NF2基因多態(tài)性與腦膜瘤預(yù)后的相關(guān)性

黃冠又，郝淑煜，馮潔，王亮，張力偉，張俊廷，吳震*

1貴陽市第二人民醫(yī)院神經(jīng)外科，貴州 貴陽 550081；2首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京天壇醫(yī)院神經(jīng)外科，北京 100070；3首都醫(yī)科大學(xué)北京市神經(jīng)外科研究所，北京 100070

腦膜瘤（meningioma）起源于蛛網(wǎng)膜帽狀細(xì)胞，約占中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤的38.3%，是常見的成人顱內(nèi)良性腫瘤，女性多見[1-2]。腦膜瘤的病因尚不明確，研究顯示可能與生活方式、環(huán)境因素及基因、遺傳易感性等多種因素有關(guān)[3-6]。腦膜瘤多數(shù)為良性，行手術(shù)切除后通常預(yù)后較好，但仍有約6.9%的患者出現(xiàn)腫瘤復(fù)發(fā)[7]。研究顯示，腦膜瘤復(fù)發(fā)除與病理分級和腫瘤切除程度有關(guān)外，也可能與遺傳學(xué)因素有關(guān)[8]。神經(jīng)纖維瘤?、蛐停╪eurofibromatosis 2，NF2）是與腦膜瘤發(fā)生相關(guān)的遺傳綜合征，22 號染色體細(xì)胞遺傳學(xué)改變和NF2基因突變在腦膜瘤形成初期發(fā)揮了關(guān)鍵作用[9]。研究顯示，40%～60%的散發(fā)腦膜瘤患者存在NF2基因突變或22 號染色體缺失[10]，不同病理亞型腦膜瘤的NF2突變率不同，纖維型和過渡型腦膜瘤的NF2基因突變率為70%～80%，而內(nèi)皮型腦膜瘤的NF2基因突變率僅為25%，提示不同病理亞型的腦膜瘤在形成過程中伴隨著不同的遺傳學(xué)改變[11]。大多數(shù)單核苷酸多態(tài)性（single nucleotide polymorphism，SNP）在功能上是中性的，但編碼區(qū)的SNP 可影響蛋白質(zhì)氨基酸序列，從而影響基因表達(dá)，可能增加腦膜瘤的發(fā)病和復(fù)發(fā)風(fēng)險[12]。目前NF2基因SNPs 與腦膜瘤易感性及預(yù)后的關(guān)系少見報道。本研究針對腦膜瘤患者的NF2基因位點(diǎn)多態(tài)性進(jìn)行研究，探討NF2基因多態(tài)性與腦膜瘤預(yù)后的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2010 年5 月－2011 年1 月于首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京天壇醫(yī)院神經(jīng)外科中心接受手術(shù)治療并經(jīng)病理學(xué)檢查確診為腦膜瘤的患者215例，男57例，女158例，年齡16～75（50.2±10.3）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）有詳細(xì)完整的臨床病史資料、影像學(xué)資料及圍手術(shù)期資料；（2）行顯微手術(shù)切除腫瘤，腫瘤切除程度有明確的手術(shù)記錄；（3）根據(jù)2021 年第五版世界衛(wèi)生組織（World Health Organization，WHO）中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤分類標(biāo)準(zhǔn)[13]，術(shù)后病理診斷為腦膜瘤；（4）未接受過放射治療和（或）化療；（5）隨訪時間＞8年。排除標(biāo)準(zhǔn)：有嚴(yán)重基礎(chǔ)疾病、精神障礙或合并其他多器官功能障礙，合并其他顱內(nèi)腫瘤或其他器官存在腫瘤。

另選擇同一時期在北京天壇醫(yī)院行健康體檢者218 例為對照組，男74 例，女144 例，年齡24～79（48.5±9.7）歲。兩組性別、年齡差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。本研究獲首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京天壇醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)（KY2018-047-01）。研究對象均簽署知情同意書。

