刺梨多酚對(duì)NG-硝基-L-精氨酸甲酯誘導(dǎo)小鼠高血壓的影響及機(jī)制

徐 青，譚書(shū)明*，俞 露，袁 夢(mèng)，譚蕓蕓，張麗群

（貴州大學(xué)釀酒與食品工程學(xué)院，貴州省刺梨研究院，貴州 貴陽(yáng) 550025）

高血壓由動(dòng)脈壓持續(xù)升高造成[1]，它是一種死亡率極高的心腦血管疾病[2]。全球范圍內(nèi)高血壓患者約有11.3億 人，其中80%的患者未得到妥善的健康管理[3]。引發(fā)高血壓的主要原因大多歸結(jié)于遺傳、高脂高鹽膳食和心理因素，其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，并伴隨腦、心臟和腎臟等臟器損傷，發(fā)現(xiàn)不及時(shí)或治療不當(dāng)可能導(dǎo)致心肌梗死、中風(fēng)、腎功能衰竭甚至死亡[4]。目前常見(jiàn)的降血壓藥物大多是化學(xué)合成類(lèi)藥物，不僅依賴(lài)性大且伴有副作用，這導(dǎo)致高血壓患者接受治療依從性差[5]。而從天然植物中提取的降血壓活性成分可代替合成類(lèi)藥物用于高血壓的治療，并能減少副作用、增加安全性[6]。

刺梨是落葉灌木繅絲花（Rosa roxburghii，RR）的果實(shí)，又名刺莓果、送春歸，是一種功能性食品，它主要分布在云貴高原、湖南及四川西部高原，尤其在貴州省產(chǎn)量最為豐富[7]。刺梨果實(shí)營(yíng)養(yǎng)豐富，富含多酚、黃酮、多糖等成分[8]。研究表明，植物多酚提取物具有降血壓作用[9-11]；王著等[12]研究發(fā)現(xiàn)石榴多酚能顯著降低高血壓大鼠收縮壓和舒張壓，其作用機(jī)制可能與改善血管舒張作用，上調(diào)NO、下調(diào)血管緊張素II（angiotensin II，Ang II）和內(nèi)皮素-1（endothelin-1，ET-1）水平有關(guān)。Moreno-Luna等[13]研究發(fā)現(xiàn)橄欖油多酚能提高NO的生物利用度，食用富含多酚的橄欖油可顯著降低血壓和改善內(nèi)皮功能。Yuan Yao等[14]研究發(fā)現(xiàn)富含多酚的荔枝種子提取物可通過(guò)抑制炎癥、減少氧化應(yīng)激和調(diào)節(jié)腸道菌群來(lái)降低血壓和改善高血壓引發(fā)的腎損傷。有研究表明，刺梨多酚（Rosa roxburghiifruit polyphenols，RRP）具有解酒護(hù)肝、改善高脂膳食小鼠脂代謝和預(yù)防糖尿病等功效[15-17]，但目前對(duì)RRP降血壓作用的研究欠缺，故本研究進(jìn)一步探討刺梨多酚提取物對(duì)NG-硝基-L-精氨酸甲酯（NG-nitro-L-arginine methyl ester，L-NAME）誘導(dǎo)的小鼠高血壓的影響。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物、材料與試劑

50 只SPF級(jí)雄性KM小鼠（（35±2）g，生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK（湘）2019-0014），購(gòu)自長(zhǎng)沙市天勤生物技術(shù)有限公司。

刺梨（‘貴農(nóng)5號(hào)’）由貴州宏財(cái)聚農(nóng)投資有限公司提供；標(biāo)準(zhǔn)飼料與墊料購(gòu)自重慶騰鑫生物技術(shù)有限公司。

沒(méi)食子酸標(biāo)準(zhǔn)品 上海麥克林生化科技有限公司；L-NAME 上海源葉生物科技有限公司；卡托普利貴州一樹(shù)藥業(yè)股份有限公司； 白細(xì)胞介素- 6（interleukin-6，IL-6）試劑盒、腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）試劑盒、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）試劑盒、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px）試劑盒、丙二醛（malondialdehyde，MDA）試劑盒、一氧化氮（nitric oxide，NO）試劑盒、ET-1試劑盒、Ang II試劑盒、腎素試劑盒、醛固酮（aldosterone，ALD）試劑盒 泉州市睿信生物科技有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

