活動性肺結(jié)核患者結(jié)核感染T細(xì)胞斑點試驗與高分辨CT征象的相關(guān)性研究

張歷君　余志敏　吳群

【摘要】? 目的? ? 探討活動性肺結(jié)核患者結(jié)核感染T細(xì)胞斑點試驗（T-SPOT.TB）與高分辨率CT（HRCT）征象的相關(guān)性。方法? ? 回顧性分析2017年3月—2021年3月鄱陽縣人民醫(yī)院診治的60例活動性肺結(jié)核患者的臨床資料，對外周血液標(biāo)本進(jìn)行T-SPOT.TB數(shù)值檢測，同時按其HRCT的7種典型征象分布與范圍對患者肺部CT表現(xiàn)予以評分，分析T-SPOT.TB數(shù)值與HRCT征象的相關(guān)性。結(jié)果? ? 60例活動性肺結(jié)核患者微結(jié)節(jié)HRCT分值最大（4.18±0.63）分，空洞分值最?。?.20±0.03）分；60例活動性肺結(jié)核患者T-SPOT.TB所測值A(chǔ)孔抗原孔陰性17例、陽性43例，B孔抗原陰性15例、陽性45例，T-SPOT.TB表現(xiàn)為陰性所對應(yīng)的HRCT征象評分均值與陽性所對應(yīng)均值相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）（無論A孔或B孔）；Spearman相關(guān)性分析顯示：T-SPOT.TB抗原孔A與HRCT征象評分呈正相關(guān)（P<0.05），T-SPOT.TB抗原孔B與HRCT征象評分呈正相關(guān)（P<0.05）。結(jié)論? ? 活動性肺結(jié)核患者T-SPOT.TB與肺部CT所提示肺結(jié)核病變范圍、大小及程度存在一定的相關(guān)性，可作為臨床輔助檢查手段。

【關(guān)鍵詞】? 活動性肺結(jié)核；結(jié)核感染T細(xì)胞斑點試驗；高分辨率CT征象；相關(guān)性

中圖分類號：R521? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：1672-1721（2023）10-0068-03

DOI：10.19435/j.1672-1721.2023.10.022

結(jié)核是由結(jié)核分枝桿菌感染所引發(fā)的慢性傳染病，可累及全身多器官系統(tǒng)，以活動性肺結(jié)核最為常見[1-2]。活動性肺結(jié)核發(fā)病較為隱匿，無特異性臨床表現(xiàn)，極易被誤診、漏診，從而延誤治療時間，對患者的身心安全構(gòu)成威脅[3]。痰細(xì)菌學(xué)檢查為診斷肺結(jié)核的金標(biāo)準(zhǔn)，但所需時間較長，故臨床常通過肺部CT對活動性肺結(jié)核患者進(jìn)行鑒別診斷[4-5]。值得注意的是，肺部CT檢查雖具有較高的敏感性，但其表現(xiàn)呈多樣性，仍存在一定的誤診、漏診情況。隨著臨床醫(yī)學(xué)技術(shù)的持續(xù)發(fā)展，結(jié)核感染T細(xì)胞斑點試驗（T-SPOT.TB）得以在臨床診斷活動性肺結(jié)核中廣泛運用，具有較高的靈敏度與準(zhǔn)確度，可有效彌補(bǔ)細(xì)菌學(xué)與影像學(xué)檢查的不足。本研究回顧性分析60例活動性肺結(jié)核患者的臨床資料，探究結(jié)核感染T細(xì)胞斑點試驗與高分辨CT征象的相關(guān)性，報告如下。

1? ? 資料與方法

1.1? ? 一般資料? ? 回顧性分析2017年3月—2021年3月鄱陽縣人民醫(yī)院診治的60例活動性肺結(jié)核患者的臨床資料。納入標(biāo)準(zhǔn)：符合《臨床診療指南：結(jié)核病分冊》[6]有關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)；病歷資料齊全。排除標(biāo)準(zhǔn)：妊娠或哺乳期女性；初治≥2周或復(fù)治肺結(jié)核者；急性病毒感染者；存在酒精、藥物依賴史者；合并凝血功能異常者；存有意識或精神障礙，無法進(jìn)行正常溝通者；艾滋病患者；存在嚴(yán)重的腦器質(zhì)性疾病者。男38例，女22例；年齡34～75歲，平均年齡（59.78±2.49）歲；體重指數(shù)（BMI）18.3～27.2 kg/m²，平均（24.19±0.67）kg/m²。

