冷激預(yù)處理減輕鮮切火龍果褐變的作用及機理

李冰茹，李美琪，李皎琪，王濟瀚，李曉安，李富軍，張新華

（山東理工大學(xué)農(nóng)業(yè)工程與食品科學(xué)學(xué)院，山東 淄博 255049）

火龍果（Hylocereus undatus）因其外觀奇特、口感清甜、富含膳食纖維、酚類物質(zhì)和甜菜苷等營養(yǎng)物質(zhì)，且具有抗氧化、抗糖尿病、預(yù)防心腦血管疾病或癌癥等功效而廣受歡迎[1-2]。前期研究發(fā)現(xiàn)，切割處理可誘導(dǎo)鮮切火龍果中酚類物質(zhì)的積累，提高其在一定貯藏期內(nèi)的抗氧化能力，而鮮切處理可激活果蔬自身的防御反應(yīng)，通過調(diào)節(jié)其應(yīng)答機制生成酚類物質(zhì)等次生代謝產(chǎn)物，防御和修復(fù)機械傷害[3-4]。但由于果蔬鮮切處理會引發(fā)汁液流出、呼吸增強、組織褐變、微生物生長等現(xiàn)象，加速品質(zhì)下降。因此，開發(fā)減輕鮮切產(chǎn)品品質(zhì)劣變的方法是一個迫切需要解決的問題。目前，鮮切果蔬的保鮮主要有化學(xué)法（保鮮劑、可食性涂膜、植物內(nèi)源活性物質(zhì)等）、物理法（低溫、氣調(diào)、熱處理、非熱殺菌等）及生物法（拮抗菌）等[5-6]。

冷激是指將果蔬置于不會造成冷害的低溫條件下進(jìn)行短時間處理的一種物理方法，常用的有空氣冷激和冰水混合物冷激[7]。有研究表明，冷激處理可以減緩黃瓜的黃變，降低黃瓜腐爛率[8]、保持甜櫻桃的花青素含量[9]、抑制西葫蘆葉綠素含量降低和紅度（a*值）、黃度（b*值）的升高[10]。冷激處理可通過降低膜脂過氧化程度和細(xì)胞膜通透性、提高抗氧化能力提高木瓜[11]、桃[12]和茄子[13]果實的抗冷性，減輕果實在低溫貯藏期間的品質(zhì)劣變。劉洪竹等[14]使用0 ℃冰水處理鮮切甘藍(lán)、洋蔥和胡蘿卜以增加它們的抗氧化酶活性，保持鮮切果蔬的品質(zhì)。唐文等[15]發(fā)現(xiàn)用－18 ℃冷空氣處理鮮切青椒可保持其品質(zhì)和抗壞血酸含量，延長鮮切青椒的貯藏期。本實驗主要從研究冷激預(yù)處理對鮮切果蔬品質(zhì)影響的機理入手，旨在為鮮切火龍果的品質(zhì)保持提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

供試白肉火龍果‘莞華白’（Hylocereus undatuscv.Guanhuabai）購自山東博發(fā)農(nóng)副產(chǎn)品綜合批發(fā)市場，選擇大小和顏色均勻、無機械傷的果實備用。

福林-酚 上海源葉生物科技有限公司；甲醇煙臺市遠(yuǎn)東精細(xì)化工有限公司；磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀 天津市雙船化學(xué)試劑廠；1,1-二苯基苦基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl，DPPH）、抗壞血酸上海阿拉丁生化科技股份有限公司；Tris 生工生物工程（上海）股份有限公司；反轉(zhuǎn)錄試劑盒RR036A PrimeScriptTMRT Master Mix、實時熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（real-time quantitative polymerase chain reaction，qPCR）試劑盒RR420B TB Green?Premix ExTaqTM日本Takara公司。

1.2 儀器與設(shè)備

CR400色差儀 日本柯尼卡-美能達(dá)公司；DDS-307A電導(dǎo)率儀 上海光學(xué)儀器廠；Sorvall ST 16R高速冷凍離心機 美國賽默飛世爾科技有限公司；UV-2102PCS紫外分光光度計 尤尼柯（上海）儀器有限公司；1260高效液相色譜儀 美國安捷倫公司；FQD-96A實時熒光定量PCR檢測系統(tǒng) 杭州博日科技有限責(zé)任公司。

