乳腺癌組織中人表皮生長因子受體-2、雌激素受體、磷酸酶張力蛋白同源物的表達(dá)及其與臨床病理特征和預(yù)后的關(guān)系

黃曉玲，趙芳芳，陳香菊

（臨汾市中心醫(yī)院病理科，山西 臨汾 041000）

乳腺癌乳腺上皮細(xì)胞是在多種致癌因子作用下出現(xiàn)增殖失控而形成的惡性病變，是女性常見的惡性腫瘤類型之一，部分患者接受手術(shù)、放化療等治療后仍存在不良預(yù)后，因此臨床需尋找特異性與敏感性較高的指標(biāo)，評估患者病情的進展與預(yù)后情況。人表皮生長因子受體-2（HER-2）是細(xì)胞膜上的一種蛋白質(zhì)受體，其可以控制正常細(xì)胞的生長與分裂，與多種腫瘤的增殖、生長及轉(zhuǎn)移密切相關(guān)[1-2]。雌激素受體（ER）為基因調(diào)節(jié)蛋白，主要參與調(diào)節(jié)生長因子受體通路，可以通過其表達(dá)情況預(yù)測患者的預(yù)后[3-4]。磷酸酶張力蛋白同源物（PTEN）是一種抑癌基因，在細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)中均可表達(dá)， PTEN 與乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后密切相關(guān)[5-6]。本研究旨在探討乳腺癌組織中HER-2、 ER、 PTEN 的表達(dá)情況及其與臨床病理特征和預(yù)后的關(guān)系，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料回顧性分析2018 年1 月至2022 年1 月臨汾市中心醫(yī)院收治的225 例女性乳腺癌患者的臨床資料，收集其癌旁正常組織與浸潤性導(dǎo)管癌組織，將其分為正常組與癌化組。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《中國抗癌協(xié)會乳腺癌診治指南與規(guī)范（2015 版）》[7]中乳腺癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)者；②經(jīng)檢查腫瘤未發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移者；③未接受放化療或性激素類藥物治療者；④既往無乳腺癌或其他惡性腫瘤病史者等。排除標(biāo)準(zhǔn)：①臨床資料不完整者；②合并有結(jié)締組織疾病者；③妊娠期乳腺癌者等。本研究經(jīng)院內(nèi)醫(yī)學(xué)倫理委員會審核批準(zhǔn)。

1.2 檢測方法取所有患者乳腺癌手術(shù)切除病灶組織與癌旁正常組織，固定于10%中性福爾馬林，常規(guī)制作石蠟組織切片，厚4 μm，微波加熱進行抗原修復(fù)，梯度酒精脫水，滴入濃度為1∶300 的HER-2、ER、PTEN 第一抗體，4 ℃濕盒孵育過夜，而后滴加Envision 第二抗體，37 ℃濕盒孵育30 min。最后顯色、沖洗、復(fù)染、封片。HER-2 主要定位于細(xì)胞膜或細(xì)胞漿中，HER-2 表達(dá)判定：細(xì)胞無染色或染色細(xì)胞≤ 10%為0；細(xì)胞染色＞10%、呈不完整的微弱細(xì)胞膜染色為1+；細(xì)胞染色＞10%、呈不完整的中等強度細(xì)胞膜染色，或腫瘤染色＜10%、腫瘤呈完整的細(xì)胞膜染色為2+；細(xì)胞染色＞10%，呈完整的強度細(xì)胞膜染色為3+；HER-2 免疫組化2+者再行熒光原位雜交（FISH）檢測，F(xiàn)ISH 檢測無擴增為陰性，2+FISH 檢測擴增與3+均為陽性。ER 定位于細(xì)胞核內(nèi)，ER 的表達(dá)分為陽性、陰性和無法判讀，以1%為陽性界值， ≥ 1%的腫瘤細(xì)胞核任何強度著色時即判為陽性；在理想的內(nèi)外陽性對照前提下，＜1%的腫瘤細(xì)胞核著色時判為陰性；標(biāo)本中正常乳腺上皮細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞均無著色時，結(jié)果為無法判讀。 PTEN 定位于細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，陽性著色表達(dá)呈黃色、棕黃色、褐色；著色程度按照無色、淡黃色、棕黃色、棕褐色分別計0、1、2、3 分；陽性細(xì)胞所占比例＜5%計0 分，5% ≤ 陽性細(xì)胞所占比例＜25%計1 分， ≤ 25%陽性細(xì)胞所占比例＜50%計2 分，50% ≤ 陽性細(xì)胞所占比例＜75%計3 分，陽性細(xì)胞所占比例≥ 75%計4 分；兩積分之和≤ 3 分為陰性，＞3分為陽性[8]。

