兒童特應(yīng)性皮炎患兒血清IP-10和CXCR3水平及臨床意義*

許 穎,尉景娟,孫 偉

首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京友誼醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心,北京 100050

特應(yīng)性皮炎(AD)又稱特應(yīng)性濕疹,是兒童最常見(jiàn)的慢性炎癥性皮膚病,臨床表現(xiàn)為從最初的急性期(以瘙癢和紅斑-囊泡/丘疹為特征)向慢性期的演變,在此期間,皮膚出現(xiàn)地衣化,這是皮膚炎癥和抓撓引起的組織重塑和真皮纖維化的結(jié)果[1-2]。大部分兒童患AD后會(huì)反復(fù)發(fā)作,嚴(yán)重影響患兒的生活質(zhì)量[3]。AD影響5%～20%的兒童[4],醫(yī)療費(fèi)用較高和生活質(zhì)量下降等給患兒、家庭和社會(huì)帶來(lái)沉重負(fù)擔(dān)[5]。因此,尋找與AD有關(guān)的生物標(biāo)志物具有重要的臨床意義。趨化因子是調(diào)節(jié)抗病毒免疫的重要因素,干擾素-γ誘導(dǎo)蛋白-10(IP-10)也稱為C-X-C基序配體10(CXCL10),在不同的細(xì)胞類型(如肝細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、單核細(xì)胞和活化T細(xì)胞)中高度表達(dá),在調(diào)節(jié)抗病毒免疫中發(fā)揮關(guān)鍵作用[6]。趨化因子受體3(CXCR3)蛋白是一種七跨膜的G蛋白偶聯(lián)受體,具有1個(gè)細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域、3個(gè)胞外環(huán)(ECL1-3)、3個(gè)胞內(nèi)環(huán)(ICL1-3)和1個(gè)C端胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域[7]。研究表明,CXCL10/CXCR3信號(hào)軸與多種疾病(包括胰腺炎)的炎癥發(fā)生有關(guān)[8]。CXCR3在兒童發(fā)育和疾病發(fā)展中發(fā)揮重要的作用,如傷口愈合、各種神經(jīng)炎癥及心血管疾病[9]。而AD作為一種炎癥疾病,其發(fā)病與炎癥因子密不可分,筆者推測(cè)IP-10和CXCR3可能與AD的發(fā)生、發(fā)展存在聯(lián)系。本研究通過(guò)對(duì)比AD患兒與體檢健康兒童IP-10、CXCR3水平,探討IP-10和CXCR3在AD中的臨床意義。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2020年3月至2022年3月在本院診斷為AD的114例患兒作為AD組,其中男65例,女49例;年齡1～10歲,平均(3.50±0.86)歲。選擇同期在本院體檢健康的108例兒童作為對(duì)照組,其中男59例,女49例;年齡1～11歲,平均(3.75±1.13)歲。本研究經(jīng)本院倫理委員會(huì)審批通過(guò),所有研究受試者及其家屬知情并同意。AD患兒納入標(biāo)準(zhǔn):(1)診斷符合《特應(yīng)性皮炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)》[10]中有關(guān)AD的標(biāo)準(zhǔn);(2)首次患病。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)伴嚴(yán)重心、肺功能異常;(2)自身免疫性疾病;(3)研究前使用免疫抑制劑治療;(4)精神異常,不能正常交流。

1.2方法

1.2.1收集資料 收集嗜酸性粒細(xì)胞絕對(duì)值、嗜酸性粒細(xì)胞百分比、鈣離子、總lgE、體質(zhì)量指數(shù)(BMI)等指標(biāo)。

1.2.2特應(yīng)性皮炎評(píng)分(SCORAD) 根據(jù)SCORAD將AD組患兒分為輕度組(評(píng)分<25分,38例)、中度組(評(píng)分25～50分,42例)、重度組(評(píng)分>50分,34例)。

1.2.3血清IP-10和CXCR3水平檢測(cè) AD患兒檢查當(dāng)天和對(duì)照組體檢當(dāng)天清晨空腹抽取靜脈血10 mL,以4 500 r/min離心20 min,離心半徑為10 cm,取其上清液置于-20 ℃冰箱待用。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)血清IP-10和CXCR3水平,IP-10檢測(cè)試劑盒(貨號(hào):YM-PD9468)購(gòu)自上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司,CXCR3檢測(cè)試劑盒(貨號(hào):CSB-E08850h-1)購(gòu)自上海恒斐生物科技有限公司,試驗(yàn)過(guò)程按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。使用EnVision酶標(biāo)儀(珀金埃爾默企業(yè)管理有限公司)檢測(cè)吸光度值,繪制標(biāo)準(zhǔn)品的回歸曲線,按照曲線方程計(jì)算血清IP-10和CXCR3水平。

2 結(jié) 果

2.1兩組基本資料的比較 兩組年齡、性別、BMI、鈣離子比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);與對(duì)照組比較,AD組嗜酸性粒細(xì)胞絕對(duì)值、嗜酸性粒細(xì)胞百分比、總lgE水平均升高(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 兩組基本資料比較或n/n)

2.2兩組IP-10和CXCR3水平比較 AD組血清IP-10和CXCR3水平均較對(duì)照組升高(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 兩組IP-10和CXCR3水平比較

2.33組血清IP-10、CXCR3水平和SCORAD比較 重度組IP-10、CXCR3水平和SCORAD均高于中度組和輕度組(P<0.05),中度組高于輕度組(P<0.05)。見(jiàn)表3。

