核酸適配體在腎癌中的應(yīng)用*

吳彩虹 韓冬梅 金 昊

（天津市腫瘤醫(yī)院空港醫(yī)院腫瘤精準(zhǔn)檢測(cè)與轉(zhuǎn)化中心，天津 300308）

在世界各國(guó)，癌癥是死亡的主要原因，也是延長(zhǎng)預(yù)期壽命的一個(gè)重要障礙。隨著全球人口老齡化，以及癌癥主要危險(xiǎn)因素的流行和分布的變化，全球癌癥發(fā)病率和死亡率的負(fù)擔(dān)正在迅速增長(zhǎng)。腎癌占全球新發(fā)腫瘤病例的2.2%，占死亡病例的1.8%［1］，其全球發(fā)病率正逐步上升，其發(fā)病率僅次于前列腺癌及膀胱癌，占泌尿系統(tǒng)腫瘤第三位。腎細(xì)胞癌（renal cell carcinoma，RCC）是腎臟腫瘤的主要類(lèi)型，約占腎臟腫瘤的90%～95%［2］。RCC具有較高的局部浸潤(rùn)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的頻率，約33%～50%的RCC患者在發(fā)現(xiàn)時(shí)已發(fā)生轉(zhuǎn)移［3］，從而加重了RCC患者的死亡率。RCC的主要治療手段是手術(shù)切除，對(duì)放化療不敏感，放射治療主要用于緩解腫瘤轉(zhuǎn)移或抑制局部腫瘤生長(zhǎng)。盡管在腎癌的診斷和治療方面取得了諸多進(jìn)展，但絕大多數(shù)轉(zhuǎn)移性腎癌患者仍然無(wú)法治愈。RCC的早期診斷能夠大大提高RCC有效治療的機(jī)會(huì)，對(duì)于腎癌的有效治療具有十分重要的意義。由于核酸適配體能特異性地識(shí)別腎癌細(xì)胞，因此在腎癌診療中的應(yīng)用前景非常廣闊。

1 核酸適配體

核酸適配體是一種具有獨(dú)特三維構(gòu)象的短的單鏈DNA或RNA寡核苷酸，通常由20～60個(gè)核苷酸組成。核酸適配體是通過(guò)指數(shù)富集的配體系統(tǒng)進(jìn)化技術(shù)（systematic evolution of ligands by exponential enrichment，SELEX），從核酸分子文庫(kù)中得到的寡核苷酸片段，能夠選擇性地與小分子配體或高親和力的蛋白質(zhì)靶標(biāo)結(jié)合，對(duì)靶分子或細(xì)胞具有較高的親和力和特異性，是一類(lèi)重要的分子靶向配體。SELEX過(guò)程最早于1990年實(shí)現(xiàn)，由Ellington等［4］和Tuerk等［5］分別在兩篇報(bào)道中提出，他們利用SELEX技術(shù)篩選分離出3種與噬菌體T4 DNA及有機(jī)染料特異性結(jié)合的RNA適配體。SELEX技術(shù)是從大量隨機(jī)寡核苷酸庫(kù)中選擇目標(biāo)結(jié)合序列的迭代過(guò)程。即通過(guò)隨機(jī)核酸文庫(kù)與目標(biāo)分子/靶分子孵育，以促進(jìn)目標(biāo)與顯示目標(biāo)親和力的寡核苷酸之間形成絡(luò)合物，然后將目標(biāo)結(jié)合的序列從未結(jié)合的文庫(kù)池中分離出來(lái)，進(jìn)行PCR擴(kuò)增；新的核酸序列（ssDNA/RNA）文庫(kù)富含目標(biāo)結(jié)合寡核苷酸，然后與對(duì)照靶標(biāo)孵育，將未與對(duì)照靶標(biāo)結(jié)合的序列進(jìn)行PCR擴(kuò)增參與新的選擇循環(huán)；繼續(xù)選擇，直到篩選文庫(kù)被充分富集，最后將經(jīng)過(guò)8～20輪篩選得到的文庫(kù)進(jìn)行測(cè)序鑒定（圖1）。自核酸適配體的概念誕生以來(lái)，經(jīng)過(guò)優(yōu)化篩選和技術(shù)改良，目標(biāo)范圍不斷擴(kuò)大，篩選效率和速度得到了很大提升。

