班 學(xué),馬翔宇,張飛鵬,張王斌
(塔里木大學(xué) 農(nóng)學(xué)院,新疆 阿拉爾 843300)
庫(kù)爾勒香梨(Pyrussinkiangensisyu)是新疆農(nóng)業(yè)發(fā)展的支柱產(chǎn)業(yè)之一,在農(nóng)業(yè)結(jié)構(gòu)調(diào)整、農(nóng)民增收脫貧中發(fā)揮著重要作用[1]。香梨是典型的蟲媒授粉作物,蜜蜂授粉是促進(jìn)香梨增產(chǎn)提質(zhì)的重要措施[2]。梨火疫病在香梨整個(gè)生育期均會(huì)不同程度地發(fā)生,若防治不當(dāng),將對(duì)香梨的產(chǎn)量和質(zhì)量產(chǎn)生極大的影響[3]?;瘜W(xué)農(nóng)藥是目前防治梨火疫病的主要措施,但果樹花粉和花蜜很容易因受到農(nóng)藥污染而導(dǎo)致蜜蜂中毒死亡,繼而影響香梨授粉的順利進(jìn)行[4]。因此,如何處理好梨火疫病農(nóng)藥防治與蜜蜂授粉之間的矛盾是新疆香梨生產(chǎn)中亟須解決的問題。
近年來(lái),世界各地的蜜蜂蜂群普遍出現(xiàn)了嚴(yán)重的勢(shì)量衰竭失調(diào)現(xiàn)象,科學(xué)家們稱之為蜂群崩潰綜合征(colony collapse disorder, CCD),但關(guān)于引起蜂群勢(shì)量衰退的主要原因,學(xué)界仍有爭(zhēng)議[5]。賈變桃等[6]認(rèn)為,引起蜂群衰退的因素很多,其中,農(nóng)藥的大量使用是一個(gè)重要誘因。趙帥等[7]研究了300種農(nóng)藥制劑,發(fā)現(xiàn)其中74%以上的殺蟲劑對(duì)蜜蜂具有高毒或劇毒毒性,但大多數(shù)殺菌劑對(duì)蜜蜂相對(duì)安全。近年的研究發(fā)現(xiàn),部分殺菌劑與其他農(nóng)藥具有協(xié)同增效的作用,但對(duì)蜜蜂的毒性加劇,破壞蜜蜂種群的多樣性及其為蜜源植物授粉的可持續(xù)性[8]。Fisher等[9]研究發(fā)現(xiàn),吡唑醚菌酯與啶酰菌胺的復(fù)配劑可引起意大利蜜蜂蛋白質(zhì)缺乏,營(yíng)養(yǎng)不良,導(dǎo)致蜂群中的工蜂壽命縮短,工蜂數(shù)量下降15%,嚴(yán)重影響蜂群積極越冬。此外,大多數(shù)內(nèi)吸性殺菌劑被植物吸收后還可引起花粉和花蜜的污染,極易對(duì)成蜂和幼蟲的生理生化和行為產(chǎn)生影響,如引起成年工蜂分工不明顯、巢房清潔行為減少、運(yùn)動(dòng)功能紊亂等,干擾蜜蜂神經(jīng)系統(tǒng),影響蜜蜂正常生長(zhǎng)發(fā)育和繁殖,損害其記憶、學(xué)習(xí)能力,以及采集歸巢的能力等[10-12]。王康等[13]研究證明,多菌靈農(nóng)藥脅迫會(huì)導(dǎo)致蜜蜂保幼激素滴度上升,蛻皮激素滴度顯著下降,直接干預(yù)幼蟲的穩(wěn)定發(fā)育,造成蜜蜂化蛹延遲。這會(huì)對(duì)蜜蜂的健康發(fā)育和蜂群的穩(wěn)定和維持構(gòu)成潛在威脅。
目前,國(guó)內(nèi)關(guān)于農(nóng)藥對(duì)意大利蜜蜂(Apismelliferaligustica)急性毒性的研究雖然較多,但絕大多數(shù)研究?jī)H評(píng)價(jià)了新煙堿類、植物源類和昆蟲生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑類殺蟲劑對(duì)意大利蜜蜂的生態(tài)風(fēng)險(xiǎn),忽視了殺菌劑對(duì)蜜蜂生理和行為的影響[14-15]。除殺蟲劑外,殺菌劑也是蜜蜂最常接觸的一類化學(xué)物質(zhì)。