BT-100-02恒流泵 蘇州辰傲電子科技有限公司；LGJ-10真空冷凍干燥機(jī) 北京松源華興科技發(fā)展有限公司；SpectraMax190酶標(biāo)儀 美國(guó)Molecular Devices公司；UV9000S紫外分光光度計(jì) 上海元析儀器有限公司；BP-2010A智能無(wú)創(chuàng)血壓計(jì) 北京軟隆生物技術(shù)有限公司；H1-16KR高速冷凍離心機(jī) 湖南可成儀器設(shè)備有限公司；DY89-II勻漿機(jī) 寧波新芝生物科技股份有限公司；RE-52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 上海亞榮生化儀器廠。

1.3 方法

1.3.1 RRP的制備

取適量刺梨果剁碎真空冷凍干燥72 h，料理機(jī)高速研磨后得到刺梨粉若干待用。

RRP的提取與純化：參考文獻(xiàn)[18-20]的方法并稍作調(diào)整，稱(chēng)取適量刺梨粉倒入燒杯，加入0.25%（以刺梨粉質(zhì)量計(jì)）的纖維素酶粉末，按料液比1∶5加入純水?dāng)嚢杈鶆蚝?0 ℃酶解2 h，隨后按料液比1∶15加入體積分?jǐn)?shù)80%乙醇溶液攪拌均勻，在超聲條件下（溫度40 ℃、超聲時(shí)間50 min、超聲功率300 W）提取完成后經(jīng)抽濾除去固體雜質(zhì)，隨后在50 ℃條件下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去乙醇即得RRP粗提液。RRP粗提液在常溫下經(jīng)AB-8大孔樹(shù)脂吸附10 h后解吸（80%乙醇、上樣量500 mL、洗脫液用量2 500 mL），洗脫液經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)、真空冷凍干燥后得RRP備用。

1.3.2 RRP中多酚純度的測(cè)定

參考劉祖望等[21]的方法略有修改，配制質(zhì)量濃度0.1 mg/mL沒(méi)食子酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液備用；分別吸取沒(méi)食子酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液60、80、100、120、140、160、180、200、220 μL于5 mL棕色離心管中，純水定容至500 μL后加入500 μL福林-酚試劑，混勻后避光反應(yīng)2 min，隨后再加入2 mL、質(zhì)量分?jǐn)?shù)10% Na2CO3溶液，最后加入1 mL純水，搖勻，40 ℃恒溫水浴30 min后于760 nm波長(zhǎng)處檢測(cè)OD值。標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為：y＝21.045x＋0.057 4，R2＝0.999，利用標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計(jì)算可得RRP中多酚純度為68%。

1.3.3L-NAME誘導(dǎo)小鼠高血壓模型的建立與分組

小鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1 周（（25±1）℃，12 h光暗循環(huán)）后，除空白組（n＝10）外其余組開(kāi)始誘導(dǎo)建模（L-NAME，15 mg/（kgmb·d）腹腔注射4 周），每周用BP-2010A智能無(wú)創(chuàng)血壓儀測(cè)量清醒小鼠的收縮壓（systolic blood pressure，SBP），SBP連續(xù)3 d大于140 mm Hg并穩(wěn)定則視為建模成功[22]。

將建模成功的小鼠分為4 組（n＝10）：模型組（9 g/L生理鹽水）、陽(yáng)性組（50 mg/（kgmb·d）卡托普利）、RPP低劑量組（250 mg/（kgmb·d）RPP）、RPP高劑量組（500 mg/（kgmb·d）RPP），對(duì)各組小鼠進(jìn)行灌胃，空白組灌胃生理鹽水（質(zhì)量濃度9 g/L）[23]；持續(xù)干預(yù)4 周，每周測(cè)量血壓并記錄。第56天對(duì)小鼠進(jìn)行末次血壓測(cè)量后禁食不禁水12 h。采用眼眶取血置于離心管中，高速冷凍離心（4 ℃、3 500 r/min、5 min），取上清液于-80 ℃冰箱中保存；解剖后摘取心、肝、腎稱(chēng)質(zhì)量并記錄（以其質(zhì)量表征相應(yīng)的臟器指數(shù)）；心臟和其中的一個(gè)腎臟放入4%多聚甲醛固定液中保存，用于病理學(xué)分析；肝臟均分為3 份后，與另一個(gè)腎臟用液氮暫存后轉(zhuǎn)入-80 ℃冰箱中保存。

