HBV-DNA檢測(cè)及血液細(xì)胞分析在肝炎性肝硬化治療效果評(píng)價(jià)中應(yīng)用

王 華 牛 琰 趙瑞敏 宋予娟

1.河南省新鄉(xiāng)市第一人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科(河南 新鄉(xiāng) 453000)

2.河南省新鄉(xiāng)市第一人民醫(yī)院消化科(河南 新鄉(xiāng) 453000)

肝炎性肝硬化是肝硬化的主要類型之一，是由于肝炎(甲肝、乙肝、丙肝等)病情發(fā)展所導(dǎo)致[1]。肝臟炎癥反應(yīng)、肝炎病毒的持續(xù)復(fù)制所致的肝臟損傷是肝硬化不斷進(jìn)展的重要原因[2-3]。肝炎性肝硬化在發(fā)病早期無明顯臨床癥狀，隨著病情的加重，患者會(huì)出現(xiàn)肝腹水、肝性腦病等并發(fā)癥，具有一定的死亡率。藥物治療為肝炎性肝硬化患者的主要治療方法，恩替卡韋(Entecavir，ETV)是當(dāng)前抗肝炎病毒的主要治療藥物[4]。但是也有部分患者在使用恩替卡韋治療后，臨床癥狀與肝臟纖維化的改善并不明顯，也容易出現(xiàn)復(fù)發(fā)，為此加強(qiáng)早期療效評(píng)價(jià)極為重要[5]。隨著對(duì)乙肝病毒血清學(xué)研究的不斷深入，乙型肝炎病毒(HBV)-DNA 載量的變化和其所引起的生物學(xué)得到了廣泛重視。血細(xì)胞分析是臨床最常用、最基本的臨床檢驗(yàn)診斷指標(biāo)與預(yù)后判斷指標(biāo)，主要包括紅細(xì)胞(RBC)、血小板(PLT)、白細(xì)胞(WBC)、血紅蛋白(Hb)等[6]。本文具體探討與分析了HBV-DNA檢測(cè)及血液細(xì)胞分析在肝炎性肝硬化治療效果評(píng)價(jià)中應(yīng)用價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選擇2019年2月到2022年1月在本院診治的137例肝炎性肝硬化患者作為研究對(duì)象。

納入標(biāo)準(zhǔn)：符合乙肝炎性肝硬化的診斷標(biāo)準(zhǔn)；病原學(xué)明確的HBV感染；肝臟超聲提示肝硬化；年齡20-80歲；具有藥物治療的指征；依從性好；臨床與隨訪資料完整；患者病情穩(wěn)定，自愿參與本研究；本研究得到了醫(yī)院倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)；檢測(cè)前未接受任何疫抑制劑治療及抗病毒治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：肝硬化由酒精、藥物等引起者；合并高危呼吸道傳染性疾病者；特異性或過敏性體質(zhì)者；妊娠期和哺乳期女性；合并惡性腫瘤、自身免疫性疾病者；有吸毒或酗酒史；小學(xué)及其以下文化程度者；患有精神病或無法控制的癲癇病者；丙肝病毒、丁肝、戊肝病毒者。

1.2 治療方法所有患者都給予恩替卡韋治療，每次口服恩替卡韋(國藥準(zhǔn)字H20052237，中美上海施貴寶制藥有限公司生產(chǎn))0.5mg，1次/d，持續(xù)治療觀察3個(gè)月。

1.3 觀察指標(biāo)(1)所有患者在治療前采集患者的血液樣本5mL左右，用肝素進(jìn)行抗凝處理30min，2000rpm/min離心10min。取下層組織提取總核酸，然后采用HBV-DNA試劑(上海之江生物有限公司)檢測(cè)HBV-DNA 含量。(2)取上述血液樣本，促凝后2000rpm/min離心10min，取上層血清保存于-20.0℃冰箱。貝克曼AU5800生化分析儀檢測(cè)血清TBiL、DBiL、堿性磷酸酶(ALP)、谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(GGT )含量。(3)取上述血液樣本，采用邁瑞B(yǎng)C-6000血液分析儀測(cè)定與記錄紅細(xì)胞、血小板、白細(xì)胞、血紅蛋白等指標(biāo)。(4)療效判定：在治療后對(duì)患者的治療有效情況進(jìn)行判定，有效標(biāo)準(zhǔn)：臨床癥狀消失，肝功能恢復(fù)正常，肝纖維化指標(biāo)恢復(fù)至正常水平。同時(shí)調(diào)查所有患者的性別、年齡、體重指數(shù)、病程、肝功能分級(jí)、血壓等一般資料。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法采用SPSS 21.0軟件，計(jì)量資料描述為(±s)，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，進(jìn)行t檢驗(yàn)。而所有的計(jì)數(shù)資料以率(n%)表示，用卡方χ2檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用Spearsman分析，檢驗(yàn)水準(zhǔn)為α=0.05。

2 結(jié) 果

2.1 治療效果所有患者治療觀察3個(gè)月，有效患者107例，有效率為78.1%。

2.2 一般資料對(duì)比有效患者的一般資料與無效患者對(duì)比無明顯差異(P＞0.05)。見表1。

表1 有效患者與無效患者的一般資料對(duì)比

2.2 血液細(xì)胞分析指標(biāo)對(duì)比有效組的紅細(xì)胞、血小板、白細(xì)胞、血紅蛋白等血液細(xì)胞分析指標(biāo)都明顯高于無效組(P＜0.05)。見表2。