1.2? ? 方法? ? 對全部受試者施行肺部高分辨率CT（HRCT）檢查：運用美國GE 64排螺旋CT，掃查范圍從肺尖一直到肺底，常規(guī)掃描層厚、螺距、電流、電壓分別為5 mm、1∶1、150 mA、120 kV；HRCT掃描，調(diào)節(jié)電壓、電流、層厚分別為120 kV、250 mA、1 mm。檢查出的圖像由2名高年資影像學(xué)醫(yī)師評判，HRCT圖像可分為7種，包括支氣管損傷、間質(zhì)損傷、結(jié)節(jié)、實變、微結(jié)節(jié)、空洞以及磨玻璃影。HRCT征象評分標(biāo)準(zhǔn)：肺區(qū)分為上、中、下3個部位，上部：支氣管隆突之上范圍，中部：下肺靜脈與支氣管隆突間的范圍，下部：下肺靜脈之下的范圍。1個區(qū)域4分，采用5級法對每個區(qū)域內(nèi)CT征象所占范圍評分，0分：無大陰影；1分：大陰影面積≤1/4；2分：大陰影面積占比1/4～1/2；3分：大陰影面積占比1/2～3/4；4分：肺部受累，大陰影面積>3/4，各部分評分相加為總分。T-SPOT.TB檢測：采集所有患者6 mL靜脈血，進(jìn)行抗凝處理，之后取6 mL抗凝血清標(biāo)本，以RPMI培養(yǎng)液、Ficoll淋巴細(xì)胞分離液進(jìn)行單個核細(xì)胞的獲取，以AIM-V培養(yǎng)液把單獨的核細(xì)胞配比成2.5×10⁵mL濃度后備用；分別把50μLAIM-V培養(yǎng)液加入T-spot.TB試劑盒微孔板4個微孔內(nèi)當(dāng)成陰性對照組，于4個微孔內(nèi)分別放入50μL抗原CFP-10當(dāng)成B檢測孔，50μL結(jié)核分枝桿菌特異抗原ESAT-6當(dāng)成A檢驗孔，50μL植物血凝血當(dāng)成陽性對照組；把100μL標(biāo)準(zhǔn)溶液分別放進(jìn)4個微孔內(nèi)，之后將其放于5%二氧化碳培養(yǎng)箱中，控制溫度于37℃，進(jìn)行18 h的孵育。反復(fù)進(jìn)行4次磷酸緩沖液（PBS）洗滌，將堿性磷酸酶標(biāo)記二抗加入，施行60 min的孵育，溫度控制為2～8 ℃，PBS洗滌4次。之后把底物顯色溶液放入，施行7 min的孵育，運用去離子或蒸餾水予以洗滌，終止反應(yīng)，對各個微孔中的顏色斑點采取放大鏡計數(shù)。結(jié)果判定：陽性：檢測孔（抗原孔A/B）>陰性對照孔顯色點數(shù)的2倍，且陰性對照孔存在6個及以上的顯色點數(shù)；陽性：檢測孔（抗原孔A/B）減去陰性對照孔顯色點數(shù)在6個及以上，且陰性對照孔存在0～5個顯色點數(shù)。

1.3? ? 觀察指標(biāo)? ? （1）肺部HRCT征象表現(xiàn)評分。（2）T-SPOT.TB檢測結(jié)果。（3）T-SPOT.TB陽性與陰性值對應(yīng)的HRCT征象評分對比。（4）T-SPOT.TB與HRCT征象評分的相關(guān)性。

1.4? ? 統(tǒng)計學(xué)方法? ? 使用SPSS 20.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計量資料以x±s表示，采用t檢驗，相關(guān)性檢驗采用Spearman相關(guān)分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2? ? 結(jié)果

2.1? ? 肺部HRCT征象表現(xiàn)評分? ? 60例活動性肺結(jié)核患者微結(jié)節(jié)HRCT分值最大，空洞分值最小，見表1。

2.2? ? T-SPOT.TB檢測結(jié)果? ? 60例活動性肺結(jié)核患者T-SPOT.TB所測值A(chǔ)抗原孔陰性有17例，陽性有43例，數(shù)值分布于0～100之間；B孔抗原陰性有15例，陽性有45例，數(shù)值分布于0～200之間，見圖1～2。

