比較初乳乳房拭子與仔豬睪丸處理液對(duì)6種豬繁殖障礙相關(guān)病毒的監(jiān)測(cè)效果

祁松，張哲瑋，朱晶，羅宇山，董德文，貝為成，3，4*

(1. 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，農(nóng)業(yè)微生物學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖北 武漢 430070；2. 廣西翔儀生物工程有限公司，廣西 南寧 530000；3. 湖北洪山實(shí)驗(yàn)室，湖北 武漢 430070；4. 生豬健康養(yǎng)殖協(xié)同創(chuàng)新中心，湖北 武漢 430070)

豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)、豬瘟病毒(CSFV)、豬偽狂犬病毒(PRV)、豬圓環(huán)病毒2型(PCV-2)、豬細(xì)小病毒(PPV)和豬圓環(huán)病毒3型(PCV-3)是豬場(chǎng)常見(jiàn)與豬繁殖障礙有關(guān)的6種病毒，常導(dǎo)致感染母豬流產(chǎn)，高返情率，產(chǎn)死胎、木乃伊胎、弱仔和引起哺乳仔豬及保育豬發(fā)病和死亡，給豬場(chǎng)帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)損失[1]。因此，有效監(jiān)測(cè)豬群中相關(guān)病原的感染狀況對(duì)疫病的防控意義重大。當(dāng)前，豬場(chǎng)一線獸醫(yī)對(duì)疫病監(jiān)測(cè)所采集的樣品主要以血清、扁桃體拭子、口腔液、環(huán)境樣品和仔豬睪丸處理液為主。扁桃體是非洲豬瘟(ASFV)、PRRSV、CSFV、PRV及胸膜肺炎放線桿菌等病原復(fù)制和定居的重要場(chǎng)所，利用扁桃體拭子可準(zhǔn)確地診斷豬群感染疫病病原[2]。而所謂口腔液，是指口腔中的唾液和血清滲出液的混合液體，其中血清滲出液是通過(guò)口腔黏膜以及口腔黏膜上的齒齦溝和毛細(xì)血管進(jìn)入口腔，其既可用于抗體檢測(cè)也可用于PCR檢測(cè)抗原，是多種傳染病高效監(jiān)測(cè)技術(shù)手段的樣品來(lái)源[3]。近年來(lái)，仔豬睪丸處理液成為規(guī)模豬場(chǎng)監(jiān)控PRRSV高效且更為便利的樣品來(lái)源，其敏感度要高于血清[4]，但關(guān)于睪丸處理液對(duì)豬其他繁殖障礙相關(guān)病毒，如PCV-3、PPV等的檢測(cè)報(bào)道較少。Dvorak等[5]報(bào)道了PCV-2在母豬口腔液、初乳和仔豬血清三者之間的病毒載量差異，初乳的檢測(cè)敏感度要高于仔豬血清，提示初乳也可作為高效的樣品來(lái)源，且能反映病原經(jīng)乳汁垂直傳播的情況。Voicu 等[6]也報(bào)道了PRRSV能通過(guò)母豬初乳和常乳進(jìn)行傳播，進(jìn)而作為地方流行的一種傳播途徑。其次，初乳拭子樣品不僅能為豬場(chǎng)獸醫(yī)提供預(yù)警信息，而且能為其針對(duì)疫病防控來(lái)優(yōu)化生產(chǎn)管理方案提供一定的參考信息，如當(dāng)在初乳拭子中檢測(cè)到某種病原時(shí)，豬場(chǎng)管理者可以通過(guò)減少弱仔寄養(yǎng)、加強(qiáng)生物安全和免疫保健等措施來(lái)降低病原的水平傳播程度以及后續(xù)危害等。

為了評(píng)估母豬初乳乳房拭子對(duì)豬多種繁殖障礙性病毒的檢測(cè)敏感性，同時(shí)比較其和睪丸處理液對(duì)不同的病毒檢出率差異，本文以河南某規(guī)模豬場(chǎng)豬為研究對(duì)象，使用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)的方法，對(duì)隨機(jī)不分胎次采集的113份(452頭母豬的4混1樣)母豬初乳乳房拭子和171份(684窩仔豬的4混1樣)仔豬睪丸處理液進(jìn)行PRRSV、CSFV、PRV、PPV、PCV2和PCV3的病原學(xué)檢測(cè)，另外再單獨(dú)采集38頭1胎母豬的初乳乳房拭子及其所產(chǎn)3～5日齡仔豬的睪丸處理液進(jìn)行病原學(xué)檢測(cè)，旨在為規(guī)模豬場(chǎng)對(duì)疫病監(jiān)測(cè)采集合適的樣品提供一定的理論參考。

