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    外周血紅細(xì)胞微粒及內(nèi)皮細(xì)胞微粒水平與頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊易損性的關(guān)系▲

    2023-09-07 04:56:40李偉峰劉惠欽范月輝李獻(xiàn)軍郭春保
    廣西醫(yī)學(xué) 2023年13期
    關(guān)鍵詞:易損易損性微粒

    李偉峰 劉惠欽 范月輝 李獻(xiàn)軍 梁 潔 郭春保

    (1 石家莊市人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科四病區(qū),河北省石家莊市 050000;2 三峽大學(xué)第三臨床醫(yī)學(xué)院·國(guó)藥葛洲壩中心醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科,湖北省宜昌市 443002)

    腦血管疾病是指腦血管病變所致的腦組織壞死或功能喪失的一類疾病,其具有較高的致殘率及病死率,且其發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)[1-3]。Zhou等[4]的研究顯示,2017年腦卒中在我國(guó)疾病的死亡原因居于首位,也是導(dǎo)致我國(guó)社會(huì)負(fù)擔(dān)的主要原因。頸動(dòng)脈粥樣硬化是導(dǎo)致缺血性腦卒中發(fā)生的主要危險(xiǎn)因素之一,而缺血性腦卒中的發(fā)生主要取決于頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的性質(zhì)[5-7]。因此,早期識(shí)別易損斑塊對(duì)于預(yù)測(cè)缺血性腦卒中具有重要的臨床意義。既往研究表明,紅細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、單核細(xì)胞的微粒在頸動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生和發(fā)展中發(fā)揮著關(guān)鍵的作用[8]。內(nèi)皮細(xì)胞微粒(endothelial microparticles,EMPs)水平可反映內(nèi)皮細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能[9]。還有研究顯示,冠心病患者紅細(xì)胞微粒(red blood cell microparticles,RMPs)水平高于非冠心病患者,RMPs水平的上升可縮短血栓形成的時(shí)間,進(jìn)而促進(jìn)血栓的形成[10]?;诖?本研究探討外周血RMPs及EMPs水平與頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊易損性的相關(guān)性,旨在為評(píng)估頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的易損性,進(jìn)而預(yù)防缺血性腦卒中的發(fā)生提供依據(jù)。

    1 資料與方法

    1.1 臨床資料 回顧性分析2017年1月至2020年1月石家莊市人民醫(yī)院收治的227例頸動(dòng)脈粥樣硬化性狹窄患者的臨床資料。納入標(biāo)準(zhǔn):(1)符合《頸動(dòng)脈狹窄診治指南》中關(guān)于頸動(dòng)脈粥樣硬化性狹窄的診斷標(biāo)準(zhǔn)[11],單側(cè)發(fā)病;(2)符合頸動(dòng)脈支架術(shù)治療指征,并行手術(shù)治療;(3)年齡≥18歲;(4)首次發(fā)病,既往無腦卒中史;(5)于發(fā)病7 d內(nèi)住院;(6)患者及其家屬知情且同意。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)合并非缺血性腦卒中或其他腦血管疾病;(2)合并其他嚴(yán)重疾病;(3)近3個(gè)月內(nèi)使用抗生素、激素、免疫抑制劑等可能影響研究結(jié)果的藥物者;(4)依從性差者。本研究已通過石家莊市人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

    1.2 研究方法

    1.2.1 收集資料:收集研究對(duì)象一般資料,包括性別、年齡、體質(zhì)指數(shù)、吸煙史(每天吸煙1支以上且持續(xù)半年為有吸煙史)、飲酒史(每個(gè)月至少飲酒1次且連續(xù)飲酒半年即為有飲酒史)、高血壓史、糖尿病史、高脂血癥史,以及收縮壓、舒張壓、空腹血糖、總膽固醇、三酰甘油、HDL、LDL檢測(cè)結(jié)果。