Fig.1 Schematic presentation of the aptamer selection圖1 核酸適配體的篩選進(jìn)程模式圖

由于核酸適配體與靶標(biāo)的識(shí)別模式和抗原抗體的識(shí)別模式十分類(lèi)似，因此也被稱為“化學(xué)抗體”。核酸適配體憑借自身的種種優(yōu)勢(shì)，包括高度特異性、無(wú)免疫原性、體積相對(duì)較小、可以很容易地通過(guò)化學(xué)修飾來(lái)穩(wěn)定等，已迅速應(yīng)用于臨床研究中，后來(lái)又不斷提高其診斷和治療能力。迄今為止，適配體已被用于治療黃斑變性、腫瘤、糖尿病、炎癥和凝血等。2004年，美國(guó)食品和藥物管理局（FDA）批準(zhǔn)了NeXstar開(kāi)發(fā)的首個(gè)治療性核酸適配體藥物——Macugen，用于治療新血管性老年性黃斑變性（AMD）。后來(lái)已有多個(gè)核酸適配體成功進(jìn)入了各種治療適應(yīng)癥的臨床試驗(yàn)［6］。

2 核酸適配體在腎癌中的應(yīng)用

近年來(lái)，核酸適配體在癌癥診療領(lǐng)域的應(yīng)用研究受到越來(lái)越多的關(guān)注，現(xiàn)已篩選得到一些靶向腎癌的核酸適配體，然后利用核酸適配體與納米材料偶聯(lián)制備成復(fù)合物，進(jìn)行腎癌影像學(xué)診斷及靶向藥物遞送的應(yīng)用研究。本文主要對(duì)篩選得到的適配體（表1）及其在腎癌中的應(yīng)用研究進(jìn)展進(jìn)行綜述，希望可以為腎癌的診斷和治療提供新的視角和思路。

Table 1 Aptamers used in renal cell carcinoma表1 RCC相關(guān)核酸適配體

2.1 靶向蛋白質(zhì)的核酸適配體

2.1.1 核仁素（nuleolin）

核仁素（nuleolin，NCL）是核仁中含量最多的非核糖體磷酸化蛋白之一，參與包括細(xì)胞黏附、分裂、遷移以及調(diào)控rRNA轉(zhuǎn)錄、細(xì)胞生長(zhǎng)等多種生物進(jìn)程。與正常細(xì)胞或癌前細(xì)胞相比，癌細(xì)胞的表達(dá)水平升高［7］。AS1411是第一個(gè)被廣泛用于靶向NCL進(jìn)入癌細(xì)胞的DNA核酸適配體。它是采用非SELEX的方法篩選得到，是一種富含鳥(niǎo)嘌呤堿基的寡核苷酸GROs，被發(fā)現(xiàn)對(duì)多種癌細(xì)胞有抗增殖活性［8-9］。AS1411具有從細(xì)胞表面穿梭到大多數(shù)腫瘤細(xì)胞細(xì)胞核的特性，已被證明可選擇性地結(jié)合多種腫瘤細(xì)胞系高表達(dá)的NCL并誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞死亡，包括腎癌、乳腺癌和其他腺癌細(xì)胞系［10-11］。在2003年開(kāi)始的一項(xiàng)針對(duì)實(shí)體瘤患者的I期臨床試驗(yàn)中，AS1411在轉(zhuǎn)移性RCC患者中顯示出抗腫瘤活性，在12例轉(zhuǎn)移性RCC患者中產(chǎn)生了一個(gè)完全緩解（CR）和一個(gè)部分緩解（PR）［12-14］。但在RCC的II期臨床試驗(yàn)中［15］，只有一名患者（既往使用≥1種酪氨酸激酶抑制劑治療失敗的轉(zhuǎn)移性腎透明細(xì)胞癌（clear cell renal cell carcinomas，ccRCC）患者達(dá)到了PR（總緩解率（overall response rate，ORR）2.9%），治療效果顯著，靶腫瘤病變的總直徑減少了84%。且該患者在研究治療結(jié)束后24個(gè)月仍處于PR期，沒(méi)有疾病進(jìn)展的證據(jù)，也不需要額外的治療［15］?；诤怂徇m配體具有修飾和結(jié)合多種分子的能力，可以偶聯(lián)不同的納米載體，比如脂質(zhì)體、膠束、聚合物納米粒子和量子點(diǎn)等，AS1411核酸適配體已經(jīng)通過(guò)負(fù)載納米顆粒靶向腎癌細(xì)胞應(yīng)用于腎癌影像學(xué)診斷或作為靶向配體遞送抗癌藥物研究。