1.3 觀察指標(biāo)①比較正常組與癌化組組織中HER-2、ER、PTEN 的表達(dá)情況。②HER-2、ER、PTEN 表達(dá)與乳腺癌患者臨床病理特征（年齡、組織學(xué)分級、TNM 分期、神經(jīng)/脈管侵犯、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況）的關(guān)系。③所有患者均隨訪1 年，隨訪期間根據(jù)患者預(yù)后結(jié)果，將其分為生存組（202 例）與死亡組（23 例），比較不同預(yù)后患者腫瘤組織中HER-2、ER、PTEN 的表達(dá)。④將生存組和死亡組患者的一般資料進行單因素與多因素Logistic 回歸分析，篩選出影響乳腺癌患者預(yù)后生存的危險因素。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法應(yīng)用SPSS 22.0 統(tǒng)計學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)，計數(shù)資料以[ 例(%)] 表示，采用χ2檢驗；計量資料首先采用S-W 法檢驗，對于符合正態(tài)分布的計量資料以(±s)表示，采用t檢驗；危險因素分析采用多因素Logistic 回歸分析。以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 正常組與癌化組組織中HER-2、ER、PTEN 的表達(dá)差異正常組中HER-2 陽性和陰性表達(dá)率分別為15.11%（34/225）、84.89%（191/225），ER 陽性和陰性表達(dá)率分別為23.11%（52/225）、76.89%（173/225），PTEN 陽性和陰性表達(dá)率分別為69.78%（157/225）、30.22%（68/225）；癌化組HER-2 陽性和陰性表達(dá)率分別為80.00%（180/225）、20.00%（45/225），ER 陽性和陰性表達(dá)率分別為82.22%（185/225）、17.78%（40/225），PTEN 陽性和陰性表達(dá)率分別為33.78%（76/225）、66.22%（149/225），見圖1。與正常組比，癌化組HER-2 和ER 的陽性表達(dá)率及PTEN 陰性表達(dá)率均更高，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=189.930、157.684、58.394，均P＜0.05）。

圖1 癌化組組織中ER、HER-2 及PTEN 免疫組織化學(xué)染色圖片（×100）

2.2 HER-2、ER、PTEN 表達(dá)與患者臨床病理特征的關(guān)系HER-2、ER 陽性及PTEN 陰性患者中組織學(xué)分級為3 級、TNM 分期為Ⅲ+Ⅳ、神經(jīng)/脈管侵犯、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者占比分別高于HER-2、ER 陰性及PTEN 陽性患者，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05），見表1。

表1 HER-2、ER、PTEN 表達(dá)與乳腺癌患者臨床病理特征的關(guān)系[例(%)]

2.3 影響乳腺癌患者預(yù)后生存的單因素分析225 例患者均完成隨訪，隨訪期間根據(jù)患者預(yù)后結(jié)果，將其分為生存組（202 例）與死亡組（23 例），死亡率為10.22%。與生存組患者比，死亡組組織學(xué)分級3 級、TNM 分期Ⅲ+Ⅳ期、神經(jīng)/脈管侵犯、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、HER-2 陽性表達(dá)、ER陽性表達(dá)、PTEN 陰性表達(dá)的患者占比均更高，組織學(xué)分級1+2 級、TNM 分期Ⅰ+Ⅱ期占比均更低，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05），見表2。

表2 影響乳腺癌患者預(yù)后生存的單因素分析[例(%)]

2.4 影響乳腺癌患者預(yù)后生存的多因素Logistic 回歸分析將表2 中差異有統(tǒng)計學(xué)意義的因素納入多因素Logistic 回歸模型分析，結(jié)果顯示，組織學(xué)分級3 級、TNM 分期Ⅲ+ Ⅳ期、神經(jīng)/ 脈管侵犯、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、HER-2 陽性表達(dá)、ER 陽性表達(dá)、PTEN 陰性表達(dá)均為影響乳腺癌患者預(yù)后生存的危險因素，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（OR=1.672、1.863、1.866、1.548、1.471、1.704、1.525，均P＜0.05），見表3。

