48 份黑果枸杞種質(zhì)主要表型和品質(zhì)性狀的遺傳多樣性研究

王曉潔，黎美霞，陶 蕾，張 波，何昕孺，米 佳，戴國禮，徐文娣

（1.寧夏農(nóng)林科學(xué)院 枸杞科學(xué)研究所/國家枸杞工程技術(shù)研究中心，寧夏 銀川 740002；2.北方民族大學(xué) 生物科學(xué)與工程學(xué)院，寧夏 銀川 750021；3.北方民族大學(xué) 經(jīng)濟林遺傳改良創(chuàng)新團隊，寧夏 銀川 750021）

黑 果 枸 杞（Lycium ruthenicumMurr.）是 茄 科（Solancea）枸杞屬（Lycium）灌木植物，是我國西北荒漠地區(qū)一種耐旱耐鹽堿抗風沙植物，對西北地區(qū)防風固沙、土壤改良及生態(tài)環(huán)境保護具有重要意義[1]。成熟果實多為紫黑色或白色漿果，富含維生素、糖類和有機酸，可作為保健食品的原料[2]。黑果枸杞所含的多糖具有防治糖尿病[3]和抗疲勞[4]作用；所含的黃酮具有抗氧化活性和降血脂作用[5]；富含的大量花色苷類物質(zhì)具有體外抗氧化作用[6]，其花色苷含量及體外抗氧化活性均顯著優(yōu)于藍莓、樹莓，也顯著高于紅果枸杞[7]。隨著人們生活水平的提高，枸杞市場需求量也逐年增長，近幾年紅果枸杞栽培種已在各地實現(xiàn)了大面積種植，但黑果枸杞具有棘刺多、難采摘和耗時長等缺點，在各地仍處于野生狀態(tài)，而且在部分地區(qū)每年僅有1 次果實成熟采摘期，導(dǎo)致以黑果枸杞為原料的加工產(chǎn)品價格極其昂貴。

植物遺傳多樣性是植物表型學(xué)、細胞學(xué)、生理生化及分子生物學(xué)等領(lǐng)域涵蓋的種群間及個體間遺傳變異的總和，其中植物葉片、果實大小等表型性狀受生態(tài)環(huán)境條件影響明顯，具有豐富的遺傳變異，已經(jīng)成為遺傳育種工作的研究熱點。目前，國內(nèi)利用分子標記技術(shù)分析黑果枸杞遺傳多樣性的研 究 較 多。 王 錦 楠 等[8]利 用AFLP（Amplified fragment length polymorphism）對柴達木地區(qū)的5 個黑果枸杞種群遺傳多樣性進行了分析；有學(xué)者利用ISSR（Inter-simple sequence repeat）技術(shù)對新疆南部等的8 個黑果枸杞自然居群進行了遺傳多樣性分析[9]；黃興發(fā)等[10]在對無性系的黑果枸杞基因組測序基礎(chǔ)上建立了黑果枸杞SSR（Simple sequence repeat）標記檢索數(shù)據(jù)庫，為研究黑果枸杞遺傳多樣性提供SSR 標記支撐。目前，國內(nèi)外學(xué)者利用表型性狀對較多植物種群進行了遺傳多樣性分析，伴隨表型數(shù)據(jù)采集技術(shù)的提高，其在闡明種群變異結(jié)構(gòu)、來源和規(guī)律方面的作用日益凸顯，為植物資源收集、保護或遺傳改良提供了重要研究基礎(chǔ)[11-12]。

黑果枸杞是我國西北地區(qū)重要的天然藥用植物資源，但關(guān)于其表型和品質(zhì)性狀的遺傳多樣性研究相對較少。鑒于此，擬利用描述性統(tǒng)計、主成分、相關(guān)性和聚類分析這4 種方法，對48 份黑果枸杞種質(zhì)資源的18種表型和品質(zhì)性狀進行測定，并分析黑果枸杞種質(zhì)主要性狀的遺傳多樣性，為鑒別特異種質(zhì)、確定核心親本、提高黑果枸杞的產(chǎn)量與品質(zhì)，以及野生黑果枸杞人工馴化與遺傳改良提供參考。