1.3.4 生理指標(biāo)測(cè)定

3.貧困人口獲得健康能力低下，直接降低了健康扶貧政策的實(shí)際績(jī)效。單純疾病治療缺乏可持續(xù)效果，貧困者自身不能在扶貧中發(fā)揮有效作用，這也是目前健康扶貧的突出問(wèn)題。阿瑪?shù)賮啞ど浞謴?qiáng)調(diào)了個(gè)人可行能力的重要性，“僅僅關(guān)注人們?nèi)绾螌?shí)現(xiàn)功能性活動(dòng)是不夠的，關(guān)注一個(gè)人是否有能力去實(shí)現(xiàn)功能性活動(dòng)也是同等重要的”。［12］世界衛(wèi)生組織《阿拉木圖宣言》也提出了初級(jí)衛(wèi)生保健九個(gè)部分內(nèi)容，健康教育，食品供給及適當(dāng)?shù)臓I(yíng)養(yǎng)，安全飲用水，基本衛(wèi)生設(shè)施，婦幼保健，免疫接種、地方性疾病預(yù)防，普通疾病和受傷的治療，基本藥物供給等，這些政策體現(xiàn)了以提升貧困者健康可行能力為基礎(chǔ)的整體性政策建構(gòu)。

1.3.4.1 NO、ET-1、Ang II、腎素和ALD水平的測(cè)定

采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（e n z y m e l i n k e d immunosorbent assay，ELISA）測(cè)定血清中NO、ET-1、Ang II、腎素和ALD水平，以上實(shí)驗(yàn)均嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.3.4.2 炎癥標(biāo)志物和氧化應(yīng)激標(biāo)志物水平的測(cè)定

采用ELISA法測(cè)定血清中IL-6和TNF-α的質(zhì)量濃度，采用生化法檢測(cè)小鼠腎臟和肝臟組織勻漿中SOD、GSH-Px和MDA水平，操作步驟均嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.3.5 腎臟和心臟組織切片病理學(xué)分析

采用蘇木精-伊紅（hematoxylin-eosin，HE）染色法分別對(duì)心臟和腎臟組織進(jìn)行染色，并在光學(xué)顯微鏡下觀察其結(jié)構(gòu)，從而對(duì)其病理學(xué)變化進(jìn)行評(píng)價(jià)。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

采用SPSS 26.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間顯著性差異采用單因素方差分析（ANOVA），P＜0.05表示具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。利用Origin 2021軟件作圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 RRP對(duì)高血壓小鼠血壓和臟器指數(shù)的影響

2.1.1 RRP對(duì)高血壓小鼠血壓的影響

圖1 RRP對(duì)小鼠血壓的影響Fig.1 Effect of RRP on systolic blood pressure in mice

2.1.2 RRP對(duì)高血壓小鼠臟器指數(shù)的影響

心臟質(zhì)量增加與高血壓引起的心肌肥大有關(guān)[24]，腎臟質(zhì)量減輕與腎臟損傷和血壓升高密切相關(guān)[25]。如表1所示，與空白組相比，模型組心臟指數(shù)上升51.8%（P＜0.05），腎臟指數(shù)降低32.4%（P＜0.05）。與模型組相比，陽(yáng)性組、RRP低劑量組、RRP高劑量組心臟指數(shù)分別降低30.5%、17.9%、24.8%（P＜0.05），腎臟指數(shù)分別上升25.0%、10.3%、18.9%（P＜0.05）。說(shuō)明陽(yáng)性藥物及卡托普利低、高劑量RRP均能顯著改善高血壓對(duì)心臟和腎臟帶來(lái)的不良影響，改善效果依次為陽(yáng)性藥物＞高劑量RRP組＞低劑量RRP。

表1 RRP對(duì)小鼠臟器指數(shù)的影響Table 1 Effect of RRP on organ indexes of mice

2.2 RRP對(duì)高血壓小鼠血清NO、ET-1、Ang II、腎素和ALD水平的影響

NO的缺乏和ET-1水平的增加會(huì)導(dǎo)致血壓升高[26-27]。如表2所示，與空白組相比，模型組NO濃度降低53.0%，ET-1質(zhì)量濃度上升51.7%（P＜0.05）。與模型組相比，陽(yáng)性組、RRP低劑量組、RRP高劑量組NO濃度分別上升90.7%、47.0%、63.4%（P＜0.05），ET-1質(zhì)量濃度分別降低25.2%、7.0%、15.9%（P＜0.05）。說(shuō)明陽(yáng)性藥物和低、高劑量RRP均能顯著改善NO和ET-1水平，改善效果依次為陽(yáng)性組＞RRP高劑量組＞RRP低劑量組，這為RRP能改善血管收縮和內(nèi)皮功能障礙提供了理論依據(jù)。