1 材料與方法

1.1 樣品來(lái)源

河南某5 000頭規(guī)模母豬場(chǎng)，年窩均出生總仔為15.3頭，其中1胎母豬的年平均死胎率為10.6%，2胎及以上母豬的年平均死胎率為3.2%～5.3%，1胎母豬的年平均死胎率要顯著高于其他胎次。其他生產(chǎn)情況均較為正常，近2年來(lái)未出現(xiàn)重大生產(chǎn)問(wèn)題。樣品采集于2022年8月至9月死胎率較高的階段。

1.2 主要試劑

PRRSV/CSFV/PRV/PCV-2四重?zé)晒舛縋CR試劑盒，購(gòu)自湖南國(guó)策生物技術(shù)有限公司，生產(chǎn)批號(hào)：382021006。PCV-3熒光定量PCR試劑盒，生產(chǎn)批號(hào)20220425；PPV熒光定量PCR試劑盒，生產(chǎn)批號(hào)：20220327；DNA/RNA總核酸提取試劑盒，生產(chǎn)批號(hào)：2022060201A，以上購(gòu)自百獅園動(dòng)物保健科技有限公司。

1.3 樣品采集

1.3.1 初乳乳房拭子

根據(jù)豬場(chǎng)的生產(chǎn)操作流程要求，母豬分娩前，使用1∶400的衛(wèi)可溶液，對(duì)母豬乳房進(jìn)行擦拭消毒。乳房拭子的采集于母豬分娩結(jié)束時(shí)，使用一次性滅菌棉簽，對(duì)母豬的乳房、乳頭進(jìn)行擦拭，并通過(guò)使用棉簽按壓母豬乳頭，盡可能沾取到初乳乳汁，以4窩母豬初乳乳房拭子為1個(gè)混樣組，然后裝入到滅菌離心管中。標(biāo)號(hào)做好記錄，放入帶冰塊的泡沫箱中，低溫配送至實(shí)驗(yàn)室。在采集的每一份乳房拭子中加入3 mL PBS，渦旋震蕩30 s后，使用冷凍離心機(jī)于4 ℃條件下，6 000 r/min離心1 min，然后取上清液(注意避免收集到最上層的脂質(zhì)層)分裝到2 mL滅菌離心管中，置于-20 ℃冰箱保存?zhèn)溆?，或?dāng)天檢測(cè)。

1.3.2 睪丸處理液

根據(jù)豬場(chǎng)的生產(chǎn)操作流程，對(duì)3～5日齡的哺乳仔豬進(jìn)行閹割。操作人員每閹割完1窩仔豬需要換刀片和手套，防止樣品間的交叉污染。將睪丸收納桶內(nèi)套入滅菌處理過(guò)的一次性塑料袋，然后再使用一次性滅菌紗布套在塑料袋內(nèi)，并用橡膠圈在桶口處勒緊，收集的睪丸組織放入紗布中，讓液體通過(guò)過(guò)濾紗布流入塑料袋內(nèi)。以4窩仔豬睪丸為1個(gè)混樣組，收集完畢后可以稍微擠壓紗布，讓處理液充分過(guò)濾到塑料袋內(nèi)。最后將塑料袋中的處理液轉(zhuǎn)移到滅菌離心管中，標(biāo)號(hào)做好記錄，放入帶冰塊的泡沫箱中，配送至實(shí)驗(yàn)室于-20 ℃冰箱保存或直接檢測(cè)。

1.4 DNA/RNA總核酸提取

分別取前期預(yù)處理好的乳房拭子樣品和睪丸處理液樣品各200 μL，各加入20 μL蛋白酶K混勻靜置60 s后，再加入到全自動(dòng)DNA/RNA總核酸提取試劑盒指定的樣品孔中，放入全自動(dòng)核酸提取儀器中，按照試劑盒說(shuō)明書(shū)所示的步驟設(shè)置核酸提取程序，進(jìn)行DNA/RNA總核酸提取，提取好的核酸置于-20 ℃冰箱，用作后續(xù)的qPCR檢測(cè)。

1.5 病原檢測(cè)