1.2 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器 血液基因組DNA 抽提試劑盒、HotStar Taq DNA 聚合酶、脫氧核糖核苷三磷酸（deoxy-ribonucleoside triphosphate，dNTP）、溴化乙錠、溴酚藍(lán)及PCR 引物等購自上海生工技術(shù)有限公司； SNaPshot Multiplex Kit、 Genescan-120LIZ Size Standard、去離子甲酰胺Hidi-Formamide 上樣液購自美國ABI 公司；蝦堿性磷酸酶（shrimp alkaline phosphatase，SAP）購自美國Promega公司；核酸外切酶Exonuclease Ⅰ（ExoⅠ）購自美國Epicentre 公司；DNA Marker購自美國Invitrogen公司。電泳儀購自美國Bio-Rad 公司；PCR 儀、ABI 3730XL 測序儀購自美國ABI公司。

1.3 外周血基因組DNA提取 抽取受試者清晨空腹外周靜脈血5 ml，加入0.4 ml 乙二胺四乙酸（ethylene diamine tetraacetic acid，EDTA）防止血液凝固，置于－20 ℃低溫冰箱保存?zhèn)溆谩＠醚夯蚪MDNA抽提試劑盒，按照操作說明書提取基因組DNA。對提取到的DNA樣本應(yīng)用紫外分光光度計(jì)檢測其濃度和純度，根據(jù)OD260/OD280的比值判斷DNA純度，比值范圍在1.8～2.0 為純度合格；若不在此范圍，則重新取血并提取DNA。將提取好的DNA 樣本放置于-20 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4 引物設(shè)計(jì)與合成 根據(jù)NCBI 中的dbSNP 數(shù)據(jù)庫，查找并下載NF2基因數(shù)據(jù)信息；從Ensembl數(shù)據(jù)庫（https：//asia.ensembl.org/）中選擇中國漢族人群作為樣本，將得到的文件導(dǎo)入HaploView 4.2 軟件中，以參數(shù)r2＞0.8、最小等位基因頻率＞0.05為篩選條件，運(yùn)行HapMap數(shù)據(jù)，選中篩選的SNPs，運(yùn)行tag得到tagSNP，包括rs2530673 和rs2530662。應(yīng)用在線引物設(shè)計(jì)軟件Primer3（http：//bioinfo.ut.ee/primer3-0.4.0/）在需要檢測的位點(diǎn)兩側(cè)設(shè)計(jì)引物。引物序列：多態(tài)位點(diǎn)rs2530673，上游5'-TGGCAGAGAATAGCAGGAA CA-3'， 下游5'-TCCAGCCTCAGTGACAGAACA-3'，PCR 擴(kuò)增片段長度388 bp；多態(tài)位點(diǎn)rs2530662，上游5'-GCGCTGTAGCTGTATAGTA-3'，下游5'-AGGCA CTCTCTATTCCTTA-3'，PCR 擴(kuò)增片段長度385 bp。兩對引物均由上海生工技術(shù)有限公司合成。PCR 產(chǎn)物用HotStarTaq DNA 聚合酶進(jìn)行多重PCR 獲得，經(jīng)SAP和ExoⅠ純化后用SNaPshot Multiplex kit 進(jìn)行延伸反應(yīng)。20 μl PCR 反應(yīng)體系包括：2 μl 10×PCR Buffer，0.8 μl MgCl2（50 mmol/L），0.5 μl dNTP（10 mmol/L），1 μl DNA 樣本，0.5 μl HotStar Taq DNA 聚合酶（2.5 U），14.2 μl ddH2O 和1 μl PCR 引物。PCR 擴(kuò)增條件：95 ℃預(yù)變性2 min 后進(jìn)行11 個周期的溫度遞減循環(huán)（94 ℃變性20 s，65 ℃～60 ℃退火40 s，每個周期遞減0.5 ℃，72 ℃延伸1.5 min），隨后進(jìn)行24個周期的恒溫循環(huán)（94 ℃變性20 s，59 ℃退火30 s，72 ℃延伸1.5 min），72 ℃延伸2 min，4 ℃保持。