殺菌劑常噴施在對(duì)采集蜂有吸引力的蜜源作物上,極易造成采集蜂的農(nóng)藥中毒死亡[16],因此應(yīng)注重開展殺菌劑對(duì)蜜蜂毒性、作用機(jī)制等方面的研究。這樣不僅有利于對(duì)授粉蜜蜂種質(zhì)資源多樣性的保護(hù),而且對(duì)新疆地區(qū)養(yǎng)蜂業(yè)、授粉業(yè)和香梨產(chǎn)業(yè)的健康可持續(xù)協(xié)調(diào)發(fā)展具有積極的推進(jìn)作用。為此,本研究根據(jù)殺菌劑的作用機(jī)制和化學(xué)結(jié)構(gòu),選擇梨火疫病防治中常用的7種殺菌劑作為供試藥劑,以意大利蜜蜂為受試對(duì)象,參照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 31270.10—2014《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評(píng)價(jià)試驗(yàn)準(zhǔn)則 第10部分:蜜蜂急性毒性試驗(yàn)》[17]在室內(nèi)采用連續(xù)攝入法和接觸法測(cè)定其對(duì)蜜蜂24、48 h的急性經(jīng)口和接觸毒性,旨在明確7種殺菌劑對(duì)意大利蜜蜂的急性毒性,并通過危害熵值(HQ)初步評(píng)價(jià)其對(duì)意大利蜜蜂的生態(tài)風(fēng)險(xiǎn),以期通過合理選擇梨火疫病防治用藥來(lái)減輕或避免意大利蜜蜂在授粉期間受到的毒性影響,同時(shí)為開展殺菌劑對(duì)意大利蜜蜂的安全性評(píng)價(jià)提供科學(xué)依據(jù)。
1.1.1 供試蜜蜂
試驗(yàn)用的意大利蜜蜂從新疆維吾爾自治區(qū)阿拉爾市一師九團(tuán)羅斌養(yǎng)蜂場(chǎng)購(gòu)入,并由塔里木大學(xué)農(nóng)學(xué)院繁殖和馴養(yǎng)。選擇同一蜂群健康狀況一致的成年工蜂開展試驗(yàn)。用于急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)的蜜蜂需要在黑暗條件下提前饑餓2 h。
1.1.2 供試藥劑
45%(質(zhì)量分?jǐn)?shù),下同)中生菌素原藥(簡(jiǎn)記為藥劑A),陜西麥克羅生物科技有限公司;85%春雷霉素原藥(簡(jiǎn)記為藥劑B),陜西麥克羅生物科技有限公司;3%中生菌素可溶液劑(簡(jiǎn)記為藥劑C),福建凱立生物制品有限公司;4%春雷霉素水劑(簡(jiǎn)記為藥劑D),山西新源華康化工股份有限公司;3%噻霉酮微乳劑(簡(jiǎn)記為藥劑E),江蘇輝豐生物農(nóng)業(yè)股份有限公司;47%春雷·王銅可濕性粉劑(簡(jiǎn)記為藥劑F),一帆生物科技集團(tuán)有限公司;0.3%四霉素水劑(簡(jiǎn)記為藥劑G),遼寧微科生物工程股份有限公司。
1.1.3 主要儀器設(shè)備
試驗(yàn)蜂籠為17 cm×5.5 cm×12 cm的長(zhǎng)方體透明塑料盒,頂部設(shè)有飼喂口和通風(fēng)口,不重復(fù)使用。昆蟲室,面積10.8 m2。
大型儀器設(shè)備包括:AL204型電子分析天平,梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司;MGC-450HP型人工氣候培養(yǎng)箱,上海一恒科學(xué)儀器有限公司;晶弘BCD-220EGK型冰箱,合肥晶弘電器有限公司。
參照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 31270.10—2014,采用連續(xù)攝入法和接觸法2種方法,分別測(cè)定7種供試殺菌劑對(duì)意大利蜜蜂的急性經(jīng)口和接觸毒性。試驗(yàn)溫度為(26±2)℃,相對(duì)濕度60%~70%,于黑暗條件下進(jìn)行。