表2 RRP對(duì)高血壓小鼠血清中NO、ET-1、Ang II、腎素和ALD水平的影響Table 2 Effect of RRP on serum NO, ET-1, Ang II, renin and ALD levels

Ang II、腎素和ALD是腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)（renin angiotensin aldosterone system，RAAS）的組成成分，在高血壓患者中通常表現(xiàn)為Ang II、腎素和ALD水平升高[28]。由表2可知，與空白組相比，模型組Ang II質(zhì)量濃度升高63.2%（P＜0.05），腎素質(zhì)量濃度升高56.6%（P＜0.05），ALD質(zhì)量濃度升高74.5%（P＜0.05）。與模型組相比，陽(yáng)性組Ang II、腎素和ALD質(zhì)量濃度分別下降26.5%、29.86%、34.3%（P＜0.05）；RRP低劑量組上述指標(biāo)分別下降6.5%、5.9%、9.7%（P＜0.05）；RRP高劑量組分別下降14.8%、13.3%、16.2%（P＜0.05）。說(shuō)明陽(yáng)性藥物和低、高劑量RRP均能顯著改善Ang II、腎素和ALD水平，改善效果依次為陽(yáng)性藥物＞高劑量組RRP＞低劑量RRP。

2.3 RRP對(duì)高血壓小鼠血清炎癥標(biāo)志物IL-6和TNF-α質(zhì)量濃度的影響

如圖2所示，與空白組相比，模型組IL-6質(zhì)量濃度升高55.0%，TNF-α質(zhì)量濃度升高157.2%（P＜0.05）。與模型組相比，陽(yáng)性組、RRP低劑量組、RRP高劑量組IL-6質(zhì)量濃度分別降低22.3%、7.4%、13.3%，TNF-α質(zhì)量濃度分別降低43.5%、15.8%、24.3%（P＜0.05）。說(shuō)明陽(yáng)性藥物及低、高劑量RRP均能顯著緩解高血壓小鼠炎癥，緩解效果依次為陽(yáng)性藥物＞高劑量組RRP＞低劑量RRP。

圖2 RRP對(duì)血清炎癥標(biāo)志物的影響Fig.2 Effect of RRP on inflammatory markers in serum

2.4 RRP對(duì)高血壓小鼠肝臟和腎臟氧化應(yīng)激標(biāo)志物的影響

如圖3 所示，與空白組相比，模型組腎臟組織中SOD、GSH-P x 活力分別降低71.3%、28.9%（P＜0.05），MDA水平上升112.5%（P＜0.05）；肝臟組織中SOD、GSH-Px活力分別降低65.1%、29.9%（P＜0.05），MDA水平上升117.0%（P＜0.05）。與模型組相比，陽(yáng)性組腎臟組織中SOD、GSH-Px活力分別升高161.0%、30.2%（P＜0.05），MDA水平降低28.2%（P＜0.05）；肝臟組織中SOD、GSH-Px活力分別升高142.0%、32.4%（P＜0.05），MDA水平降低43.3%（P＜0.05）。與模型組相比，RRP低劑量組腎臟組織中SOD、GSH-Px活力分別升高10.2%、14.7%，MDA水平降低13.7%（P＜0.05）；肝臟組織中SOD、GSH-Px活力分別升高64.9%、8.4%（P＜0.05），MDA水平降低9.6%（P＜0.05）。與模型組相比，RRP高劑量組腎臟組織中SOD、GSH-Px活力分別升高33.5%、19.4%，MDA水平降低18.9%（P＜0.05）；肝臟組織中SOD、GSH-Px活力分別升高113%、18.4%（P＜0.05），MDA水平降低31.0%（P＜0.05）。說(shuō)明陽(yáng)性藥物及低、高劑量RRP均可顯著改善腎臟和肝臟中的脂質(zhì)過(guò)氧化，減少氧化應(yīng)激，改善效果依次為陽(yáng)性藥物＞高劑量RRP＞低劑量RRP。

圖3 RRP對(duì)小鼠氧化應(yīng)激標(biāo)志物的影響Fig.3 Effect of RRP on biomarkers of oxidative stress in mice