1 材料和方法

1.1 試驗材料及試驗地概況

48 份黑果枸杞種質(zhì)資源定植于國家枸杞種質(zhì)資源圃，該資源圃位于寧夏回族自治區(qū)銀川市西夏區(qū)蘆花臺試驗地（東經(jīng)106°09′、北緯38°39′）。該地為中溫帶干旱大陸性氣候，干旱少雨、日照充足，年平均氣溫8.5 ℃，年平均日照時數(shù)2 800～3 000 h，年平均降水量200 mm。試驗地土壤以淡灰鈣土為主，pH 值為8.2～8.7[13]。48 份黑果枸杞種質(zhì)采用籬架栽培，定植株行距為0.5 m×3.0 m，定植年份、來源等信息詳見表1。

表1 48份黑果枸杞種質(zhì)的基本信息Tab.1 Basic information of 48 L.ruthenicum Murr.germplasm resources

1.2 試驗化學(xué)試劑和儀器

試驗化學(xué)試劑主要有氯化鉀（成都市科隆化學(xué)品有限公司）、36%鹽酸（天津市大茂化學(xué)試劑廠）、醋酸鈉（天津市凱通化學(xué)試劑有限公司）、冰乙酸（MREDA 公司）、甲醇（MREDA 公司）、三氟乙酸（MREDA 公司）。試驗儀器主要有電子游標卡尺（MC 量制浙字01010235）、Scan Maker i600 掃描儀（上海中晶科技有限公司）、紫外可見分光光度計TU1810（北京普析通用儀器有限責任公司）、電子分析天平AUY200（德國賽多利斯公司）、SHZ-Ⅲ型循環(huán)水真空泵（上海亞榮生化儀器廠）、全數(shù)字超聲波發(fā)生器（武漢嘉鵬電子有限公司）。

1.3 測定指標和方法

黑果枸杞表型數(shù)據(jù)測定參照參考文獻[14]進行，為降低樹齡對表型差異的影響，本研究均以1年生結(jié)果枝為對象，進行表型數(shù)據(jù)采集。各項指標測定及果實采摘時間集中于2022年8月上旬。

1.3.1 黑果枸杞枝長和枝粗的測定 對每份種質(zhì)1年生單株結(jié)果主枝條數(shù)和單株結(jié)果側(cè)枝條數(shù)進行記錄；每份種質(zhì)隨機選取冠面中上部5根側(cè)枝，用卷尺從枝條基部測量至頂端即為枝長，用標準游標卡尺測量該枝條基部即為枝粗。

用于指標測量的葉片應(yīng)具有完整葉形且無明顯病蟲害。從采摘回來的3 段枝條中各選出1 個無棘刺芽眼的葉簇，用掃描儀檢測該芽眼所有葉片的葉長、葉寬和葉面積，并記錄葉片形狀和單簇葉片數(shù)，重復(fù)3次。

葉片形狀及判斷標準，條形：近無柄；條狀披針形：近披針形，葉片基部寬度較大；倒披針形：呈狹披針形，葉尖頂端鈍圓。

1.3.3 黑果枸杞果實的果形指數(shù)等指標的測定

使用枝剪剪下每份種質(zhì)各5 根超過20 cm 的枝條，標記裝袋放在保溫箱4 ℃儲存，在采摘后6 h 內(nèi)測量并記錄果柄長、果實橫徑、果實縱徑、平均單果質(zhì)量、單枝成熟果實數(shù)、單枝未成熟果實數(shù)、果實顏色和果實形狀，之后立即使用錫箔紙包裹鮮果于-20 ℃避光冷凍保存，用于品質(zhì)性狀即果實內(nèi)花色苷含量的測定。

用于指標測量的果實要求成熟且無病蟲害和機械損傷。將采摘的枝條進行統(tǒng)一修剪，留下含頂端的20 cm 枝條，記錄其單枝成熟果實數(shù)、單枝未成熟果實數(shù)和果實顏色；從枝條上修剪下5 個完整的果柄，用掃描儀分析測定果柄長；隨機選取30 個完整的鮮果，先對果實形狀進行判定，再用掃描儀分析測定果實橫徑和果實縱徑，然后對這5 根枝條上的所有成熟且完整的果實進行計數(shù)和稱質(zhì)量，計算平均單果質(zhì)量。

