甲狀腺癌血清let-7e、DKK-1 及TSGF 的表達(dá)及與疾病嚴(yán)重程度的關(guān)系

凌云志 沈益青

甲狀腺癌是臨床常見的惡性腫瘤之一，臨床無(wú)明顯癥狀，多數(shù)患者是在體檢時(shí)通過甲狀腺觸診發(fā)現(xiàn)甲狀腺小腫塊。甲狀腺癌發(fā)病率較高，占全身惡性腫瘤的1%～5%，且以每年4%的速度增加，已成為困擾我國(guó)居民健康的重要問題［1-2］。甲狀腺癌可依據(jù)組織學(xué)分為分化型、未分化型，其中分化型甲狀腺癌預(yù)后較好。目前臨床多使用超聲檢查診斷甲狀腺癌，但超聲檢查診斷標(biāo)準(zhǔn)不統(tǒng)一，易被漏診和誤診，因此尋找其他無(wú)創(chuàng)、簡(jiǎn)單鑒別疾病的方法具有重要意義［3］。血清線性能量傳遞7e（low energy transfer-7e，let-7e）可促進(jìn)癌細(xì)胞增殖、體外血管生成和腫瘤生長(zhǎng)，研究顯示，let-7e在多種惡性腫瘤中表達(dá)較低［4］。Dick-kopfx 相關(guān)蛋白-1（Recombinant Dickkopf Related Protein 1，DKK-1）是Wnt 信號(hào)通路相關(guān)因子，可加劇氧化應(yīng)激性障礙，通過旁分泌和自分泌參與腫瘤的增殖和轉(zhuǎn)移。腫瘤特異性生長(zhǎng)因子（Tumor Supplied Group of Factors，TSGF）是一種腫瘤標(biāo)記物，參與多種惡性腫瘤的血管增生，對(duì)血管網(wǎng)形成起重要作用［5］。本研究旨在探討血清let-7e、DKK-1及TSGF 在甲狀腺癌中的表達(dá)，并分析其與疾病嚴(yán)重程度的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2019 年6 月至2022 年1 月于民航上海醫(yī)院進(jìn)行治療的165 例甲狀腺癌患者設(shè)為病例組，其中男49 例，女116 例，年齡平均（43.56±3.56）歲，體質(zhì)量平均（23.22±0.36）kg/m2。其中乳頭狀癌82 例，濾泡癌39 例，髓樣癌44 例；預(yù)后不良（腫瘤遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移或死亡）23 例，預(yù)后良好（影像學(xué)檢查提示無(wú)病變征象）142 例［6］；根據(jù)TNM 分期［7］分為Ⅰ+Ⅱ期124 例、Ⅲ期27 例、Ⅳ期14 例。選擇同期在本院進(jìn)行檢查的100 名健康人為對(duì)照組（排除甲狀腺手術(shù)史、妊娠、哺乳及不同意參加研究者），其中男31 例，女69 例，年齡平均（43.47±3.48）歲，體質(zhì)量平均（23.31±0.37）kg/m2。兩組一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），研究已獲得本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)實(shí)施。

病例組納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《甲狀腺癌診療規(guī)范》［8］診斷標(biāo)準(zhǔn)；②首次確診；③患者或家屬簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①頸部感染性疾??；②其他甲狀腺疾病者；③甲狀腺手術(shù)史；④合并其他感染者。

1.2 方法

抽取所有受試者入組后第1 d 空腹靜脈血5 mL，3 000 r/min，半徑10 cm，離心10 min，提取上層血清后置入EP 管，并置于冷凍箱內(nèi)儲(chǔ)存以備檢測(cè)，使用酶聯(lián)免疫吸附法對(duì)血清let-7e、DKK-1 及TSGF 進(jìn)行檢測(cè)，試劑盒購(gòu)于英國(guó)Abcam 公司，儀器均使用東芝GA800 生化分析儀。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 24.0 統(tǒng)計(jì)軟件包處理數(shù)據(jù)，計(jì)量資料用（±s）表示，行t檢驗(yàn)，多組比較采用方差分析，相關(guān)性分析使用Spearman 相關(guān)系數(shù)，以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清let-7e、DKK-1及TSGF表達(dá)水平比較

