雙歧桿菌、韋榮球菌、奈瑟氏菌生物學(xué)特點(diǎn)及其在低齡兒童齲發(fā)生發(fā)展中的作用和作用機(jī)制研究進(jìn)展

林秀燕，石宏

1 河北醫(yī)科大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院，石家莊 050017；2 河北醫(yī)科大學(xué)口腔醫(yī)院兒童口腔科；3 河北省口腔醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室；3 河北省口腔疾病臨床醫(yī)學(xué)研究中心

低齡兒童齲（Early childhood caries，ECC）是臨床最常見的兒童口腔疾病，其患病率高居兒童疾病的首位，是患病率第2 位的哮喘病的5 倍［1］。ECC 可導(dǎo)致兒童乳牙缺損、根尖周炎、乳牙滯留，影響恒牙的正常替換，嚴(yán)重者可引起全身其他器官的感染與損害，對(duì)兒童的身心健康造成極大危害。ECC 的發(fā)生發(fā)展可能與細(xì)菌、宿主、飲食等因素密切相關(guān)，口腔微生物群落的存在和生態(tài)失調(diào)可能在ECC 的發(fā)生發(fā)展中具有重要作用［2］。既往研究［3］認(rèn)為，變形鏈球菌是齲病的主要致齲菌之一，在重度低齡兒童齲（Severe early childhood caries，SECC）的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用。然而基于傳統(tǒng)致病菌的治療未能有效降低齲病的發(fā)生率，可見以變形鏈球菌為主的單一致病菌理論無(wú)法完全反映口腔微生物在ECC 發(fā)生發(fā)展中的作用。最新研究［4］認(rèn)為，齲齒并不是單純由變形鏈球菌導(dǎo)致的，口腔微生物群落的整體平衡的改變導(dǎo)致齲齒的發(fā)生。有學(xué)者認(rèn)為雙歧桿菌、韋榮球菌及耐瑟氏菌是益生菌，可維持人體口腔健康；但部分學(xué)者認(rèn)為，雙歧桿菌、韋榮球菌及耐瑟氏菌具有一定致齲性，與ECC 的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。目前，雙歧桿菌、韋榮球菌及耐瑟氏菌在ECC 發(fā)生發(fā)展中的作用及作用機(jī)制已有部分研究報(bào)道。 現(xiàn)將雙歧桿菌，韋榮球菌、耐瑟氏菌的生物學(xué)特點(diǎn)及其在ECC 發(fā)生發(fā)展中的作用及作用機(jī)制研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1 雙歧桿菌生物學(xué)特點(diǎn)及其在ECC 發(fā)生發(fā)展中的作用和作用機(jī)制

1.1 雙歧桿菌的生物學(xué)特點(diǎn) 雙歧桿菌屬［5］是一群具有多形態(tài)、無(wú)動(dòng)力的革蘭陽(yáng)性無(wú)芽孢厭氧菌，其最適pH 值為6.5～7.0，最適生長(zhǎng)溫度為37～41 ℃，是一種耐酸微生物。該菌屬首先從嬰兒糞便中分離到，生化反應(yīng)特征為過氧化氫酶陰性，具有Y 形特征，G+C含量高，雙歧桿菌與絕大多數(shù)糖類的分解代謝途徑不同，其主要依賴于果糖-6-磷酸解酮酶，而產(chǎn)物不生成二氧化碳、丁酸、丙酸，其主要代謝產(chǎn)物中的乳酸、乙酸以及少量的甲酸的等量比例會(huì)隨菌株不同形成差異。雙歧桿菌與腸壁相互作用維護(hù)腸道內(nèi)生理環(huán)境，具有調(diào)節(jié)腸道微生物區(qū)系、產(chǎn)生抗菌物質(zhì)、增強(qiáng)免疫系統(tǒng)等生理功能，被認(rèn)為是人體益生菌［6-7］。迄今為止，已經(jīng)分離鑒定的雙歧桿菌（亞種）有88種，多數(shù)來(lái)自人類腸道和口腔、動(dòng)物胃腸道［7-8］，比如棲牙雙歧桿菌、齒雙歧桿菌及殊形雙歧桿菌主要在人體口腔中發(fā)現(xiàn)。細(xì)菌的產(chǎn)酸能力和耐酸性與齲病的發(fā)生密切相關(guān)，當(dāng)口腔環(huán)境中pH 值小于5.5時(shí)，牙釉質(zhì)開始脫礦。研究發(fā)現(xiàn)，雙歧桿菌屬里長(zhǎng)雙歧桿菌、動(dòng)物雙歧桿菌的產(chǎn)酸性最強(qiáng)，芽孢桿菌的產(chǎn)酸能力最低［8］，表明不是所有的雙歧桿菌屬均有強(qiáng)致齲性，不同菌株的致齲性不同，臨床應(yīng)尋找并阻斷優(yōu)勢(shì)致齲菌株在牙面的定植，抑制ECC的發(fā)生發(fā)展。