1.3 方法

1.3.1 原料處理

將挑選好的白肉火龍果隨機分為兩組，每組9 0 個果實，分別在相對濕度9 0%的恒溫箱中使用（－2.0±0.5）℃冷空氣（冷激組）、（20.0±0.5）℃空氣（對照組）處理3 h后，將兩組果實置于20 ℃條件下貯存3 h，再用質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.02%次氯酸鈉溶液浸泡2 min，無菌水沖洗后晾干表面水分。根據(jù)Li Xiao’an等[4]的方法去除果皮，將其切成厚度為1 cm的1/4片狀，分別放置于無菌聚丙烯保鮮盒（16 cm×11 cm×5 cm）內(nèi)，每盒10 片，質(zhì)量約200 g，于（20±1）℃、相對濕度85%～90%條件下貯藏，并分別于0、6、12、24、36、48 h取樣測定，每次取樣6 盒，其中3 盒用于拍照、測定果肉顏色，其余樣品液氮速凍后于－80 ℃保存用于其他指標(biāo)測定。每組處理取3 次數(shù)據(jù)的平均值。

1.3.2 果肉顏色測定

鮮切火龍果的果肉顏色使用色差儀進(jìn)行測定，記錄亮度（L*）、紅綠度（a*）、黃藍(lán)度（b*）值，參照Coklar等[16]的方法，按式（1）、（2）計算褐變指數(shù)（browning index，BI）。

1.3.3 電導(dǎo)率及丙二醛含量測定

電導(dǎo)率（electrical conductivity，EC）的測定參照Luo Zisheng等[17]的方法。使用打孔器從火龍果切片上獲取圓片（厚度1 mm、直徑10 mm）10 片，置于25 mL蒸餾水中浸泡60 min，使用電導(dǎo)率儀測定初始EC并記為C1/（S/cm），沸水浴5 min并冷卻至室溫后，再次測定EC并記為C2/（S/cm）。相對電導(dǎo)率結(jié)果表示為C1/C2×100%。

丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量的測定參照Min Dedong等[18]的方法。稱取2 g凍樣用5 mL 10 g/100 mL三氯乙酸溶液研磨后離心。取相同體積的上清液與0.6 g/100 mL硫代巴比妥酸溶液混勻，沸水浴15 min后立即置于冰上冷卻。用紫外分光光度計測定反應(yīng)體系在600、532 nm和450 nm波長處吸光度。MDA含量單位為mmol/kg。

1.3.4 總酚及總黃酮含量的測定

稱取2 g凍樣充分研磨后用5 mL甲醇在4 ℃下避光抽提24 h，離心后取上清液用于測定總酚和總黃酮含量?？偡雍康臏y定參照Swain等[19]的方法，記錄765 nm波長處吸光度的變化，以沒食子酸為標(biāo)準(zhǔn)品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計算總酚含量，單位為g/kg?？傸S酮含量的測定參照Chang等[20]的方法，測定430 nm波長處吸光度的變化，以蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計算總黃酮含量，單位為g/kg。

1.3.5 抗氧化能力的測定

通過DPPH自由基和羥自由基（·OH）清除能力反映抗氧化能力。DPPH自由基清除能力的測定參照Brand-Williams等[21]的方法，樣品的提取方法與總酚相同。上清液（0.15 mL）與120 μmol/L DPPH溶液（1.85 mL）混勻后于25 ℃避光反應(yīng)15 min，以甲醇代替上清液的反應(yīng)體系作為對照，記錄515 nm波長處吸光度的變化，按式（3）計算DPPH自由基清除能力。

式中：A1為0.15 mL上清液與1.85 mL DPPH反應(yīng)后吸光度；A2為0.15 mL上清液與1.85 mL甲醇反應(yīng)后吸光度；A3為0.15 mL甲醇與1.85 mL DPPH溶液反應(yīng)后吸光度。

·OH清除能力的測定參照Richmond等[22]的方法，稱取2 g凍樣加入5 mL體積分?jǐn)?shù)70%乙醇溶液研磨，離心后取1.0 mL上清液與2.0 mL 18 mmol/L硫酸亞鐵溶液、0.2 mL 0.3% H2O2、1.3 mL 18 mmol/L水楊酸溶液混合均勻后，于37 ℃反應(yīng)25 min，測定510 nm波長處吸光度的變化，以70%乙醇溶液代替上清液的反應(yīng)體系作為對照。按式（4）計算·OH清除能力。

