基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)及“上病下取”理論探討“苦杏仁-萊菔子”治療兒童慢性咳嗽的作用機制

楊柳岸，白曉紅，修 禪，呂啟慧

（1.遼寧中醫(yī)藥大學(xué)，遼寧 沈陽 110847；2.遼寧中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，遼寧 沈陽 110032）

兒童慢性咳嗽是指兒童以咳嗽為主要癥狀或唯一癥狀，咳嗽時間>4周且胸部X片正常的慢性咳嗽[1]。中醫(yī)學(xué)根據(jù)其在臨床上的表現(xiàn)，將其歸屬“久咳”“久嗽”等范疇。慢性咳嗽在兒童中多發(fā)，病程遷延不愈，具有易反復(fù)、治療時間長、難以根治等明顯區(qū)別于其他兒童呼吸道疾病的特點。目前通過中醫(yī)療法治療兒童慢性咳嗽已經(jīng)得到了廣泛應(yīng)用，并取得一定的成果，但大多數(shù)中醫(yī)僅局限于采用清肺、潤肺等治療上焦的方法[2]，而忽視了“上病下取”的理念。本研究分析“苦杏仁-萊菔子”藥對治療兒童慢性咳嗽的理念及方法，同時通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)探討治療在兒童慢性咳嗽中可能的作用機制。

1 “上病下取”理論與兒童慢性咳嗽的關(guān)系

“上病下取”出自《素問·五常政大論》“病在上，取之下”，該治法是一種中醫(yī)臨床治療手段，是中醫(yī)整體觀念的高度體現(xiàn)，旨在以治下而愈上。中醫(yī)理念中，人體為一個有機且統(tǒng)一的整體，臟腑之間上下、左右均有關(guān)聯(lián)，牽一發(fā)而動全身，中醫(yī)治療不應(yīng)局限在疾病的局部臨床表現(xiàn)，更應(yīng)該判斷疾病的本質(zhì)[3]。兒童慢性咳嗽在中醫(yī)學(xué)屬肺系疾病，部分患兒伴有不同程度的便秘[4]，多表現(xiàn)為大便干燥粗長。肺與大腸相表里，對于肺系疾病的治療，可從胃腸出發(fā)?！鹅`樞·本輸》曰“肺合大腸，大腸者，傳導(dǎo)之府”。肺氣如果可以正常地進行肅降則大腸的傳導(dǎo)功能便會正常，而大腸傳導(dǎo)糟粕的功能如若失調(diào)，肺氣便會在肅降方面失調(diào)，發(fā)生慢性咳嗽[5]。唐宗海曰：“大腸之所以傳導(dǎo)者，以其為肺之腑。肺氣下達，故能傳導(dǎo)?！蔽笟馊缛羯夏娣阜危瑒t會發(fā)生咳嗽。如若通暢下焦氣機，令肺氣能夠正常肅降，咳嗽癥狀便會緩解甚至消失[6]。該理念是中醫(yī)整體觀依據(jù)氣機升降治則的精煉，與兒童慢性咳嗽聯(lián)系頗深，對其治療也有獨到之處。

2 “苦杏仁-萊菔子”藥對對兒童慢性咳嗽的治療

苦杏仁，性味甘、苦，在人體氣機運動中可升可降，乃陰中陽也，入肺、大腸經(jīng)?？嘈尤示哂欣?、除腸中燥滿之功，可除腸中郁結(jié)滯氣，通暢胸中之滿，對胸中氣逆喘促亦有很好的功效，且油脂豐富，具有潤腸功能，在臨床表現(xiàn)為止咳、墜痰、通便。萊菔子，味辛、甘，入肺、胃經(jīng)，既可以下氣定喘，通達上焦氣機，治療肺系疾病，亦可以調(diào)理下焦氣機，治療食積氣滯、脘腹脹滿?！夺t(yī)學(xué)衷中參西錄》中闡述萊菔子可以順氣開郁、消脹除滿，乃化氣之品，非破氣之品，表明萊菔子作用于慢性咳嗽并不是直接止肺中之咳，而是化下氣以通上氣。同時萊菔子中最主要的成分蘿卜苷具有消食化積功能，在促進腸運動中發(fā)揮了作用[7]。二者具有上下焦共治的聯(lián)合作用，可疏通下焦氣機而調(diào)節(jié)上焦氣機，體現(xiàn)了“上病下取”的中醫(yī)臨床理念；二者都具有針對下焦病癥的有效成分，在臨床以及相關(guān)實驗中已經(jīng)證實對兒童慢性咳嗽有很好的療效[8-10]。