1.5.1 PRRSV/CSFV/PRV/PCV-2四重?zé)晒舛縋CR檢測(cè)

按照試劑盒說(shuō)明書(shū)配置反應(yīng)體系：PCR反應(yīng)液43 μL，酶混合液2 μL，樣品核酸模板5 μL，合計(jì)50 μL進(jìn)行qPCR擴(kuò)增。選擇FAM通道檢測(cè)PRRSV核酸，HEX通道檢測(cè)PRV核酸，ROX通道檢測(cè)CSFV核酸，CY5通道檢測(cè)PCV-2核酸。反應(yīng)程序：50 ℃ 30 min；95 ℃ 2 min；95 ℃ 15 s，60 ℃ 30 s，共40個(gè)循環(huán)。結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)：Ct值>40為陰性，Ct值≤35為陽(yáng)性，35

1.5.2 PCV-3熒光定量PCR檢測(cè)

分別按照試劑盒的說(shuō)明書(shū)配置反應(yīng)體系：PCR反應(yīng)液19 μL，酶混合液1 μL，樣品核酸模板5 μL，合計(jì)25 μL進(jìn)行qPCR擴(kuò)增。選擇FAM通道檢測(cè)PCV-3基因，選擇HEX通道為內(nèi)參基因。反應(yīng)程序：95 ℃ 3 min；95 ℃ 15 s，55 ℃ 30 s，共40個(gè)循環(huán)。結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)：Ct值>40為陰性，Ct值≤37為陽(yáng)性，37

1.5.3 PPV熒光定量PCR檢測(cè)

按照試劑盒的說(shuō)明書(shū)配置反應(yīng)體系：PCR反應(yīng)液19 μL，酶混合液1 μL，樣品核酸模板5 μL，合計(jì)25 μL進(jìn)行qPCR擴(kuò)增。選擇FAM通道檢測(cè)PPV基因，選擇HEX通道為內(nèi)參基因。反應(yīng)程序：95 ℃ 3 min；95 ℃ 15 s，55 ℃ 30 s，共40個(gè)循環(huán)。結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)：Ct值>40為陰性，Ct值≤37為陽(yáng)性，37

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

對(duì)本次初乳乳房拭子與仔豬睪丸處理液中6種豬繁殖障礙相關(guān)病毒的抗原檢出率，使用卡方檢驗(yàn)進(jìn)行顯著性分析。對(duì)qPCR檢測(cè)初乳乳房拭子和睪丸處理液陽(yáng)性樣本的Ct值，用IBM SPSS Statistics 21.0軟件獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)進(jìn)行差異分析。P<0.05判為顯著差異，P<0.01判為差異極顯著。

2 結(jié)果

2.1 對(duì)隨機(jī)采樣的初乳乳房拭子和睪丸處理液的檢測(cè)

使用四重qPCR對(duì)113份混合初乳乳房拭子和171份混合睪丸處理液樣本進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示：PRRSV、CSFV、PRV和PCV-2在113份混合初乳乳房拭子和171份混合睪丸處理液樣本中的檢出率為0，與該場(chǎng)的歷史檢測(cè)監(jiān)測(cè)記錄相吻合。PCV-3在113份混合初乳乳房拭子的檢出陽(yáng)性數(shù)為30份，陽(yáng)性率為26.55%；在171份混合睪丸處理液樣品檢出的陽(yáng)性數(shù)為10份，陽(yáng)性率為5.85%。PPV在113份混合初乳乳房拭子的檢出陽(yáng)性數(shù)為5份，陽(yáng)性率為4.42%；在171份混合睪丸處理液樣品檢出的陽(yáng)性數(shù)為2份，陽(yáng)性率為1.17%。初乳乳房拭子對(duì)PCV-3和PPV分別在檢出率分別比睪丸處理液高20.70個(gè)百分點(diǎn)(P<0.01)和3.26個(gè)百分點(diǎn)(P<0.05)，說(shuō)明初乳乳房拭子對(duì)PCV-3和PPV檢出率要顯著高于睪丸處理液，詳見(jiàn)表1。