1.5NF2基因多態(tài)性檢測 應(yīng)用多重單堿基延伸SNP分型技術(shù)（Multiplex SNaPshot）進(jìn)行目的基因的多態(tài)性檢測。檢測多態(tài)位點(diǎn)為NF2基因rs2530673 和rs2530662。（1）多重單堿基延伸引物：rs2530673，tttttttttttttttttttttttttttttttttCAATGACTTACCTTCCAGA CCT；rs2530662，ttttttttttttttttttttttttttttGTAGAGATGC TACCAGTTTCCT。（2）延伸反應(yīng)程序：96 ℃預(yù)變性1 min；96℃變性10 s，55℃退火5 s，60℃延伸30 s，共28 個循環(huán)。（3）基因測序：取純化好的0.5 μl PCR延伸產(chǎn)物，與0.5 μl Genescan-120LIZ Size Standard、9 μl Hi-Di 溶液混勻，95 ℃變性5 min 后，在PRISM 3730XL 測序儀上測序，運(yùn)行GeneMapper 5.0軟件查看.fsa文件，按照軟件操作說明的步驟分析樣品及查看最終結(jié)果，得到分型膠電泳峰型圖及單位點(diǎn)分型圖，不同峰的顏色代表不同堿基種類，從而確定樣本的基因型。

1.6 隨訪 術(shù)后采用電話、門診、微信等方式對腦膜瘤患者進(jìn)行隨訪，截至2018 年9 月25 日，平均隨訪時間為（8.16±0.18）年。無進(jìn)展生存期（progressionfree survival，PFS）為患者確診腦膜瘤日期至發(fā)現(xiàn)腫瘤復(fù)發(fā)或患者死亡的時間，失訪及仍健在的患者按截尾數(shù)據(jù)處理，均以年為單位計(jì)算。

1.7NF2基因多態(tài)性對腦膜瘤發(fā)病風(fēng)險及預(yù)后的影響分析 各位點(diǎn)基因型與腦膜瘤發(fā)病風(fēng)險的相關(guān)性采用非條件logistic 回歸分析，分別在顯性遺傳模型及隱性遺傳模型下計(jì)算相關(guān)優(yōu)勢比（odds radio，OR）和95%可信區(qū)間（confidence interval，CI）。設(shè)R 為野生型等位基因，W 為突變型等位基因，顯性遺傳模型以RR基因型為參照，進(jìn)行WW+WR與RR的比較；隱性遺傳模型以RR+WR 聯(lián)合基因型為參照，進(jìn)行WW 與WR+RR 的比較。應(yīng)用χ2檢驗(yàn)評估位點(diǎn)rs2530673和rs2530662中基因型和等位基因頻率分布是否符合Hardy-Weinberg平衡定律，當(dāng)P＞0.05時認(rèn)為基因頻率符合Hardy-Weinberg 平衡，具有群體代表性。應(yīng)用Kaplan-Meier 方法進(jìn)行預(yù)后分析，Log-rank檢驗(yàn)比較NF2基因多態(tài)位點(diǎn)rs2530673和rs2530662不同基因型腦膜瘤患者生存曲線的差異；采用Cox 風(fēng)險比例模型評估各影響因素與腦膜瘤患者復(fù)發(fā)的關(guān)系，各自變量對結(jié)局變量的影響以風(fēng)險比（hazard ratio，HR）及其95%CI表示。