表3 3組血清IP-10、CXCR3水平和SCORAD比較

2.4IP-10和CXCR3的相關(guān)性 相關(guān)性分析顯示,AD組血清IP-10與CXCR3水平呈正相關(guān)(r=0.671,P<0.001)。

2.5ROC曲線分析血清IP-10和CXCR3對(duì)AD的診斷價(jià)值 ROC曲線顯示,IP-10和CXCR3診斷AD發(fā)生的曲線下面積(AUC)分別為0.893和0.895,二者聯(lián)合診斷AD的AUC為0.961,二者聯(lián)合診斷的AUC高于IP-10和CXCR3單項(xiàng)診斷(P<0.001)。見(jiàn)圖1。

圖1 血清IP-10、CXCR3診斷AD的ROC曲線

3 討 論

AD是一種多因子異質(zhì)性疾病,是遺傳和表觀遺傳因素、環(huán)境因子、免疫缺陷和上皮屏障功能障礙相互作用的結(jié)果[11]。不同地區(qū)AD的患病率不同,這種疾病通常發(fā)生在兒童早期,大約85%的病例在5歲左右可能發(fā)病,到7歲時(shí)疾病明顯緩解,在一小部分人群中,該病可能開(kāi)始于成年期[12]。AD對(duì)患兒的心理健康和生活質(zhì)量有重大影響,通常有哮喘、過(guò)敏性鼻結(jié)膜炎、食物過(guò)敏和精神性疾病等共病,AD的患病率和發(fā)病率近年來(lái)有所上升[13]。因此,尋找與AD有關(guān)的臨床診斷指標(biāo)具有重要價(jià)值。

IP-10的誘導(dǎo)完全依賴于中性粒細(xì)胞,已有文獻(xiàn)證明皮膚中存在的一些細(xì)胞類型可產(chǎn)生IP-10,包括上皮角質(zhì)形成細(xì)胞、髓樣細(xì)胞和感覺(jué)神經(jīng)元[14]。在AD和相關(guān)慢性瘙癢障礙的人類和小鼠模型研究中,慢性病變中確實(shí)存在中性粒細(xì)胞和(或)中性粒細(xì)胞趨化因子[15]。研究發(fā)現(xiàn),中性粒細(xì)胞通過(guò)觸發(fā)形成慢性瘙癢病變所需的分子變化,為急性到慢性瘙癢的過(guò)渡提供物質(zhì)基礎(chǔ),同時(shí)導(dǎo)致持續(xù)瘙癢[16]。IP-10是促炎趨化因子,是CXCR3的配體,IP-10促發(fā)了人類免疫缺陷病毒(HIV)靶細(xì)胞向淋巴組織的運(yùn)輸,從而促進(jìn)了新一輪感染,并幫助建立病毒庫(kù)[17]。研究表明,中性粒細(xì)胞在AD早期可誘發(fā)瘙癢和炎癥,包括滲透到皮膚時(shí)直接觸發(fā)瘙癢,或通過(guò)改變內(nèi)源性瘙癢原的表達(dá)間接觸發(fā)瘙癢[18]。本研究結(jié)果表明,AD組血清IP-10水平較對(duì)照組升高,表明IP-10與AD的發(fā)生有關(guān)。重度組的IP-10水平高于中度組和輕度組,中度組明顯高于輕度組,提示隨著AD患兒嚴(yán)重程度的增加IP-10水平升高。

CXCR3主要在效應(yīng)白細(xì)胞上表達(dá),包括CD4+和CD8+T細(xì)胞、自然殺傷(NK)細(xì)胞、NK T細(xì)胞和B細(xì)胞的亞群,也被稱為CXCR3A,其有3個(gè)主要的功能配體:CXCL9、CXCL10和CXCL11,均是干擾素γ誘導(dǎo)型[19]。CXCR3配體CXCL10可引發(fā)小鼠急性和過(guò)敏性瘙癢,然而,它在慢性瘙癢中的作用此前并不清楚[20]。CXCR3及其配體在介導(dǎo)中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎癥疾病和控制中樞神經(jīng)系統(tǒng)嗜神經(jīng)病毒感染方面發(fā)揮著至關(guān)重要的作用[21]。最近,CXCR3作為共刺激分子的作用被證實(shí),來(lái)自CXCR3缺陷小鼠的T細(xì)胞效應(yīng)功能受損[22]。CXCR3已被報(bào)道在幾種免疫細(xì)胞類型中表達(dá),如效應(yīng)T細(xì)胞、CD4+Foxp3+T細(xì)胞、NK細(xì)胞和B細(xì)胞[23]。研究證明,在克氏錐蟲(chóng)感染后,CXCR3在特定的CD8+T細(xì)胞中表達(dá)升高[24]。本研究顯示,與對(duì)照組比較,AD組血清CXCR3水平升高,提示CXCR3與AD的發(fā)生相關(guān)。此外,重度組的CXCR3水平高于中度組和輕度組,中度組高于輕度組,表明CXCR3水平與AD的嚴(yán)重程度有關(guān)。

相關(guān)性分析顯示,AD組血清IP-10與CXCR3水平呈正相關(guān),提示二者共同調(diào)控AD的發(fā)生發(fā)展過(guò)程。IP-10和CXCR3聯(lián)合診斷AD的AUC高于二者單項(xiàng)診斷,提示IP-10和CXCR3聯(lián)合診斷對(duì)AD的診斷價(jià)值較高。綜上所述,AD患兒血清IP-10和CXCR3呈高表達(dá),且二者呈正相關(guān),二者在AD的發(fā)病及進(jìn)展中發(fā)揮重要作用。