表1 6種豬繁殖障礙性相關(guān)病毒在隨機(jī)采樣的初乳乳房拭子和睪丸處理液中的檢測(cè)結(jié)果

2.2 對(duì)38頭1胎母豬的初乳乳房拭子和對(duì)應(yīng)仔豬睪丸處理液的檢測(cè)

qPCR檢測(cè)結(jié)果顯示：PRRSV、CSFV和PRV在38頭母豬的初乳乳房拭子和對(duì)應(yīng)仔豬睪丸處理液中檢出率均為0；PCV-2在初乳乳房拭子中的檢出率為2.63%(1/38)，在仔豬睪丸處理液中未檢出。PCV-3在初乳乳房拭子和對(duì)應(yīng)仔豬睪丸處理液的檢出率分別為55.26%(21/38)和44.74%(17/38)，即PCV-3在初乳乳房拭子中的檢出率比仔豬睪丸處理液高10.52個(gè)百分點(diǎn)(P<0.01)。其中在21頭初乳乳房拭子為PCV3陽(yáng)性母豬中，有16頭對(duì)應(yīng)的仔豬睪丸處理液也為陽(yáng)性，其余5頭對(duì)應(yīng)的仔豬睪丸處理液樣品檢測(cè)為陰性，皮爾遜相關(guān)性檢驗(yàn)結(jié)果為相關(guān)性顯著(r=0.618，P<0.01)；有1份PCV-3陽(yáng)性仔豬睪丸處理液樣品未在其對(duì)應(yīng)的初乳乳房拭子樣品中檢測(cè)到PCV-3，占比2.63%(1/38)。PPV在38份初乳乳房拭子樣品中檢出1份，陽(yáng)性率為2.63%(1/38)，在仔豬睪丸處理液樣品中未檢出。PCV-2+PCV-3和PPV+PCV-3混合感染在初乳乳房拭子樣品中的檢出率均為2.63%(1/38)，在睪丸處理液樣品中均未檢測(cè)到任何形式的混合感染。詳見(jiàn)表2和圖1。

注：*表示P<0.05，**表示P<0.01。下同。

表2 38頭1胎母豬初乳乳房拭子及睪丸處理液樣品檢測(cè)數(shù)據(jù)(Ct值)比較

PCV-3的qPCR檢測(cè)結(jié)果顯示(圖2)，睪丸處理液陽(yáng)性樣品的平均Ct值為25.36，初乳乳房拭子陽(yáng)性樣品的平均Ct值為29.54，即睪丸處理液樣品的平均Ct值要顯著低于初乳乳房拭子樣品(P<0.05)。

圖2 PCV-3 陽(yáng)性樣本qPCR的Ct值

3 討論

ASFV、PRRSV、PRV、CSFV、PCV-2、PCV-3和PPV等是引起豬繁殖障礙性疾病的重要病原，給養(yǎng)豬業(yè)帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)損失[7-9]。ASFV在中國(guó)暴發(fā)后，不少規(guī)模豬場(chǎng)自建檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室[10]，使得這些豬場(chǎng)重點(diǎn)關(guān)注疾病的檢測(cè)監(jiān)測(cè)變得更加便捷。然而隨著豬繁殖障礙性疾病在臨床上的感染類型逐漸變得復(fù)雜多樣化，除急性和慢性發(fā)病外，隱性感染、亞臨床感染和間歇性排毒呈逐步上升趨勢(shì)，使得臨床監(jiān)測(cè)的敏感性和準(zhǔn)確性受到巨大的挑戰(zhàn)。如Batista 等[11]報(bào)道了PRRSV血清樣本抗原抗體檢測(cè)均為陰性的豬，仍然能在其內(nèi)臟器官和組織檢測(cè)到病原。

