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    紫外檢測(cè)測(cè)定食品中的亞硝酸鹽含量

    2023-10-08 07:45:24次仁卓嘎扎西窮達(dá)朱肖翔拉毛才旦
    現(xiàn)代食品 2023年14期
    關(guān)鍵詞:標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法

    ◎ 次仁卓嘎,央 拉,扎西窮達(dá),朱肖翔,拉毛才旦

    (西藏自治區(qū)食品藥品檢驗(yàn)研究院,西藏 拉薩 850000)

    目前,在我們所食用的多種食物中都含有亞硝酸鹽成分,如果亞硝酸鹽被人們過(guò)量食用,會(huì)出現(xiàn)癌癥、畸形以及其他病變性疾病等風(fēng)險(xiǎn)。相關(guān)調(diào)查研究顯示,如果單次攝入0.3 g的亞硝酸鹽,就會(huì)導(dǎo)致人體中毒,嚴(yán)重者還會(huì)有死亡風(fēng)險(xiǎn)[2]。

    1 不同樣品的常規(guī)前處理方法

    與水樣相比,食品的種類非常多,成分也相對(duì)復(fù)雜。亞硝酸鹽在檢測(cè)的過(guò)程中,首先需要做的是排除其他成分的干擾,如脂肪、蛋白質(zhì)以及色素等,檢測(cè)液只有在無(wú)色澄清的狀態(tài)下才能保證檢測(cè)結(jié)果,才能提高檢測(cè)方法的準(zhǔn)確度。目前,常用的樣品預(yù)處理方法主要有以下幾種。

    1.1 水樣前處理方法

    水樣的前處理方法比較簡(jiǎn)單,取出無(wú)色澄清的水樣,利用酸堿將其調(diào)至中性,最后進(jìn)行檢測(cè)。這樣經(jīng)過(guò)處理的水樣是適合多種檢測(cè)方法的。有研究[3]用氣相色譜法和化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)了地表水(雨水、河水)中的亞硝酸鹽,不僅操作比較簡(jiǎn)單,還能保證檢測(cè)結(jié)果,有很高的準(zhǔn)確性。對(duì)于比較渾濁或者顏色深的水樣來(lái)說(shuō),可以先通過(guò)加入氫氧化鋁懸浮液、活性炭等攪拌后靜置沉淀,接下來(lái)將其過(guò)濾,最后再用酸堿將其調(diào)至中性進(jìn)行檢測(cè)。相關(guān)研究顯示[4],被處理過(guò)的水樣通過(guò)分光光度法和離子色譜法定量檢測(cè),結(jié)果顯示加標(biāo)回收范圍在98.58%~106.49%和101.85%~105.31%。由此可以看出,檢測(cè)準(zhǔn)確度比較高。其他研究學(xué)者[5]利用活性炭處理污水,用電化學(xué)傳感器來(lái)測(cè)定亞硝酸鹽,其檢測(cè)限達(dá)到10.71 μmol/L,此前處理方法能夠?qū)?fù)雜水樣中的亞硝酸鹽含量檢測(cè)出來(lái),但此檢測(cè)方法所需時(shí)間較長(zhǎng)。如果用0.22 μm 或 0.45 μm微孔膜將水中雜質(zhì)過(guò)濾,然后再檢測(cè)亞硝酸鹽含量,結(jié)果顯示檢測(cè)限值達(dá)到0.1 μmol/L。兩者相比較而言,后一種方法即膜過(guò)濾處理方法更有優(yōu)勢(shì),也更適合精密儀器檢測(cè)亞硝酸鹽。其缺點(diǎn)是濾膜比較小,對(duì)樣品處理量要求比較高。

    1.2 固體樣品前處理方法

    1.2.1 對(duì)含有蛋白質(zhì)、脂肪食品樣品的前處理方法

    如果所檢測(cè)樣品中含有蛋白質(zhì)和脂肪,首先需要將其剔除。這類型的固體樣品需要先將其粉碎,然后加入硼砂至飽和狀態(tài),再攪拌加熱15 min將其冷卻沉淀,還需要借助亞鐵氰化鉀和乙酸鋅溶液,將蛋白質(zhì)和脂肪過(guò)濾除去,過(guò)濾后的濾液留著備用。在檢測(cè)過(guò)程中,如果遇到檢測(cè)固體顏色比較深,無(wú)法得到澄清的濾液,這時(shí)還需要利用氫氧化鋁乳液進(jìn)行處理。

    1.2.2 對(duì)不含蛋白質(zhì)、脂肪固體樣品的前處理方法

    不含蛋白質(zhì)、脂肪的固體樣品大多數(shù)都是果蔬類樣品,檢測(cè)的主要目的是將二氧化碳釋放出來(lái),有的樣品還需要進(jìn)行脫色處理。首先將檢測(cè)樣品青菜進(jìn)行烘干和粉碎,然后用 V硝酸∶V高氯酸按5∶1的比例進(jìn)行混合,并將其加熱消化到無(wú)色透明的液體,接下來(lái)需要利用催化光度法對(duì)亞硝酸鹽進(jìn)行檢測(cè)。還可以利用另一種檢測(cè)方法,將蔬菜切碎制成勻漿,然后加沸水將其稀釋加入活性炭脫色、過(guò)濾,提取出清亮、無(wú)色的液體,再利用紫外分光光度法檢測(cè)亞硝酸鹽。另外,可以將蔬菜切片碾碎,對(duì)過(guò)濾后的液體進(jìn)行pH調(diào)整,利用熒光光度法和毛細(xì)管電泳法完成對(duì)亞硝酸鹽的檢測(cè)。雖然此種檢測(cè)方法操作起來(lái)比較方便、簡(jiǎn)單,所用的儀器也不會(huì)很復(fù)雜,但是應(yīng)用范圍很小,有局限性。