3 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究

3.1 材料與方法

3.1.1 “苦杏仁-萊菔子”藥對中有效成分及活性物質(zhì)的篩選

基于TCMSP數(shù)據(jù)庫，以“苦杏仁”“萊菔子”為關(guān)鍵詞進行搜索，以口服生物利用度≥30%、類藥性≥0.18為標準，對苦杏仁、萊菔子的有效成分及其作用靶點進行篩選，再通過Unipro軟件將篩選出來的靶點轉(zhuǎn)化為簡稱。

通過使用GeneCard數(shù)據(jù)庫（https：//www.genec ards.org/）、OMIM 數(shù) 據(jù) 庫（https：//www.omim.org/）、PharmGKB 數(shù) 據(jù) 庫（https：//www.pharmgkb.org/）、DrugBank 數(shù) 據(jù) 庫（https：//go.drugbank.com/），以“chronic cough in children”為關(guān)鍵詞查找與兒童慢性咳嗽有關(guān)的疾病基因，其中GeneCard數(shù)據(jù)庫（https：//www.genecards.org/）以評分>1作為篩選條件，將4個基因數(shù)據(jù)庫篩選出的疾病基因取交集并繪制Venn圖。

3.1.3 藥物作用靶點基因與疾病相關(guān)基因交集

將從兩味中藥篩選出的靶點基因合并，去除重復(fù)靶點基因；將從兒童慢性咳嗽疾病基因庫中篩選出的疾病相關(guān)基因進行合并，去除重復(fù)基因。取二者交集，得到交集基因并繪制Venn圖。

3.1.4 “苦杏仁-萊菔子”藥對復(fù)方調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建

獲取“苦杏仁-萊菔子”藥對活性成分與兒童慢性咳嗽疾病基因的交集靶點基因。利用Cytoscape軟件構(gòu)建“活性成分-交集靶點”復(fù)方調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。計算各個節(jié)點的連接度，評估網(wǎng)絡(luò)中各個節(jié)點的相互聯(lián)系程度。

廠房建設(shè)以發(fā)展聯(lián)合建筑為主，內(nèi)部空間進行合理、明確的功能分區(qū)，將功能相近又互不影響的空間布置在一起，工作區(qū)域與非工作區(qū)域分開，工作線路與參觀線路用不同道路線表示，生產(chǎn)車間與其輔助用房的安全出口分開設(shè)計。做到廠房內(nèi)部動靜分明，工藝流程一目了然，人員疏散線路安全流暢。

3.1.5 蛋白互作網(wǎng)絡(luò)及網(wǎng)絡(luò)核心的構(gòu)建

利用STRING平臺構(gòu)建蛋白互作網(wǎng)絡(luò)，將藥物分子靶點與兒童慢性咳嗽相關(guān)靶點進行映射，以置信度≥0.4為標準篩選并隱藏孤立靶點，得到蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用信息，將蛋白互作網(wǎng)絡(luò)的結(jié)果導(dǎo)入Cytoscape軟件，通過CytoNCA插件對交集靶點進行拓撲分析，根據(jù)度中心性（DC）、接近中心性（CC）、介數(shù)中心性（BC）、局部平均中心性（LAC）、特征向量中心性（EC）以及網(wǎng)絡(luò)中心性（NC）6項拓撲參數(shù)，以中位數(shù)為篩選條件進行篩選，構(gòu)建PPI網(wǎng)絡(luò)核心。

3.1.6 GO 基因功能和KEGG 通路富集分析

運用R語言將PPI網(wǎng)絡(luò)核心靶標進行基因本體功能富集分析（gene ontology，GO）和京都基因和基因組百科全書（Kyoto Encyclopedia of Genes and Gnomes，KEGG）通路富集分析，并繪制GO功能分析、KEGG通路富集分析的柱狀圖及圈圖，用以分析中藥有效活性成分、藥物作用核心靶標及關(guān)鍵通路三者之間的關(guān)系。