當(dāng)前，對(duì)豬群重點(diǎn)防控疫病監(jiān)測(cè)的主要樣品類型是血清、扁桃體拭子、臍帶血、口腔液和環(huán)境樣。對(duì)于血清樣本，在低感染率下對(duì)大多數(shù)疾病的檢測(cè)敏感性低[12]，且血清的采集需要多人配合綁定豬只，樣品采集效率低。同樣，扁桃體拭子的采集也需要多人配合，且使用專用工具對(duì)豬進(jìn)行綁定，才能高效準(zhǔn)確地采集到扁桃體拭子樣品[2]，高人力成本導(dǎo)致其很難規(guī)?；糜谝卟〉拈L(zhǎng)期監(jiān)測(cè)。臍帶血樣本近年來(lái)也在豬場(chǎng)廣泛應(yīng)用于多種垂直傳播疾病的監(jiān)測(cè)[13-14]，但多種垂直傳播性病原，如PRRSV，經(jīng)垂直傳播感染胎兒是隨機(jī)的[15]，導(dǎo)致即使存在垂直傳播，也并非在所有仔豬臍帶血都能檢測(cè)到病毒，所以臨床上需要盡可能采集到窩內(nèi)所有仔豬的臍帶血才可提高結(jié)果可信度，由于母豬的產(chǎn)程分布較長(zhǎng)，特別是晚上在無(wú)人接產(chǎn)的情況下，并不能采集到窩內(nèi)所有初生仔豬的臍帶血?？谇灰簶悠吩谂R床上用于病原的抗原診斷和監(jiān)測(cè)時(shí)，對(duì)大欄群體飼養(yǎng)的豬群采樣效果較好，但也會(huì)出現(xiàn)豬不來(lái)咀嚼咬繩的情況，導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果的敏感性受到限制[16]；其次對(duì)于限位欄飼養(yǎng)的母豬，特別是產(chǎn)房母豬，豬不咀嚼咬繩的概率較高，因此在某些臨床情景下，采集口腔液的效率和便利性甚至不如扁桃體拭子。而對(duì)于環(huán)境樣品，樣品中雜質(zhì)，如飼料殘?jiān)⒓S尿、強(qiáng)酸強(qiáng)堿等環(huán)境消毒劑殘留，均會(huì)影響核酸提取的效果和抑制PCR反應(yīng)，導(dǎo)致檢出率大大下降[17]。綜上所述，以上樣品并不適合作為長(zhǎng)期疫病監(jiān)測(cè)的高敏和高效樣品來(lái)源。

豬場(chǎng)獸醫(yī)和管理者一直在不斷摸索更為敏感、便捷的樣品采集方法。近年來(lái)出現(xiàn)一種新的樣品采集方法，即睪丸處理液。睪丸液是在仔豬閹割或斷尾時(shí)采集的組織滲出液的混合樣品，又被稱為“處理液”，可作為PRRSV的高敏感樣品[18]，且其采樣便捷能滿足豬場(chǎng)一線工作者的需求，但目前關(guān)于睪丸處理液對(duì)PCV-3、PPV等病毒的檢測(cè)報(bào)道較少。另外對(duì)于母豬初乳乳房拭子，有研究顯示在沒(méi)有PCV-3病毒血癥的分娩母豬中，也能在初乳中檢測(cè)到高病毒載量的PCV-3[19]；Ha等[20]同樣報(bào)道了初乳和乳汁中的PCV-2和PPV具備傳染性。初乳具備這一特點(diǎn)的原因是在初乳期，母豬乳腺腺泡周圍的上皮細(xì)胞之間連接不再緊密，引起滲出物從血漿滲出至乳汁，且在此階段大量淋巴細(xì)胞歸巢至乳腺，使母豬初乳中含有高含量的白細(xì)胞[21]。這些白細(xì)胞通過(guò)“木馬機(jī)制”進(jìn)行相關(guān)病原的垂直傳播，以ASFV為例，靶細(xì)胞表明因具有抗體(IgG)的Fc受體而具有調(diào)理吞噬作用，從而給藏匿于病毒-抗體復(fù)合物中的病毒以可乘之機(jī)，進(jìn)入靶細(xì)胞，登革熱病毒也有類似的病毒傳播機(jī)制[22-23]，提示初乳樣品具備對(duì)某些病原的高效監(jiān)測(cè)能力，且母豬初乳乳房拭子的采集方便性極高，能大大減少工作人員的工作量。