1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 22.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料符合正態(tài)分布時以xˉ±s表示，組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料組間比較采用χ2檢驗(yàn)。相關(guān)性分析采用非條件logistic 回歸分析。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 臨床病理資料 215例腦膜瘤中，WHO 1級196例（91.16%），WHO 2 或3 級19 例（8.84%）。病理亞型分布方面，腦膜上皮型75例（34.88%），纖維型59例（27.44%），過渡型50 例（23.26%），血管瘤型6 例（2.79%），砂粒型1 例（0.47%），微囊型4 例（1.86%），分泌型1例（0.47%），非典型性17例（7.91%），間變性2例（0.93%）。腫瘤部位分布，（1）非顱底腦膜瘤：大腦凸面34 例（15.81%），矢狀竇/鐮旁44 例（20.46%），側(cè)腦室5 例（2.32%），第三腦室1 例（0.46%），幕上多發(fā)6 例（2.79%）；（2）顱底腦膜瘤：嗅溝、前顱底28例（13.02%），蝶骨嵴21例（9.77%），鞍旁-中顱底6例（2.79%），巖斜區(qū)34 例（15.81%），橋小腦角16 例（7.44%），枕大孔區(qū)6 例（2.79%），小腦幕14 例（6.51%，表1）。

表1 腦膜瘤215例的臨床病理資料Tab.1 The clinical and pathological data of 215 meningioma cases

2.2NF2基因多態(tài)位點(diǎn)的基因型分布NF2基因兩位點(diǎn)的基因型分布符合Hardy-Weinberg 平衡（rs2530673：χ2=3.029，P=0.085； rs2530662：χ2=0.742，P=0.401），具有群體代表性。NF2基因rs2530673 位點(diǎn)存在CC、CT 和TT 3 種基因型，rs2530662 位點(diǎn)存在AA、AT 和TT 3 種基因型。2 組NF2多態(tài)位點(diǎn)rs2530673和rs2530662基因型及等位基因頻率分布差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05，表2）。

2.3 按病理類型分層分析NF2基因多態(tài)性與腦膜瘤的發(fā)病風(fēng)險 將腦膜瘤常見的3種病理亞型（腦膜上皮型、纖維型、過渡型）在不同遺傳模式（顯性模型和隱性模型）下進(jìn)行分層分析。顯性遺傳模型（rs2530673：CC/CTvs.TT；rs2530662：TT/ATvs.AA）和隱性遺傳模型（rs2530673：CCvs.CT+TT；rs2530662：TTvs.AT/AA）分布下，腦膜上皮型和纖維型腦膜瘤患者NF2基因rs2530673和rs2530662多態(tài)位點(diǎn)基因型頻率分布與對照組比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，NF2基因多態(tài)位點(diǎn)rs2530673和rs2530662與腦膜瘤的發(fā)病風(fēng)險相關(guān)性均不顯著（P＞0.05）。NF2基因多態(tài)位點(diǎn)rs2530673 在顯性遺傳模型（CC/CTvs.TT）分布下，CC基因型發(fā)生過渡型腦膜瘤的風(fēng)險明顯降低（P＜0.05，表3）。過渡型腦膜瘤患者NF2基因位點(diǎn)rs2530662 基因型頻率分布與對照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05，表4）。

表3 按病理類型分層的NF2基因多態(tài)位點(diǎn)rs2530673與腦膜瘤易感性的相關(guān)性分析結(jié)果Tab.3 Stratification analysis of relationship between NF2 gene polymophism rs2530673 and meningioma susceptibility with different pathologic subtypes

表4 按病理類型分層的NF2基因多態(tài)位點(diǎn)rs25306662與腦膜瘤易感性的相關(guān)性分析結(jié)果Tab.4 Stratification analysis of relationship between NF2 gene polymophism rs2530662 and meningioma susceptibility with different pathologic subtypes