雙歧桿菌的常規(guī)鑒定和分類是基于其表型和生化特征，如菌群形態(tài)、革蘭氏染色結(jié)果、生化反應(yīng)等。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，16S rRNA 可以從基因序列中得到不同種系發(fā)生水平的多個(gè)區(qū)域的特定基因信息，目前臨床常用的雙歧桿菌鑒定工具均基于16S rRNA 基因序列分析方法，如ARDRA、DGGE 及物種特異性引物PCR。有研究［9］采用從糞便中進(jìn)行DNA 的宏基因組測(cè)序分析了雙歧桿菌分類群在復(fù)雜細(xì)菌群落的相關(guān)性。納米孔測(cè)序技術(shù)可用于新的物種鑒定及驗(yàn)證物種分配的局限性。ANGELL 等［10］使用六聚體頻率和納米孔測(cè)序數(shù)據(jù)的k均值聚類相結(jié)合識(shí)別了3 個(gè)月大嬰兒腸道微生物群中的雙歧桿菌屬及與陰道分娩有關(guān)的雙歧桿菌。說(shuō)明雙歧桿菌屬是較早出現(xiàn)在腸道微生物群落中的，而口腔和腸道微生物之間存在相互作用的關(guān)系，腸道的菌群生態(tài)的組成和功能失調(diào)可能會(huì)導(dǎo)致口腔中有害菌的增殖，從而促進(jìn)ECC 的發(fā)生發(fā)展。宏基因組霰彈槍方法可根據(jù)測(cè)序深度提供與特定生態(tài)系統(tǒng)相關(guān)的復(fù)雜微生物群落中存在的微生物的遺傳信息，可識(shí)別一些尚未培養(yǎng)的新物種，有學(xué)者［11］應(yīng)用宏基因組霰彈槍測(cè)序方法對(duì)動(dòng)物腸道微生物群落中屬于雙歧桿菌屬的新型腸道共生物種進(jìn)行鑒定。

1.2 雙歧桿菌在ECC 發(fā)生發(fā)展中的作用及作用機(jī)制 研究［12-13］研究了短期食用含乳雙歧桿菌Bb12的益生菌對(duì)患齲風(fēng)險(xiǎn)個(gè)體唾液中變形鏈球菌計(jì)數(shù)的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)唾液中變形鏈球菌計(jì)數(shù)顯著降低，說(shuō)明食用含有乳酸雙歧桿菌Bb12 的益生菌酸奶可能會(huì)改變口腔生態(tài)環(huán)境。但肖小芬等［14］認(rèn)為，雙歧桿菌屬在SECC 組口腔中的豐度較高，且與齲失補(bǔ)牙面數(shù)強(qiáng)正相關(guān)，其可能是兒童早期重度齲發(fā)生的指示菌屬。有研究［15］采用qPCR 法對(duì)75例ECC兒童口腔中的雙歧桿菌、變形鏈球菌、嗜酸乳桿菌等進(jìn)行量化檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)雙歧桿菌在牙本質(zhì)齲患兒的口腔牙菌斑中檢出率較高，說(shuō)明雙歧桿菌在牙本質(zhì)齲進(jìn)展中發(fā)揮了一定的作用。TANTIKALCHAN 等［16］通過收集122 例泰國(guó)2～5 歲無(wú)齲及SECC 兒童過夜的牙菌斑進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)雙歧桿菌與齲均和牙齦指數(shù)相關(guān)，但在SECC 兒童牙菌斑中并未檢測(cè)到該細(xì)菌。這表明雙歧桿菌在ECC 進(jìn)展中可能并不是最初的定植者之一，其可能具有促進(jìn)或加速其他細(xì)菌在牙面定植及致齲作用。