果實形狀的判斷標準：球狀（近球形），果形指數(shù)在1.00～1.20；扁球狀（球形呈壓扁狀），果形指數(shù)＞1.20；桃狀（似桃形），果形指數(shù)＜1.00[15]。

果實顏色及判斷標準：黑色、玫紅色（果實頂部顏色多為玫紅色、紫色，下半部白色）、白色、無色（果實基部為白色，頂部近無色）[15]。

2015年，李克強總理在政府工作報告中首次提出制定“互聯(lián)網(wǎng)+”行動計劃，“互聯(lián)網(wǎng)+”一躍成為社會各界追捧的熱詞。2015年7月，國務(wù)院印發(fā)《關(guān)于積極推進“互聯(lián)網(wǎng)＋”行動的指導(dǎo)意見》，其中對“互聯(lián)網(wǎng)+”的解釋是“把互聯(lián)網(wǎng)的創(chuàng)新成果與經(jīng)濟社會各領(lǐng)域深度融合，推動技術(shù)進步、效率提升和組織變革，提升實體經(jīng)濟創(chuàng)新力和生產(chǎn)力，形成更廣泛的以互聯(lián)網(wǎng)為基礎(chǔ)設(shè)施和創(chuàng)新要素的經(jīng)濟社會發(fā)展新形態(tài)”。

1.3.4 黑果枸杞果實花色苷的提取和含量測定

HCl-KCl 溶液的配制：準確稱取7.45 g 氯化鉀定容至500 mL 后裝瓶備用；取8.5 mL 濃鹽酸定容至500 mL 后裝瓶備用，將其以體積比25∶67 配制成鹽酸-氯化鉀溶液，使用pH 計調(diào)pH 值為1±0.1。醋酸-醋酸鈉緩沖溶液配制：準確稱取18 g 醋酸鈉溶于水中，取醋酸4.9 mL 倒入醋酸鈉溶液中，用水定容至1 000 mL，用醋酸調(diào)pH 值為4.5±0.1，裝瓶貼好標簽放置冰箱備用。

稱取黑果枸杞鮮果樣品約12.0 g，加入液氮進行研磨（不宜在光照環(huán)境放置太久），準確稱取研磨樣品10.0 g，置于50 mL 離心管（用錫箔紙包裹作避光處理），加入30 mL 0.5%三氟乙酸-甲醇溶液，避光超聲輔助提取15 min（超聲頻率40 kHz），隨后抽濾、收集濾液，將濾渣繼續(xù)提取2次，合并濾液，濃縮至10 mL，即得提取液[16]。各取1 mL 提取液于2支10 mL 的試管中，分別加入9 mL 的HCl-KCl 溶液和9 mL 的醋酸-醋酸鈉緩沖溶液，即提取液分別用pH值1.0和4.5的緩沖液稀釋10倍，混合均勻后作試驗組；采用0.5%的三氟乙酸-甲醇溶液作空白對照組。分別測定每種樣品在pH 值1.0 和4.5 時530、700 nm 處的吸光度，然后按照參照文獻[17]中的方法計算總花色苷含量（以矢車菊素-3-O-葡萄糖苷計）。

1.3.5 黑果枸杞性狀指標賦值 基于參考文獻[15]、[18]，結(jié)合實際情況選取了黑果枸杞的18 種主要表型、品質(zhì)性狀指標并賦值，如表2 所示。包括15 個數(shù)量性狀（枝長、枝粗、葉長、葉寬、葉面積、單簇葉片數(shù)、果柄長、果實橫徑、果實縱徑、平均單果質(zhì)量、單枝成熟果實數(shù)、單枝未成熟果實數(shù)、單株結(jié)果主枝條數(shù)、單株結(jié)果側(cè)枝條數(shù)和花色苷含量）和3個質(zhì)量性狀（葉片形狀、果實形狀和果實顏色）。

表2 黑果枸杞性狀類型指標及賦值Tab.2 Traits and taxonomic evaluations of L.ruthenicum Murr.