2.4NF2基因多態(tài)位點(diǎn)不同基因型與腦膜瘤預(yù)后的相關(guān)性 215例腦膜瘤中，196例（91.2%）獲隨訪，19例失訪（8.8%）。隨訪期間，166例（84.7%）恢復(fù)良好，大多生活可自理；腫瘤復(fù)發(fā)24例（12.2%）；死亡6例（3.1%）。Kaplan-Meier 單因素生存分析結(jié)果顯示，NF2基因多態(tài)位點(diǎn)rs2530673 CC、CT+TT 基因型患者的PFS 分別為（7.772±0.352）年、（8.091±0.089）年，CC、CT+TT 基因型與腦膜瘤患者預(yù)后相關(guān)不顯著（Log-rankχ2=0.272，P=0.602）；rs2530662 AA、AT+TT 基因型患者的PFS 分別為（8.022±0.124）年、（8.129±0.119）年，AA、AT+TT 基因型與腦膜瘤患者預(yù)后相關(guān)不顯著（Log-rankχ2=0.004，P=0.949，圖1）。

圖1 腦膜瘤患者NF2基因多態(tài)位點(diǎn)不同基因型與PFS的相關(guān)性Fig.1 Correlation between different genotypes of NF2 SNPs and PFS

在顱底腦膜瘤中，NF2基因多態(tài)位點(diǎn)rs2530673 CC、CT+TT 基因型患者的PFS 分別為（8.147±0.195）年、（8.170±0.190）年，CC、CT+TT基因型與腫瘤復(fù)發(fā)相關(guān)不顯著（Log-rankχ2=1.338，P=0.247）；rs2530662 AA、AT+TT 基因型患者的PFS 分別為（8.151±0.190）年、（8.192±0.189）年，AA、AT+TT 基因型與腫瘤復(fù)發(fā)相關(guān)不顯著（Log-rankχ2=1.506，P=0.220，圖2）。在非顱底腦膜瘤中，NF2基因多態(tài)位點(diǎn)rs2530673 CC、CT+TT 基因型患者的PFS 分別為（6.768±0.806）年、（8.007±0.150）年，CC 基因型PFS較CT+TT 基因型縮短，復(fù)發(fā)風(fēng)險增高（Log-rankχ2=4.574，P=0.032）；rs2530662 AA、AT+TT基因型患者的PFS 分別為（7.743±0.227）年、（8.175±0.174）年，AA、AT+TT基因型與腫瘤復(fù)發(fā)相關(guān)不顯著（Log-rankχ2=1.254，P=0.263，圖3）。

圖2 NF2基因多態(tài)位點(diǎn)不同基因型與顱底腦膜瘤PFS的相關(guān)性Fig.2 Correlation between different genotypes of NF2 SNPs and PFS in skull base meningioma

圖3 NF2基因多態(tài)位點(diǎn)不同基因型與非顱底腦膜瘤PFS的相關(guān)性Fig.3 Correlation between different genotypes of NF2 SNPs and PFS in non skull base meningioma

2.5 腦膜瘤PFS 影響因素的Cox 多因素分析結(jié)果

將性別、年齡、術(shù)前KPS 評分（≥70、＜70）、腫瘤部位（顱底、非顱底）、WHO 分級（1 級、2－3 級）、腫瘤切除程度（全切、大部切除）及NF2基因多態(tài)位點(diǎn)rs2530673、rs2530662 納入Cox 比例風(fēng)險模型進(jìn)行多因素分析，結(jié)果顯示，WHO分級是影響腦膜瘤患者PFS（HR=27.117，95%CI 10.040～73.241，P=0.000）的獨(dú)立影響因素，而NF2基因多態(tài)位點(diǎn)則不是腦膜瘤預(yù)后的影響因素（P＞0.05，表5）。

表5 腦膜瘤196例無進(jìn)展生存影響因素的Cox多因素回歸分析Tab.5 Cox multivariate regression analysis on PFS of 196 meningiomas