SANTOS 等［17］發(fā)現(xiàn)動(dòng)物芽孢桿菌和長(zhǎng)芽胞桿菌與變形鏈球菌聯(lián)合可促進(jìn)不溶性胞外多糖的產(chǎn)生和齲損的進(jìn)展，說(shuō)明不同細(xì)菌在ECC 的發(fā)生、發(fā)展所起的作用不同，菌群之間可能發(fā)揮著相互協(xié)同或者拮抗的作用。雙歧桿菌具有獨(dú)特的代謝途徑，即“雙歧分流”，它可能通過增加產(chǎn)酸性而賦予其致齲潛力。MANOME 等［18］研究結(jié)果表明雙歧桿菌能夠在氟化物存在下代謝碳水化合物，在pH 值為7 時(shí)其產(chǎn)酸能力與pH 值為5.5 時(shí)一樣高，表明雙歧桿菌產(chǎn)酸能力強(qiáng)且具有很高的致齲潛力。通常細(xì)菌致齲能力包括它在牙面上的定植能力及其產(chǎn)酸和耐酸能力。雖然多數(shù)研究認(rèn)為，雙歧桿菌可促進(jìn)ECC 的發(fā)生，但由于雙歧桿菌無(wú)法在牙面大范圍定植且多在胃腸道黏膜上黏附，及不同菌株之間如何互相作用從而影響ECC 致病程度，其在ECC 發(fā)生發(fā)展中的具體作用機(jī)制仍有待進(jìn)一步深入研究。而目前生態(tài)菌斑學(xué)說(shuō)被大家逐漸接受，其認(rèn)為致齲微生物可作為口腔常居菌的一部分存在于牙菌斑生物膜中，因此在中性環(huán)境下，這些微生物并不在菌群中處于優(yōu)勢(shì)地位，在此生態(tài)環(huán)境中，牙面的脫礦和再礦化過程處于平衡狀態(tài)。那么在雙歧桿菌定植牙面、黏附、繁殖生長(zhǎng)、最終在ECC 發(fā)生發(fā)展的過程中，其他微生物如變形鏈球菌等可能都有不同程度的參與，盡管其產(chǎn)酸能力可能有所差異，但在生態(tài)種群的改建中并不存在特異性的選擇。

2 韋榮球菌屬的生物學(xué)特點(diǎn)及其在ECC 發(fā)生發(fā)展中的作用和作用機(jī)制

2.1 韋榮球菌的生物學(xué)特點(diǎn) 韋榮球菌屬［19］為0.3～0.5 μm 細(xì)小直徑的革蘭陰性球菌，呈雙球狀排列、不能運(yùn)動(dòng)、無(wú)芽孢形成、無(wú)莢膜及鞭毛，是絕對(duì)的厭氧菌，其作為共生微生物存在于人和動(dòng)物的口腔、腸道以及生殖泌尿系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)中。韋榮球菌作為牙菌斑形成過程中的早期定植菌之一［20］，其豐度和多樣性在口腔微生物中具有一定的比例，對(duì)口腔健康造成了影響。有研究［19］表明在韋榮球菌屬的14 種中，不典型弧菌、牙癬弧菌、小弧菌、羅戈弧菌、散葉弧菌、嬰兒弧菌和托貝蘇氏弧菌已在人類唾液或舌或牙齒生物膜中被發(fā)現(xiàn)，它們構(gòu)成了在齦上、齦下牙菌斑以及口腔粘膜菌群重要組成部分。

韋榮球菌在屬水平上相對(duì)容易識(shí)別，但在種水平上仍然難以識(shí)別，因?yàn)闆]有有用的表型或生化檢查來(lái)區(qū)分它們?；?6S rRNA 基因測(cè)序的分子方法，包括PCR-RFLP，通常用于鑒定韋榮球菌種水平的菌株，但因?yàn)轫f榮球菌高度保守的基因序列及其染色體內(nèi)一致性相對(duì)較高，目前較多使用如rpoB、dnak、gltA 等管家基因?qū)ζ湮锓N進(jìn)行辨別［21］。MASHIMA 等［22］學(xué)者通過采集89例泰國(guó)兒童舌部生物膜樣本，使用了一種新的基于rpoB 基因序列的物種特異性引物的一步法PCR 方法進(jìn)行檢測(cè)，這種方法能夠清楚地區(qū)分基于DNA-DNA 同源性定義良好但基于16S rDNA定義較差的物種。結(jié)果顯示，89例受試者中僅有10 例分離到101 株韋榮球菌屬細(xì)菌，對(duì)6 種韋榮球菌的rpoB 基因進(jìn)行相似性搜索，發(fā)現(xiàn)所有受試者的rpoB基因在2 500～3 100位具有高度多態(tài)性。盡管新證實(shí)的這40 個(gè)菌株目前已經(jīng)不能被歸類為任何已經(jīng)建立的口腔韋榮球菌屬，但說(shuō)明其他韋榮球菌物種也有可能棲息于口腔環(huán)境中。目前也有基于16S 核糖體DNA 基因測(cè)序的分子方法，包括PCR 隨機(jī)片段長(zhǎng)度多態(tài)性分析，用來(lái)在物種水平上鑒定韋榮球菌菌株［23-24］。然而，關(guān)于口腔韋榮球菌的鑒定和分布的研究是有限的，因?yàn)樵摷?xì)菌群落可能受到地理位置、年齡、飲食、生活方式、社會(huì)經(jīng)濟(jì)地位和口腔衛(wèi)生狀況差異的影響。