1.2.1 急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)
根據(jù)預(yù)試驗(yàn)初步確定意大利蜜蜂的最高全存活濃度和最低全致死濃度,在此范圍內(nèi),用50%蔗糖溶液以一定的級(jí)差(通常級(jí)差小于2.2)將供試藥劑配制成5個(gè)正式試驗(yàn)濃度。將供試蜜蜂引入試驗(yàn)蜂籠中,將提前配好的蜜藥裝入10 mL小燒杯中,杯內(nèi)浸漬0.5 g脫脂棉,杯口向下固定置于試驗(yàn)籠紗網(wǎng)上供蜜蜂取食,及時(shí)添加藥蜜。每組重復(fù)3次,每組重復(fù)10只蜜蜂,并設(shè)置對(duì)照組。觀察并記錄蜜蜂24、48 h的中毒癥狀和死亡情況。
1.2.2 急性接觸毒性試驗(yàn)
根據(jù)預(yù)試驗(yàn)初步確定意大利蜜蜂的最高全存活濃度和最低全致死濃度,在此范圍內(nèi),用蒸餾水以一定的級(jí)差(通常級(jí)差小于2.2)將供試藥劑配制成5個(gè)正式試驗(yàn)濃度。將意大利蜜蜂低溫麻醉后,用移液器取1 μL不同濃度的供試藥劑點(diǎn)滴在供試蜜蜂的前胸背板處,待蜂身晾干后移入試驗(yàn)籠,以50%蔗糖溶液不限量飼喂。每組重復(fù)3次,每組重復(fù)10只蜜蜂,并設(shè)置對(duì)照組。觀察并記錄蜜蜂24、48 h的中毒癥狀和死亡情況。
1.2.3 急性毒性試驗(yàn)質(zhì)量要求
(1)低溫麻醉后,蜜蜂無(wú)死亡。(2)以96%樂果(dimethoate)原藥作為參照藥劑進(jìn)行可信度試驗(yàn),其單只蜜蜂在24 h的接觸半致死劑量(LD50)應(yīng)在0.10~0.30 μg(以有效成分計(jì),下同),且對(duì)照組蜜蜂死亡率不可超過10%。
1.2.4 毒性判定標(biāo)準(zhǔn)
參照GB/T 31270.10—2014,基于致死中濃度(LC50)或單只蜜蜂的LD50劃分4個(gè)等級(jí):(1)劇毒,LC50≤0.5 mg·L-1或LD50≤0.001 μg;(2)高毒,0.5 mg·L-1
基于聯(lián)合國(guó)糧食及農(nóng)業(yè)組織(FAO)、國(guó)際經(jīng)濟(jì)及合作組織(OECD)、歐洲和地中海植物保護(hù)組織(EPPO)采用的HQ(即農(nóng)藥田間施用量與測(cè)定的LD50之比)[18-20]來(lái)評(píng)價(jià)供試農(nóng)藥對(duì)意大利蜜蜂的生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)。根據(jù)HQ的數(shù)值劃分3個(gè)等級(jí):HQ≤50,對(duì)蜜蜂低風(fēng)險(xiǎn);50
采用Excel 2013軟件記錄、整理數(shù)據(jù)。用SPSS 23.0軟件計(jì)算相應(yīng)的LC50、LD50、95%置信限,擬合線性回歸方程,開展方差分析(ANOVA),對(duì)有顯著(P<0.05)差異的,采用LSD(最小顯著差數(shù))法進(jìn)行多重比較。使用Origin 2021軟件制圖。
經(jīng)供試殺菌劑暴露處理后,意大利蜜蜂均表現(xiàn)出中毒癥狀(圖1)。接觸四霉素的蜜蜂出現(xiàn)雙翅張開、行動(dòng)不穩(wěn)、喙伸展和側(cè)躺死亡等中毒癥狀,接觸噻霉酮的蜜蜂大多出現(xiàn)拒食、體重減輕、腹部膨大和體色發(fā)黑等中毒癥狀,接觸春雷霉素和中生菌素的蜜蜂出現(xiàn)喙伸展、行動(dòng)遲緩和身體側(cè)躺抽搐等中毒癥狀??傮w來(lái)看,供試殺菌劑引起的意大利蜜蜂中毒癥狀基本相似,主要癥狀表現(xiàn)為喙伸展、雙翅張開、腹部膨大、體縮、體色發(fā)黑和散發(fā)出惡臭味等;但個(gè)別藥劑也有不同,如接觸春雷·王銅的蜜蜂除有上述中毒癥狀,還有明顯的吐液現(xiàn)象。