Li等［16］研制了一種 T1-T2雙模造影劑 Fe3O4@mSiO2/PDDA/BSA-Gd2O3納米復(fù)合物，其中BSAGd2O3NPs和Fe3O4NPs分別作為T(mén)1和T2核磁共振成像造影劑（MRI CAs），通過(guò)與AS1411適配體進(jìn)一步偶聯(lián)后，能在體外靶向腎癌細(xì)胞和小鼠腎臟增強(qiáng)核磁共振成像（MRI）。MRI作為一種無(wú)創(chuàng)影像學(xué)診斷技術(shù)，具有高三維空間分辨率和深度穿透圖像的能力。通過(guò)MRI CAs，正常和病理部位之間的影像對(duì)比可以在皮下增強(qiáng)。應(yīng)用比較多的造影劑包括氧化鐵納米顆粒、釓螯合物等。相比傳統(tǒng)的多肽或蛋白質(zhì)配體，核酸適配體具有較強(qiáng)的靶親和力、化學(xué)通用性和較低的成本效益，可以與金屬離子、放射性元素等偶聯(lián)發(fā)揮功能，這使它們成為分子成像的獨(dú)特選擇，通過(guò)將核酸適配體探針修飾耦合到適合各種成像技術(shù)的造影劑，可以提供優(yōu)越的體內(nèi)性能，并顯著降低生產(chǎn)成本。由于含釓（Gd）造影劑可能導(dǎo)致一種罕見(jiàn)但極其嚴(yán)重的疾病，即腎源性纖維化。而錳元素（Mn），作為生理代謝的必要元素，既可以有效調(diào)節(jié)機(jī)體生物系統(tǒng)的穩(wěn)態(tài)，又可以在T1加權(quán)成像中跟Gd產(chǎn)生類(lèi)似的對(duì)比度增強(qiáng)，使其在MRI中具有潛在的應(yīng)用價(jià)值。但有研究表明，錳元素的自由形式可能導(dǎo)致明顯的神經(jīng)毒性［17］。因此，現(xiàn)在通過(guò)制備螯合錳、雜化錳劑、大分子錳劑和納米顆粒錳掩蓋劑來(lái)解決游離錳的問(wèn)題。Li等［18］提出了一種用聚乙二醇（PEG）作為溶劑和表面活性劑的一鍋法制備親水性氧化錳納米載體（MnO NPs）的方法，通過(guò)引入氨基修飾的AS1411適配體作為靶向分子，與PEG-MnO NPs共價(jià)偶聯(lián)探索制備納米探針AS1411-PEG-MnO NPs，發(fā)現(xiàn)其在體外人腎癌細(xì)胞系786-O MRI上可以清晰地顯示人腎癌細(xì)胞。與PEG-MnO NPs相比，AS1411-PEG-MnONPs在786-O中的滯留時(shí)間更長(zhǎng)。表明PEG-MnO NPs在MRI掃描中作為一種替代造影劑的潛在價(jià)值。二硫化鉬量子點(diǎn)（MoS2QDs）作為一種很有前途的量子點(diǎn)納米材料的候選材料，具有高穩(wěn)定性，低毒，以及獨(dú)特的光學(xué)和電子性質(zhì)，在催化熒光成像和熒光傳感及生物成像等方面具有潛在的應(yīng)用前景。Zheng等［19］提出了一種新的錳摻雜二硫化鉬量子點(diǎn)，即Mn-MoS2QDs，通過(guò)“自下而上”的一步水熱技術(shù)用于RCC的MRI成像和細(xì)胞熒光標(biāo)記。利用AS1411適配體提高M(jìn)oS2QDs對(duì)RCC的靶向能力，與核酸適配體AS1411結(jié)合后，制備成AS1411-Mn-MoS2QDs，能特異性熒光標(biāo)記腎癌細(xì)胞，并在小鼠的腫瘤區(qū)表現(xiàn)出特異性MRI信號(hào)增強(qiáng)。此外，通過(guò)血液學(xué)和組織學(xué)分析，核酸適配體AS1411修飾的Mn-MoS2QDs對(duì)小鼠的毒性較低?？傊珹S1411-Mn-MoS2QDs的開(kāi)發(fā)為腎透明細(xì)胞癌的精確診斷提供了一種新型的熒光/MRI雙模態(tài)成像探針。