表3 影響乳腺癌患者預(yù)后生存的多因素Logistic 回歸分析

3 討論

隨著外科手術(shù)技術(shù)的進步，乳腺癌的臨床治療方法也不斷地改良、優(yōu)化，但部分患者預(yù)后效果仍不理想，亟需探尋更為可靠的指標(biāo)進行病情評估與療效預(yù)測[9-10]。

HER-2 在正常狀況下處于非激活狀態(tài)，而病理狀態(tài)下HER-2 過度表達(dá)提示患者預(yù)后較差，且腫瘤細(xì)胞的侵襲性會增加，因此其水平可判斷病情嚴(yán)重程度[11-12]。ER 陽性表達(dá)表示癌細(xì)胞的生長需依靠雌激素，其生長增殖與內(nèi)分泌因素調(diào)節(jié)相關(guān)，給予患者內(nèi)分泌治療可取得較好的預(yù)后效果[13-14]。PTEN 是抑癌基因，能夠抑制細(xì)胞增殖，促進細(xì)胞分化，在細(xì)胞周期調(diào)控中具有重要作用，是阻礙乳腺癌細(xì)胞增生活躍的重要因素，因此其水平能夠反映病情進展程度[15-16]。本研究中，與正常組比，癌化組HER-2、ER 陽性表達(dá)率，PTEN 陰性表達(dá)率均更高，HER-2、ER 陽性組織學(xué)分級為3 級、TNM 分期為Ⅲ+Ⅳ、神經(jīng)/脈管侵犯、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者占比高于HER-2、ER 陰性患者；PTEN 陽性組患者織學(xué)分級為3 級、TNM 分期為Ⅲ+Ⅳ、神經(jīng)/脈管侵犯、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均低于PTEN 陰性患者，表明乳腺癌組織中HER-2、ER 蛋白呈高表達(dá)狀態(tài)，PTEN 蛋白呈低表達(dá)狀態(tài)，并且與患者的臨床病理資料具有一定的相關(guān)性。HER-2 與ER 蛋白陽性表達(dá)越高則提示乳腺癌患者腫瘤分化程度越高，轉(zhuǎn)移風(fēng)險越大；組織學(xué)分級3 級屬于高級別腫瘤，患者病情進展快速，極易出現(xiàn)癌細(xì)胞的淋巴結(jié)或遠(yuǎn)處器官組織轉(zhuǎn)移；TNM 分期Ⅲ+Ⅳ期屬于中晚期、晚期，癌細(xì)胞已出現(xiàn)一定轉(zhuǎn)移；浸潤性導(dǎo)管癌的轉(zhuǎn)移速度較快，侵襲性較強，一旦出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移或神經(jīng)/脈管侵犯，臨床治療困難程度會增加，會對患者預(yù)后造成不良影響，與蔡冰等[17]及霍翔等[18]研究結(jié)果較為一致。本研究中，經(jīng)單因素與多因素Logistic 回歸分析顯示，組織學(xué)分級3 級、TNM 分期Ⅲ+Ⅳ期、神經(jīng)/脈管侵犯、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、HER-2陽性、ER 陽性、PTEN 陰性均為影響乳腺癌患者預(yù)后生存的危險因素，提示乳腺癌患者HER-2、ER、PTEN 的表達(dá)情況與病情進展與預(yù)后具有相關(guān)性。該結(jié)果與賀新等[19]、張國平等[20]研究結(jié)果較為一致。

綜上，乳腺癌組織中HER-2、ER 高表達(dá)，PTEN 低表達(dá)，乳腺癌組織學(xué)分級、TNM 分期、神經(jīng)/脈管侵犯、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與乳腺癌組織中HER-2、ER、PTEN 的表達(dá)均具有相關(guān)性，組織學(xué)分級3 級、TNM 分期Ⅲ+Ⅳ期、神經(jīng)/脈管侵犯、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、HER-2 陽性、ER 陽性、PTEN陰性均為乳腺癌患者預(yù)后生存的危險因素，進行乳腺癌組織HER-2、ER、PTEN 的檢測能夠為乳腺癌的診治與預(yù)后提供一定參考依據(jù)，建議臨床進一步研究。