圖1 意大利蜜蜂中毒的主要癥狀表現(xiàn)Fig.1 Main symptoms of Italian honeybees (Apis mellifera ligustica) with pesticide poisoning
隨著藥劑濃度(用量)的不斷增加,各供試藥劑對(duì)意大利蜜蜂的致死率均明顯升高(表1),且供試殺菌劑對(duì)蜜蜂的急性毒性均隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而增大,48 h平均死亡率全部高于24 h平均死亡率,表明殺菌劑對(duì)蜜蜂的急性毒性具有時(shí)間增長(zhǎng)效應(yīng)。
表1 殺菌劑對(duì)意大利蜜蜂的急性毒性試驗(yàn)結(jié)果
2.3.1 急性經(jīng)口毒性
采用連續(xù)攝入法檢測(cè)7種殺菌劑對(duì)蜜蜂的急性經(jīng)口毒性(表2)。根據(jù)其48 h的LC50判斷,供試藥劑對(duì)蜜蜂的急性經(jīng)口毒性由大到小依次為0.3%四霉素水劑>3%噻霉酮微乳劑>47%春雷·王銅可濕性粉劑>3%中生菌素可溶液劑>45%中生菌素原藥>4%春雷霉素水劑>85%春雷霉素原藥。參照GB/T 31270.10—2014,判定45%中生菌素原藥、85%春雷霉素原藥和4%春雷霉素水劑對(duì)意大利蜜蜂的急性經(jīng)口毒性為低毒,3%中生菌素可溶液劑、3%噻霉酮微乳劑、47%春雷·王銅可濕性粉劑和0.3%四霉素水劑為中毒。
表2 殺菌劑對(duì)意大利蜜蜂的急性經(jīng)口毒性
2.3.2 急性接觸毒性
通過接觸法測(cè)定7種殺菌劑對(duì)蜜蜂的急性接觸毒性(表3)。根據(jù)其48 h的LD50判定,供試藥劑對(duì)蜜蜂的急性接觸毒性由大到小依次為0.3%四霉素水劑>3%噻霉酮微乳劑>3%中生菌素可溶液劑>4%春雷霉素水劑>45%中生菌素原藥>47%春雷·王銅可濕性粉劑>85%春雷霉素原藥。參照GB/T 31270.10—2014,7種殺菌劑中除0.3%四霉素水劑被判定為中毒,其余供試藥劑對(duì)意大利蜜蜂的急性接觸毒性均為低毒。
表3 殺菌劑對(duì)意大利蜜蜂的急性接觸毒性
通過急性接觸毒性試驗(yàn)的48 h LD50來(lái)計(jì)算HQ(表4)。4%春雷霉素水劑、3%中生菌素可溶液劑和47%春雷王銅可濕性粉劑對(duì)意大利蜜蜂的HQ均小于50,說明其在田間按推薦用量施用對(duì)蜜蜂的風(fēng)險(xiǎn)較低;3%噻霉酮微乳劑和0.3%四霉素水劑對(duì)意大利蜜蜂的HQ在50~2 500,說明其在田間按推薦用量施用對(duì)蜜蜂的風(fēng)險(xiǎn)中等??偟膩?lái)看,0.3%四霉素水劑在田間施用對(duì)意大利蜜蜂的生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)最高。
表4 殺菌劑對(duì)意大利蜜蜂的接觸危害熵值(HQ)
本研究中,參照藥劑96%樂果原藥對(duì)意大利蜜蜂的急性接觸試驗(yàn)24 h LD50值為0.243 μg,符合GB/T 31270.10—2014的相應(yīng)要求,說明受試意大利蜜蜂的敏感性和質(zhì)量符合要求,既可用于急性經(jīng)口毒性試驗(yàn),也可用于急性接觸毒性試驗(yàn),試驗(yàn)方法和體系有效可靠。