在AS1411作為靶向配體傳遞藥物方面，Li等［20］報(bào)道，利用AS1411適配體作為特異性靶向分子，以氧化石墨烯納米板（GO NPs）作為造影劑和藥物納米載體，阿霉素（DOX）作為抗癌藥物，用攜帶氧化釓的牛血清白蛋白氧化釓納米載體（BSA-Gd2O3NPs）制備 GO/BSA-Gd2O3/AS1411-DOX治療納米復(fù)合物，用于腎癌細(xì)胞體外和體內(nèi)的特異性給藥和MRI。該治療性納米復(fù)合物不僅提供了更強(qiáng)的MRI對(duì)比增強(qiáng)，而且在AS1411核酸適配體的幫助下，抑制了786-O的生長(zhǎng)，同時(shí)使正常細(xì)胞免受傷害，顯示了特異性的給藥能力。此外，利用GO/BSAGd2O3/AS1411-DOX納米復(fù)合物對(duì)786-O在體外和體內(nèi)MRI成像的特異性識(shí)別能力進(jìn)一步證明了它們作為腫瘤靶向MRI的治療性納米探針的潛力。將來(lái)可以增加組織活體實(shí)驗(yàn)檢測(cè)在活體中的治療效果，從而推動(dòng)適配體偶聯(lián)復(fù)合物在腎癌診療中的臨床應(yīng)用。