表2 兩組血液細(xì)胞分析指標(biāo)對(duì)比

2.3 HBV-DNA載量對(duì)比 有效組的HBV-DNA載量明顯少于無效組(P＜0.05)，血清TBiL、DBiL、ALP、GGT含量明顯低于無效組(P＜0.05)。見表3。

表3 兩組HBV-DNA載量對(duì)比

2.4 相關(guān)性分析在137例患者中，Spearsman分析顯示紅細(xì)胞、血小板、白細(xì)胞、血紅蛋白、HBV-DNA載量都與患者預(yù)后有效呈現(xiàn)相關(guān)性(P＜0.05)。見表4。

表4 肝炎性肝硬化治療效果與HBV-DNA檢測(cè)、血液細(xì)胞分析指標(biāo)的相關(guān)性(n=137)

3 討 論

流行病學(xué)調(diào)查顯示，肝炎性肝硬化尤其是乙肝肝硬化的每年發(fā)病率都呈現(xiàn)增長的趨勢(shì)。而我國乙肝肝硬化的發(fā)病率和死亡率均遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其他國家，臨床研究證實(shí)乙肝肝硬化的發(fā)生與遺傳、自身抗原和免疫紊亂等多種因素相關(guān)[7]。特別是當(dāng)肝臟受到病毒、攻擊而造成損傷時(shí)，造成肝纖維化，進(jìn)而引發(fā)肝硬化[8-9]。

當(dāng)前治療乙肝肝硬化的藥物比較多，其中恩替卡韋可抑制病毒復(fù)制，并且恩替卡韋可抑制病毒mRNA逆轉(zhuǎn)錄負(fù)鏈的形成，從而發(fā)揮強(qiáng)效抑制病毒作用[10]。本研究顯示所有患者治療觀察3個(gè)月，有效患者數(shù)為107例，治療有效率為78.1%；有效患者的一般資料與無效患者對(duì)比無明顯差異(P＞0.05)，表明恩替卡韋治療乙肝肝硬化患者的療效有待提高，為此早期評(píng)估患者的預(yù)后具有重要價(jià)值。且有研究顯示，恩替卡韋在控制肝臟炎癥反應(yīng)、減輕肝臟纖維化程度方面的效果還存在不足[11]。

目前研究發(fā)現(xiàn)，乙肝肝硬化患者機(jī)體自身反應(yīng)性淋巴細(xì)胞含量多，促進(jìn)疾病的炎癥發(fā)展過程，而這些過程可通過血液細(xì)胞分析進(jìn)行判定[12-13]。本研究顯示有效組的紅細(xì)胞、血小板、白細(xì)胞、血紅蛋白等血液細(xì)胞分析指標(biāo)都明顯高于無效組(P＜0.05)。從機(jī)制上分析，當(dāng)機(jī)體紅細(xì)胞、血小板、白細(xì)胞、血紅蛋降低時(shí)，可打破機(jī)體免疫平衡，不斷攻擊肝細(xì)胞，造成嚴(yán)重的肝細(xì)胞壞死、結(jié)締組織增生和纖維化以及肝細(xì)胞結(jié)節(jié)的形成，導(dǎo)致患者預(yù)后變化[12]。

HBV-DNA為一種DNA病毒，當(dāng)HBV-DNA感染人體后，病毒會(huì)持續(xù)復(fù)制，引起機(jī)體特異性免疫應(yīng)答反應(yīng)，由此導(dǎo)致肝臟發(fā)生病理變化，進(jìn)而造成肝臟的慢性損傷，誘發(fā)肝硬化。本研究顯示有效組的HBV-DNA載量明顯少于無效組(P＜0.05)，血清TBiL、DBiL、ALP、GGT含量明顯低于無效組(P＜0.05)。有研究表明表明肝硬化患者的HBV-DNA載量增加，會(huì)加重肝臟功能損害，并發(fā)癥的嚴(yán)重程度也會(huì)增加[13]。

本研究Spearsman分析顯示肝炎性肝硬化患者的紅細(xì)胞、血小板、白細(xì)胞、血紅蛋白、HBV-DNA載量都與預(yù)后有效呈現(xiàn)相關(guān)性(P＜0.05)。從機(jī)制上分析，RBC、PLT、WBC、Hb下，使得機(jī)體免疫功能降低，且與病情程度成正相關(guān)。當(dāng)患者肝功能受損時(shí)，血小板生成素降低，血小板數(shù)量減少，可導(dǎo)致患者預(yù)后不良。HBV-DNA載量增加，促進(jìn)CD8+CTL、NK細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的激活，損傷肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞，介導(dǎo)肝硬化的病理過程[14]。不過本研究因經(jīng)費(fèi)問題，調(diào)查人數(shù)較少，未與健康人群行對(duì)比分析，這些不足之處將在后續(xù)深入探討。

綜上所述，恩替卡韋治療乙肝肝硬化患者的療效有待提高，HBV-DNA檢測(cè)及血液細(xì)胞分析在肝炎性肝硬化治療中的應(yīng)用能有效評(píng)估患者預(yù)后情況。