2.2 韋榮球菌在ECC 發(fā)生發(fā)展中的作用及作用機(jī)制 韋榮球菌屬被認(rèn)為是存在于人類口腔和胃腸道中的共生菌，因?yàn)樗呛诵奈⑸锝M的一部分。以往有研究［25］顯示，韋榮球菌因其利用乳酸而非碳水化合物作為能量來(lái)源、升高pH的特性以及減少產(chǎn)酸菌的致齲作用被認(rèn)為是防齲的益生菌。WANG等［26］通過單分子實(shí)時(shí)測(cè)序表征3～5 歲兒童齲齒中的口腔微生物群，結(jié)果發(fā)現(xiàn)韋榮球菌可能與健康的口腔微生物生態(tài)系統(tǒng)有關(guān)。但有研究［25］表明，韋榮球菌與變形鏈球菌存在著密切的共生關(guān)系。其可能有助于提高變形鏈球菌的群體競(jìng)爭(zhēng)力，在適當(dāng)致齲環(huán)境存在時(shí)，促進(jìn)微生態(tài)向致病性轉(zhuǎn)化，可能與ECC的發(fā)生發(fā)展存在協(xié)同作用?？梢?，韋榮球菌與ECC之間究竟存在何種關(guān)系目前尚不清楚，其可能是由于不同細(xì)菌物種在ECC 的發(fā)展中扮演著不同的角色。以往有研究認(rèn)為在口腔生物膜形成過程中，韋榮球菌是早期定植菌，但其如何在齲病早期階段發(fā)揮致齲作用仍需更深入的研究來(lái)了解其具體機(jī)制。QUDEIMAT 等［23］采用第二代測(cè)序技術(shù)對(duì)128 例兒童牙菌斑進(jìn)行測(cè)序，結(jié)果表明細(xì)小韋榮球菌在齲齒活躍的兒童中相對(duì)豐度較高并占主導(dǎo)地位。一項(xiàng)為期2 年的縱向研究［27］結(jié)果表明，小韋榮球菌可作為ECC 發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的生物標(biāo)志物，其在ECC 發(fā)生發(fā)展中具有一定的作用。變形鏈球菌作為口腔中常見的致齲菌之一［4］，致齲性取決于其產(chǎn)酸性和耐酸性，能夠迅速發(fā)酵多種碳水化合物產(chǎn)生大量酸，使局部pH下降至5.5以下，促進(jìn)菌斑的形成。LIU等［28］研究表明變形鏈球菌在與韋榮球菌共同培養(yǎng)時(shí)，雙菌種生物膜中變形鏈球菌的數(shù)量較單獨(dú)培養(yǎng)時(shí)增加，而在多菌種生物膜中，仍可見韋榮球菌對(duì)變形鏈球菌的協(xié)同促進(jìn)作用。韋榮球菌只在有鏈球菌存在時(shí)生長(zhǎng)，鏈球菌發(fā)酵碳水化合物產(chǎn)生的有機(jī)酸可作為韋榮球菌的碳源，韋榮球菌不能直接代謝糖類，具有把代謝較強(qiáng)的、非揮發(fā)性的乳酸轉(zhuǎn)化成為較弱的、揮發(fā)性的乙酸和丙酸的能力。酸和丙酸的能力。鏈球菌為韋榮球菌提供黏附位點(diǎn)和營(yíng)養(yǎng)來(lái)源，而韋榮球菌可促進(jìn)鏈球菌生長(zhǎng)和生物膜抵抗能力。韋榮球菌作為口腔微生物中高豐度菌屬之一，其高耐酸能力及在牙菌斑形成中的作用，提示韋榮球菌在致齲過程中的地位不可忽視，但其在ECC發(fā)生中的機(jī)制作用尚不明確。