2.5 腎臟和心臟組織切片病理學(xué)分析

2.5.1 腎臟組織病理學(xué)分析

由圖4可見(jiàn)，空白組腎小球、腎小管組織結(jié)構(gòu)正常，形態(tài)結(jié)構(gòu)完整，未見(jiàn)明顯病理?yè)p傷變化。模型組腎小管、腎小球囊壁的基膜增厚，腎臟組織壞死，出現(xiàn)藍(lán)染礦化灶和腎間質(zhì)纖維細(xì)胞增生，伴有炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。經(jīng)陽(yáng)性藥物和RRP干預(yù)后病理癥狀明顯減輕，表現(xiàn)為陽(yáng)性組僅少量腎小管上皮細(xì)胞見(jiàn)輕微腫脹，腎小管內(nèi)可見(jiàn)有絲網(wǎng)狀蛋白沉積；RRP高劑量組腎小球結(jié)構(gòu)正常，腎小管上皮細(xì)胞腫脹，腎小管內(nèi)可見(jiàn)少量蛋白管型；RRP低劑量組可見(jiàn)纖維細(xì)胞增生，腎小管內(nèi)可見(jiàn)均勻分布的蛋白管型、上皮細(xì)胞核空泡狀。說(shuō)明RRP治療能顯著改善高血壓小鼠腎臟組織病理學(xué)表現(xiàn)、減少蛋白沉積。

圖4 L-NAME誘導(dǎo)的高血壓小鼠腎臟組織切片（×400）Fig.4 Renal tissue sections of mice with L-NAME-induced hypertension (× 400)

2.5.2 心臟組織病理學(xué)分析

由圖5可知，空白組心肌細(xì)胞排列整齊、結(jié)構(gòu)完整，未見(jiàn)有明顯病理?yè)p傷改變。模型組心肌細(xì)胞排列紊亂，肌細(xì)胞梭形改變，心肌細(xì)胞腫大，組織內(nèi)黑色素沉積。陽(yáng)性組心臟細(xì)胞排列整齊，橫紋清晰可見(jiàn)，損傷不明顯。RRP高劑量組心肌細(xì)胞排列整齊，心肌組織內(nèi)有較大空泡。RRP低劑量組局部心肌細(xì)胞纖細(xì)、排列緊密，染色效果較周?chē)募〖?xì)胞淺。說(shuō)明RRP治療能改善高血壓小鼠心臟組織病理癥狀、緩解心肌細(xì)胞腫大。

圖5 L-NAME誘導(dǎo)的高血壓小鼠心臟組織切片（×400）Fig.5 Heart tissue sections of mice with L-NAME-induced hypertension (× 400)

3 討 論

血壓升高是導(dǎo)致高血壓患者死亡率上升的重要因素，它會(huì)造成機(jī)體一系列靶器官受損，如心臟肥大、腎臟疾病和動(dòng)脈粥樣硬化[29]等。改善高血壓最直接的辦法是降低血壓，從而減少心腦血管疾病的發(fā)生，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明RRP對(duì)高血壓小鼠血壓可起到顯著的改善作用。

NO是一種有效的血管擴(kuò)張劑[30]，能介導(dǎo)血管舒張的最小氣態(tài)胞間信號(hào)分子，可維持血管內(nèi)的正常張力[31]。NO缺乏會(huì)導(dǎo)致全身血管收縮和血壓升高；ET-1是人體作用最持久、最強(qiáng)的血管收縮肽和細(xì)胞增殖的驅(qū)動(dòng)因子，會(huì)引起血管壁增生和狹窄，導(dǎo)致血管平滑肌肥大和增生[32]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與模型組相比，RRP處理能顯著提升NO濃度，顯著降低ET-1質(zhì)量濃度，說(shuō)明RRP處理能改善高血壓小鼠的內(nèi)皮功能障礙。

