抗CD74抗體在不同病程的中軸型脊柱關(guān)節(jié)炎患者中的水平變化及與疾病活動度的關(guān)系

樊琳琳,張 貝,張 賀,馬 新,武新峰,王 飛,周麗卿,趙 燕,史曉飛

(河南科技大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院,河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院 風(fēng)濕免疫科,河南 洛陽471003)

脊柱關(guān)節(jié)炎(spondyloarthritis,SpA)是一組影響中軸和外周骨骼的炎癥性疾病,強(qiáng)直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS) 是脊柱關(guān)節(jié)炎的原型[1-2]。AS的診斷標(biāo)準(zhǔn)是1984年修訂的紐約標(biāo)準(zhǔn),要求X線表現(xiàn)為骶髂關(guān)節(jié)炎[3]。國際脊柱關(guān)節(jié)炎評估協(xié)會(ASAS)將主要累及中軸的SpA稱為中軸型SpA(axial SpA,axSpA)[4],包括放射學(xué)陽性中軸型SpA(r-axSpA,即AS)及放射學(xué)陰性中軸型SpA(nr-axSpA);主要累及外周的SpA稱為外周型脊柱關(guān)節(jié)炎(peripheral SpA,pSpA)[5]。AS主要侵犯骶髂關(guān)節(jié)、脊柱、脊柱旁軟組織及外周關(guān)節(jié),嚴(yán)重者可出現(xiàn)脊柱畸形及殘疾[6]。C反應(yīng)蛋白(CRP)和血沉(ESR)可以評估axSpA的疾病活動情況[7-9],但感染、腫瘤等均可出現(xiàn)CRP和ESR的升高。磁共振能夠在疾病的早期階段檢測到骶髂關(guān)節(jié)炎癥,提示疾病活動,但不具有特異性,且價(jià)格相對較貴,不易普及[10-11]。

CD74,又稱 HLA-DR 抗原相關(guān)恒定鏈,基本功能是輔助MHCⅡ類分子遞呈外源性抗原肽[12]。CD74在多種免疫細(xì)胞上表達(dá),如B細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞和巨噬細(xì)胞[13],這些都在炎癥的發(fā)病機(jī)制中起著關(guān)鍵作用?？笴D74抗體與CD74的結(jié)合可導(dǎo)致細(xì)胞的激活和促炎細(xì)胞因子的產(chǎn)生,如腫瘤壞死因子α[14]。此外,CD74是巨噬細(xì)胞遷移抑制因子(MIF)的高親和力受體,參與MIF介導(dǎo)的多種信號通路,與炎性疾病、自身免疫疾病、代謝及腫瘤疾病的發(fā)生發(fā)展相關(guān)[13,15]。CD74在炎癥、自身免疫性疾病中的表達(dá)升高,提示其在免疫應(yīng)答及自身免疫反應(yīng)中發(fā)揮重要作用[13]。2014年BAERLECKEN等[16]首次報(bào)道了抗CD74抗體IgG型可作為SpA的生物標(biāo)志物,特別是在疾病早期階段。此后多個(gè)研究小組報(bào)道了抗CD74抗體與axSpA密切相關(guān)[17-18],同時(shí),研究表明,axSpA患者的抗CD74抗體水平隨著發(fā)病時(shí)間的延長而降低[16]。抗CD74抗體可能參與了axSpA的發(fā)病機(jī)制[16]。然而也有很多研究認(rèn)為抗CD74抗體與axSpA無相關(guān)性[19-22]。本研究探討抗CD74抗體在不同病程的中軸型脊柱關(guān)節(jié)炎患者中的水平變化,以及其與疾病活動度的關(guān)系,報(bào)道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象

本研究納入2020年8月至2022年2月河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院風(fēng)濕免疫科收治的114例確診的axSpA患者。其中,100例AS患者(符合1984年修訂的AS紐約標(biāo)準(zhǔn)[3]),14例nr-axSpA患者(符合2009年ASAS的中軸型SpA的分類標(biāo)準(zhǔn)[4])。對照組是20例pSpA(符合2011年ASAS的外周型SpA的分類標(biāo)準(zhǔn)[5]),47名健康對照者(HC,無自身免疫性疾病、心血管疾病、癌癥、代謝性疾病或任何其他慢性疾病的癥狀)。本研究經(jīng)河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn),所有方法均按照《赫爾辛基宣言》中規(guī)定的原則進(jìn)行。所有患者和健康對照者在納入本研究前均簽署了知情同意書。