3 討 論

NF2基因位于染色體22q12，長約110 kb，包含17個外顯子，并編碼含595個氨基酸殘基的Merlin蛋白，該蛋白結(jié)構(gòu)包含3 個功能域：1 個氨基末端域、1個α螺旋域和1個羧基端[14]。研究顯示，當(dāng)NF2基因突變時，Merlin 蛋白表達(dá)下降或失活，可促進(jìn)腦膜瘤細(xì)胞的增殖，可能引起顱內(nèi)多發(fā)良性腫瘤（如神經(jīng)鞘瘤）及其他非神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤（如腎細(xì)胞癌、甲狀腺癌、間皮瘤和黑色素瘤）的發(fā)生發(fā)展[15]。50%以上的散發(fā)腦膜瘤和大部分神經(jīng)纖維瘤病相關(guān)的腦膜瘤存在NF2基因突變，該基因突變的形式大部分為無義突變、框架移位突變或拼接點(diǎn)突變，這些突變能產(chǎn)生一種截短或無功能的蛋白質(zhì)，其基因失活與腦膜瘤早期形成有關(guān)，且能引起腦膜瘤分子特征和臨床表型方面的改變[9-10]。

NF2基因發(fā)生單個核苷酸的基因序列變異（即SNP）是否會改變腦膜瘤的易感性，或增加腦膜瘤的發(fā)病風(fēng)險以及是否與腫瘤的預(yù)后有關(guān)目前尚不明確。內(nèi)含子可影響基因的表達(dá)和調(diào)控，如影響剪接和編碼前體mRNA 進(jìn)而影響RNA 表達(dá)水平，具有增強(qiáng)基因表達(dá)的作用，內(nèi)含子SNP 也可作為增強(qiáng)子或啟動子調(diào)節(jié)基因的表達(dá)[16]。NF2基因內(nèi)含子多態(tài)位點(diǎn)處發(fā)生堿基轉(zhuǎn)換引起的基因變異在腦膜瘤發(fā)病過程中的作用尚不清楚；rs2530673 和rs2530662 位點(diǎn)位于NF2基因的內(nèi)含子區(qū)域，可能通過影響pre-mRNA的剪接或影響基因啟動子轉(zhuǎn)錄活性參與基因表達(dá)調(diào)控[17]。查閱相關(guān)文獻(xiàn)，未見這兩個多態(tài)位點(diǎn)的相關(guān)報道，因此本研究選取NF2多態(tài)位點(diǎn)rs2530673 和rs2530662作為研究腦膜瘤易感性的候選基因。

本研究結(jié)果顯示，腦膜瘤組NF2基因多態(tài)位點(diǎn)rs2530673和rs2530662的基因型和等位基因分布頻率與對照組差異不顯著，在不同病理級別的腦膜瘤中，也未發(fā)現(xiàn)上述基因多態(tài)位點(diǎn)與腦膜瘤易感性顯著相關(guān)。按照WHO 1級病理亞型分層，在顯性模型分布下，攜帶NF2基因rs2530673 位點(diǎn)CC 基因型的人群發(fā)生過渡型腦膜瘤的風(fēng)險降低50.6%，提示NF2基因rs2530673 多態(tài)性與過渡型腦膜瘤的發(fā)生相關(guān)，C 等位基因可能是過渡型腦膜瘤發(fā)病的保護(hù)性因素，突變型等位基因T則是過渡型腦膜瘤發(fā)病的風(fēng)險因素。T 等位基因是否能上調(diào)NF2基因表達(dá)、發(fā)揮抗細(xì)胞凋亡的作用尚不清楚。另外，雖然rs2530673 和rs2530662 位于內(nèi)含子區(qū)，可能與該基因上位于外顯子區(qū)域的多態(tài)性位點(diǎn)呈現(xiàn)連鎖不平衡[18]，但是否與其他未檢測到的功能位點(diǎn)存在協(xié)同作用仍需進(jìn)一步探討。本研究未進(jìn)行全基因組關(guān)聯(lián)分析，也沒有進(jìn)行NF2基因表達(dá)的功能實(shí)驗(yàn)，因此在位點(diǎn)選擇上有所局限，不能排除與其他基因位點(diǎn)存在連鎖作用，影響NF2的表達(dá)及功能，從而導(dǎo)致腦膜瘤發(fā)生的可能。