    1.2.2 頸動(dòng)脈狹窄程度及斑塊性質(zhì)的評(píng)估:(1)采用彩色多普勒超聲診斷儀(Philips公司, 型號(hào):CX50)的3 MHz~12 MHz線陣探頭及1 MHz~5 MHz凸陣探頭對(duì)患者的頸動(dòng)脈狹窄程度進(jìn)行檢查。囑患者平臥、頭略偏向?qū)?cè),充分暴露頸部后由近心端至遠(yuǎn)心端掃查雙側(cè)頸總動(dòng)脈、頸內(nèi)動(dòng)脈的縱斷切面及橫斷切面。分別用二維灰階顯像觀察血管的形態(tài)學(xué)改變,以及管壁有無斑塊和斑塊的大小、位置、形態(tài)、超聲聲像學(xué)特征。計(jì)算頸動(dòng)脈狹窄率,頸動(dòng)脈狹窄率(%)=(狹窄遠(yuǎn)端正常直徑-狹窄端最窄內(nèi)徑)/狹窄遠(yuǎn)端正常直徑×100%[11]。(2)采用造影機(jī)(Philips公司,型號(hào):FD20型)對(duì)斑塊性質(zhì)進(jìn)行檢查,采用Seldinger技術(shù)穿刺右股動(dòng)脈,用6F豬尾導(dǎo)管行主動(dòng)脈弓部非選擇性頸動(dòng)脈造影,再用6F-JR4導(dǎo)管行雙側(cè)頸動(dòng)脈造影[12]。其中0級(jí)為斑塊內(nèi)無比對(duì)劑進(jìn)入;1級(jí)為斑塊內(nèi)有少量比對(duì)劑進(jìn)入;2級(jí)為斑塊內(nèi)有中量比對(duì)劑進(jìn)入;3級(jí)為斑塊內(nèi)有大量比對(duì)劑進(jìn)入。其中2~3級(jí)為易損性斑塊,0~1級(jí)為穩(wěn)定斑塊。根據(jù)頸動(dòng)脈超聲造影結(jié)果將患者分為穩(wěn)定斑塊組(71例)和易損斑塊組(156例)。

    1.2.3 外周血RMPs及EMPs水平檢測(cè):治療前,采集患者外周血5 mL,以3 000 r/min離心5 min后取上清液,再在4 ℃條件下以6 500 r/min離心10 min,獲得貧血小板血漿,將貧血小板血漿懸浮到PBS中,制成懸液。將懸液放入流式細(xì)胞儀(Beckman Coulter Life Science公司,型號(hào):EPICS-XL)以檢測(cè)外周血RMPs和EMPs水平,檢測(cè)試劑盒購(gòu)于廣州銳博生物技術(shù)有限公司(批號(hào):20161125、20170034)。

    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 22.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)量資料以(x±s)表示,組間比較采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以例數(shù)(百分比)表示,組間比較采用χ2檢驗(yàn);采用Spearman法進(jìn)行相關(guān)性分析;采用多因素Logistic回歸模型分析頸動(dòng)脈易損斑塊形成的影響因素;繪制受試者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲線分析外周血RMPs、EMPs水平評(píng)估頸動(dòng)脈易損斑塊形成的效能。以P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié) 果

    2.1 穩(wěn)定斑塊組和易損斑塊組患者一般資料的比較 易損斑塊組的男性比例、年齡、收縮壓、舒張壓均大于或高于穩(wěn)定斑塊組(均P<0.05),兩組其他臨床資料差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)。見表1。

    表1 穩(wěn)定斑塊組和易損斑塊組患者一般資料的比較

    2.2 穩(wěn)定斑塊組和易損斑塊組患者外周血RMPs及EMPs水平的比較 易損斑塊組患者外周血RMPs及EMPs水平均高于穩(wěn)定斑塊組(均P<0.05)。見表2。

    表2 穩(wěn)定斑塊組和易損斑塊組患者外周血RMPs及EMPs水平的比較(x±s,%)