式中：A1為對照組吸光度；A2為實驗組吸光度。

1.3.6 主要酚類化合物含量的測定

參照Surjadinata等[23]的方法。稱取5 g凍樣，使用20 mL甲醇研磨，離心后取上清液利用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀在35 ℃條件下濃縮至5 mL，利用活化的Waters C18Sep-pak萃取小柱將濃縮后的上清液進(jìn)行固相萃取。萃取純化后的樣品經(jīng)過0.45 μm濾膜過濾后使用高效液相色譜儀進(jìn)行分析。色譜柱為反向C18柱（6 mm×150 mm），柱溫38 ℃；流動相A為鹽酸（pH 2.3），流動相B為乙腈；梯度洗脫程序：0 min 10% B，25 min 15% B，40 min 20% B，45 min 25% B，50 min 85% B，55 min 10% B；流速0.6 mL/min；進(jìn)樣量20 μL；檢測波長280 nm。根據(jù)各標(biāo)準(zhǔn)品的保留時間和標(biāo)準(zhǔn)曲線方程進(jìn)行定性和定量分析，酚類化合物含量單位為mg/kg。

1.3.7 苯丙烷代謝關(guān)鍵酶活力測定及基因表達(dá)水平分析

參考Li Xiao’an等[24]的方法測定苯丙氨酸解氨酶（phenylalanine ammonia lyase，PAL）、肉桂酸-4-羥基化酶（cinnamate-4-hydroxylase，C4H）、4-香豆酸輔酶A連接酶（4-coumarate coenzyme A ligase，4CL）活力。稱取2 g凍樣分別用5 mL不同緩沖液進(jìn)行研磨提取。PAL活力測定所用提取液為含2 mmol/L乙二胺四乙酸、5 mmol/Lβ-巰基乙醇、40 g/L聚乙烯吡咯烷酮的硼酸緩沖液（0.1 mol/L、pH 8.7）。C4H所用提取液為含15 mmol/Lβ-巰基乙醇、5 mmol/L抗壞血酸、4 mmol/L MgCl2、1 mmol/L苯甲基磺酰氟、10 μmol/L亮異酶肽的Tris-HCl緩沖液（50 mmol/L、pH 8.9）。4CL所用提取液為含5 mmol/L MgCl2、5 mmol/L ATP、0.6 mmol/Lp-香豆酸、0.4 mmol/L輔酶A的Tris-HCl緩沖液（50 mmol/L、pH 8.0）?？扇苄缘鞍踪|(zhì)含量的測定參照Bradford等[25]的方法，以牛血清白蛋白為標(biāo)準(zhǔn)品，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計算結(jié)果。PAL、C4H、4CL活力均以蛋白質(zhì)量計，單位為U/mg。

根據(jù)前期研究[26]，選取火龍果中傷脅迫反應(yīng)較強的3 個苯丙烷代謝關(guān)鍵基因HuPAL（HU06G02082.1）、HuC4H（HU02G01415.1）、Hu4CL（HU04G01601.1）進(jìn)行qPCR分析。根據(jù)火龍果基因組數(shù)據(jù)庫（http://www.pitayagenomic.com./）中的基因序列設(shè)計引物（表1）。參考Chang Shujun等[27]的方法提取鮮切火龍果總RNA，使用反轉(zhuǎn)錄試劑盒PrimeScriptTMRT Master Mix合成cDNA。使用qPCR試劑盒TB Green?Premix ExTaqTM并按照其說明書操作，利用qPCR儀進(jìn)行檢測，以HuUBQ（HU04G01722.1）為內(nèi)參基因，按照2-ΔΔCt法計算基因的相對表達(dá)量。

表1 qPCR引物序列Table 1 Primer sequences used for qPCR analysis

1.3.8 超氧陰離子自由基產(chǎn)生速率及H2O2含量的測定

稱取2 g凍樣加入5 mL 0.1 mol/L pH 7.8磷酸緩沖液研磨，離心后取上清液，參照Elstner等[28]的方法測定超氧陰離子自由基產(chǎn)生速率，記錄530 nm波長處吸光度的變化，以亞硝酸鉀為標(biāo)準(zhǔn)品，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計算·產(chǎn)生速率，單位為μmol/（kg·s）。

