血清免疫球蛋白檢驗對肝衰竭的診斷價值研究

楊陽 陳丹

肝衰竭是指由多種因素引起的嚴(yán)重肝臟損害, 導(dǎo)致其合成、解毒、排泄和生物轉(zhuǎn)化等各功能發(fā)生嚴(yán)重障礙或失代償, 出現(xiàn)以凝血機(jī)制障礙和黃疸、肝性腦病、腹水等為主要表現(xiàn)的一組臨床癥狀。目前肝衰竭的發(fā)生及發(fā)展均需經(jīng)歷從肝炎到肝癌再到肝衰竭, 其中有效控制肝炎的發(fā)生、發(fā)展是預(yù)防肝衰竭發(fā)生的最重要措施［1］。肝炎中一般以乙型肝炎的發(fā)病率最高,也最易導(dǎo)致肝衰竭的惡性快速發(fā)展。乙型肝炎病毒在感染者體內(nèi)以準(zhǔn)種形式存在, 在環(huán)境選擇壓力下, 準(zhǔn)種的病毒組合不斷變化, 適應(yīng)性強的變異株可代替野生株成為優(yōu)勢株, 病毒生物學(xué)特點也可能發(fā)生變化, 改變病毒的復(fù)制能力和致病性、抗原表位, 影響免疫應(yīng)答反應(yīng), 產(chǎn)生抗病毒藥物耐藥性等［2］。其結(jié)果一方面造成持續(xù)感染而不斷誘導(dǎo)肝細(xì)胞炎性損害、纖維增生,加重肝纖維化, 增加產(chǎn)生新的乙型肝炎基因變異的機(jī)會；另一方面變異病毒毒力的增強和抗原表位的改變,可以引起過度免疫應(yīng)答反應(yīng), 造成嚴(yán)重的肝細(xì)胞損傷,甚至發(fā)生肝衰竭。肝衰竭的發(fā)生原因, 目前比較肯定的是由于某種原因(如病毒感染、藥物中毒、內(nèi)毒素血癥等)使肝臟局部本身的免疫細(xì)胞活化, 釋放各種細(xì)胞因子, 細(xì)胞因子和免疫細(xì)胞相互作用, 導(dǎo)致肝臟局部的免疫反應(yīng)。同時, 外周血的免疫細(xì)胞, 包括中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等聚集在肝臟, 導(dǎo)致肝臟間質(zhì)細(xì)胞的溶解和肝實質(zhì)細(xì)胞的壞死、凋亡［3］。整個過程中既涉及人體的非特異性免疫和特異性免疫, 也涉及全身免疫和肝臟的局部免疫, 既有肝實質(zhì)細(xì)胞的損傷和破壞, 也包括間質(zhì)細(xì)胞的壞死和破壞。在細(xì)胞損傷及破壞的過程中誘導(dǎo)外周免疫耐受激活體內(nèi)免疫球蛋白的超敏反應(yīng), 提高免疫球蛋白對機(jī)體的保護(hù)機(jī)制。免疫球蛋白是重要的免疫調(diào)節(jié)因子, 通過中和作用減少肝細(xì)胞內(nèi)抗原和毒素對免疫系統(tǒng)的過度激活, 降低機(jī)體的免疫應(yīng)答, 也可通過與肝細(xì)胞的受體交聯(lián)調(diào)整吞噬作用, 激活多種免疫細(xì)胞的抵抗感染侵襲的能力［4］。免疫球蛋白的抗原結(jié)合部位能夠作為獨特性抗原誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生抗獨特性抗體, 形成對整個抗體應(yīng)答的網(wǎng)絡(luò)調(diào)節(jié)。同時, 免疫球蛋白具有多種生物學(xué)功能,第一可變區(qū)能夠特異性結(jié)合病原體或毒素表面介導(dǎo)感染的表位或毒力相關(guān)的表位結(jié)合, 使病原體或毒素失去感染和毒力, 抗體與相應(yīng)抗原表位結(jié)合, 激活補體經(jīng)典激活途徑, 從而形成攻膜復(fù)合物裂解病原體, 降低肝炎細(xì)胞對肝的損傷［5］。故在肝衰竭時進(jìn)行免疫球蛋白檢驗?zāi)軌蛴行ПO(jiān)測肝衰竭的發(fā)展進(jìn)展, 但目前臨床仍有一些人認(rèn)為肝臟誘導(dǎo)的免疫保護(hù)為免疫反應(yīng), 通過免疫球蛋白等的檢驗不能有效診斷肝衰竭, 故本研究探究血清免疫球蛋白檢驗對肝衰竭的診斷價值。現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019 年9 月～2021 年9 月本院收治的30 例肝衰竭患者作為研究組, 根據(jù)肝衰竭時期不同分為輕度組和中重度組, 每組15 例；另選擇同期30 例體檢健康者作為對照組。研究組年齡32～71 歲,平均年齡(56.96±8.53)歲；男23 例, 女7 例。對照組年齡32～73 歲, 平均年齡(58.96±9.53)歲；男22 例,女8 例。兩組一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。研究組納入標(biāo)準(zhǔn)：①患者經(jīng)相關(guān)影像學(xué)及生化檢查明確肝衰竭的診斷；②患者的病程均<26 周；③患者短期內(nèi)出現(xiàn)黃疸進(jìn)行性加重而且存在出血傾向, 肝臟的縮小也進(jìn)行性加重；④患者存在b 型肝炎的攜帶史；⑤患者出現(xiàn)肝功能進(jìn)行性衰弱和失代償。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并嚴(yán)重的氨中毒導(dǎo)致4 型以上的肝性腦?。虎诤喜?yán)重的靜脈曲張及腹水增加；③合并嚴(yán)重的心臟及肺部疾??；④合并凝血功能障礙性疾??；⑤合并嚴(yán)重的免疫缺陷及結(jié)締組織性疾病。本次研究經(jīng)倫理研究委員會批準(zhǔn), 患者及家屬簽寫知情同意書。