1.4 數(shù)據(jù)處理

使用Microsoft Excel 2019 整理數(shù)據(jù)，獲取各指標最大值（Max）、最小值（Min）、平均值（Mean）、標準差（SD）、變異系數(shù)（CV）以及遺傳多樣性指數(shù)（H’）[19]。使用SPSS 23.0進行主成分分析，為便于比較，首先對數(shù)值進行標準化轉(zhuǎn)換，然后對標準化后的數(shù)據(jù)進行主成分分析，對數(shù)值進行KMO和巴特利特球形度檢驗，取KMO 取樣適切性量數(shù)≥0.6、提取特征值＞1.0 的主成分。使用Origin 2019 進行相關(guān)性及聚類熱圖分析，其中采取皮爾遜（Pearson）相關(guān)系數(shù)分析方法對標準化數(shù)據(jù)進行相關(guān)性分析；采用離差平方和法（Ward 法），并以歐氏距離（Euclidean distance）為種質(zhì)間遺傳距離進行聚類分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 48份黑果枸杞種質(zhì)的數(shù)量性狀分析

如表3 所示，48 份黑果枸杞種質(zhì)的數(shù)量性狀變異系數(shù)在19%～189%，其H’在1.431～2.095，表明48份黑果枸杞種質(zhì)資源擁有豐富的遺傳多樣性。單株結(jié)果主枝條數(shù)、單株結(jié)果側(cè)枝條數(shù)、單枝成熟果實數(shù)、單枝未成熟果實數(shù)、單簇葉片數(shù)和平均單果質(zhì)量為黑果枸杞產(chǎn)量的數(shù)量性狀指標。其中，單枝成熟果枝數(shù)的H’最高，為1.987，變異系數(shù)為57%；單枝未成熟果實數(shù)的H’為1.431，變異系數(shù)最高，為189%。果實橫徑、果實縱徑、果柄長和花色苷含量為黑果枸杞果實的數(shù)量性狀指標，果實縱徑的H’為2.095，變異系數(shù)為19%；果實橫徑的H’為2.093，變異系數(shù)為19%；果柄長的H’為1.763，變異系數(shù)為25%；花色苷含量的H’為1.807，變異系數(shù)為74%。葉長、葉寬和葉面積為黑果枸杞葉片的數(shù)量性狀指標。其中，葉寬的H’最高（1.983），其變異系數(shù)為34%；葉面積的H’最低（1.607），其變異系數(shù)為77%。枝長和枝粗為黑果枸杞枝條的數(shù)量性狀指標，枝長的H’為2.003，變異系數(shù)為29%；枝粗的H’為2.014，變異系數(shù)為24%。

2.2 48份黑果枸杞種質(zhì)的質(zhì)量性狀分析

黑果枸杞葉片形狀分為倒披針形、條狀披針形和條形3 種，如圖1 所示；果實顏色分為白色、玫紅色和黑色3 種，如圖2 所示；果實形狀分為球狀、扁球狀和桃狀3 種，如圖3 所示。48 份黑果枸杞種質(zhì)資源葉片性狀調(diào)查結(jié)果表明，葉形為倒披針形的最多，占50.0%；其次為條形，占39.7%；條狀披針形的占10.3%。果實形狀以扁球狀為主（43.7%），其次為球狀（41.7%）和桃狀（14.6%）。果實顏色中以黑色占主導(dǎo)地位（68.7%），其次為白色（4.2%）和玫紅色（27.1%）。3 個質(zhì)量性狀的H’在0.745～1.007，其中果實形狀的多樣性指數(shù)最高，達1.007；葉片形狀的多樣性指數(shù)為0.948；果實顏色的多樣性指數(shù)為0.745（表4）。

圖1 48份黑果枸杞種質(zhì)葉片形狀Fig.1 Leaf shapes of 48 L.ruthenicum Murr.germplasm resources

圖2 48份黑果枸杞種質(zhì)果實顏色Fig.2 Fruit colors of 48 L.ruthenicum Murr.germplasm resources

圖3 48份黑果枸杞種質(zhì)果實形狀Fig.3 Fruit shapes on germplasm resources of 48 L.ruthenicum Murr.