3.2 結(jié) 果

3.2.1 “苦杏仁-萊菔子”主要活性成分及作用靶點

通過TCMSP數(shù)據(jù)庫篩選收集得到苦杏仁有效成分16個，對應(yīng)靶點207個；萊菔子有效成分2個，對應(yīng)靶點3個。去除重復(fù)，得到70個靶點。結(jié)果見表1。

表1 “苦杏仁-萊菔子”有效成分及對應(yīng)靶點基因信息

3.2.2 兒童慢性咳嗽疾病基因篩選

通過GeneCard數(shù)據(jù)庫、OMIM數(shù)據(jù)庫、Pharm-GKB數(shù)據(jù)庫以及DrugBank數(shù)據(jù)庫篩選出與兒童慢性咳嗽相關(guān)疾病基因共3941個，4個數(shù)據(jù)庫交集基因共94個，繪制Venn圖，結(jié)果見圖1。

圖1 4 個基因數(shù)據(jù)庫兒童慢性咳嗽疾病基因Venn 圖

3.2.3 將藥物作用靶點基因與疾病相關(guān)基因取交集

將兩味中藥篩選出的靶點基因合并，去除重復(fù)，獲得70個基因；將從4個基因數(shù)據(jù)庫中篩選出的疾病相關(guān)基因合并，去除重復(fù)，獲得3941個基因；取二者交集，得到47個基因，繪制Venn圖，結(jié)果見圖2。

圖2 “苦杏仁-萊菔子”中有效成分靶點基因與兒童慢性咳嗽疾病基因的Venn 圖

3.2.4 “苦杏仁-萊菔子”藥對的復(fù)方調(diào)控網(wǎng)絡(luò)

“苦杏仁-萊菔子”藥對與兒童慢性咳嗽相關(guān)的有效成分共16 個，靶點基因共47 個，依托Cytoscape軟件繪制“苦杏仁-萊菔子”藥對的復(fù)方調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，共獲得63個節(jié)點以及128條邊，計算圖中每個節(jié)點的連接度（degree），觀察活性成分和靶點基因在網(wǎng)絡(luò)中發(fā)揮的作用。結(jié)果見圖3。

圖3 “苦杏仁-萊菔子”藥對的復(fù)方調(diào)控網(wǎng)絡(luò)

3.2.5 構(gòu)建蛋白互作網(wǎng)絡(luò)

依 托STRING（https：//cn.string-db.org/）網(wǎng) 站構(gòu)建交集基因的蛋白互作網(wǎng)絡(luò)，分析“苦杏仁-萊菔子”和兒童慢性咳嗽的47個共有靶點，以置信度≥0.4為標準篩選并隱藏孤立靶點，得到蛋白互作網(wǎng)絡(luò)，共含47個節(jié)點及306條連線。結(jié)果見圖4。

圖4 “苦杏仁-萊菔子”藥對靶點與兒童慢性咳嗽靶點的蛋白互作網(wǎng)絡(luò)

3.2.6 PPI 網(wǎng)絡(luò)核心的構(gòu)建

將蛋白互作網(wǎng)絡(luò)中的基因依據(jù)BC、CC、DC、EC、LAC、NC的中位值BC=15.120 238 095 238、CC=0.411 214 953 271 028、DC=12、EC=0.129 108 443 856 239、LAC=5.333 333 333 333 33、NC=6.857 142 857 142 85 對靶點作進一步篩選，最終獲得由12個核心靶點、145條邊構(gòu)建的PPI核心網(wǎng)絡(luò)，核心蛋白分別為溶質(zhì)載體系列6成員4（solute carrier family 6 member 4，SLC6A4）、熱休克蛋白90阿爾法家族A類成員1（heat shock protein 90 alpha family class a member 1，HSP90AA1）、雌激 素 受 體1（estrogen receptor 1，ESR1）、前 列 腺素內(nèi)過氧化物合酶2（prostaglandin-endoperoxide synthase 2，PTGS2）、溶質(zhì)載體系列 6成員3（solute carrier family 6 member 3，SLC6A3）、過氧化氫酶（catalase，CAT）、單胺氧化酶B（monoamine oxidase B，MAOB）、乙 酰膽 堿 酯 酶（acetylcholinesterase，ACHE）、絲 裂 原 活 化 蛋 白 激 酶14（mitogenactivated protein kinase 14，MAPK14）、孕 激 素 受體（progesterone receptor，PGR）、多 巴 胺 受 體D2（dopamine receptor D2，DRD2）、多 巴 胺 受 體D1（dopamine receptor D2，DRD1）。結(jié)果見圖5。