2.1.2 程序性死亡蛋白配體1（PD-L1）

程序性死亡蛋白1（programmed death-1，PD-1）與程序性死亡蛋白配體1（programmed death-ligand 1，PD-L1）是一對(duì)負(fù)性免疫共刺激分子，靶向免疫檢查點(diǎn)免疫療法已經(jīng)徹底改變了某些癌癥的治療，因此確定免疫檢查點(diǎn)在特定癌癥中的表達(dá)狀態(tài)有助于癌癥診療的臨床決策。大多數(shù)RCC表達(dá)PD-L1，多個(gè)涉及ccRCC患者和非透明細(xì)胞腎細(xì)胞癌患者的系列研究表明，腫瘤細(xì)胞膜中PD-L1的表達(dá)與腫瘤患者更高的Fuhrman分級(jí)或TNM分期等侵襲性特征相關(guān)［21-22］。目前，酪氨酸酶抑制劑（TKI）聯(lián)合免疫檢查點(diǎn)抑制劑（ICI）或者雙ICI聯(lián)合治療方案已經(jīng)成為晚期腎癌的標(biāo)準(zhǔn)治療方案?；诤怂徇m配體的高親和力和特異性，專(zhuān)門(mén)識(shí)別PD-L1的核酸適配體分子探針開(kāi)始快速發(fā)展。Malicki等［23］通過(guò)SELEX程序鑒定了一個(gè)針對(duì)PD-L1的單鏈核酸適配體探針2c2s，它是一個(gè)特異性識(shí)別人類(lèi)PD-L1細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域的DNA核酸適配體，能夠在體外和體內(nèi)特異性檢測(cè)腫瘤細(xì)胞上表達(dá)的PD-L1。以PD-L1生理表達(dá)為特征的腎腺癌細(xì)胞系786-O評(píng)估2c2s在細(xì)胞表面檢測(cè)PD-L1的能力，786-O細(xì)胞被均勻標(biāo)記，尤其通過(guò)腹腔注射Cy5.5-2c2s給藥小鼠（在腎包膜下接種了PD-L1陽(yáng)性的ccRCC細(xì)胞），用全身成像追蹤標(biāo)記物發(fā)現(xiàn)，腫瘤位置與PD-L1特異性適配體的信號(hào)之間存在很強(qiáng)的相關(guān)性，表明2c2s適配體能夠檢測(cè)體內(nèi)表達(dá)PD-L1的腫瘤。這更加驗(yàn)證了，適配體與抗體相比，其小尺寸和易標(biāo)記的多功能性為成像響應(yīng)靈活提供了廣泛的機(jī)會(huì)。后續(xù)可以進(jìn)一步優(yōu)化評(píng)估長(zhǎng)期效果，并測(cè)試適配體的安全性，有望實(shí)現(xiàn)適配體探針的體內(nèi)腫瘤靶向成像，能夠?qū)⑵鋺?yīng)用到腫瘤的非侵入性診斷中。

除了NCL、PD-L1，在ccRCC中，von Hippel-Lindau（VHL）基因經(jīng)常失活，導(dǎo)致缺氧誘導(dǎo)因子1α（HIF-1α）的積累和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）的過(guò)度表達(dá)，而且研究表明，VHL基因失活和VEGF高表達(dá)與腫瘤侵襲性和低生存率相關(guān)［24］。因此，VEGF成為高度血管表型的ccRCC抗血管生成治療的有力靶點(diǎn)。其中一種策略就是通過(guò)單克隆抗體或者核酸適配體直接靶向VEGF進(jìn)行抗血管生成治療。利用臨床批準(zhǔn)的VEGF靶向藥物制定的治療方案為ccRCC的治療取得了顯著成果，但患者最終產(chǎn)生的耐藥性影響了長(zhǎng)期的效果。有研究表明，將適配體與抗體偶聯(lián)可以增強(qiáng)藥物的腫瘤浸潤(rùn)性，具有良好的抗腫瘤能力［25］。目前，通過(guò)SELEX技術(shù)已經(jīng)鑒定出多種抗VEGF的核酸適配體［26］，將適配體與抗體偶聯(lián)的思路應(yīng)用于腎癌的相關(guān)研究中，有望輔助腎癌治療策略的探索。

2.2 靶向腎癌細(xì)胞的核酸適配體

核酸適配體不僅可以使用純化蛋白質(zhì)作為靶點(diǎn)進(jìn)行篩選，還可以通過(guò)細(xì)胞-配體指數(shù)富集系統(tǒng)進(jìn)化（cell-SELEX）的方法在事先不了解靶細(xì)胞分子特征的情況下，生成能夠以其天然構(gòu)象特異性結(jié)合細(xì)胞表面靶分子/生物標(biāo)志物的核酸適配體，尤其對(duì)于目前缺少有效的生物標(biāo)志物及明晰的分子異常機(jī)制的RCC意義非凡［27］，適配體可以有助于獲得RCC的特異分子譜及新型特異分子探針來(lái)促進(jìn)早期診斷和治療。Wang等［28］利用cell-SELEX以ccRCC細(xì)胞系786-O為靶細(xì)胞，胚胎腎細(xì)胞系293T為對(duì)照細(xì)胞，開(kāi)發(fā)了RCC核酸適配體探針W786-1（平衡解離常數(shù)Kd值為（9.4±2.0）nmol/L），結(jié)構(gòu)優(yōu)化產(chǎn)生一個(gè)截短的序列W786-1S，只有48個(gè)核苷酸，與W786-1對(duì)目標(biāo)786-O細(xì)胞的識(shí)別能力相似，并初步確定了W786-1的靶標(biāo)為細(xì)胞表面的膜蛋白，即適配體通過(guò)膜蛋白識(shí)別目標(biāo)786-O細(xì)胞，并在生理溫度下保持良好的結(jié)合親和力和優(yōu)異的選擇性?；谄鋬?yōu)異的靶向性和特異性，W786-1具有作為靶向分子探針用于RCC診斷和治療的巨大潛力。