1.2 方法 研究組患者入院后完善醫(yī)師的醫(yī)囑檢查,同時協(xié)助醫(yī)師完善病歷的書寫, 注意試驗期間的飲食管理, 同時護(hù)理人員囑患者避免住院期間出現(xiàn)嚴(yán)重的跌倒等意外損傷, 每日對患者進(jìn)行血壓、血氧飽和度等生命體征監(jiān)測, 囑家屬注意患者的精神行為等異常改變, 床旁準(zhǔn)備急救相關(guān)藥品。對照組在進(jìn)行檢測時囑其避免服用免疫相關(guān)藥劑, 避免在感染及發(fā)熱期間進(jìn)行免疫球蛋白檢驗。

兩組受檢者于清晨空腹時由護(hù)理人員使用一次性注射器抽取靜脈血5 ml, 以3500 r/min 的速度對全血進(jìn)行離心處理, 收集血清, 應(yīng)用四川邁克生物科技有限公司的IgG、IgA、IgM 定量測定試劑盒采用免疫透射比濁法檢測IgG、IgA、IgM 含量, 應(yīng)用重慶中元生物技術(shù)有限公司的總膽紅儀器進(jìn)行總膽紅素的測定, 應(yīng)用樂普(北京)醫(yī)療器械股份有限公司生產(chǎn)的凝血分析儀進(jìn)行凝血酶原活動度的測定。應(yīng)用基蛋生物科技股份有限公司生產(chǎn)的基蛋免疫定量分析進(jìn)行白蛋白的測定。

1.3 觀察指標(biāo) 比較研究組與對照組IgG、IgA、IgM及總膽紅素、白蛋白及凝血酶原活動度；比較研究組不同肝衰竭時期的IgG、IgA、IgM 及總膽紅素、白蛋白及凝血酶原活動度。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS25.0 統(tǒng)計學(xué)軟件對研究數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示, 采用t 檢驗；計數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗。P<0.05 表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 研究組與對照組IgG、IgA、IgM 及總膽紅素、白蛋白、凝血酶原活動度比較 研究組IgG、IgA、IgM、總膽紅素水平高于對照組, 白蛋白、凝血酶原活動度低于對照組, 差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 研究組與對照組IgG、IgA、IgM 及總膽紅素、白蛋白、凝血酶原活動度比較( ±s)