圖5 PPI 網(wǎng)絡(luò)核心的構(gòu)建

3.2.7 GO 與KEGG 富集結(jié)果

通過使用R軟件包org.Hs.eg.db中基因的GO注釋，將基因映射到背景集合中，使用R軟件包clusterProfiler進行富集分析，獲得基因集富集的結(jié)果。設(shè)定最小基因集為5，最大基因集為5000，以P<0.05 和錯誤發(fā)生率（FDR）>0.25 作為條件進行篩選，包括細胞組件（BP）、生物學(xué)過程（CC）、分子功能（MF）3 個組成部分，分別獲得1000、293、364 條通路，核心靶點的BP依次與化學(xué)成分的反應(yīng)（response to chemical）、生物質(zhì)量的調(diào)節(jié)（regulation to biological quality）、細胞對化學(xué)刺激的反應(yīng)（cellular response to chemical stimulus）等過程相關(guān)；CC與內(nèi)膜系統(tǒng)（endomembrane member）、膜的固有成分（intrinsic component of membrane）、質(zhì)膜部分（plasma membrane part）等相關(guān)；MF與陽離子結(jié)合（cation binding）、分子換能器活性（molecular transducer activity）、催化活性（catalytic activity）等相關(guān)，并分別篩選出前20條、前21條、前18條通路繪制柱狀圖，結(jié)果見圖6A。

圖6A 核心靶點GO 富集分析

圖6B 核心靶點KEGG 富集分析

通過使用KEGG rest API（https：//www.kegg.jp/kegg/rest/keggapi.html）獲取最新的KEGG Pathway基因注釋，將基因映射到背景集合中，使用R軟件包clusterProfiler（version 3.14.3）進行富集分析，獲得基因集富集的結(jié)果。設(shè)定最小基因集為5，最大基因集為5000，以P<0.05 和FDR>0.25 作為條件進行篩選，共得出167條通路，主要涉及神經(jīng)活性配體-受體相互作用（neuroactive ligandreceptor interaction），癌 癥 相 關(guān) 通 路（pathways in cancer）、代 謝 通 路（metabolic pathways）、多 巴胺 能 突 觸（dopaminergic synapse）、鈣 信 號 通 路（calcium signaling pathway），根據(jù)富集程度篩選出前24條通路繪制圈圖，結(jié)果見圖6B。

4 臨床醫(yī)案

李某，男，5歲，2021年10月17日初診，主訴：反復(fù)咳嗽1年余?；純?年來反復(fù)咳嗽，每月發(fā)作一次，現(xiàn)癥見：流涕，咳嗽，有痰，痰質(zhì)黏色黃，汗多，脾氣可，納差，夜眠不實，大便2 日一行，偏干。體格檢查：神清狀可，呼吸平穩(wěn)，舌紅，苔薄白。中醫(yī)診斷：小兒咳嗽。證型：肺胃蘊熱證。處方：玄參10 g，黃芩10 g，甘草3 g，柴胡6 g，桔梗6 g，防風(fēng)6 g，炒萊菔子10 g，苦杏仁10 g，佛手6 g，連翹10 g，陳皮6 g，荊芥10 g，茯苓10 g，法半夏6 g。中藥顆粒，12劑，口服。隨診。

二診：2021年10月26日，患者自述咳嗽、飲食、便秘好轉(zhuǎn)，夜眠不實改善，加白芷6 g，絲瓜絡(luò)10 g，炒薏苡仁10 g，繼服12劑。

三診：2021年11月10日，患者癥狀好轉(zhuǎn)，然近兩天感冒，流清涕，喉嚨不適，飲食可，便秘，大便干，2 日1 次。證型：風(fēng)痰證。處方：太子參10 g，黃芩10 g，麩炒蒼術(shù)10 g，甘草3 g，清半夏6 g，柴胡6 g，桔梗6 g，防風(fēng)6 g，炒萊菔子10 g，苦杏仁10 g，陳皮6 g，荊芥10 g，辛夷6 g，炒雞內(nèi)金6 g。10劑，口服。