    2.3 頸動(dòng)脈易損斑塊形成影響因素的多因素分析 以頸動(dòng)脈易損斑塊形成情況為因變量(頸動(dòng)脈易損斑塊形成:是=1,否=0),將2.1和2.2的指標(biāo)作為自變量(賦值:男性=1,女性=0;年齡≥67.8歲=1,年齡<67.8歲=0;收縮壓≥145.96 mmHg=1,收縮壓<145.96 mmHg=0;舒張壓≥87.22 mmHg=1,舒張壓<87.22 mmHg=0;外周血RMPs水平≥68.49%=1,外周血RMPs水平<68.49%=0;外周血EMPs水平≥73.18%=1,外周血EMPs水平<73.18%=0。年齡、收縮壓、舒張壓、外周血RMPs和EMPs水平均以易損斑塊組的平均值作為界定值),進(jìn)行多因素Logistic回歸分析。結(jié)果顯示,男性是頸動(dòng)脈易損斑塊形成的危險(xiǎn)因素(P<0.05)。見表3。

    表3 多因素Logistic回歸分析結(jié)果

    2.4 外周血RMPs、EMPs水平與頸動(dòng)脈狹窄率及頸動(dòng)脈超聲造影分級(jí)的相關(guān)性 頸動(dòng)脈粥樣硬化性狹窄患者的外周血RMPs、EMPs水平與頸動(dòng)脈狹窄率及頸動(dòng)脈超聲造影分級(jí)均呈正相關(guān)(均P<0.05)。見表4。

    表4 相關(guān)性分析結(jié)果

    2.5 外周血RMPs及EMPs水平評(píng)估頸動(dòng)脈易損斑塊形成的價(jià)值 RMPs最佳截?cái)嘀禐?9.66%時(shí),其評(píng)估頸動(dòng)脈易損斑塊形成的曲線下面積(area under the curve,AUC)為0.827;EMPs最佳截?cái)嘀禐?1.35%時(shí),其評(píng)估頸動(dòng)脈易損斑塊形成的AUC為0.836;兩者聯(lián)合評(píng)估頸動(dòng)脈易損斑塊形成的AUC為0.903,且聯(lián)合評(píng)估的AUC大于RMPs和EMPs單獨(dú)評(píng)估的AUC(z=9.144、10.268,均P<0.001)。見表5和圖1。

    表5 外周血RMPs及EMPs水平評(píng)估頸動(dòng)脈易損性斑塊形成的效能

    圖1 外周血RMPs及EMPs水平評(píng)估頸動(dòng)脈易損斑塊形成的ROC曲線圖

    3 討 論

    研究表明,頸動(dòng)脈粥樣硬化是腦卒中發(fā)生和發(fā)展的病理基礎(chǔ),而相較于穩(wěn)定斑塊,易損斑塊的纖維帽更薄,且脂質(zhì)核心大,引起的炎癥反應(yīng)也更為嚴(yán)重,因此易損斑塊破裂的風(fēng)險(xiǎn)更高,其可導(dǎo)致血栓栓塞的發(fā)生率升高[13],且與缺血性腦卒中關(guān)系更密切[14]。已有研究表明,血液中的纖維因子、炎癥因子、抗凝物質(zhì)等在動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生過程中起著重要作用[15]。微粒主要以出芽的形式從紅細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞等細(xì)胞釋放至細(xì)胞外基質(zhì),微粒內(nèi)包含來源于細(xì)胞的蛋白質(zhì)、RNA、脂蛋白等的物質(zhì)。研究表明,微粒與炎癥反應(yīng)、免疫功能、血管功能等密切相關(guān),其通過微粒表面蛋白的傳遞而完成細(xì)胞間交流[16]。已有研究發(fā)現(xiàn),微粒具有促炎、激活凝血等作用,是動(dòng)脈粥樣硬化所致缺血性腦血管疾病發(fā)生的主要原因,一些學(xué)者認(rèn)為微??勺鳛樵\斷心腦血管疾病的生物學(xué)標(biāo)志物[17]。