病例組血清let-7e 低于對(duì)照組，DKK-1 及TSGF 表達(dá)水平高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表1 兩組血清let-7e、DKK-1 及TSGF 表達(dá)水平比較（±s）Table 1 Comparison of serum let-7e，DKK-1 and TSGF expression levels between the two groups（±s）

表1 兩組血清let-7e、DKK-1 及TSGF 表達(dá)水平比較（±s）Table 1 Comparison of serum let-7e，DKK-1 and TSGF expression levels between the two groups（±s）

2.2 病例組不同臨床分期血清let-7e、DKK-1 及TSGF 表達(dá)水平比較

血清let-7e 水平：Ⅰ+Ⅱ期＞Ⅲ期＞Ⅳ期，DKK-1及TSGF 水平：Ⅰ+Ⅱ期＜Ⅲ期＜Ⅳ期，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表2 病例組不同臨床分期血清let-7e、DKK-1 及TSGF表達(dá)水平比較（±s）Table 2 Comparison of serum let-7e，DKK-1 and TSGF expression levels at different clinical stages in case group（±s）

表2 病例組不同臨床分期血清let-7e、DKK-1 及TSGF表達(dá)水平比較（±s）Table 2 Comparison of serum let-7e，DKK-1 and TSGF expression levels at different clinical stages in case group（±s）

注：與Ⅰ+Ⅱ期比較，a P＜0.05，與Ⅲ期比較，bP＜0.05。

2.3 不同組織學(xué)類型血清let-7e、DKK-1 及TSGF表達(dá)水平比較

不同組織學(xué)類型之間血清let-7e、DKK-1 及TSGF 表達(dá)水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表3。

表3 不同組織學(xué)類型血清let-7e、DKK-1 及TSGF 表達(dá)水平比較（±s）Table 3 Comparison of serum let-7e，DKK-1 and TSGF expression levels among different histological types（±s）

表3 不同組織學(xué)類型血清let-7e、DKK-1 及TSGF 表達(dá)水平比較（±s）Table 3 Comparison of serum let-7e，DKK-1 and TSGF expression levels among different histological types（±s）

2.4 不同預(yù)后血清let-7e、DKK-1 及TSGF 表達(dá)水平比較

預(yù)后良好患者血清let-7e 顯著高于預(yù)后不良患者，DKK-1 及TSGF 表達(dá)水平顯著低于預(yù)后不良患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表4。

表4 不同預(yù)后血清let-7e、DKK-1 及TSGF 表達(dá)水平比較（±s）Table 4 Comparison of serum let-7e，DKK-1 and TSGF expression levels in different prognosis（±s）

表4 不同預(yù)后血清let-7e、DKK-1 及TSGF 表達(dá)水平比較（±s）Table 4 Comparison of serum let-7e，DKK-1 and TSGF expression levels in different prognosis（±s）

2.5 血清let-7e、DKK-1 及TSGF 與甲狀腺癌患者病情程度的相關(guān)性分析

相關(guān)性分析結(jié)果顯示，血清let-7e 和病情程度之間呈負(fù)相關(guān)，血清DKK-1 及TSGF 和病情程度之間呈正相關(guān)（P＜0.05）。見表5。

表5 血清let-7e、DKK-1 及TSGF 與甲狀腺癌患者病情程度的相關(guān)性分析Table 5 Correlation analysis between serum let-7e，DKK-1 and TSGF and the severity of thyroid cancer patients

