微柱凝膠技術(shù)在新生兒溶血病患兒輸血前的檢驗(yàn)價(jià)值

王梅娟

（遼寧省北票市中心醫(yī)院臨床輸血科，遼寧 北票 122100）

新生兒溶血?。╤emolytic disease of newborn，HDN）指的是因母子血型不合，母親體內(nèi)產(chǎn)生了與胎兒血型抗原不相匹配的抗體，此種血型抗體進(jìn)入胎兒以后，可引發(fā)同族免疫性溶血，常見新生兒溶血病情況有ABO血型系統(tǒng)溶血以及Rh血型系統(tǒng)溶血兩種情況[1]。溶血病新生兒的主要臨床癥狀是手足徐動(dòng)、貧血、黃疸等，若患兒未及時(shí)接受治療，可對(duì)運(yùn)動(dòng)發(fā)育和智力發(fā)育造成影響，嚴(yán)重時(shí)還可危及生命安全。對(duì)于新生兒溶血病的治療，主要原則是預(yù)防心力衰竭和膽紅素腦病，糾正貧血，降低血清膽紅素。此外，臨床還應(yīng)積極進(jìn)行診斷，加強(qiáng)對(duì)于危險(xiǎn)孕產(chǎn)婦的管理，以提高新生兒生命質(zhì)量。目前我國(guó)對(duì)于新生兒輸血尚缺乏詳細(xì)的策略，部分臨床醫(yī)師對(duì)于新生兒溶血病實(shí)施輸血時(shí)，同類型輸血和符合血型的輸血檢測(cè)是常見的輸血原則。根據(jù)國(guó)際規(guī)定，新生兒輸血時(shí)需全面、充分考慮是否存在溶血病，提前篩查血清內(nèi)是否有母體抗體A或者是抗體B，主要的篩查方式為交叉配血。因而保證科學(xué)的輸血前檢驗(yàn)，尤其是選擇更為合理、準(zhǔn)確的交叉配血，可充分保證輸血的安全性。新生兒溶血病患兒輸血前的檢驗(yàn)方式中，微柱凝膠法（MGT）與微孔板凝聚胺法（MPT）是目前國(guó)內(nèi)外常用的方式，為進(jìn)一步探討微柱凝膠技術(shù)對(duì)于新生兒溶血病患兒輸血前的檢驗(yàn)價(jià)值，本文特以我院收治的47例溶血病新生兒進(jìn)行研究，報(bào)道如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 選擇我院兒科2018年2月至2020年2月收治的47例新生兒溶血病患兒作為研究對(duì)象，均給予輸血治療，并接受MPT和MGT檢驗(yàn)。本研究獲得本院醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①診斷符合新生兒溶血病，需給予輸血治療。②患兒家長(zhǎng)簽署知情同意書。③患兒無(wú)藥物過敏情況。④無(wú)其他血液系統(tǒng)疾病。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①存在意識(shí)障礙、精神病家族史患兒。②傳染性疾病患兒。③先天性心臟病。④免疫及循環(huán)系統(tǒng)疾病。⑤合并心肝腎等重要器官疾病。

1.2 方法 47例患兒均采取MGT和試管法（血型鑒定的金標(biāo)準(zhǔn)）來鑒定血型，并均采用MGT、MPT進(jìn)行交叉配血。所用儀器包括FYQ型免疫微柱孵育器、TD-A血清學(xué)離心機(jī)以及試劑。

血型鑒定：①M(fèi)GT。對(duì)血標(biāo)本離心處理后分別取6支凝膠微管，每個(gè)滴入紅細(xì)胞懸液（5%），于其中2支中滴血血清和已知的A、B型紅細(xì)胞懸液（5%），以3 000 r/min進(jìn)行離心處理，時(shí)間為5 min，觀察結(jié)果。②試管法。以《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作流程》對(duì)血標(biāo)本實(shí)施離心處理后對(duì)反定結(jié)果進(jìn)行觀察，實(shí)施陰性排除冷凝集[2]。

