中草藥漱口顆粒的制備工藝研究 *

林 娟 李玲慧 陳攀振 黃漢明 李 丹△ 潘鴻貞※

（1.福州市中醫(yī)院藥學(xué)部，福建 福州 350001；2.福建中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，福建 福州 350122）

我國(guó)口腔問(wèn)題仍然嚴(yán)峻，國(guó)家制定出臺(tái)了多項(xiàng)政策，對(duì)口腔衛(wèi)生工作提出了明確要求和具體指標(biāo)。國(guó)家衛(wèi)生健康委員會(huì)發(fā)布的《健康口腔行動(dòng)方案（2019—2025年）》明確到2020年，兒童、老年人等重點(diǎn)人群口腔保健水平穩(wěn)步提高；到2025年，人群口腔健康素養(yǎng)水平和健康行為形成率大幅提升，口腔健康服務(wù)覆蓋全人群、全生命周期［1］。臨床上治療口腔病藥物以含漱液居多，且多含西藥成分，存在刺激性大、口感差、易復(fù)發(fā)的缺點(diǎn)，治療口腔病的中成藥或中藥復(fù)方又很少，效果好的更屬少見。

中草藥漱口方系福州市中醫(yī)院口腔科專家與中藥房老主任何建楠（福州時(shí)方派名醫(yī)何秀春之孫），根據(jù)口腔常見疾病特征，結(jié)合臨床經(jīng)驗(yàn)與心得，總結(jié)提煉而成，后經(jīng)口腔科王小娟、郭秀榕等臨床應(yīng)用研究略作調(diào)整。該方由石膏、地骨皮、燙骨碎補(bǔ)、蟛蜞菊、蒲公英、紫花地丁、白茅根、白術(shù)、蒼術(shù)、黃芪、甘草共11味中藥組成，具有清熱瀉火、解毒消腫、涼血止痛、健脾益腎的功效，臨床上應(yīng)用多年，對(duì)于口腔疾病，尤其是口腔潰瘍、牙周炎、牙齦炎，療效確切，能緩解疼痛、促進(jìn)潰瘍愈合，并能顯著降低口腔潰瘍的復(fù)發(fā)率［2］。

中草藥漱口方在臨床上以湯劑形式給藥，但傳統(tǒng)湯劑存在煎煮麻煩、不及時(shí)、服用量大、攜帶不便、藥效物質(zhì)不穩(wěn)定、不宜久儲(chǔ)等弊端。根據(jù)傳統(tǒng)中藥制劑的備案要求，并經(jīng)出膏率預(yù)試驗(yàn)后，擬將中草藥漱口方開發(fā)成顆粒劑型，解決以上缺陷，增加臨床應(yīng)用，提高臨床療效，促進(jìn)醫(yī)院特色制劑發(fā)展，推動(dòng)中醫(yī)藥的傳承與創(chuàng)新。本研究通過(guò)水提工藝和制劑成型工藝研究，優(yōu)選中草藥漱口顆粒的最佳制備工藝，為該制劑的開發(fā)奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

1 材料

1.1 儀器設(shè)備循環(huán)水式多用真空泵［SHZ-D（III），上海秋佐科學(xué)儀器有限公司］，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（Rotavapor?R-300，瑞士BUCHI 公司），調(diào)溫恒溫電熱套（HDM-2000，常州國(guó)華電器有限公司），真空干燥箱（DZF-6050，上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司），鼓風(fēng)干燥箱（DHG-9240A，上海一恒科學(xué)儀器有限公司），超純水儀（Milli-Q，美 國(guó)Millipore 公 司），精 密 電 子 天 平（XY2000C，常州市幸運(yùn)電子設(shè)備有限公司），搖擺式中藥粉碎機(jī)（DFY-500，溫嶺市林大機(jī)械有限公司），離心機(jī)（Centrifuge 5418 R，德國(guó)Eppendorf公司）。

1.2 藥材與輔料制備中草藥漱口顆粒所用的中藥飲片均購(gòu)自福建鷺燕醫(yī)藥發(fā)展有限公司（原福建鷺燕中宏醫(yī)藥有限公司），經(jīng)福建中醫(yī)藥大學(xué)生物醫(yī)藥研發(fā)中心老師鑒定均符合藥典要求。輔料糊精、可溶性淀粉、蔗糖、微晶纖維素均購(gòu)于上海阿拉丁生化科技股份有限公司。