3 奈瑟氏菌屬生物學(xué)特點(diǎn)及其在ECC 發(fā)生發(fā)展中的作用和作用機(jī)制

3.1 奈瑟氏菌的生物學(xué)特點(diǎn) 奈瑟氏菌［29］為直徑0.6～1.0 μm 的需氧革蘭陰性球菌，單個(gè)或成對(duì)排列，且相鄰的一面扁平，按彼此互相垂直的兩個(gè)平面分裂，有時(shí)導(dǎo)致四聯(lián)球菌，不形成內(nèi)生芽孢，無(wú)鞭毛但可有纖毛，不運(yùn)動(dòng)，其最適生長(zhǎng)溫度為35～37 ℃，對(duì)干燥敏感，初次分離需要濕度?？谇荒紊暇柩趺负瓦^氧化氫酶均為陽(yáng)性，產(chǎn)生H2S，亞硝酸鹽還原陽(yáng)性。奈瑟氏菌屬是一類β 變形桿菌，是人和動(dòng)物的專性共生體，至少有8 種共生奈瑟氏菌在人類黏膜表面定居［30］，人體內(nèi)發(fā)現(xiàn)的奈瑟氏菌有淋球菌、腦膜炎球菌、解乳糖奈瑟氏菌、干燥奈瑟氏菌、微黃奈瑟氏菌、金黃奈瑟氏菌、黏液奈瑟氏菌等，正常人口腔中常見者為干燥奈瑟氏菌、微黃奈瑟氏菌和黏液奈瑟氏菌［29］。其在出生一周的新生兒口腔中無(wú)法檢測(cè)到，但到八個(gè)月后，幾乎所有嬰兒口腔中均能檢測(cè)到該菌，7～12 歲兒童中80%唾液內(nèi)可檢到奈瑟氏菌，為唾液中數(shù)量?jī)H次于α—溶血性鏈球菌的細(xì)菌，約為5×106/mL。

傳統(tǒng)的奈瑟氏菌表型分類法可鑒別出腦膜炎奈瑟菌、淋球菌和乳鏈球菌，但此方法對(duì)于定義和識(shí)別其他奈瑟氏菌相關(guān)物種具有一定的難度［31］，因此諸如DNA-DNA 雜交和16S 核糖體基因的核苷酸序列數(shù)據(jù)的系統(tǒng)發(fā)育分析等分子方法的應(yīng)用解決了該問題，基于多基因座序列分析的系統(tǒng)發(fā)育，導(dǎo)致了一些奈瑟氏菌屬的重新分類，將其合并為亞黃酮亞變種、全黃菌和黃奈瑟氏菌。也有研究報(bào)道可利用16S rRNA 基因的高通量測(cè)序和元基因組學(xué)來(lái)鑒定奈瑟氏菌與齲病相關(guān)的潛在屬［32］。

3.2 奈瑟氏菌在ECC 發(fā)生發(fā)展中的作用及作用機(jī)制 奈瑟氏菌為兒童出生后口腔的首批定植者，被證明是來(lái)源于健康個(gè)體的早期生物膜內(nèi)細(xì)胞-細(xì)胞相互作用的重要介質(zhì)，其可能在維持與健康相關(guān)的口腔微生物組中發(fā)揮關(guān)鍵作用［33］。LEE 等［34］采集120 例韓國(guó)12 歲以下兒童的唾液和牙菌斑樣本，用Illumina HiSeq 測(cè)序鑒定其口腔細(xì)菌組成，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：6 歲以下無(wú)齲兒童牙菌斑中口腔奈瑟氏菌含量較高，奈瑟氏菌與ECC 可能并無(wú)明顯的相關(guān)性。對(duì)健康兒童口腔正常菌群的研究也發(fā)現(xiàn)，在唾液、菌斑窩溝、齦上菌斑、齦下菌斑中，奈瑟氏菌的檢出率為100%。但XIAO 等［32］學(xué)者通過收集96 例3～6 歲無(wú)齲、ECC、SECC 兒童的牙菌斑，利用16S rRNA 基因的高通量測(cè)序和元基因組學(xué)鑒定，表明桿狀奈瑟菌ATCC BAA-1200 菌株在兒童齲病的發(fā)生發(fā)展過程中起著非常重要的作用，其與齲失補(bǔ)牙面數(shù)及葡萄糖相關(guān)代謝途徑呈正相關(guān)，具有發(fā)酵產(chǎn)酸能力。奈瑟氏菌在SECC 兒童唾液微生物群中豐度最高，但也有表明低齲齒經(jīng)歷的健康兒童與奈瑟氏菌屬、嗜血桿菌屬和梭桿菌屬的豐度較高有關(guān)，而這些屬中的大多數(shù)物種僅輕微發(fā)酵蔗糖，可見不同的奈瑟氏菌菌株與ECC 的相關(guān)性并不完全一致，一些特異性菌株可能具有較強(qiáng)的產(chǎn)酸性和耐酸性，在ECC 的進(jìn)展中存在潛在的致齲性。

