 22.54±4.17 144.053 0.000 sFLCκ/λ 1.83±0.25 1.97±0.18 1.85±0.21 4.737 0.011 NCAL(μg·L-1) 135.47±17.33 159.23±18.18 184.29±20.14 44.662 0.000 LAMP-2(μg·L-1) 7.18±1.27 15.22±3.48 44.73±5.86 640.57 0.000 Scr(μmol·L-1) 150.48±12.24 173.45±27.47 196.49±30.12 20.162 0.000 BUN(μmol·L-1) 17.48±3.13 22.11±3.06 27.84±3.17 63.331 0.000 24 h尿蛋白定量(g·24h-1) 153.24±13.17 176.38±28.15 194.76±31.08 15.909 0.000

2.3 不同程度腎功能受損患者血清sFLC、NACL、LAMP-2水平及腎功能對(duì)比

不同程度腎功能受損患者血清sFLC、NACL、LAMP-2水平及腎功能指標(biāo)水平之間均存在顯著差異（P＜0.05）；重度腎功能損傷患者血清sFLCκ、NCAL、LAMP-2、Scr、BUN及24 h尿蛋白定量水平均較輕度、中度腎功能損傷患者偏高（P＜0.05）；中度腎功能損傷患者sFLCλ水平及sFLC κ/λ比值均高于輕、重度患者（P＜0.05）。詳見(jiàn)表4。

表4 IgG4-RKD患者病程發(fā)展的多因素分析

2.4 各指標(biāo)間相關(guān)性分析

IgG4-RKD患者中，sFLCκ、sFLCλ、sFLCκ/λ與eGFR呈負(fù)相關(guān)；與Scr、BUN之間無(wú)相關(guān)性；LAMP-2與IgG4-RKD患者Scr、BUN水平及24 h尿蛋白呈正相關(guān)；NGAL水平與Scr、BUN、24 h尿蛋白水平均呈正相關(guān)。

2.5 影響IgG4-RKD患者病程發(fā)展的相關(guān)因素分析

logistic多元回歸分析顯示，LAMP-2及NGAL均是影響IgG4-RKD患者病程發(fā)展及腎功能損傷的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，sFLCκ/λ是風(fēng)險(xiǎn)因素但無(wú)法作為獨(dú)立預(yù)測(cè)參考指標(biāo)。

見(jiàn)表5。

3 討論

IgG4-RD是近年來(lái)新發(fā)現(xiàn)的一種病因不詳?shù)穆悦庖呒膊　gG4-RD累及腎臟器官引發(fā)相關(guān)的腎臟病變被統(tǒng)稱為IgG4-RKD。IgG4-RKD的發(fā)病機(jī)制尚未完全明確，臨床研究已證實(shí)IgG4-RKD治療的開始時(shí)間與療效優(yōu)劣有著緊密的聯(lián)系[1,2]。由此可見(jiàn)，積極探索特異性、敏感性更高的診斷指標(biāo)對(duì)改善疾病的預(yù)后有著積極的意義。

免疫球蛋白重鏈類型可分為IgA、IgE、IgM、IgD、IgG型，輕鏈只有κ和λ型[1,2]。正常的狀態(tài)下，人體血清中κ/λ通常保持在2；1，正常人尿液中也不會(huì)存在過(guò)多輕鏈，一旦出現(xiàn)過(guò)量uFLC，則表明腎小管重吸收功能下降或受損[1,2]。

本研究結(jié)果顯示，重度腎功能損傷患者血清sFLCκ水平均較輕度、中度腎功能損傷患者偏高，中度腎功能損傷患者sFLCλ水平及sFLCκ/λ比值均高于輕、重度患者。結(jié)合兩種類型患者sFLC κ/λ水平與對(duì)照組患者之間的關(guān)系，推測(cè)κ型IgG4-RKD患者κ型輕鏈增生明顯，λ型IgG4-RKD患者存在兩種輕鏈增生，且λ型增生幅度更大。相關(guān)性分析結(jié)果顯示，sFLCκ、sFLCλ、sFLCκ/λ與eGFR呈負(fù)相關(guān)，與Scr、BUN之間無(wú)相關(guān)性。sFLCκ/λ是風(fēng)險(xiǎn)因素但無(wú)法作為獨(dú)立的預(yù)測(cè)參考指標(biāo)。

LAMP-2在慢性腎小球腎炎患者血清和尿液中的表達(dá)水平顯著升高，且血液和尿液中的LAMP-2是抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體（ANCA）相關(guān)性腎炎的高危因素[3]。本研究結(jié)果顯示，觀察組血清LAMP-2及NCAL水平均顯著高于對(duì)照組，且隨著腎功能受損程度的加重，表達(dá)水平升高。相關(guān)性分析結(jié)果顯示，LAMP-2與IgG4-RKD患者Scr、BUN水平及24 h尿蛋白呈正相關(guān)，LAMP-2是影響IgG4-RKD患者病程發(fā)展及腎功能損傷的獨(dú)立危險(xiǎn)因素[3]。

尿NGAL濃度的升高可有效反映腎間質(zhì)早期的結(jié)構(gòu)變化[4]。NGAL常用于預(yù)測(cè)腎臟早期受損情況。本研究發(fā)現(xiàn)，觀察組血清NCAL水平顯著高于對(duì)照組，且會(huì)隨著腎功能損傷加重而表達(dá)增高。相關(guān)性分析結(jié)果顯示，NGAL水平與Scr、BUN、24 h尿蛋白水平均呈正相關(guān)，NGAL均是影響IgG4-RKD患者病程發(fā)展及腎功能損傷的獨(dú)立危險(xiǎn)因素[4,6]。

綜上所述，IgG4-RKD患者在疾病發(fā)展及腎功能受損過(guò)程中的血清sFLC、ADP、LAMP-2及NGAL水平均會(huì)出現(xiàn)一定程度的改變，均表現(xiàn)為濃度升高?？煽紤]檢測(cè)三項(xiàng)因子水平結(jié)合常規(guī)腎功能檢查來(lái)共同診斷IgG4-RKD的發(fā)生或用于評(píng)估此類患者的腎功能損傷程度。