稱取凍樣2 g加入5 mL冷丙酮研磨，離心后取上清液，參照Patterson等[29]的方法測定H2O2含量。單位為mmol/kg。

1.3.9 抗氧化酶活力的測定

稱取2 g凍樣加入5 mL 50 mmol/L pH 7.0磷酸緩沖液研磨，離心后取上清液，參照Zeng Kaifang等[30]的方法測定超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、過氧化氫酶（catalase，CAT）、抗壞血酸過氧化物酶（ascorbate peroxidase，APX）活力。SOD以抑制50%的氮藍(lán)四唑光還原反應(yīng)時所需的酶量作為一個酶活力單位。CAT以每分鐘還原1 μmol H2O2所需的酶量作為一個酶活力單位。APX以每分鐘氧化1 μmol抗壞血酸所需的酶量作為一個酶活力單位。結(jié)果均以蛋白質(zhì)量計，單位為U/mg。

1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

實驗采用完全隨機設(shè)計，每個處理重復(fù)3 次，結(jié)果表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差。使用SPSS 19.0軟件采用鄧肯多重檢驗的單因素方差分析檢驗結(jié)果的差異顯著性，P＜0.05時認(rèn)為有顯著差異。

2 結(jié)果與分析

2.1 冷激預(yù)處理對鮮切火龍果表面顏色、褐變程度、電導(dǎo)率及丙二醛含量的影響

圖1A為鮮切火龍果在20 ℃貯藏48 h期間表面顏色外觀圖像，對照組鮮切火龍果的褐變程度隨著貯藏時間的延長而增加，冷激預(yù)處理顯著抑制了褐變程度的增加，貯藏48 h時這種抑制效果更為顯著。如圖1B所示，對照組和冷激預(yù)處理組的鮮切火龍果BI均逐漸上升，冷激預(yù)處理組BI在貯藏過程中均顯著低于對照組，說明冷激預(yù)處理能夠有效抑制鮮切火龍果的褐變。EC與果蔬細(xì)胞膜通透性的變化密切相關(guān)，反映了細(xì)胞膜損傷的程度。MDA是膜脂過氧化作用的主要產(chǎn)物之一，其含量反映了細(xì)胞膜脂過氧化的程度。由圖1C、D可知，對照組鮮切火龍果的相對電導(dǎo)率和MDA含量在貯藏期間均呈現(xiàn)逐漸增長趨勢，冷激預(yù)處理顯著抑制了傷脅迫誘導(dǎo)的相對電導(dǎo)率和MDA含量的增加。貯藏48 h后，冷激預(yù)處理組鮮切火龍果的相對電導(dǎo)率比對照組低16.45%，MDA含量比對照組低20.11%。表明冷激預(yù)處理能夠抑制細(xì)胞膜脂過氧化作用，減輕鮮切火龍果細(xì)胞膜的損傷程度。

圖1 冷激預(yù)處理對鮮切火龍果20 ℃貯藏48 h期間表面顏色（A）、BI（B）、EC（C）、MDA含量（D）的影響Fig.1 Effect of cold shock pretreatment on surface color (A),BI (B),EC (C) and MDA content (D) of fresh-cut pitaya fruit stored at 20 ℃ for up to 48 h

2.2 冷激預(yù)處理對鮮切火龍果總酚、總黃酮含量及抗氧化能力的影響

酚類物質(zhì)作為果蔬中重要的次生代謝產(chǎn)物，在防御和修復(fù)機械傷害、清除活性氧（reactive oxygen species，ROS）、增強抗氧化能力方面發(fā)揮重要作用，酚類物質(zhì)的合成是果蔬傷脅迫應(yīng)答反應(yīng)的普遍現(xiàn)象[4]。如圖2A、B所示，鮮切火龍果中總酚和總黃酮含量均呈先上升后下降的趨勢，冷激預(yù)處理顯著提高了總酚和總黃酮含量。貯藏48 h時冷激預(yù)處理組的總酚含量比對照組高9.04%，總黃酮含量比對照組高10.02%。DPPH自由基清除能力和·OH清除能力是表征果蔬抗氧化能力的重要指標(biāo)。如圖2C、D所示，對照組鮮切火龍果DPPH自由基和·OH清除能力先隨貯藏時間的延長而逐漸升高，在24 h達(dá)到峰值后緩慢下降。冷激預(yù)處理顯著提高了DPPH自由基和·OH清除能力，在48 h時冷激預(yù)處理組的DPPH自由基清除能力比對照組高11.05%，·OH清除能力比對照組高14.48%。綜上，冷激預(yù)處理有效促進(jìn)了鮮切火龍果酚類物質(zhì)的積累，增強了鮮切火龍果的抗氧化能力。