四診：2021年11月25日，患者感冒好轉(zhuǎn)，偶清嗓。處方：茯苓10 g，苦杏仁10 g，甘草3 g，桔梗6 g，炒萊菔子10 g，法半夏6 g，黃芩10 g，焦山楂10 g，木蝴蝶6 g，玄參10 g，連翹10 g，陳皮6 g，芡實10 g，石膏30 g。10劑，口服。

1年后電話隨訪，患者自述咳嗽明顯減輕，1年內(nèi)無明顯反復(fù)咳嗽。

按語：該患者就診時自述反復(fù)咳嗽超過1年，且發(fā)病頻繁，每月發(fā)作一次，符合兒童慢性咳嗽的臨床表現(xiàn)，同時初診時除咳嗽外，伴有咳黃痰、納差、大便干燥等明顯肺胃蘊熱表現(xiàn)，因此治療時需兼具上下焦。4次治療均根據(jù)癥狀改變進行不同程度的藥物加減，根據(jù)初診患兒的腸胃表現(xiàn)4次治療均選擇使用“杏仁-萊菔子”，前2次治療中發(fā)揮了潤腸通便、理下焦氣機，繼而清肺熱、止咳的功效；后2次治療風(fēng)痰證感冒，亦發(fā)揮除腸燥、除肺燥、化痰的功效。杏仁如《醫(yī)學(xué)啟源》中所言“除肺中燥，治風(fēng)燥在于胸膈”?！吨髦蚊卦E》亦云杏仁“潤肺氣，消食，升滯氣”。《本草綱目》言“萊菔子之功，長于利氣。生能升，熟能降，升則吐風(fēng)痰，散風(fēng)寒，發(fā)瘡疹；降則定痰喘咳嗽，調(diào)下痢后重，止內(nèi)痛，皆是利氣之效”。二者通過共同調(diào)理上下氣機，以下治上，在兒童慢性咳嗽的治療中發(fā)揮巨大作用。

5 討 論

小兒慢性咳嗽目前病因不明確且發(fā)病機制復(fù)雜，與成人咳嗽有明顯差異。兒童慢性咳嗽可能源于感染后咳嗽、支氣管擴張、氣管軟化和哮喘等，一旦過了青春期，咳嗽的病因可能趨向于成人常見的原因，即胃食管反流、上氣道綜合征等[11]。從中醫(yī)學(xué)角度看，兒童慢性咳嗽的病因來源于各個臟腑，《內(nèi)經(jīng)》曰“五臟六腑皆令人咳，非獨肺也”。鑒于中藥成分的復(fù)雜性，本研究以“上病下取”理論作為出發(fā)點，從腸治肺，通過使用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的方法，從多維度出發(fā)，解讀“杏仁-萊菔子”對于兒童慢性咳嗽治療的作用機制。

通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析“杏仁-萊菔子”治療兒童慢性咳嗽的各個成分可知，在“杏仁-萊 菔 子”中 左 旋 千 金 藤 啶 堿（l-SPD）、豆 甾醇（stigmasterol）、雌 酮（estrone）、甘 草 查 爾 酮B（licochalcone B）、烏藥堿（machiline）與疾病基因的相關(guān)值較高，提示其為治療作用的核心成分。目前的各項研究表明，l-SPD可通過突觸前D1 受體引起其對PL錐體細胞自發(fā)興奮性突觸后電流（sEPSC）頻率的影響，并且依賴于蛋白激酶A（PKA）和蛋白激酶C（PKC）信號通路，具有D1受體激動劑和D2 受體拮抗劑雙重作用。同時l-SPD針對外源性添加的腎上腺素和神經(jīng)釋放去甲腎上腺素所誘導(dǎo)的α1腎上腺素，對其介導(dǎo)的收縮抑制作用可能有助于藥物降壓，用于松弛腸系膜小動脈血管[12-14]。豆甾醇具有抗炎作用，可能由糖皮質(zhì)激素受體介導(dǎo)，在腸道和相關(guān)免疫細胞的分化和功能、對環(huán)境刺激的反應(yīng)和吸收過程損傷方面的調(diào)節(jié)具有潛力[15-16]。雌酮是雌激素的一種，不僅可以促進女性生殖器官的發(fā)育以及維持第二性征，同時對心血管系統(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)、代謝系統(tǒng)等均有明顯的影響[17]。甘草查爾酮B可以抑制巨噬細胞中NOD樣受體熱蛋白結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白3（NLRP3）炎癥小體的活化，但對黑色素瘤抑制因子2（AIM2）或含NLR家族CARD域蛋白4（NLRC4）炎性小體的活化沒有影響，是一種特異性NLRP3抑制劑[18]。烏藥堿具有強心、抗腫瘤、緩解支氣管哮喘、抗炎作用[19]。其中l(wèi)-SPD、豆甾醇、甘草查爾酮B均具有抗炎、潤腸、緩腸的作用，與本研究上病下取治療咳嗽的理念趨同，更加表明了“上病下取”理念的正確性及科學(xué)性，為臨床治療兒童慢性咳嗽提供可行道路。