    受到細(xì)胞膜氧化、損傷等刺激后,紅細(xì)胞可通過胞吐的形式形成微粒。研究發(fā)現(xiàn),在心血管疾病進(jìn)展過程中,RMPs水平顯著上升,且其水平的變化可反映細(xì)胞凋亡或活化狀態(tài),從而間接反映血管損傷情況[18]。Giannopoulos等[19]發(fā)現(xiàn),相較于正常健康人群,接受經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入術(shù)治療的急性ST段抬高型心肌梗死患者外周血RMPs水平顯著上升,且其水平與患者預(yù)后密切相關(guān)。本研究結(jié)果顯示,相較于穩(wěn)定斑塊組患者,易損斑塊組患者的外周血RMPs水平更高,且頸動(dòng)脈粥樣硬化性狹窄患者外周血RMPs水平與頸動(dòng)脈狹窄率及頸動(dòng)脈超聲造影分級(jí)均呈正相關(guān)(P<0.05),這提示外周血RMPs水平越高,頸動(dòng)脈粥樣硬化性狹窄患者更易出現(xiàn)易損斑塊,其病情也更為嚴(yán)重。

    既往研究證實(shí),內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙與心血管疾病的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān),EMPs是心血管疾病、血栓形成的關(guān)鍵因素[20]。研究表明,EMPs表面攜帶的磷脂酰絲氨酸可促進(jìn)纖維蛋白原轉(zhuǎn)化為纖維蛋白凝塊,進(jìn)而促進(jìn)細(xì)胞黏附,增加動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)[21]。此外,EMPs還可與一氧化氮反應(yīng),促進(jìn)一氧化氮的清除,加重內(nèi)皮細(xì)胞的炎癥反應(yīng),進(jìn)而通過氧化LDL促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生。本研究結(jié)果顯示,易損斑塊組患者的外周血EMPs水平高于穩(wěn)定斑塊組患者,且其水平與頸動(dòng)脈狹窄率及頸動(dòng)脈超聲造影分級(jí)呈正相關(guān)(P<0.05)。因此,對(duì)于EMPs水平越高的頸動(dòng)脈粥樣硬化性狹窄患者,更應(yīng)警惕易損斑塊的形成。

    為進(jìn)一步探討外周血RMPs、EMPs水平評(píng)估頸動(dòng)脈易損斑塊形成的效能,本研究采用ROC曲線進(jìn)行分析,結(jié)果顯示,RMPs最佳截?cái)嘀禐?9.66%時(shí),其評(píng)估易損斑塊形成的AUC為0.827,EMPs最佳截?cái)嘀禐?1.35%時(shí),其評(píng)估易損斑塊形成的AUC為0.836,提示上述兩個(gè)指標(biāo)在評(píng)估頸動(dòng)脈粥樣硬化性斑塊易損性中均具有一定的效能。此外,兩者聯(lián)合評(píng)估的AUC為0.903,高于單一指標(biāo)的AUC,說明聯(lián)合評(píng)估的效能更高。在臨床工作中,可通過檢測(cè)頸動(dòng)脈粥樣硬化性狹窄患者外周血RMPs、EMPs水平以評(píng)估其斑塊的性質(zhì),及時(shí)干預(yù)從而降低缺血性腦卒中的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。本研究的單因素分析結(jié)果顯示,易損斑塊組的男性比例、年齡、收縮壓、舒張壓,以及外周血RMPs水平、EMPs水平均大于或高于穩(wěn)定斑塊組,但多因素Logistic回歸分析結(jié)果顯示,只有男性是頸動(dòng)脈易損斑塊形成的危險(xiǎn)因素,而外周血RMPs與EMPs水平并不是頸動(dòng)脈易損斑塊發(fā)生的影響因素。原因可能是本研究樣本量較小,結(jié)果存在偏倚,故相關(guān)結(jié)果仍需進(jìn)一步研究的驗(yàn)證。

    綜上所述,與存在穩(wěn)定斑塊的患者相比,存在易損斑塊的頸動(dòng)脈粥樣硬化性狹窄患者外周血RMPs及EMPs水平更高,兩者與患者頸動(dòng)脈狹窄程度及斑塊易損性相關(guān),聯(lián)合檢測(cè)RMPs及EMPs水平在評(píng)估頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊易損性中具有一定的臨床價(jià)值。但本研究也存在以下不足:(1)本研究為單中心研究,樣本量較小,結(jié)果可能存在偏倚;(2)未對(duì)患者進(jìn)行隨訪以分析外周血RMPs及EMPs水平在評(píng)估患者預(yù)后中的臨床價(jià)值。因此,今后仍需深入研究以進(jìn)一步探討。

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