1.2 方法

1.2.1臨床資料收集 收集患者包括性別、年齡、病程、癥狀等相關(guān)臨床資料。對患者進(jìn)行疾病活動度的評估,包括Bath強(qiáng)直性脊柱炎疾病活動指數(shù)(bath ankylosing spondylitis disease activity index,BASDAI)和強(qiáng)直性脊柱炎疾病活動評分(ankylosing spondylitis disease activity score,ASDAS)。BASDAI是axSpA中應(yīng)用最廣泛的疾病活動度評估指標(biāo)[23],共包括6個(gè)問題,由患者根據(jù)過去一周的狀況回答以下問題:Q1疲勞/困倦的總體程度;Q2總體腰背痛程度;Q3外周關(guān)節(jié)的疼痛腫脹程度;Q4由于觸痛或壓痛導(dǎo)致不適的總體程度;Q5晨僵的嚴(yán)重程度;Q6晨僵持續(xù)時(shí)間[23]。從沒有影響到程度極重,計(jì)分0～10[23]。BASDAI=0.2×[Q1+Q2+Q3+Q4+0.5×(Q5+Q6)][23]。BASDAI<4或≥4定義為緩解期或活動期[24-25]。

1.2.2實(shí)驗(yàn)室檢查 所有參與者用真空采血管采集4 ml血液。采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定血清的抗CD74抗體IgG型,該試劑盒來自上海酶聯(lián)生物科技有限公司,嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作,讓血液凝固1小時(shí)后,4℃ 3 000 rpm離心5 min,收集血清,行抗CD74抗體的測定。將吸光度(OD值)轉(zhuǎn)化為濃度。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 一般資料比較

axSpA患者的平均年齡為(39.0±12.6)歲,其中AS患者平均年齡(40.8±12.2)歲,男性79例,女性21例;nr-axSpA患者平均年齡(36.4±7.4)歲,男性11例,女性3例。pSpA平均年齡(37.9±13.6)歲,男性15例,女性5例。47名HC的平均年齡為(37.1±9.0)歲,男性32例,女性15例。各組的性別、年齡差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

2.2 AS組、nr-axSpA組、pSpA組和HC組的抗CD74抗體IgG型濃度比較

AS組、nr-axSpA組、pSpA組和HC組患者的抗CD74抗體IgG型濃度兩兩相比,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。但AS組、nr-axSpA組的抗CD74抗體IgG型濃度的平均值均高于pSpA組和HC組。見表1。

表1 AS組、nr-axSpA組、pSpA組和HC組的抗CD74抗體IgG型濃度的比較

2.3 不同病程的axSpA患者抗CD74抗體的比較

因nr-axSpA組的患者數(shù)目有限,且該組的抗CD74抗體濃度和AS組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。故將AS組和nr-axSpA組結(jié)合,分析不同病程的axSpA患者的抗CD74抗體IgG型的濃度是否存在差異。如表2所示,axSpA患者病程<3年的抗CD74抗體IgG型濃度明顯高于病程3～10年和>10年(P=0.001,P<0.001)。病程3～10年與>10年相比,抗CD74抗體IgG型濃度差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),但前者均值高于后者。

表2 不同病程axSpA患者的抗CD74抗體的比較

2.4 axSpA組中不同BASDAI評分患者的抗CD74抗體的比較

如表3所示,axSpA患者BASDAI評分為<4分組和≥4分組抗CD74抗體濃度差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

表3 不同BASDAI評分患者的抗CD74抗體的比較

2.5 axSpA組中不同ASDAS-ESR評分患者的抗CD74抗體的比較

如表4所示,axSpA組患者根據(jù)ASDAS-ESR分為4個(gè)組。4個(gè)組的抗CD74抗體濃度差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

表4 不同ASDAS-ESR評分患者的抗CD74抗體的比較

2.6 axSpA組中不同ASDAS-CRP評分患者的抗CD74抗體的比較

如表5所示,axSpA組患者ASDAS-CRP評分4個(gè)組間的抗CD74抗體濃度差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

表5 不同ASDAS-CRP評分患者的抗CD74抗體的比較

2.7 按照病程和BASDAI分組,比較axSpA患者的抗CD74抗體濃度

如表6所示,按照病程和BASDAI將axSpA患者分組。其中在病程<3年的患者中,BASDAI≥4組(疾病活動期)的抗CD74抗體的平均濃度明顯高于BASDAI<4組(疾病緩解期)的患者,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。在病程3～10年及>10年的患者中,BASDAI≥4分和<4分患者的抗CD74抗體濃度差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