表4 48份黑果枸杞種質(zhì)3個質(zhì)量性狀的遺傳多樣性分析Tab.4 Assessment on genetic diversity of 3 qualitative traits of 48 L.ruthenicum Murr.germplasm resources

2.3 48份黑果枸杞種質(zhì)主要表型和品質(zhì)性狀的主成分分析

利用主成分分析將多個性狀指標轉(zhuǎn)化為較少的幾個主成分，從而可以探究導(dǎo)致種質(zhì)遺傳多樣性的主要影響因子，其中特征值和貢獻率是選擇主成分的依據(jù)，參照參考文獻[20]以特征值＞1.0 為標準提取主成分。本研究中，基于48份黑果枸杞種質(zhì)的18 種主要表型和品質(zhì)性狀的主成分分析的KMO 取樣適切性量數(shù)=0.647，該值＞0.6。由表5 可知，特征值＞1.0 的主成分共計6 個，累計貢獻率達到80.09%，表明這6 個主成分包含了黑果枸杞絕大部分的變異信息，可以反映18種主要表型和品質(zhì)性狀的基本特征。

表5 48份黑果枸杞種質(zhì)的18種主要表型和品質(zhì)性狀的主成分分析Tab.5 Principal component analysis of 18 main phenotypic and quality traits of 48 L.ruthenicum Murr.germplasm resources

從表5 的結(jié)果可以看出，6 個主成分涵蓋了黑果枸杞種質(zhì)的絕大部分變異性狀，累計貢獻率為80.09%。第1主成分特征值最大，為6.30，貢獻率為34.99%，果實縱徑對主成分1影響最大，其次是果實顏色、葉面積、花色苷含量。第2 主成分貢獻率為14.00%，果實橫徑和葉長對主成分2 影響較大。第3 主成分貢獻率為8.95%，枝粗對主成分3 影響最大。第4、5、6 主成分貢獻率分別為8.31%、7.38%、6.47%，單株結(jié)果主枝條數(shù)、單枝未成熟果實數(shù)和單枝成熟果實數(shù)分別對主成分4、5、6的影響較大。綜合考量18個性狀與黑果枸杞產(chǎn)量及品質(zhì)的關(guān)系，篩選果實縱徑、果實顏色、葉面積、花色苷含量、果實橫徑和枝粗6個性狀作為反映黑果枸杞產(chǎn)量及品質(zhì)的主要指標。

2.4 48份黑果枸杞種質(zhì)主要表型和品質(zhì)性狀的相關(guān)性分析

如圖4 所示，黑果枸杞種質(zhì)資源的18 種主要表型和品質(zhì)性狀指標間相關(guān)程度較高，各性狀間相互影響較大。其中，葉長、葉寬、葉面積和果柄長間呈極顯著正相關(guān)關(guān)系（P＜0.01）；果柄長與單枝未成熟果實數(shù)呈極顯著正相關(guān)關(guān)系（P＜0.01）；果實橫徑、果實縱徑和單株結(jié)果側(cè)枝條數(shù)間呈極顯著正相關(guān)關(guān)系（P＜0.01）；果實橫徑、平均單果質(zhì)量和枝粗間呈極顯著正相關(guān)關(guān)系（P＜0.01）；果實橫徑、平均單果質(zhì)量、單簇葉片數(shù)間呈極顯著正相關(guān)關(guān)系（P＜0.01）；單株結(jié)果主枝條數(shù)與單株結(jié)果側(cè)枝條數(shù)呈極顯著正相關(guān)關(guān)系（P＜0.01）；花色苷含量、果實顏色和單枝成熟果實數(shù)間呈極顯著正相關(guān)關(guān)系（P＜0.01）；果柄長與果實形狀、果實顏色、花色苷含量和枝粗均呈極顯著負相關(guān)關(guān)系（P＜0.01）。

圖4 48份黑果枸杞種質(zhì)的18種主要表型和品質(zhì)性狀的相關(guān)性分析Fig.4 Correlation analysis of 18 main phenotypic and quality traits of 48 L.ruthenicum Murr.germplasm resources