    2 檢測(cè)方法

    2.1 樣品前處理

    將待測(cè)食品樣品稱取適量,加入適量的蒸餾水混合均勻。將混合好的樣品加熱至80 ℃,加入適量的硫酸和硫酸亞鐵同時(shí)攪拌,使亞硝酸鹽與硫酸亞鐵反應(yīng)生成氮?dú)猓瑢⑻崛∫弘x心沉淀。將沉淀液過(guò)濾,得到濾液。將濾液分別置于紫外分光光度計(jì)中,測(cè)量其在220 nm波長(zhǎng)處的吸光度。需要對(duì)樣品進(jìn)行凈化處理,以去除可能存在的干擾物質(zhì)??梢圆捎秒x心、過(guò)濾等方法將樣品中的固體顆粒和雜質(zhì)去除,使樣品變得清澈透明。制備一系列不同濃度的亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液,并用紫外光譜儀測(cè)定它們的吸光度。根據(jù)吸光度與濃度的關(guān)系繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,以便后續(xù)測(cè)定時(shí)進(jìn)行定量分析。將處理好的樣品取一定量,用紫外光譜儀測(cè)定其吸光度。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出亞硝酸鹽的濃度。對(duì)測(cè)定結(jié)果進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,計(jì)算出樣品中亞硝酸鹽的含量。如果需要進(jìn)行質(zhì)量控制,可以采取空白對(duì)照、重復(fù)測(cè)定等措施。

    2.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液制備

    準(zhǔn)備精密天平和200 mg的亞硝酸鈉固體。將亞硝酸鈉固體轉(zhuǎn)移到100 mL容量瓶中,加入約50 mL去離子水,用玻璃棒充分?jǐn)嚢枞芙?。用去離子水定容至100 mL,充分搖勻得到200 μg/mL的亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液。將制備好的溶液轉(zhuǎn)移到棕色試管中,并在紫外光下檢測(cè)其吸光度,以確保其濃度符合標(biāo)準(zhǔn)。在實(shí)驗(yàn)中使用該標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行檢測(cè)和校準(zhǔn),以確保準(zhǔn)確測(cè)定食品中的亞硝酸鹽含量。準(zhǔn)備5.0 mg的亞硝酸鈉粉末,稱取并轉(zhuǎn)移到10 mL的容量瓶中。用去離子水稀釋至刻度線,充分混合。將制備好的亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)使用液倒入紫外檢測(cè)器中,進(jìn)行波長(zhǎng)掃描,確定最大吸收波長(zhǎng)。將待測(cè)食品樣品中的亞硝酸鹽提取出來(lái),用亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)使用液進(jìn)行外標(biāo)法測(cè)定。(注:為了防止亞硝酸鈉被溶液氧化,亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)使用液5.0 μg/mL要現(xiàn)用現(xiàn)配。)

    2.3 標(biāo)準(zhǔn)樣品及樣品待測(cè)液制備

    取亞硝酸鈉(NaNO2)粉末,精確稱取一定質(zhì)量的亞硝酸鈉溶于去離子水中,制備成1 000 mg/L的亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液。將標(biāo)準(zhǔn)溶液保存在干燥、避光的容器中,以免受光分解。將待測(cè)食品樣品取樣,根據(jù)樣品的不同特性選擇不同的提取方法。將提取液過(guò)濾或離心后,取一定量的待測(cè)液進(jìn)行測(cè)定。具體各溶液添加量如表1、表2所示。

    表1 亞硝酸鹽實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表

    表2 復(fù)測(cè)亞硝酸鹽實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表

    注意事項(xiàng):①制備標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)液的容器、儀器應(yīng)注意清潔,避免雜質(zhì)的干擾。②制備標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)液的過(guò)程中,應(yīng)嚴(yán)格控制溶液的濃度和體積,確保濃度準(zhǔn)確。③制備的標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)液應(yīng)在制備后盡快使用,避免長(zhǎng)時(shí)間放置導(dǎo)致濃度變化。④在樣品制備和測(cè)定過(guò)程中,應(yīng)注意安全操作,避免接觸亞硝酸鹽對(duì)人體造成危害。

    根據(jù)2次測(cè)定結(jié)果,樣品中亞硝酸鹽的含量分別為80.34 mg/kg和93.31 mg/kg,取平均值為85.33 mg/kg。根據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB 2762—2017《食品中限制使用的添加劑》規(guī)定,食品中亞硝酸鹽的限量標(biāo)準(zhǔn)為150 mg/kg。因此,樣品中亞硝酸鹽含量低于限量標(biāo)準(zhǔn),可以判斷該樣品的亞硝酸鹽含量合格。

    3 結(jié)語(yǔ)

    綜上所述,在以上的檢測(cè)方法中,光度法、色譜法是應(yīng)用范圍最廣泛的檢測(cè)方法,而其他檢測(cè)方法還未能標(biāo)準(zhǔn)化,無(wú)法真正滿足食品中亞硝酸鹽的檢測(cè)需求。另外,采用紫外線分光光度法是可行的,不僅操作簡(jiǎn)單,操作體系也非常穩(wěn)定,比較適合大批量樣品。

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