RAAS的過(guò)度激活是導(dǎo)致血壓升高的重要原因之一[33]，在調(diào)節(jié)血壓和血管功能中至關(guān)重要，也是探究高血壓降壓機(jī)制和開(kāi)發(fā)降血壓藥物的關(guān)鍵靶點(diǎn)。腎素裂解血管緊張素原的N端形成Ang I，Ang I在內(nèi)皮細(xì)胞中血管緊張素轉(zhuǎn)換酶（angiotensin converting enzyme，ACE）的作用下轉(zhuǎn)化為Ang II；Ang II是RAAS的主要效應(yīng)物，它能收縮血管引發(fā)高血壓、激活結(jié)締組織生長(zhǎng)因子和刺激腎上腺ALD的分泌。血清中Ang II水平降低代表著血管收縮劑活性下降，從而導(dǎo)致ALD分泌減少、血壓降低[34]。而ALD水平過(guò)高會(huì)導(dǎo)致內(nèi)皮功能障礙，它與血管平滑肌的增殖、血管外基質(zhì)沉積、纖維細(xì)胞活化有關(guān)[35]?？偟貋?lái)說(shuō)，抑制Ang II、腎素和ALD的產(chǎn)生能避免RAAS的過(guò)度激活，從而降低血壓和保護(hù)心血管器官[36]。本研究結(jié)果顯示，與模型組相比，高、低劑量RRP能顯著降低Ang II、腎素和ALD質(zhì)量濃度。從腎臟和心臟的組織切片可看出，高劑量RRP可改善腎臟組織纖維細(xì)胞增生和蛋白沉積，緩解心肌細(xì)胞腫大等病理癥狀，這可能與RRP降低了Ang II、ALD和ET-1水平相關(guān)。降血壓效果由高到低分別為陽(yáng)性藥物＞高劑量RRP＞低劑量RRP，說(shuō)明RRP能抑制L-NAME引起的RAAS過(guò)度激活，一定程度上緩解高血壓導(dǎo)致的膠原沉積和纖維化。RRP對(duì)NO和ET-1水平的改善程度明顯優(yōu)于RASS，由此可知，RRP主要通過(guò)提高NO水平、改善內(nèi)皮功能障礙來(lái)降低L-NAME誘導(dǎo)的血壓升高；此外，RRP能抑制RAAS過(guò)度激活，減少靶器官損傷。

高血壓常伴有低程度的炎性反應(yīng)，血液的炎癥反應(yīng)會(huì)增加誘發(fā)高血壓的可能性[37]。IL-6和TNF-α是尤為關(guān)鍵的兩種炎癥因子，過(guò)量表達(dá)會(huì)增加血液中的阻力，使血壓升高。IL-6是具有多種作用的細(xì)胞因子，它可以降低內(nèi)皮細(xì)胞中前列環(huán)素的含量，提高Ca2＋的滲入和濃度，同時(shí)也會(huì)引起動(dòng)脈學(xué)管收縮和血壓的上升[38]。TNF-α是造成人體炎癥的最主要因子，其主要作用是促進(jìn)IL-6的產(chǎn)生，從而促進(jìn)血小板源生長(zhǎng)因子的分泌、細(xì)胞的纖維化和血管平滑肌細(xì)胞的增殖，造成血管壁直徑減小、血管阻力增大，最終導(dǎo)致血壓上升[39]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，高、低劑量RRP均可顯著降低高血壓小鼠IL-6和TNF-α水平（P＜0.05），減輕高血壓小鼠機(jī)體炎癥。此外，IL-6和TNF-α水平的升高會(huì)增加活性氧（reactive oxygen species，ROS）水平，而ROS過(guò)量產(chǎn)生引起的氧化應(yīng)激在高血壓的發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮關(guān)鍵作用，氧化應(yīng)激或受損的內(nèi)皮細(xì)胞會(huì)激活免疫系統(tǒng)的促炎狀態(tài)，而炎癥會(huì)導(dǎo)致內(nèi)皮功能障礙[40]。本研究結(jié)果顯示，高、低劑量RRP均能顯著改善高血壓小鼠腎臟和肝臟中SOD、MDA、GSH-Px水平（P＜0.05），表明RRP能減輕高血壓小鼠氧化應(yīng)激反應(yīng)。

綜上，RRP能降低高血壓小鼠血壓，提高NO含量，降低ET-1、AngII、腎素和ALD質(zhì)量濃度，這與王著等[12]對(duì)石榴多酚的降血壓作用研究結(jié)果一致，且對(duì)比得出RRP對(duì)NO水平的改善效果突出；同時(shí)，RRP能減輕伴隨血壓升高出現(xiàn)的炎癥和氧化應(yīng)激，保護(hù)高血壓小鼠心臟和腎臟，緩解其臟器損傷。本研究結(jié)果表明，RRP具有降血壓效果，這主要與RRP能夠提高高血壓小鼠NO水平、改善內(nèi)皮細(xì)胞功能、抑制RAAS過(guò)度激活有關(guān)，RRP降血壓作用的確切單體成分以及具體作用通路有待進(jìn)一步研究。