通過分析PPI網(wǎng)絡(luò)可得到核心靶點主要包括SLC6A4、HSP90AA1、PTGS2、SLC6A3 等。SLC-6A4 多態(tài)性的頻率和更高水平的5-羥色胺（5-HT）與腸易激綜合征（IBS）顯著相關(guān)，特別是在腹瀉和腹痛患者中，提示SLC6A4是參與IBS發(fā)病機制的潛在候選基因，同時SLC6A4也是功能性消化不良以及腸易激綜合征的病理因素之一[20-22]，從側(cè)面印證了治療消化系統(tǒng)可改善呼吸系統(tǒng)的理念。HSP90AA1通過調(diào)節(jié)自噬促進牙齦卟啉單胞菌脂多糖（Pg-LPS）誘導(dǎo)的肝細胞生長因子（HGFs）的炎癥反應(yīng)。3-甲基腺嘌呤（3-methyl adenine，3-MA）的加入進一步證實了自噬可能介導(dǎo)熱休克蛋白90α家族A類成員1（siHSP90AA1）以增強炎癥反應(yīng)[23]。通過產(chǎn)生前列腺素，PTGS2在調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)中起關(guān)鍵作用[24]，在研究及查閱文獻過程中發(fā)現(xiàn)SLC6A4、HSP90AA1、SLC6A3均在治療精神類疾病例如抑郁癥、自閉癥等，也就是中醫(yī)所述的情志病方面，具有直接或間接的作用[25-27]?？赡軐τ趦和钥人?，情志方面的治療與管理在一定程度上具有積極效果，從而打開了一條嶄新的治療兒童慢性咳嗽的思路，具體還需進一步證明。

通過對“杏仁-萊菔子”的關(guān)鍵靶標基因進行GO基因功能富集分析以及KEGG通路富集分析，可得出7條通路與兒童慢性咳嗽進展過程高度相關(guān)，可能是藥對發(fā)揮治療作用的主要途徑。神經(jīng)活性配體-受體相互作用信號通路是所有處于質(zhì)膜上和細胞內(nèi)外信號通路有關(guān)系的受體以及配體的集合，與炎癥反應(yīng)顯著相關(guān)[28]。鈣信號通路可以參與控制代謝、分泌、受精、增殖和平滑肌收縮等過程，在控制炎癥反應(yīng)中起到了一定作用[29]。cAMP信號通路可以改善氣道炎癥，通過激活PKA，繼而促進環(huán)磷酸腺苷反應(yīng)元件結(jié)合蛋白（CREB）轉(zhuǎn)錄，將膜上的Gq蛋白活化，進一步激活蛋白激酶C，進而激活肌球蛋白輕鏈激酶，最后達到促進氣道平滑肌松弛的結(jié)果[30]。磷脂酰肌醇3-激酶-蛋白激酶B（PI3K-Akt）信號通路可以通過影響人氣道上皮細胞、支氣管上皮細胞（16HBE）自噬的發(fā)生，改善人體氣道炎癥反應(yīng)，也可以改善結(jié)腸的炎癥反應(yīng)，發(fā)揮對結(jié)腸的保護作用[31-32]。

綜上，本研究通過對“上病下取”理論的深入探究以及通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法深層次、多維度研究“杏仁-萊菔子”藥對對于兒童慢性咳嗽在上焦和下焦的多種作用機制，探查該藥對核心靶點的生物效應(yīng)，開創(chuàng)地提出了情志對于兒童慢性咳嗽可能存在的影響。本研究挖掘結(jié)果均通過查閱文獻后得到了相應(yīng)的證實，為未來相關(guān)研究提供了一定的參考及支持，但本研究結(jié)果仍需要在實驗研究方面進行驗證。