圖2 冷激預(yù)處理對鮮切火龍果20℃貯藏48 h期間總酚含量（A）、總黃酮含量（B）、DPPH自由基清除能力（C）、·OH清除能力（D）的影響Fig.2 Effect of cold shock pretreatment on the contents of total phenolics(A) and total flavonoids (B),and DPPH (C) and hydroxyl (D) radical scavenging capacity in fresh-cut pitaya fruit stored at 20℃ for up to 48 h

2.3 冷激預(yù)處理對鮮切火龍果主要酚類化合物的影響

酚類物質(zhì)是含有苯酚基本結(jié)構(gòu)的一類化合物，含有多個酚羥基，其中酚酸類、黃酮類及花色苷類等是果蔬中常見的酚類物質(zhì)，與果蔬的營養(yǎng)價值、抗氧化活性等密切相關(guān)。如圖3所示，鮮切火龍果中共檢測到4 種酚酸（沒食子酸、原兒茶酸、咖啡酸、綠原酸）和4 種黃酮類化合物（根皮苷、蘆丁、山柰酚、表兒茶素）?；瘕埞兄饕宇愇镔|(zhì)種類和含量會因品種、生長環(huán)境等的不同而存在差異，本研究中測得的主要酚類化合物種類與前人的研究結(jié)果[31-32]類似，而含量略有不同。對照組中原兒茶酸、咖啡酸含量在貯藏前期逐漸上升，在不同貯藏時間達(dá)到最大值后呈下降趨勢，沒食子酸、綠原酸含量隨貯藏時間的延長呈波動增長的趨勢。冷激預(yù)處理促進(jìn)了沒食子酸、原兒茶酸和咖啡酸含量的積累，提高了其在貯藏期間的水平，延緩了綠原酸含量的增加。對照組中根皮苷和山柰酚含量整體呈上升趨勢，蘆丁和表兒茶素含量隨貯藏時間的延長先增加后下降。冷激預(yù)處理促進(jìn)了根皮苷、山柰酚、蘆丁含量在貯藏期間的積累，延緩了表兒茶素含量的增加。

圖3 冷激預(yù)處理對鮮切火龍果20℃貯藏48 h期間主要酚類化合物含量的影響Fig.3 Effect of cold shock pretreatment on phenolic compound contents in fresh-cut pitaya fruit stored at 20℃ for up to 48 h

2.4 冷激預(yù)處理對鮮切火龍果苯丙烷代謝關(guān)鍵酶活性及其基因相對表達(dá)量的影響

苯丙烷代謝途徑是酚類物質(zhì)合成的重要途徑，PAL、C4H、4CL作為苯丙烷代謝途徑的關(guān)鍵酶直接參與酚類物質(zhì)的合成，在果蔬逆境脅迫防御反應(yīng)中發(fā)揮重要作用。在L-苯丙氨酸進(jìn)入苯丙烷代謝后，經(jīng)PAL催化轉(zhuǎn)化為反式肉桂酸，C4H催化反式肉桂酸對位點發(fā)生位置特異性的羥基化反應(yīng)，生成p-香豆酸，4CL將p-香豆酸轉(zhuǎn)化為p-香豆酰輔酶A，進(jìn)而轉(zhuǎn)化為其他下游酚類物質(zhì)[33]。如圖4A～C所示，隨貯藏時間的延長，各組鮮切火龍果中的PAL、C4H、4CL活力均先上升后下降。冷激預(yù)處理顯著提高了這3 種酶活力，48 h時冷激預(yù)處理組的PAL、C4H、4CL活力分別比對照組高9.16%、12.34%和10.63%?；虮磉_(dá)結(jié)果顯示，兩組鮮切火龍果HuPAL表達(dá)量均被傷脅迫顯著誘導(dǎo)，并于6 h時達(dá)到峰值，之后隨著貯藏時間的延長逐漸降低。冷激預(yù)處理進(jìn)一步提高了HuPAL的表達(dá)量，并在整個貯藏過程中保持較高水平（圖4D）。兩組鮮切火龍果HuC4H表達(dá)量均隨貯藏時間的延長呈先增加后下降的趨勢，對照組HuC4H表達(dá)量在12 h時達(dá)到最大值，冷激組HuC4H表達(dá)量在36 h時達(dá)到最大值，且冷激預(yù)處理顯著促進(jìn)了HuC4H表達(dá)量的上升并抑制其下降，極大提高了HuC4H的表達(dá)水平（圖4E）。兩組鮮切火龍果的Hu4CL表達(dá)量在貯藏期間也呈先上升后下降的趨勢，對照組在24 h時達(dá)到峰值，冷激組在36 h時達(dá)到峰值，與對照組相比，冷激預(yù)處理顯著提高了鮮切火龍果前36 hHu4CL的表達(dá)量，然后其表達(dá)量迅速下降，在48 h時與對照組無顯著差異（圖4F）。綜上，冷激預(yù)處理可以誘導(dǎo)提高苯丙烷代謝途徑關(guān)鍵酶的活力和關(guān)鍵基因表達(dá)，從而促進(jìn)鮮切火龍果中酚類物質(zhì)的合成。