交叉配血：①M(fèi)GT。對(duì)全部血清進(jìn)行離心處理，取2支凝膠微管并標(biāo)記為主側(cè)和次側(cè)，制作紅細(xì)胞懸液（0.5%～1.0%），將50 μL輸血標(biāo)本和50 μL的供血標(biāo)本紅細(xì)胞懸液分別加入主側(cè)和次側(cè)凝膠微管中，主次側(cè)加入患者及獻(xiàn)血者血漿各50 μL，置于37 ℃中進(jìn)行孵育，時(shí)間為15 min，以3 000 r/min離心處理，時(shí)間為5 min，觀察結(jié)果[3]。②MPT。對(duì)全部血清進(jìn)行離心處理，取2支凝膠微管并標(biāo)記為主側(cè)和次側(cè)，制作紅細(xì)胞懸液（3%～5%），在主側(cè)凝膠微管中加入1滴供血標(biāo)本和1滴輸血標(biāo)本，后分別加入0.6 mL的低離子介質(zhì)溶液，均勻混合后放置1 min，繼續(xù)加入2滴凝聚胺溶液后放置15 s，以3 000 r/min離心處理，時(shí)間為1 min，在管底中取0.1 mL的凝集液體，加入2滴重懸液后觀察結(jié)果[4]。

1.3 觀察指標(biāo) 比較MGT、試管法對(duì)血型正反定型的不符合率；比較MGT、MPT的交叉配血不合格率。

1.4 判定標(biāo)準(zhǔn) MGT交叉配血的判定標(biāo)準(zhǔn)為：在凝膠管底部有紅細(xì)胞沉積情況，上清液呈正常血清顏色視為匹配；在凝膠管的上面或者中間存在紅細(xì)胞凝集情況，上清液呈紅色即有溶血現(xiàn)象，視為不匹配。

MPT交叉配血的判定標(biāo)準(zhǔn)為：凝聚胺引發(fā)的非免疫性凝集在1 min內(nèi)散開，視為匹配；若凝集不散，則為存在異體抗體引發(fā)的免疫性凝集，視為不匹配。試驗(yàn)結(jié)果均在3 min內(nèi)進(jìn)行判斷[5]。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 將SPSS 22.0作為本研究的數(shù)據(jù)處理軟件，計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，兩組間比較用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般資料 在4 7 例患兒中，男患兒2 6 例（55.32%）；日齡為1～22 d，平均日齡（11.62±2.58）d；體質(zhì)量為2.5～4.4 kg，平均（3.45±0.34）kg。

2.2 MGT、試管法對(duì)血型正反定型結(jié)果分析 經(jīng)檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，MGT、試管法對(duì)血型正反定型的不符合率均較低[1（2.13%）vs.2（4.26%），P=0.557]，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.3 MGT、MPT的交叉配血結(jié)果分析 交叉配血結(jié)果比較發(fā)現(xiàn)，MGT的交叉配血不合格率低于MPT[1（2.13%）vs.7（14.89%），P=0.027]，存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

3 討論

新生兒溶血病發(fā)病原因主要是紅細(xì)胞抗原與血型抗體結(jié)合而引起的免疫性溶血反應(yīng)，孕母體內(nèi)產(chǎn)生了針對(duì)父源的血型特異性抗體，這種抗體能夠通過胎盤進(jìn)入胎兒體內(nèi)與紅細(xì)胞結(jié)合，通過免疫細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用導(dǎo)致胎兒紅細(xì)胞溶血[5]。IgG型抗體是唯一能夠通過胎盤屏障的抗體，臨床檢測(cè)確診需要測(cè)定致敏紅細(xì)胞和血型抗體，常見的有抗體釋放試驗(yàn)、游離抗體試驗(yàn)、抗人球蛋白試驗(yàn)[6]。新生兒溶血病患兒主要表現(xiàn)為水腫、貧血、黃疸等，若未及時(shí)接受干預(yù)，疾病發(fā)展可造成繼發(fā)膽紅素腦病，威脅生命[7-8]。因此，對(duì)患兒實(shí)施早期評(píng)估和治療，對(duì)于改善預(yù)后具有積極意義。對(duì)于新生兒溶血病患兒的治療，主要方式為輸血治療，因而需加強(qiáng)臨床檢驗(yàn)工作，及時(shí)發(fā)現(xiàn)不合理情況[9]。實(shí)施輸血前，應(yīng)對(duì)患兒體內(nèi)是否存在母體抗體進(jìn)行檢驗(yàn)，以免發(fā)生溶血反應(yīng)，保證輸血安全[10]。