3 討論

甲狀腺癌是一種起源于甲狀腺濾泡上皮的惡性腫瘤，是頭頸部最為常見的惡性腫瘤，可侵犯周圍組織，發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移或腺內(nèi)擴(kuò)散，嚴(yán)重威脅患者生命［9］。甲狀腺癌的發(fā)病機(jī)制比較復(fù)雜，研究表明可能與遺傳、碘攝入量、雌激素水平及其他甲狀腺疾病有關(guān)［10］。因此，尋找與疾病相關(guān)的指標(biāo)并對(duì)疾病進(jìn)行早期預(yù)測(cè)有重要意義。近年來(lái)隨著生物技術(shù)的進(jìn)步，分子標(biāo)記在甲狀腺癌分化中的作用引起了臨床的重視［11］。

miRNA 是一類短鏈非編碼RNA，可參與調(diào)控甲狀腺癌進(jìn)展［12］。血清let-7e 是由22 個(gè)核苷酸組成的，參與胚胎發(fā)育、干細(xì)胞分化、腫瘤發(fā)生等多種病理過程，研究證實(shí)let-7e 被抑制能增加促炎細(xì)胞因子表達(dá)，加劇炎癥反應(yīng)［13］。本研究結(jié)果顯示，甲狀腺癌患者血清let-7e 較健康人更低，且隨著疾病的加重而降低，不同組織學(xué)類型之間血清let-7e 表達(dá)水平無(wú)明顯差異。周偉清［14］等研究也顯示，let-7e 可抑制細(xì)胞增殖、侵襲、遷移和促進(jìn)細(xì)胞凋亡，在甲狀腺癌患者中血清let-7e 水平低于健康人，能促進(jìn)癌細(xì)胞增殖、腫瘤生長(zhǎng)，與甲狀腺癌發(fā)生有關(guān)，但關(guān)于其是如何參與甲狀腺癌發(fā)生的目前尚無(wú)定論。DKK-1 是一種抑制骨形成過程相關(guān)通路的關(guān)鍵性因子，含有1 個(gè)信號(hào)肽序列和2 段富含半胱氨酸的保守結(jié)構(gòu)域，能通過提高炎癥性因子增加心肌細(xì)胞線粒體損傷，對(duì)細(xì)胞的分化、增殖、凋亡和遷移有重要作用［15］。本研究結(jié)果與文獻(xiàn)［16］報(bào)道血清DKK-1表達(dá)水平對(duì)胃癌的診斷效能結(jié)果接近。

TSGF 是一種腫瘤標(biāo)記物，與惡性腫瘤有關(guān)，可促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)和周圍血管增殖，其異常變化可以反映組織腫瘤的進(jìn)展。本研究結(jié)果顯示，甲狀腺癌患者血清TSGF 高于健康人群，且Ⅰ+Ⅱ期＜Ⅲ期＜Ⅳ期，預(yù)后良好患者血清TSGF 顯著低于預(yù)后不良。提示，TSGF 在甲狀腺癌中表達(dá)異常升高，可作為惡性腫瘤診斷的指標(biāo)。分析其原因可能是，甲狀腺癌的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移需要新生血管，而TSGF 可參與血管內(nèi)皮細(xì)胞的信號(hào)通路，加速腫瘤組織增殖，促進(jìn)血管網(wǎng)絡(luò)的形成，在惡性腫瘤的發(fā)展中TSGF 隨腫瘤細(xì)胞分化釋放進(jìn)入血液，從而導(dǎo)致其水平升高。王珊珊等［17］研究也顯示，TSGF 在甲狀腺癌中表達(dá)異常，可成為惡性腫瘤早期重要的診斷指標(biāo)，與本研究結(jié)果相似。進(jìn)一步相關(guān)性分析顯示，血清let-7e 和病情程度之間呈負(fù)相關(guān)，血清DKK-1 及TSGF 和病情程度之間呈正相關(guān)。TSGF 與多種腫瘤的增殖、侵襲等有關(guān)，能促進(jìn)血管網(wǎng)形成，加速淋巴管的生成，當(dāng)發(fā)生甲狀腺癌時(shí)其水平異常升高，同時(shí)隨病情嚴(yán)重程度而升高。

綜上所述，血清let-7e、DKK-1 及TSGF 在甲狀腺癌患者表達(dá)異常，與疾病嚴(yán)重程度之間關(guān)系密切，對(duì)于病情控制具有重要臨床意義。