表1 研究組與對照組IgG、IgA、IgM 及總膽紅素、白蛋白、凝血酶原活動度比較( ±s)

注：與對照組比較, aP<0.05

組別 例數(shù) IgG(g/L) IgA(g/L) IgM(g/L) 總膽紅素(μmol/L) 白蛋白(g/L) 凝血酶原活動度(%)對照組 30 11.20±4.31 4.02±1.23 3.76±1.21 13.61±7.64 37.12±9.31 91.35±9.67研究組 30 23.52±5.61a 13.21±3.61a 12.62±4.10a 382.43±32.64a 28.61±8.49a 34.61±8.59a t 9.538 13.198 11.352 60.262 3.699 24.027 P 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000

2.2 研究組不同肝衰竭時期IgG、IgA、IgM 及總膽紅素、白蛋白及凝血酶原活動度比較 中重度組IgG、IgA、IgM、總膽紅素水平高于輕度組, 白蛋白、凝血酶原活動度低于輕度組, 差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 研究組不同肝衰竭時期IgG、IgA、IgM 及總膽紅素、白蛋白及凝血酶原活動度比較( ±s)

表2 研究組不同肝衰竭時期IgG、IgA、IgM 及總膽紅素、白蛋白及凝血酶原活動度比較( ±s)

注：與輕度組比較, aP<0.05

組別 例數(shù) IgG(g/L) IgA(g/L) IgM(g/L) 總膽紅素(μmol/L) 白蛋白(g/L) 凝血酶原活動度(%)中重度組 15 26.37±9.12a 17.58±6.43a 17.51±6.35a 420.61±31.26a 22.70±8.36a 31.23±8.56a輕度組 15 20.67±4.13 8.84±1.52 7.73±1.32 344.25±17.63 34.52±9.79 37.99±6.25 t 2.333 5.123 5.840 8.240 3.556 2.470 P 0.027 0.000 0.000 0.000 0.001 0.020