2.3? ? T-SPOT.TB陽性與陰性值對應(yīng)的HRCT征象評分對比? ? T-SPOT.TB抗原孔A陰性的17例患者的HRCT征象評分均值為（12.96±1.58）分，而陽性的43例患者HRCT征象評分均值為（13.85±1.75）分，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（t=1.823，P=0.074）。T-SPOT.TB抗原孔B陰性的15例患者HRCT征象評分為（13.79±1.63）分，陽性的45例患者HRCT征象評分均值為（14.22±1.89）分，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（t=0.788，P=0.434）。

2.4? ? T-SPOT.TB與HRCT征象評分相關(guān)性? ? Spearman相關(guān)性分析顯示：T-SPOT.TB抗原孔A與HRCT征象評分呈正相關(guān)（r=0.329，P<0.05）；T-SPOT.TB抗原孔B與HRCT征象評分呈正相關(guān)（r=0.348，P<0.05），表明T-SPOT.TB測定值與HRCT征象評分呈弱相關(guān)性，見圖3～4。

3? ? 討論

活動性肺結(jié)核在臨床具有較高的患病率，且近年因城市的快速發(fā)展與人們生活方式的變化，促使該病的發(fā)生率呈逐年上漲趨勢[7-8]?；顒有苑谓Y(jié)核大部分是因感染結(jié)核分枝桿菌之后，機(jī)體的抵抗力持續(xù)下降，促使病原菌快速繁殖生長所致，在出現(xiàn)肺結(jié)核相關(guān)癥狀后易將病原菌傳播給他人，從而造成疾病擴(kuò)散，對群眾的身心健康構(gòu)成威脅[9-10]。

針對活動性肺結(jié)核，痰涂片檢查仍為診斷金標(biāo)準(zhǔn)，但存在敏感度低、檢測周期長等不足。而HRCT為活動性肺結(jié)核常見的影像學(xué)檢查措施，在判斷患者的活動性與病理過程上相較平片更具優(yōu)勢。活動性肺結(jié)核具有多樣的HRCT表現(xiàn)，而明晰HRCT各種征象對CT總評分如何進(jìn)行干擾，能夠更為優(yōu)良地掌握該病的HRCT影像學(xué)特征，從而為臨床提供更為可靠的指導(dǎo)。而T-SPOT.TB屬一類新興的檢查手段，其是運用刺激物對CFP-10與ESAT-6兩種結(jié)核特異性抗原施行刺激，通過酶聯(lián)免疫斑點技術(shù)測定結(jié)核菌致敏T淋巴細(xì)胞，進(jìn)而作出診斷。T-SPOT.TB具有良好的特異性與敏感性，目前已廣泛應(yīng)用于肺結(jié)核的臨床診斷中。本研究結(jié)果顯示，T-SPOT.TB抗原孔A陰性的17例患者的HRCT征象評分均值為（12.96±1.58）分，而陽性的43例患者HRCT征象評分均值為（13.85±1.75）分，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。T-SPOT.TB抗原孔B陰性的15例患者的HRCT征象評分為（13.79±1.63）分，陽性的45例患者的HRCT征象評分均值為（14.22±1.89）分，無明顯差異（P>0.05）。分析原因在于T-SPOT.TB更多地是反映患者的T細(xì)胞免疫記憶狀態(tài)，而肺部CT更多地反映帶菌狀態(tài)，故無明顯差異。同時，在檢測活動性肺結(jié)核時，兩種檢查手段能夠相互補(bǔ)充，特別是在影像特征缺乏特異性時，T-SPOT.TB結(jié)果仍能夠為結(jié)核病的診斷提供參考信息。Spearman相關(guān)性分析顯示：T-SPOT.TB抗原孔A與HRCT征象評分呈正相關(guān)（P<0.05），T-SPOT.TB抗原孔B與HRCT征象評分呈正相關(guān)（P<0.05），表明T-SPOT.TB測定值與HRCT征象評分之間具有弱相關(guān)性。由此可知，T-SPOT.TB結(jié)果可能是多因素共同作用，而并非單一帶菌程度。

綜上所述，活動性肺結(jié)核患者T-SPOT.TB與HRCT征象之間存在一定的相關(guān)性，將其與肺部CT聯(lián)合應(yīng)用具有良好的互補(bǔ)性，有利于進(jìn)一步提高臨床診斷精準(zhǔn)性，從而為針對性治療提供更為可靠的指導(dǎo)。

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（收稿日期：2023-01-06）