表6 按照病程和BASDAI分組的axSpA患者的抗CD74抗體的比較

3 討論

axSpA的典型臨床表現(xiàn)是炎性腰背痛和脊柱強(qiáng)直,年輕男性發(fā)病率高[5]。在疾病的早期階段識別疾病活動情況,給予積極的干預(yù),對減少疾病的潛在破壞性影響至關(guān)重要。

在本研究中,雖然axSpA(AS組、nr-axSpA組)患者的抗CD74抗體濃度與對照組(pSpA組和HC組)相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,但前者的抗CD74抗體濃度的平均值均高于后者。德國的BAERLECKEN 等[16]首次報(bào)道歐洲 AS 患者的血清抗 CD74 抗體的水平明顯高于健康對照者。而本研究與中國的LIU Y[21]、HU C J等[22]的研究一致,均認(rèn)為抗CD74抗體IgG型在axSpA組和健康對照組間的濃度差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。這些結(jié)果不一致,考慮原因可能有以下幾個(gè)方面:①只有少數(shù)的研究有病程的數(shù)據(jù),有限的數(shù)據(jù)提示抗CD74抗體的濃度可能隨發(fā)病時(shí)間的延長而降低。②使用不同的ELISA抗原,可能導(dǎo)致抗CD74抗體濃度的不同結(jié)果。③不同地區(qū)及人種的抗CD74抗體濃度可能存在差異。

本研究評估了抗CD74抗體的濃度與病程的關(guān)系。將病程分為<3年、3～10年和>10年。病程<3年的抗CD74抗體IgG型濃度明顯高于病程3～10年和>10年。提示與長病程的患者相比,病程短的axSpA患者的抗CD74抗體IgG型濃度更高,抗CD74抗體在疾病早期階段可能發(fā)揮一定的作用。BAERLECKEN 等[16]發(fā)現(xiàn)抗 CD74 抗體水平在發(fā)病早期的axSpA患者中相對較高,尤其是病程在1年內(nèi)的患者。在體外,抗CD74抗體與CD74的結(jié)合導(dǎo)致靶細(xì)胞的激活和促炎細(xì)胞因子的產(chǎn)生[14]。抗CD74抗體可能參與了axSpA的發(fā)病機(jī)制。

此外本研究還評估了抗CD74抗體的濃度與疾病活動度的關(guān)系。根據(jù)BASDAI將axSpA患者分為BASDAI<4組和≥4組,分別為疾病緩解期或活動期[24-25]。BASDAI<4組和≥4組的抗CD74抗體濃度差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。根據(jù)ASDAS將axSpA患者分為ASDAS<1.3(疾病緩解),1.3≤ASDAS<2.1(低疾病活動度),2.1≤ASDAS≤3.5(高疾病活動度),ASDAS>3.5(極高疾病活動度)[26]。無論是ASDAS-ESR還是ASDAS-CRP,不同的疾病活動度分組的抗CD74抗體濃度差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。通過病程和BASDAI分層,本研究發(fā)現(xiàn)在病程<3年、3～10年及>10年的患者中,BASDAI≥4組(疾病活動期)與BASDAI<4組(疾病緩解期)患者的抗CD74抗體濃度差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。抗CD74抗體的濃度與疾病活動度之間無相關(guān)性,不能以抗CD74抗體的濃度變化評估病情。BAERLECKEN 等[16]發(fā)現(xiàn)抗CD74抗體的濃度不受ESR、CRP和BASDAI等因素的影響。CD74是炎癥的關(guān)鍵調(diào)控因子之一,許多研究證實(shí)了CD74在炎癥性疾病中的作用[13,15]。結(jié)合病程的分組結(jié)果,可以推測抗CD74抗體可能通過激活CD74而導(dǎo)致促炎細(xì)胞因子的產(chǎn)生[14],參與axSpA的發(fā)病機(jī)制。

本研究的局限性:本研究的樣本量相對較小,數(shù)據(jù)收集來自單個(gè)中心,需要在大規(guī)模多中心研究中進(jìn)一步驗(yàn)證。此外,本研究未納入具體的臨床表現(xiàn)與抗CD74抗體的相關(guān)性,以及經(jīng)過治療后抗CD74抗體的濃度是否會發(fā)生變化。

綜上所述,與長病程的患者相比,病程短(<3年)的axSpA患者的抗CD74抗體的濃度更高。抗CD74抗體可能參與了axSpA的發(fā)病機(jī)制?？笴D74抗體的濃度與疾病活動度之間無相關(guān)性,不能以抗CD74抗體的濃度變化評估病情。由于本研究納入例數(shù)有限,且為單中心研究,結(jié)論還尚待大規(guī)模多中心研究進(jìn)一步驗(yàn)證。