本研究結(jié)果顯示，在對(duì)隨機(jī)不分胎次采集的113份混合初乳乳房拭子和171份混合仔豬睪丸處理液樣本的6種垂直傳播性疾病的病原檢測(cè)中，初乳乳房拭子樣本中PCV-3和PPV的檢出率比仔豬睪丸處理液樣本分別顯著高出20.7個(gè)百分點(diǎn)和3.25個(gè)百分點(diǎn)。由于本次試驗(yàn)所研究的豬場(chǎng)1胎母豬的年平均死胎率顯著高于其他胎次，結(jié)合豬場(chǎng)實(shí)際生產(chǎn)情況，遂額外再單獨(dú)采集38份1胎母豬初乳乳房拭子樣本和對(duì)應(yīng)的仔豬睪丸處理液樣本進(jìn)行6種垂直傳播性疾病的病原檢測(cè)分析。結(jié)果顯示，初乳乳房拭子樣本中PCV-2、PCV-3和PPV的檢出率分別比仔豬睪丸處理液樣本分別高出2.63個(gè)百分點(diǎn)、10.52個(gè)百分點(diǎn)和2.63個(gè)百分點(diǎn)。有1份仔豬睪丸處理液樣品檢出PCV-3，但未在其對(duì)應(yīng)的初乳乳房拭子中檢測(cè)到PCV-3，占比2.63%，可能是仔豬出生后的自然感染導(dǎo)致，后續(xù)可通過(guò)ELISA等方法來(lái)進(jìn)一步研究。其次，基于這一差異，提示豬場(chǎng)獸醫(yī)可以通過(guò)比較初乳乳房拭子和睪丸處理液樣本中的檢測(cè)差異，來(lái)評(píng)估病毒垂直傳播和水平傳播的程度和差異。PCV-2+PCV-3和PPV+PCV-3的雙重感染在初乳乳房拭子樣本中的檢出率均為2.63%，但在仔豬睪丸處理液中未見(jiàn)任何形式的混合感染。以上數(shù)據(jù)顯示，初乳乳房拭子樣本比仔豬睪丸處理液樣本對(duì)PCV-2、PCV-3和PPV具備更高的檢測(cè)敏感性。在qPCR檢測(cè)PCV-3陽(yáng)性的21份初乳乳房拭子中和17份睪丸處理液中，仔豬睪丸處理液樣品的平均Ct值要顯著低于初乳乳房拭子，其可能的原因是病毒經(jīng)母豬初乳傳播給仔豬，并在仔豬體內(nèi)進(jìn)行復(fù)制和增殖，即導(dǎo)致仔豬血液和睪丸處理液中呈現(xiàn)更高的病毒載量。

單獨(dú)檢測(cè)的38頭1胎母豬的初乳乳房拭子和對(duì)應(yīng)仔豬睪丸處理液樣本中PCV-3檢出率均要遠(yuǎn)高于各胎次母豬的隨機(jī)混合樣品，Kedkovid等[19]也報(bào)道了PCV-3在1胎母豬初乳中檢出率要顯著高于其他胎次。有文獻(xiàn)報(bào)道[24-25]，PCV-3在死胎有較高的檢出率，而本場(chǎng)1胎母豬的死胎率顯著高于其他胎次母豬，是否與PCV-3的感染有直接關(guān)系值得更進(jìn)一步研究。 PRRSV、CSFV和PRV在本次研究中在初乳乳房拭子和睪丸處理液中的檢出率均為0，結(jié)合本場(chǎng)的歷史檢測(cè)監(jiān)測(cè)記錄及豬群的臨床表現(xiàn)，較為吻合。本次研究并未能比較出初乳乳房拭子和仔豬睪丸處理液對(duì)PRRSV、CSFV和PRV的檢測(cè)敏感性，其次所采集的113份初乳乳房拭子混合樣品與171份仔豬睪丸液混合樣品并不對(duì)應(yīng)匹配，即在臨床對(duì)多種豬繁殖障礙相關(guān)病毒的監(jiān)測(cè)中，初乳乳房拭子是否能完全取代睪丸處理液，后續(xù)需要通過(guò)對(duì)不同胎次母豬的初乳乳房拭子和對(duì)應(yīng)的仔豬睪丸處理液進(jìn)行更進(jìn)一步研究。

以上結(jié)果表明，母豬初乳乳房拭子樣品對(duì)PCV-2、PCV-3和PPV具備較高的監(jiān)測(cè)能力，且檢出率要高仔豬睪丸處理液樣本，但兩者對(duì)PRRSV、CSFV和PRV的檢測(cè)敏感性差異未能比較。臨床上，母豬初乳乳房拭子的預(yù)警時(shí)間要早于仔豬睪丸處理液，通過(guò)初乳乳房拭子監(jiān)測(cè)到相關(guān)疫病后，可以通過(guò)減少仔豬的寄養(yǎng)來(lái)降低病毒的水平傳播程度；其次，也能提示豬場(chǎng)獸醫(yī)及時(shí)采取生物安全和免疫保健方案來(lái)降低病原的危害，對(duì)豬場(chǎng)疫病防控起到極大的預(yù)警作用。綜上，母豬初乳乳房拭子樣品作為PCV-2、PCV-3和PPV的監(jiān)測(cè)樣本，具備高檢測(cè)敏感性、采樣便利性和風(fēng)險(xiǎn)預(yù)警性，能準(zhǔn)確地反映產(chǎn)房?jī)?nèi)母豬和仔豬病原流行情況及風(fēng)險(xiǎn)，以便豬場(chǎng)制定和采取更為準(zhǔn)確的免疫保健和生物安全等綜合防控措施。