3 討論

據(jù)相關(guān)研究顯示, 肝細(xì)胞內(nèi)幾乎所有的細(xì)胞均參與免疫反應(yīng)及應(yīng)答, 如肝細(xì)胞表面存在參與炎癥相關(guān)的受體表達(dá)調(diào)質(zhì), 能夠激活T 細(xì)胞或肝內(nèi)其他細(xì)胞釋放的細(xì)胞因子通過免疫球蛋白使受體的水平上調(diào)；肝細(xì)胞內(nèi)的庫普弗細(xì)胞調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)和炎癥反應(yīng)除了通過抗原提呈外, 還能通過分泌花生四烯酸和細(xì)胞因子發(fā)揮作用, 而且他們還能重建連接組織和參與纖維的形成［6］。肝衰竭的發(fā)展過程中抗原通過門靜脈系統(tǒng)進(jìn)入血液不能引起免疫反應(yīng), 但經(jīng)過腔靜脈進(jìn)入血液的抗原能夠引起免疫反應(yīng), 在某些條件下, 庫普弗細(xì)胞能夠表達(dá)抗原, 提呈抗原, 引起自身免疫現(xiàn)象。故在對肝衰竭進(jìn)行診斷時應(yīng)用免疫球蛋白檢驗?zāi)軌蛟缙诎l(fā)現(xiàn)肝衰竭。慢性肝衰竭患者存在細(xì)胞免疫缺陷, 容易導(dǎo)致敗血癥的發(fā)生, 導(dǎo)致患者的多器官出現(xiàn)衰竭［7］。免疫球蛋白在肝衰竭患者體內(nèi)具有多種生物學(xué)功能, 如：肝臟是人體進(jìn)行體內(nèi)各種代謝和毒素清除的主要結(jié)構(gòu),免疫球蛋白通過特異性的識別和結(jié)合毒素關(guān)鍵表位,封閉病原體或毒素的結(jié)構(gòu), 使乙型肝炎病毒喪失感染能力, 同時還能有效清除細(xì)胞外病原體和處于裂解復(fù)制期的游離病毒, 達(dá)到體內(nèi)代償作用［8］。免疫球蛋白與肝細(xì)胞的抗原結(jié)合, 可因構(gòu)型改變使其ch2/ch3 功能區(qū)的補體幾何點暴露, 激活補體破壞病原體；免疫球蛋白的V 區(qū)與細(xì)菌等顆粒性抗原結(jié)合后能夠促進(jìn)庫普弗細(xì)胞對細(xì)菌等顆粒性抗原的吞噬, 發(fā)揮免疫反應(yīng)［9］。免疫球蛋白是機(jī)體最重要的免疫調(diào)節(jié)分子, 可通過中和作用減少抗原和毒素對免疫系統(tǒng)的刺激, 也可通過受體交聯(lián)、調(diào)理吞噬等激活多種免疫細(xì)胞的抗感染功能, 避免肝衰竭患者因細(xì)菌感染導(dǎo)致敗血癥的發(fā)生, 降低死亡率［10］。IgG 是血清和體液中的主要抗體成分,是再次體液免疫應(yīng)答產(chǎn)生的主要抗體, 親和力高, 在體內(nèi)的分布廣泛, 是肝衰竭患者體內(nèi)發(fā)揮免疫反應(yīng)的重要抗體。IgM 不能通過細(xì)胞壁, 主要存在血清中, 具有很強的抗原結(jié)合能力, 該抗體也是初次體液免疫應(yīng)答中最早出現(xiàn)的抗體, 血清中該抗體的檢出, 表明患者存在感染。IgA 主要存在唾液等腺體表面, 參與局部黏膜保護(hù), 是一種重要的自然被動免疫抗體［11］。肝衰竭患者由于肝內(nèi)各種免疫系統(tǒng)及細(xì)胞的大面積壞死導(dǎo)致患者的免疫系統(tǒng)崩潰, 出現(xiàn)免疫球蛋白的大量釋放參與抗原抗體反應(yīng), 故在肝衰竭的診斷中免疫球蛋白的水平與肝衰竭患者的發(fā)生發(fā)展存在正相關(guān)關(guān)系［12］, 肝臟同樣也是凝血因子合成的主要場所, 肝衰竭患者的肝臟損傷嚴(yán)重, 肝細(xì)胞大量死亡, 肝臟大面積壞死, 導(dǎo)致肝細(xì)胞合成的凝血因子減少, 導(dǎo)致發(fā)揮內(nèi)外凝血途徑的凝血因子缺乏, 凝血酶原活動度降低。

本研究結(jié)果顯示：研究組IgG(23.52±5.61)g/L、IgA(13.21±3.61)g/L、IgM(12.62±4.10)g/L、總膽紅素(382.43±32.64)μmol/L 高于對照組的(11.20±4.31)g/L、(4.02±1.23)g/L、(3.76±1.21)g/L、(13.61±7.64)μmol/L,白蛋白(28.61±8.49)g/L、凝血酶原活動度(34.61±8.59)%低于對照組的(37.12±9.31)g/L、(91.35±9.67)%,差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。中重度組IgG(26.37±9.12)g/L、IgA(17.58±6.43)g/L、IgM(17.51±6.35)g/L、總膽紅素(420.61±31.26)μmol/L 高于輕度組的(20.67±4.13)g/L、(8.84±1.52)g/L、(7.73±1.32)g/L、(344.25±17.63)μmol/L, 白 蛋 白(22.70±8.36)g/L、 凝血酶原活動度(31.23±8.56)%低于輕度組的(34.52±9.79)g/L、(37.99±6.25)%, 差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

綜上所述, 血清免疫球蛋白檢驗對肝衰竭具有顯著的臨床診斷價值, 不僅能夠提高診斷準(zhǔn)確率, 而且能夠評估患者病情嚴(yán)重程度, 值得臨床推廣使用。但在實際檢測過程中應(yīng)加強檢測的規(guī)范性, 避免人為的操作失誤及儀器的損壞造成結(jié)果的不準(zhǔn)確。