本研究分別采用連續(xù)攝入法和接觸法對(duì)意大利蜜蜂進(jìn)行急性毒性測(cè)定,從結(jié)果看,45%中生菌素原藥、85%春雷霉素原藥和4%春雷霉素水劑對(duì)意大利蜜蜂的急性經(jīng)口毒性和接觸毒性均為低毒;0.3%四霉素水劑對(duì)意大利蜜蜂的急性經(jīng)口和接觸毒性均為中毒;3%中生菌素可溶液劑、3%噻霉酮微乳劑和47%春雷·王銅可濕性粉劑對(duì)意大利蜜蜂的急性經(jīng)口毒性為中毒,但急性接觸毒性為低毒??梢?供試殺菌劑對(duì)意大利蜜蜂的急性毒性不盡相同,大部分殺菌劑的急性經(jīng)口毒性大于急性接觸毒性,這可能是由于在不同的試驗(yàn)中進(jìn)入蜜蜂體內(nèi)的農(nóng)藥暴露劑量不同,因而造成其毒性存在明顯差異。
中生菌素為N-糖苷類堿性水溶性殺菌劑,主要抑制蛋白質(zhì)肽鍵的合成,降低細(xì)胞酶活性,具有抑制和觸殺作用。中生菌素原藥對(duì)意大利蜜蜂的急性經(jīng)口毒性和接觸毒性均為低毒,但本研究選用的中生菌素制劑對(duì)意大利蜜蜂的急性經(jīng)口毒性為中毒,接觸毒性為低毒。趙帥等[7]研究發(fā)現(xiàn),同樣有效成分的不同劑型對(duì)蜜蜂的急性毒性結(jié)果存在很大差異,其原因可能是制劑里含有的助劑、溶劑等改變了農(nóng)藥的附著性和滲透性,從而導(dǎo)致蜜蜂受到的農(nóng)藥暴露劑量不同。春雷霉素為氨基糖苷類殺菌劑,主要抑制氨酰tRNA與信使RNA(mRNA)核糖體蛋白復(fù)合物的結(jié)合,從而阻礙蛋白質(zhì)翻譯的啟動(dòng),導(dǎo)致細(xì)胞顆粒化,具有內(nèi)吸和滲透作用。本試驗(yàn)選用的85%春雷霉素制劑對(duì)意大利蜜蜂的急性經(jīng)口毒性和接觸毒性均為低毒,與王宏棟等[15]對(duì)地熊蜂(Bombusterrestris)接觸毒性的測(cè)定結(jié)果一致,但對(duì)比得到的LD50值,仍存在些許差異。這既可能是因?yàn)橐獯罄鄯浜偷匦芊涞拿舾行源嬖诓町?也可能是由不同廠商的生產(chǎn)工藝差異所造成。噻霉酮為有機(jī)雜環(huán)類噻唑啉酮?dú)⒕鷦?主要干擾細(xì)胞呼吸和腺苷三磷酸(adenosine triphosphate,ATP)的合成,抑制細(xì)胞呼吸和能量合成,干擾菌體正常新陳代謝,具有觸殺和滲透作用。本試驗(yàn)中噻霉酮制劑對(duì)意大利蜜蜂的急性經(jīng)口毒性為中毒,但急性接觸毒性為低毒。由此可知,即使是同種制劑,但受特定的作用方式和作用機(jī)制影響,蜜蜂最終面對(duì)的農(nóng)藥暴露劑量也不相同,測(cè)定的急性經(jīng)口毒性和接觸毒性結(jié)果也會(huì)有一定的差異。春雷·王銅是春雷霉素和氫氧化銅混配的復(fù)合型殺菌劑,主要干擾氨基酸代謝的酯酶系統(tǒng),妨礙病菌能量合成,以抑制作用為主,并兼具內(nèi)吸性。本試驗(yàn)中春雷·王銅制劑對(duì)意大利蜜蜂的急性經(jīng)口毒性為中毒,但急性接觸毒性為低毒。這與韓文素等[21]的研究結(jié)論基本相似,單劑與不同作用機(jī)制的藥劑復(fù)配會(huì)增強(qiáng)其對(duì)意大利蜜蜂的急性毒性。四霉素是四烯大環(huán)內(nèi)酯類殺菌劑,屬于麥角甾醇生物合成抑制劑(ergosterol biosynthesis inhibitors, E-BIs),主要抑制麥角甾醇生物合成C-14脫甲基化酶形成抗生素甾醇復(fù)合物,破壞孢子形態(tài)和細(xì)胞膜結(jié)構(gòu),并抑制細(xì)胞色素P450解毒活性,從而提高殺菌劑的毒性,具有抑制和滲透作用。