奈瑟氏菌在牙菌斑生物膜中的作用表現(xiàn)為對(duì)牙表面黏附能力很弱，但卻是與血鏈球菌一起最早定植于干凈牙面的細(xì)菌［35］，其主要存在于菌斑外層和早期菌斑中，可能因?yàn)槟紊暇切柩蹙咴缙诘母哐鯄河欣谒L(zhǎng)，而隨著菌斑的成熟，氧壓降低，奈瑟氏菌數(shù)量也減少。奈瑟氏菌在分解各種糖時(shí)會(huì)形成數(shù)量不等的酸，其中分解麥芽糖產(chǎn)生的酸最多，且各種奈瑟氏菌產(chǎn)酸的能力也不同，產(chǎn)生酸類最強(qiáng)的是干燥奈瑟氏菌，其次是微黃奈瑟氏菌。干燥奈瑟氏菌在含蔗糖的培養(yǎng)基中產(chǎn)生的多糖莢膜能使無(wú)莢膜的細(xì)菌聚集，并且這種聚集不因葡聚糖的消化而分解，莢膜還可被其他微生物的生長(zhǎng)所利用，促進(jìn)菌斑形成。微黃奈瑟氏菌中的深黃奈瑟氏菌在含蔗糖的培養(yǎng)基中能產(chǎn)生大量支鏈淀粉，比蔗糖還容易迅速被鏈球菌和乳桿菌所利用。有研究發(fā)現(xiàn)腦膜炎奈瑟氏菌可以利用乳酸，從牙菌斑中分離的奈瑟氏菌菌株也已被證明能將乳酸降解為醋酸，表明奈瑟氏菌具有雙向作用，在有蔗糖的條件下可合成胞外多糖并可酵解糖，其具有代謝葡萄糖、產(chǎn)生有機(jī)酸的能力，在糖缺少或無(wú)糖時(shí)，奈瑟氏菌可降解菌斑中產(chǎn)酸菌所產(chǎn)生的乳酸成為弱酸和揮發(fā)性酸，其又有利用乳酸的能力［36］?？梢娔紊暇诳谇恢械陌缪莸慕巧鞘菑?fù)雜的，其在低齡兒童致齲過程中所發(fā)揮的作用仍然未知，因此未來(lái)對(duì)奈瑟氏菌的深入研究具有一定的必要性。

綜上所述，ECC 是一種慢性感染性疾病?？谇恢胁糠旨?xì)菌如雙歧桿菌、韋榮球菌、奈瑟氏菌與ECC的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。產(chǎn)酸性較強(qiáng)的雙歧桿菌可導(dǎo)致牙釉質(zhì)脫礦，促進(jìn)或加速其他口腔致病菌在牙面的定植，促進(jìn)ECC 的發(fā)生發(fā)展。韋榮球菌是牙菌斑形成過程中的早期定植菌之一，促進(jìn)口腔致病菌變形鏈球菌的生長(zhǎng)，提高變形鏈球菌的生物膜抵抗能力，促進(jìn)ECC 的發(fā)生發(fā)展。奈瑟氏菌是人體口腔的常見菌，是生物膜內(nèi)細(xì)胞—細(xì)胞相互作用間的重要介質(zhì)，可能通過發(fā)酵產(chǎn)酸途徑促進(jìn)ECC 的發(fā)生發(fā)展。齲易感兒童非致齲性菌斑轉(zhuǎn)變?yōu)橹慢x性菌斑的過程中口腔微生物的生理結(jié)構(gòu)、數(shù)量種類的變化仍然未知，且細(xì)菌酸堿代謝與基于16S 的物種分配的關(guān)系似乎也很復(fù)雜，但是隨著分子生物學(xué)及其技術(shù)的不斷發(fā)展，在未來(lái)的研究中，對(duì)整個(gè)基因組進(jìn)行功能描述的元基因組方法、多組學(xué)聯(lián)合應(yīng)用等將有助于闡明齲病的微生物發(fā)病機(jī)制，更好地為ECC 的預(yù)防及微生物靶向阻斷提供科學(xué)依據(jù)。