葉茂等［29］利用已發(fā)表的能夠結(jié)合腫瘤細(xì)胞的核酸適配體，進(jìn)行同源性建模分析，設(shè)計(jì)出全新的核酸序列，將所有篩選獲得的這些序列明確，但功能不明確的核酸序列構(gòu)建成新的文庫(kù)Swan Library，然后在新文庫(kù)中篩選獲得一條與人腎癌細(xì)胞系786-O結(jié)合，不與人腎成纖維細(xì)胞系KFB細(xì)胞結(jié)合的核酸適配體RCC-H1，其特異性和穩(wěn)定性都較強(qiáng)。序列優(yōu)化獲得的RCC-H1b在荷瘤小鼠腫瘤部位富集明顯，對(duì)臨床腎癌組織切片具有良好的識(shí)別檢測(cè)能力，而與腎正常組織基本不結(jié)合。Zhang等［30］從Swan Library中鑒定出對(duì)人RCC細(xì)胞786-O具有高結(jié)合親和力和特異性的核酸適配體SW-4（平衡解離常數(shù)Kd值約為（45.92±5.58）nmol/L），它與人RCC細(xì)胞786-O具有高親和力，但不與上皮細(xì)胞HEK293T或人近端小管上皮細(xì)胞HK-2結(jié)合。序列優(yōu)化的SW-4b具有更好的結(jié)合親和力，且通過(guò)小泡介導(dǎo)的內(nèi)吞作用內(nèi)化到靶細(xì)胞中，使該適配體成為基于適配體的藥物遞送系統(tǒng)開(kāi)發(fā)的理想候選體。體內(nèi)和臨床樣品的熒光成像證實(shí)了SW-4b具有良好的識(shí)別能力。最重要的是，SW-4b對(duì)786-O細(xì)胞表現(xiàn)出顯著的抗增殖活性，其作用是在細(xì)胞周期S期阻止進(jìn)展。將來(lái)可以進(jìn)一步在荷瘤小鼠身上驗(yàn)證該適配體的腫瘤抑制功能，推動(dòng)其成為RCC診斷和靶向治療的新工具。

2.3 靶向腎癌組織的核酸適配體

由于腎癌早期無(wú)特異性體征和癥狀，主要治療手段是手術(shù)切除，對(duì)放化療不敏感，目前RCC的5年生存率總體為74%，局部（III期）患者的5年生存率降至53%，而伴有轉(zhuǎn)移性的腎癌患者5年生存率僅8%［31］，因此腎癌的早期診斷能夠大大提高腎癌患者有效治療的機(jī)會(huì)。胡小曉等［32］利用tissue-SELEX技術(shù)，以臨床腎癌組織為正篩樣本，腎癌癌旁組織為負(fù)篩樣本，篩選獲得一種檢測(cè)人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞的核酸適配體wcq-5，為42個(gè)堿基的短鏈核酸序列，通過(guò)熒光檢測(cè)其與人ccRCC細(xì)胞的結(jié)合親和力較高，解離平衡常數(shù)在納摩爾級(jí)別。此外還可連接放射性物質(zhì)、治療性物質(zhì)、生物素或者酶標(biāo)記基團(tuán)，發(fā)展為檢測(cè)腎癌的新型分子探針，為腎癌的準(zhǔn)確診斷、快速定位、靶向治療和預(yù)后提供有效的工具，推進(jìn)該適配體在腎癌診斷與治療中的應(yīng)用。

