銀翹蒲黃散對奶山羊的安全性試驗(yàn)

李 沛,蔣 娟,李穩(wěn)超,滕 江,趙昕鈺,左景茹,陳君霖,廖 琳,劉曉強(qiáng)*

(1.西北農(nóng)林科技大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院,陜西楊陵 712100;2.富平縣畜牧發(fā)展中心,陜西富平 711700;3.西藏瓊結(jié)縣農(nóng)牧綜合服務(wù)中心,西藏瓊結(jié) 856800)

近年來隨著奶山羊養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展,奶山羊乳房炎問題日顯突出,發(fā)病率達(dá)2%～19%[1]。臨床型乳房炎平均發(fā)病率為6%,最高可達(dá)20%[2]。乳房炎不僅影響奶山羊的繁育,還影響產(chǎn)奶量和奶品質(zhì)[3]。銀翹蒲黃散是西北農(nóng)林科技大學(xué)獸醫(yī)藥理學(xué)教研室研發(fā)的用于奶山羊乳房炎的中獸藥,主要由金銀花、連翹、蒲公英、黃芪、王不留行、乳香等中藥組成,具有清熱解毒、抗菌消炎、消癰下乳、通經(jīng)活血之功效。為評價(jià)銀翹蒲黃散對奶山羊的安全性,本試驗(yàn)參照農(nóng)業(yè)部《獸藥研究技術(shù)指導(dǎo)原則匯編》和《獸用中藥、天然藥物安全藥理學(xué)研究技術(shù)指導(dǎo)原則》[4-5],進(jìn)行銀翹蒲黃散對奶山羊的安全性試驗(yàn),考察奶山羊以推薦劑量的1、3、5倍劑量連續(xù)給藥后,臨床反應(yīng)及生理生化指標(biāo)變化,為銀翹蒲黃散的臨床應(yīng)用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗(yàn)用動物 健康成年奶山羊40只,由富平縣某奶山羊養(yǎng)殖合作社提供,試驗(yàn)期間常規(guī)飼養(yǎng)。

1.1.2 試驗(yàn)藥品 銀翹蒲黃散主要含有金銀花、連翹、蒲公英、黃芪、王不留行、乳香等11味中藥組成,具有熱解毒、消癰下乳、通經(jīng)活血之功效,擬用于泌乳動物乳房炎的治療,使用劑量為50 g/只。所有中藥均購自陜西省楊凌示范區(qū)國華藥店。將藥物依據(jù)組方配藥,粉碎為粗粉,臨用前適量溫水溶解。

1.1.3 主要試劑 白蛋白(ALB)測定試劑盒,上海泛柯實(shí)業(yè)有限公司;丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)試劑盒,天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)試劑盒,江蘇晶美生物科技有限公司;尿素氮(BUN)試劑盒,上海吉至生化科技有限公司;肌酐(SCr) 測定試劑盒,上海源葉生物科技有限公司;山羊總蛋白(TP)測定試劑盒,上海泛柯實(shí)業(yè)有限公司。

1.1.4 主要儀器 電子分析天平,奧豪斯儀器有限公司產(chǎn)品;漩渦振蕩器,其林貝爾儀器制造公司產(chǎn)品;MTN-81全自動血細(xì)胞分析儀,長春曼特諾醫(yī)療器械公司產(chǎn)品; H1650R高速冷凍離心機(jī),湘儀儀器有限公司產(chǎn)品。

1.2 方法

1.2.1 試驗(yàn)動物分組處理 將受試奶山羊隨機(jī)分為4組,包括3個(gè)試驗(yàn)組(1倍劑量組、3倍劑量組和5倍劑量組)和對照組,每組10頭。1倍劑量組、3倍劑量組和5倍劑量組的奶山羊每次分別經(jīng)胃管灌服銀翹蒲黃散100、150、250 g,每天1次,連續(xù)3 d。對照組灌服生理鹽水600 mL,每天1次,連續(xù)3 d。

1.2.2 評價(jià)指標(biāo)

1.2.2.1 奶山羊生理指標(biāo) 于給藥前和給藥后對受試奶山羊的精神、食欲及糞尿情況進(jìn)行觀察。糞尿觀察主要包括排糞排尿動作、次數(shù)及糞尿顏色、氣味、形狀等異常情況。同時(shí),測量給藥前及給藥后試驗(yàn)?zāi)躺窖虻暮粑l率、心率及體溫。

1.2.2.2 血常規(guī)檢測 試驗(yàn)前試驗(yàn)組和對照組采空白抗凝血各1次;給藥后3 d、7 d各采抗凝血1次。用全自動血細(xì)胞分析儀檢測血液學(xué)指標(biāo)。測指標(biāo)主要有:紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(RBC)、白細(xì)胞計(jì)數(shù)(WBC)、淋巴細(xì)胞數(shù)(LYM)及血紅蛋白(HGB)。

1.2.2.3 血清生化指標(biāo)檢測 給藥前對試驗(yàn)組和對照組各采空白血1次,分別于給藥后3 d、7 d采血,4℃條件下4 000 r/min離心30 min,分離血清用于測定血清生化指標(biāo)。主要檢測指標(biāo)包括血清尿素氮(BUN)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、肌酐(SCr)、白蛋白(ALB)和總蛋白(TP)。