MGT和MPT均是檢驗(yàn)新生兒溶血病患兒輸血前的檢驗(yàn)方式，本研究結(jié)果顯示，MGT、試管法正反定型的不符合率分別是2.13%、4.26%，結(jié)果無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。MGT、MPT的交叉配血的不合格率分別是2.13%、14.89%，差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，結(jié)果表明MGT的檢驗(yàn)價(jià)值優(yōu)于MPT。MPT是一種利用凝聚胺的正電荷，中和紅細(xì)胞表面帶有的負(fù)電荷，促使紅細(xì)胞發(fā)生非特異性的凝聚反應(yīng)，最后加入懸浮液，中和凝聚胺的作用，使聚集的紅細(xì)胞散開，試驗(yàn)結(jié)果則為隱形；但如果紅細(xì)胞被相應(yīng)抗體致敏，則發(fā)生抗原抗體反應(yīng)，就會(huì)凝集不散，則試驗(yàn)結(jié)果為陽(yáng)性，配血結(jié)果不相合[11-12]。MPT用于不完全抗體的測(cè)定與鑒定以及交叉配血等血清學(xué)試驗(yàn)已在國(guó)內(nèi)迅速推廣使用。該方法簡(jiǎn)便、時(shí)間短、結(jié)果明顯但漏診率和假陽(yáng)性率較高[13]。MGT在一些先進(jìn)國(guó)家已成為常規(guī)的紅細(xì)胞血型血清學(xué)檢測(cè)技術(shù)，具有較強(qiáng)的特異性和較高的靈敏度，主要應(yīng)用在輸血前的篩查[14]。MGT指的是將與血清學(xué)標(biāo)準(zhǔn)相符合的稀釋液制成凝膠取微管柱進(jìn)行灌注，凝膠顆粒分子可對(duì)紅細(xì)胞進(jìn)行過濾，同時(shí)還可保留凝集紅細(xì)胞，以確定反應(yīng)結(jié)果[15-16]。MGT的檢驗(yàn)結(jié)果可通過肉眼進(jìn)行觀察，無(wú)須借助顯微鏡，且檢驗(yàn)的準(zhǔn)確性較高，基本不存在假陽(yáng)性率[7]。但是MGT的不足之處就是檢驗(yàn)的時(shí)間較長(zhǎng)，并不能夠滿足急診配血的要求，無(wú)法分辨出紅細(xì)胞中的不完全抗體，但是相較于MPT而言，MGT的時(shí)間更短、操作更為簡(jiǎn)便，可省略紅細(xì)胞洗滌步驟，因此價(jià)值更優(yōu)[18-19]。既往研究發(fā)現(xiàn)，新生兒輸血可考慮以下幾點(diǎn)：①在新生兒需要接受輸血治療前，若患兒同時(shí)存在黃疸、貧血等情況，需進(jìn)一步實(shí)施輸血前檢驗(yàn)，明確是否存在ABO溶血癥，同時(shí)也可明確患兒血型，保證相容性輸血[20]。②對(duì)于無(wú)條件篩查確診ABO溶血病的情況下，需詳細(xì)考慮ABO血型抗原表達(dá)情況[21]。③若診斷新生兒溶血病結(jié)果為陽(yáng)性，但是交叉配血中為陰性，可能與溶血癥檢測(cè)中檢測(cè)酶處理細(xì)胞過程中提高了抗體的吸收能力有關(guān)，從而增加了陽(yáng)性可能性，同時(shí)也可能是因?yàn)榻徊媾溲捎玫难簶颖緛碜杂诔赡耆?，兩種血液的細(xì)胞方面存在一定的差異，可導(dǎo)致配血結(jié)果與溶血性抗原抗體反應(yīng)結(jié)果不相符[22-23]。

綜上所述，無(wú)論是輸血室人員或是新生兒科室臨床醫(yī)師在對(duì)患兒進(jìn)行輸血時(shí)，應(yīng)充分、全面考慮患兒的免疫血液學(xué)特點(diǎn)和生理特點(diǎn)，完善輸血前檢驗(yàn)工作，充分保證輸血的安全性。通過實(shí)施輸血前檢驗(yàn)，可避免盲目按照ABO同型血進(jìn)行輸血，進(jìn)而有效提高了新生兒溶血病患兒的輸血安全。研究發(fā)現(xiàn)，在新生兒溶血病患兒輸血前實(shí)施微柱凝膠技術(shù)進(jìn)行檢驗(yàn)，可準(zhǔn)確地判斷患兒血型，有效發(fā)現(xiàn)交叉配血不合格情況，從而保證輸血安全性，可在臨床進(jìn)行推廣。