本試驗(yàn)中四霉素制劑對(duì)意大利蜜蜂的急性經(jīng)口毒性和接觸毒性均為中毒,這可能是由于四霉素長(zhǎng)時(shí)間在蜜蜂體內(nèi)積累,導(dǎo)致其甾醇合成持續(xù)受到抑制,藥劑毒性隨之增強(qiáng)。張勇等[22]研究表明,氟環(huán)唑?qū)σ獯罄鄯涞募毙越?jīng)口毒性和接觸毒性均為高毒。賈變桃等[6]研究表明,抑霉唑和丙環(huán)唑?qū)σ獯罄鄯涞募毙越?jīng)口毒性為中毒,咪鮮胺和丙環(huán)唑的急性接觸毒性為中毒,氟硅唑?yàn)楦叨?。廖秀麗等[23]研究發(fā)現(xiàn),代森錳鋅對(duì)小峰熊蜂(Bombushypocrita)和紅光熊蜂(Bombusignitus)的急性經(jīng)口毒性和接觸毒性均為高毒,且毒性高于氟蟲脲和毒死蜱??梢?殺菌劑對(duì)蜜蜂的毒性風(fēng)險(xiǎn)并不一定小于殺蟲劑,應(yīng)當(dāng)慎重使用。
本研究采用HQ來(lái)評(píng)價(jià)供試藥劑對(duì)蜜蜂的生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)。4%春雷霉素水劑、3%中生菌素可溶液劑和47%春雷·王銅可濕性粉劑對(duì)意大利蜜蜂表現(xiàn)出低風(fēng)險(xiǎn),3%噻霉酮微乳劑和0.3%四霉素水劑表現(xiàn)為中風(fēng)險(xiǎn)。整體來(lái)看,大多數(shù)供試殺菌劑對(duì)意大利蜜蜂表現(xiàn)出低毒低風(fēng)險(xiǎn)和中毒中風(fēng)險(xiǎn)的趨勢(shì),這與張艷峰等[24]的研究結(jié)論基本一致。從HQ的計(jì)算方式也可以看出,該值一方面取決于田間施用量,另一方面取決于農(nóng)藥對(duì)意大利蜜蜂的急性接觸LD50值,因此急性毒性是評(píng)價(jià)農(nóng)藥對(duì)蜜蜂生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)的決定性因素之一[25]。在急性毒性數(shù)據(jù)的基礎(chǔ)上引入藥劑的田間施用量,可以更準(zhǔn)確、更直觀地反映出供試藥劑對(duì)蜜蜂的生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)。這也說明,嚴(yán)格把控農(nóng)藥的田間使用量,是降低農(nóng)藥對(duì)蜜蜂毒性風(fēng)險(xiǎn)的有效措施。因此,庫(kù)爾勒香梨生產(chǎn)中可優(yōu)先選擇中生菌素、春雷霉素、春雷·王銅這3種低風(fēng)險(xiǎn)農(nóng)藥來(lái)防治梨火疫病。當(dāng)施用噻霉酮、四霉素時(shí),應(yīng)采取相關(guān)措施降低其對(duì)蜜蜂的毒性風(fēng)險(xiǎn)。
在實(shí)際的田間應(yīng)用中,各種劑型農(nóng)藥在田間的性質(zhì)、實(shí)際用量和田間用藥操作行為,以及環(huán)境因素,都會(huì)影響農(nóng)藥對(duì)蜜蜂的毒性;因此,要科學(xué)評(píng)價(jià)農(nóng)藥對(duì)蜜蜂的毒性,還必須考慮農(nóng)藥殘留對(duì)田間蜜蜂的影響,除了強(qiáng)調(diào)蜜蜂的急性死亡終點(diǎn)指標(biāo),還需關(guān)注由慢性中毒引起的蜜蜂生理和生態(tài)行為變化。今后,應(yīng)在現(xiàn)有急性毒性的研究基礎(chǔ)上,適時(shí)開展農(nóng)藥對(duì)蜜蜂的慢性毒性研究。這對(duì)于全面準(zhǔn)確地評(píng)價(jià)農(nóng)藥對(duì)蜜蜂的毒性風(fēng)險(xiǎn)具有積極的現(xiàn)實(shí)意義。