2.5 48份黑果枸杞種質(zhì)主要表型和品質(zhì)性狀的聚類分析

基于主要表型和品質(zhì)性狀的聚類分析能夠初步反映各類群的相似性和親緣關(guān)系，遺傳相似性越高，種質(zhì)資源的數(shù)量越密集[21]。根據(jù)6 個主成分特征向量絕對值大小從18 個指標中篩選出16 個指標（葉長、葉寬、葉面積、果柄長、單枝未成熟果實數(shù)、果實縱徑、果實橫徑、平均單果質(zhì)量、單株結(jié)果主枝條數(shù)、單株結(jié)果側(cè)枝條數(shù)、枝粗、花色苷含量、單枝成熟果實數(shù)、單簇葉片數(shù)、果實形狀和果實顏色）進行聚類，結(jié)果如圖5 所示，在歐氏距離10.0 處將48份枸杞種質(zhì)聚為六大類群。

圖5 48份黑果枸杞種質(zhì)基于16種主要表型和品質(zhì)性狀的聚類分析Fig.5 Clustering analysis of 48 L.ruthenicum Murr.germplasm resources based on16 main phenotypic and quality traits

第Ⅰ類群包含6 份種質(zhì)，其中4 份來源于甘肅，2份來源于新疆。其主要特征是果實形狀為桃狀和扁球狀，顏色為玫紅色，枝條較細，葉片大且寬，果實較小且質(zhì)量較低，產(chǎn)量適中，花色苷含量在6個種群中處于第5 位。第Ⅱ類群包含3 份種質(zhì)，均來源于青海。其主要特征是果實形狀為扁球狀，顏色為白色和玫紅色，枝條細，葉片細小，果實小且質(zhì)量低，產(chǎn)量較高，花色苷含量在6 個種群中處于第6位。第Ⅲ類群包含6 份種質(zhì)，其中4 份來源于新疆，1份來源于甘肅，1份來源于青海。其主要特征是果實形狀為桃狀和扁球狀，顏色為玫紅色，枝條細，葉片大小中等，果實大小和質(zhì)量適中，產(chǎn)量最低，花色苷含量在6個種群中處于第4位。第Ⅳ類群包含19份種質(zhì)，其中13 份來源于青海，4 份來源于新疆，2份來源于甘肅。其主要特征是果實形狀為扁球狀和球狀，顏色均為黑色，其枝條粗，葉片較小，果實大小中等但質(zhì)量最高，產(chǎn)量適中，花色苷含量在6個種群中處于第3位。第Ⅴ類群包含4份種質(zhì)，其中2份來源于甘肅，1 份來源于青海，1 份來源于新疆。其主要特征是果實形狀為扁球狀和球狀，顏色均為黑色，其枝條較粗，葉片較大，果實較大且質(zhì)量較高，單枝產(chǎn)量最高，花色苷含量在6個種群中處于第1 位。第Ⅵ類群包含10 份種質(zhì)，其中6 份來源于青海，4 份來源于新疆。其主要特征是果實形狀為扁球狀和球狀，顏色均為黑色，其枝條粗，葉片小，但果實較大且質(zhì)量較高，其產(chǎn)量適中，花色苷含量在6個種群中處于第2位。

指標層聚為兩大類，第一類包括葉長、葉寬、葉面積、果柄長、單枝未成熟果實數(shù)；第二類包括果實縱徑、果實橫徑、平均單果質(zhì)量、單株結(jié)果主枝條數(shù)、單株結(jié)果側(cè)枝條數(shù)、枝粗、果實顏色、花色苷含量、單枝成熟果實數(shù)、果實形狀和單簇葉片數(shù)。聚類結(jié)果與相關(guān)性分析結(jié)果一致。