2 結(jié)果

2.1 銀翹蒲黃散對奶山羊生理指標(biāo)的影響

連續(xù)給藥3 d后,試驗(yàn)組奶山羊未出現(xiàn)精神異常、食欲廢止、嘔吐、便秘或腹瀉等異常反應(yīng),排糞排尿次數(shù)、排泄物顏色、氣味、形狀等均正常。由表1可知,對照組奶山羊的呼吸頻率、心率、體溫在試驗(yàn)前后均未出現(xiàn)明顯變化,各組與對照組相比均無顯著性差異(P>0.05)。

表1 不同劑量的銀翹蒲黃散對奶山羊呼吸頻率、心率和體溫的影響

2.2 銀翹蒲黃散對奶山羊血液學(xué)指標(biāo)的影響

連續(xù)給藥3 d后,3 d、7 d各組奶山羊血液學(xué)指標(biāo)檢測結(jié)果見表2和表3。各組的血常規(guī)參數(shù)沒有明顯變化。對照組與試驗(yàn)組間的紅細(xì)胞數(shù)(RBC)、白細(xì)胞數(shù)(WBC)、血紅蛋白(HGB)和淋巴細(xì)胞數(shù)(LYM)的含量無顯著性差異(P>0.05)。結(jié)果表明,銀翹蒲黃散對受試奶山羊的血液學(xué)指標(biāo)不會產(chǎn)生明顯的不良影響。

表2 不同劑量的銀翹蒲黃散對奶山羊血常規(guī)的影響(給藥前)

表3 不同劑量的銀翹蒲黃散對奶山羊血液學(xué)指標(biāo)的影響(給藥后第3、7天)

2.3 銀翹蒲黃散對奶山羊血清生化指標(biāo)的影響

由表4和表5可知,連續(xù)給藥3 d后,奶山羊血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)、白蛋白(ALB)以及總蛋白(TP)活性與給藥前相比無顯著性差異(P>0.05)。試驗(yàn)組與對照組相比較,各血液生化指標(biāo)活性差異不顯著(P>0.05)。表明銀翹蒲黃散對奶山羊的肝臟、腎臟功能以及物質(zhì)代謝并無不良影響。

表4 不同劑量的銀翹蒲黃散對奶山羊血清生化指標(biāo)的影響(給藥前)

表5 不同劑量的銀翹蒲黃翹對奶山羊血清生化指標(biāo)的影響(給藥后第3、7天)

3 討論

抗菌藥物在應(yīng)對泌乳動物乳房炎方面發(fā)揮了重要作用,但長期使用會引起細(xì)菌的耐藥性、獸藥殘留和環(huán)境污染等問題,加之國家限抗、替抗政策的出臺[6]。臨床治療動物乳房炎也越來越傾向于中草藥治療,中草藥含有豐富的活性物質(zhì),各味中草藥之間互相協(xié)調(diào)輔助,可同時(shí)產(chǎn)生抗炎、抗菌、鎮(zhèn)痛、抗氧化、調(diào)節(jié)免疫功能等多種功效。

靶動物安全性評價(jià)是藥物臨床應(yīng)用判斷標(biāo)準(zhǔn)之一[7]。根據(jù)受試奶山羊的臨床體征,不同劑量組奶山羊均未出現(xiàn)異常反應(yīng),精神狀態(tài)良好,飲水、飲食、排糞和排尿正常,體溫、心率和呼吸也均正常,說明銀翹蒲黃散對奶山羊無不良影響。藥3 d與7 d后血常規(guī)指標(biāo)均在正常范圍,表明銀翹蒲黃散在一定劑量范圍內(nèi)對奶山羊的血常規(guī)指標(biāo)無不良影響。銀翹蒲黃散所含的主要成份為金銀花、連翹、蒲公英、黃芪、王不留行、乳香等,單味或復(fù)方均毒性低,安全可靠。蒲公英可化熱毒,消惡腫,具有抑菌、抗氧化、抗炎等多種藥理作用[6,8-9]。連翹和黃芩也屬于臨床常用中草藥[10-11]。銀翹藍(lán)芩口服液含有金銀花、連翹、黃芩等,許春燕對靶動物雞連續(xù)飲水給藥7 d,不同劑量組與對照組相比,血液生理學(xué)與生化學(xué)指標(biāo)以及臟器系數(shù)差異不顯著(P>0.05),且各臟器無明顯組織病變[12]。血液生化指標(biāo)中,血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、白蛋白和總蛋白是評價(jià)肝臟功能的重要標(biāo)志,尿素氮和肌酐是評價(jià)腎臟功能的重要指標(biāo),可反映機(jī)體肝臟、腎臟及總體代謝功能的正常與否。本試驗(yàn)中1倍和3倍劑量組奶山羊用藥后其血液生化指標(biāo)變化均處于參考值正常范圍內(nèi),與給藥前相比較差異不顯著(P>0.05),表明銀翹蒲黃散對奶山羊的肝、腎功能及機(jī)體代謝不會產(chǎn)生不良影響。但是5倍劑量組奶山羊的血清生化指標(biāo)和對照組比顯著升高(P<0.05),其原因可能是該散劑中所含的沒藥、乳香及知母在劑量較大時(shí)產(chǎn)生一定毒性[13]。綜上所述,銀翹蒲黃散不超過3倍推薦劑量時(shí)具有良好的安全性。