3 總結(jié)與展望

核酸適配體憑借自身優(yōu)勢(shì)，被證明是多種分子強(qiáng)有力的靶向載體，已有效應(yīng)用于腫瘤相關(guān)領(lǐng)域，包括腫瘤靶向成像、納米級(jí)機(jī)械集成、親和純化、生物傳感以及診斷治療等［33］，但其開(kāi)發(fā)和臨床轉(zhuǎn)化正處于起步階段，有許多挑戰(zhàn)還待解決。首先，天然核酸在適配體介導(dǎo)的體內(nèi)治療中生物穩(wěn)定性有限，半衰期也較短。再加上適配體固有的小體積，容易被腎臟系統(tǒng)清除，限制了功能的發(fā)揮，這可能也是適配體在腎癌的應(yīng)用研究進(jìn)展較為緩慢的原因之一。雖然可以通過(guò)對(duì)適配體加以化學(xué)修飾來(lái)增加其半衰期或改變其藥代動(dòng)力學(xué)特征，但以往利用聚乙二醇修飾的適配體會(huì)受到體內(nèi)聚乙二醇抗體的干擾，從而抑制適配體結(jié)合影響療效，還有使用硫代磷酸修飾的核苷酸時(shí)，可能存在肝毒性等［34］。其次，可用的適配體數(shù)量仍然非常有限，能夠高效地選擇性能良好的適配體的新策略是未來(lái)亟需的。第三，許多適配體-藥物偶聯(lián)物在臨床研究中還未能發(fā)揮其潛力，在合理設(shè)計(jì)偶聯(lián)物方面需要繼續(xù)優(yōu)化，包括提高針對(duì)既定癌基因的藥物遞送能力和效率等。

綜上所述，目前已經(jīng)篩選得到一些靶向腎癌的核酸適配體，而且在腎癌診療方面也顯現(xiàn)了良好的研究?jī)r(jià)值和臨床應(yīng)用前景。尤其晚期腎癌患者轉(zhuǎn)移是其死亡的主要原因，適配體對(duì)于抵抗癌癥轉(zhuǎn)移的策略具有先天的優(yōu)勢(shì)，它可以通過(guò)與癌細(xì)胞內(nèi)部信號(hào)通路的分子結(jié)合或者與腫瘤微環(huán)境的多種基質(zhì)細(xì)胞直接相互作用來(lái)發(fā)揮其藥理功能［35］。由于細(xì)胞毒性小藥物、TKI或miRNA替代療法等多種抗癌藥物的療效和安全性受到周?chē)】导?xì)胞和組織脫靶效應(yīng)的影響，因此，有選擇地將抗癌藥物輸送到目標(biāo)細(xì)胞，既能減少健康組織中嚴(yán)重的不良反應(yīng)，又能提高治療效果和癌癥患者的生活質(zhì)量。利用核酸適配體在腫瘤細(xì)胞和腫瘤微環(huán)境中較高的組織穿透和細(xì)胞內(nèi)攝取能力，核酸適配體-藥物偶聯(lián)物（ApDC）選擇性地與靶標(biāo)結(jié)合來(lái)推動(dòng)腫瘤特異性藥物更好地發(fā)揮療效。譚蔚泓院士團(tuán)隊(duì)［36］利用全景正電子發(fā)射型計(jì)算機(jī)斷層顯像（TB-PET）連續(xù)獲取的數(shù)據(jù)，建立了接近現(xiàn)實(shí)的核酸適配體藥代動(dòng)力學(xué)PBPK模型，有望用于未來(lái)ApDC治療響應(yīng)的預(yù)測(cè)。隨著更多針對(duì)腎癌的核酸適配體以及適配體偶聯(lián)物的開(kāi)發(fā)及應(yīng)用研究，將大大有助于腎癌相關(guān)發(fā)病機(jī)制的探究，為腎癌的精準(zhǔn)診療提供一種新的策略。