3 結(jié)論與討論

本研究中，人工收集保存的48份黑果枸杞野生種質(zhì)具有豐富的遺傳多樣性，18種表型包含了15個數(shù)量性狀和3 個質(zhì)量性狀（葉片形狀、果實形狀、果實顏色），數(shù)量和質(zhì)量性狀指標的變異系數(shù)反映性狀的離散程度，且與離散程度呈正相關(guān)，變異系數(shù)越大，說明獲得優(yōu)良性狀的可能性就越大[22-27]。數(shù)量和質(zhì)量性狀的H’高，說明這些性狀具有較為豐富的變異信息，是研究種質(zhì)資源多樣性的另一重要指標[28]。盧文晉等[29]的研究表明，人工栽培條件下黑果枸杞存在果實性狀、枝條和葉片形態(tài)等方面的變異。本研究中，黑果枸杞的不同性狀在不同種質(zhì)之間表現(xiàn)出了不同程度的變異性和多樣性。其中，單枝未成熟果實數(shù)變異系數(shù)最大（189%），這可能與采摘時間和果實成熟時間有關(guān)，說明種質(zhì)包含分批成熟型和集中成熟型果實。

主成分分析結(jié)果表明，六大主成分累計貢獻率達80.09%。當性狀在某個主成分中的特征向量絕對值＞0.5 時，認為將其可代表該主成分主要反映的信息[30]。六大主成分反映的各指標信息方面，第1主成分：果實縱徑、果實顏色、葉面積、花色苷含量、葉長、葉寬、平均單果質(zhì)量、果柄長、枝粗、果實橫徑、單株結(jié)果側(cè)枝條數(shù)、果實形狀；第2主成分：果實橫徑、葉長、平均單果質(zhì)量、葉面積、葉寬；第3 主成分：枝粗；第4主成分：單株結(jié)果主枝條數(shù)、單株結(jié)果側(cè)枝條數(shù)；第5 主成分：單枝未成熟果實數(shù)；第6主成分：單枝成熟果實數(shù)、單簇葉片數(shù)。在六大主成分中按信息載量選擇1～2 個主要特征向量，最終篩選出果實縱徑、果實顏色、葉面積、花色苷含量、果實橫徑、枝粗6個主要特征向量，作為黑果枸杞新品種選育親本評價的重要指標。

相關(guān)性分析和聚類分析結(jié)果表明，果實橫徑、平均單果質(zhì)量和枝粗間呈極顯著正相關(guān)關(guān)系（P＜0.01），且果實橫徑、平均單果質(zhì)量、單簇葉片數(shù)間呈極顯著正相關(guān)關(guān)系（P＜0.01），表明在黑果枸杞人工選育中，1年生枝條枝粗和單簇葉片數(shù)量可作為種質(zhì)篩選的重要指標。劉桂英等[31]對柴達木盆地的野生黑果枸杞區(qū)域3 個野生群體的19 種表型性狀進行比較分析發(fā)現(xiàn)，野生黑果枸杞表型性狀的果實性狀（果柄長、果實橫縱徑、果形指數(shù)、最大單果質(zhì)量和百果質(zhì)量）在群體間存在顯著性差異，其他的表型性狀（當年生和木質(zhì)化枝條的枝長、葉簇數(shù)、葉長、葉寬、葉形指數(shù)和老葉的葉長、葉寬、葉形指數(shù)）在群體間不存在顯著性差異，以上研究結(jié)果與本研究具有一致性。黑果枸杞花色苷含量和單枝成熟果實數(shù)呈極顯著正相關(guān)關(guān)系（P＜0.01），表明果實采摘時間和花色苷含量存在密切聯(lián)系。聚類研究結(jié)果表明，在歐式距離為10.0 處，將其分為六大類，每一類群都有不同特征，對于進一步進行黑果枸杞品種人工定向選育具有重要參考意義。

目前，利用分子標記技術(shù)對黑果枸杞遺傳多樣性的研究，從分子層面解析黑果枸杞遺傳變異和群體結(jié)構(gòu)[8-10]，對黑果枸杞核心種質(zhì)挖掘和種質(zhì)的篩選具有重要意義，但存在一定局限性，其結(jié)果需要通過與表型數(shù)據(jù)進行關(guān)聯(lián)分析，才能確定標記與表型的連鎖關(guān)系，從而指導(dǎo)新品種的選育。本研究從表型性狀出發(fā)，建立黑果枸杞表型指標數(shù)據(jù)測定及評價方法，篩選出的主要表型指標和核心種質(zhì)，可為下一步開展黑果枸杞分子標記與表型性狀間相關(guān)分析提供參考。