圖4 冷激預(yù)處理對鮮切火龍果20℃貯藏48 h期間苯丙烷代謝途徑關(guān)鍵酶活力及其基因相對表達(dá)量的影響Fig.4 Effect of cold shock pretreatment on the activities and relative gene expression of key enzymes in the phenylpropanoid pathway in freshcut pitaya fruit stored 20℃ for up to 48 h

圖5 冷激預(yù)處理對鮮切火龍果20℃貯藏48 h期間·產(chǎn)生速率（A）、H2O2含量（B）的影響Fig.5 Effect of cold shock pretreatment on superoxide anion production rate (A) and H2O2 content (B) in fresh-cut pitaya fruit stored 20℃ for up to 48 h

2.5 冷激預(yù)處理對鮮切火龍果·產(chǎn)生速率及H2O2含量的影響

2.6 冷激預(yù)處理對鮮切火龍果抗氧化酶活力的影響

SOD、CAT、APX是果蔬體內(nèi)ROS清除酶促防御系統(tǒng)中的重要酶，SOD能通過歧化反應(yīng)將·轉(zhuǎn)化為H2O2和O2，從而清除·，H2O2可被CAT催化分解為H2O和O2，降低H2O2對果蔬造成的氧化損傷。H2O2還可通過APX的催化被抗壞血酸還原清除[13]。如圖6所示，鮮切處理提高了兩組鮮切火龍果SOD、CAT、APX活力，冷激預(yù)處理組3 種酶活力在貯藏期間始終高于對照組。在48 h時冷激預(yù)處理組SOD、CAT、APX活力分別比對照組高14.87%、11.85%和14.88%。這些結(jié)果表明冷激預(yù)處理能夠通過提高鮮切火龍果SOD、CAT、APX活力促進(jìn)·和H2O2的清除，減輕ROS對鮮切火龍果造成的氧化損傷和組織褐變。

圖6 冷激預(yù)處理對鮮切火龍果20℃貯藏48 h期間SOD（A）、CAT（B）、APX（C）活力的影響Fig.6 Effect of cold shock pretreatment on the activities of SOD (A),CAT (B) and APX (C) in fresh-cut pitaya fruit stored 20℃ for up to 48 h

3 結(jié)論

冷激（－2 ℃冷空氣、3 h）預(yù)處理通過上調(diào)苯丙烷代謝關(guān)鍵酶PAL、C4H、4CL活力及其相關(guān)基因的表達(dá)，促進(jìn)鮮切火龍果酚類物質(zhì)的合成積累并抑制貯藏后期酚類物質(zhì)含量的下降，增強其抗氧化能力；此外，冷激預(yù)處理可以誘導(dǎo)提高SOD、CAT、APX抗氧化酶活力，有效清除過多的ROS。綜上，冷激預(yù)處理通過調(diào)控苯丙烷途徑和ROS代謝，提高抗氧化能力，緩解鮮切火龍果氧化過程，從而有效抑制其果肉褐變。冷激預(yù)處理安全高效、操作簡單，在鮮切火龍果品質(zhì)保持方面具有較好的應(yīng)用前景。