本研究結(jié)果顯示，多態(tài)位點(diǎn)rs2530662與不同病理亞型腦膜瘤易感性均相關(guān)不顯著，提示該位點(diǎn)在腦膜瘤的發(fā)病過程中未發(fā)揮明顯作用；而位于內(nèi)含子的多態(tài)位點(diǎn)rs2530673變異可能在過渡型腦膜瘤發(fā)病過程中起一定作用，纖維型和過渡型腦膜瘤中NF2基因突變率較高[11，19]，推測該亞型腦膜瘤的發(fā)病可能與位點(diǎn)rs2530673 中T 等位基因促進(jìn)NF2基因變異有關(guān)，但具體作用機(jī)制尚不清楚，有待進(jìn)一步研究驗(yàn)證。

NF2基因的遺傳改變可能影響腦膜瘤的進(jìn)展，為探討NF2基因變異對腦膜瘤術(shù)后復(fù)發(fā)的影響，本研究分別對不同多態(tài)位點(diǎn)基因型的腦膜瘤進(jìn)行生存分析，結(jié)果顯示NF2基因位點(diǎn)rs2530673和rs2530662與腦膜瘤的預(yù)后相關(guān)不顯著；但根據(jù)腫瘤部位進(jìn)行分層分析發(fā)現(xiàn)，在非顱底腦膜瘤組中，NF2基因rs2530673 位點(diǎn)與腦膜瘤術(shù)后復(fù)發(fā)相關(guān)。有研究顯示，非顱底腦膜瘤較顱底腦膜瘤在生物學(xué)行為方面更具侵襲性，腫瘤更易復(fù)發(fā)[20]。NF2基因突變的腦膜瘤多好發(fā)于大腦凸面，提示多態(tài)位點(diǎn)rs2530673是非顱底腦膜瘤復(fù)發(fā)進(jìn)展的一個潛在危險因素，其遺傳學(xué)改變可能與NF2基因其他多態(tài)位點(diǎn)共同作用，增加非顱底腦膜瘤的患病風(fēng)險，這可能是由于NF2rs2530673 基因突變后其表達(dá)水平改變，影響了細(xì)胞周期調(diào)控和細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，進(jìn)而導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。而在顱底腦膜瘤組中，位于內(nèi)含子的兩個多態(tài)位點(diǎn)與腫瘤PFS 相關(guān)不顯著，提示這些位點(diǎn)在顱底腦膜瘤的發(fā)病和復(fù)發(fā)進(jìn)展過程中未發(fā)揮明顯作用，可能存在其他非NF2基因的遺傳變異對顱底腦膜瘤的發(fā)生發(fā)展起作用[21]。

關(guān)于NF2基因變異與腦膜瘤發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后的相關(guān)研究報道較少，本研究也未發(fā)現(xiàn)NF2基因多態(tài)位點(diǎn)rs2530673和rs2530662與中國人群腦膜瘤遺傳易感性顯著相關(guān)?？紤]到納入研究的樣本量、腫瘤部位、病理級別分型，以及腫瘤影像特征差異這些因素相互影響，可能導(dǎo)致研究結(jié)果不同，造成結(jié)論不一致，且本研究隨訪時間不長，只分析了NF2基因兩個位點(diǎn)的多態(tài)性，可能造成研究偏倚。因此，為全面深入了解NF2基因與腦膜瘤發(fā)病的關(guān)系，還需進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量，對多個SNP 位點(diǎn)進(jìn)行聯(lián)合分析，并對患者密切隨訪，從遺傳學(xué)角度深入研究腦膜瘤術(shù)后復(fù)發(fā)的影響因素及相關(guān)機(jī)制。