2 方法與結(jié)果

2.1 中草藥漱口顆粒提取工藝因中草藥漱口方前期臨床采用傳統(tǒng)水煎煮湯劑，患者使用后效果確切，綜合預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果及有關(guān)藥材藥效成分特點(diǎn)，本課題選擇水提法。

2.1.1 得膏率的測(cè)定稱取1 個(gè)處方量的中草藥漱口方中藥飲片（生石膏30 g，地骨皮15 g，燙骨碎補(bǔ)9 g，蟛蜞菊18 g，蒲公英15 g，紫花地丁30 g，白茅根15 g，白術(shù)15 g，蒼術(shù)15 g，黃芪15 g，甘草片6 g），水提取后以3000 r/min的速度離心15 min（離心半徑10 cm），得到過(guò)濾的藥材提取液，精密吸取25 mL，于60 ℃減壓濃縮得浸膏，真空干燥48 h 得干浸膏，計(jì)算得膏率。得膏率=［（m×v）/（25×M）］×100%，其中m 表示25 mL 提取液濃縮干燥膏重（g）、v表示提取液體積、M表示復(fù)方提取飲片總重量。

2.1.2 單因素考察回流提取工藝

2.1.2.1 浸泡時(shí)間的考察 分別稱取6 份1 個(gè)處方量的中草藥漱口方中藥飲片，加入10 倍量的超純水約1830 mL，定時(shí)取出稱重，計(jì)算吸水率。結(jié)果顯示，浸泡2.0 h，中藥飲片增重309.56 g，吸水率為169.16%；繼續(xù)增加浸泡時(shí)間，吸水率變化不大，趨于平緩，說(shuō)明藥材接近浸泡飽和。從吸水率及時(shí)間效率綜合考慮，浸泡時(shí)間確定為2.0 h。見表1。

表1 中草藥漱口顆粒提取工藝藥材浸泡時(shí)間的考察結(jié)果

2.1.2.2 提取時(shí)間的考察 稱取5份1/3個(gè)處方量的中草藥漱口方中藥飲片，分別加入12倍量超純水，加熱回流0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 h（保持微沸），按照2.1.1計(jì)算得膏率。結(jié)果顯示，在1.0～2.5 h的范圍內(nèi)回流提取時(shí)間越長(zhǎng)，得膏率也相應(yīng)地增大，但當(dāng)超過(guò)1.5 h后，得膏率基本趨于穩(wěn)定，說(shuō)明此時(shí)水溶性成分提取已接近飽和狀態(tài)。見表2。

表2 中草藥漱口顆粒提取工藝提取時(shí)間的考察結(jié)果

2.1.2.3 提取溶劑倍量的考察 稱取5 份1/3 個(gè)處方量的中草藥漱口方中藥飲片，分別加入8、10、12、15、18倍量超純水，加熱回流1.5 h（保持微沸），按照2.1.1 計(jì)算得膏率。結(jié)果顯示，提取溶劑為10、12、15、18倍量時(shí)得膏率基本穩(wěn)定，說(shuō)明10倍量的提取溶劑對(duì)水溶性成分的提取接近飽和狀態(tài)。見表3。

表3 中草藥漱口顆粒提取工藝提取溶劑倍量的考察結(jié)果

2.1.2.4 提取次數(shù)的考察 稱取3 份1/3 個(gè)處方量的中草藥漱口方中藥飲片，加入12 倍量超純水，加熱回流1.5 h（保持微沸），分別提取1 次、2 次、3 次，按照2.1.1 計(jì)算得膏率。結(jié)果顯示，提取次數(shù)越多，得膏率相應(yīng)上升。但提取3 次與2 次的相比，提取率略有上升，提取2 次的提取率為提取3 次的99.55%，說(shuō)明提取2 次時(shí)水溶性成分基本被提取完全。見表4。

表4 中草藥漱口顆粒提取工藝提取次數(shù)的考察結(jié)果

2.1.3 提取工藝正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)根據(jù)上述單因素實(shí)驗(yàn)的考察結(jié)果，分別稱取9份1/3個(gè)處方量的中草藥漱口方中藥飲片，按表5 中的因素水平進(jìn)行回流提取，按照2.1.1計(jì)算得膏率。結(jié)果得知，提取溶劑倍量、提取時(shí)間、提取次數(shù)3 個(gè)因素中對(duì)得膏率影響從大到小依次為C＞B＞A，且最佳的提取工藝組合為C2B3A2，即藥材浸泡2 h，提取溶劑倍量為10倍量，提取時(shí)間為1.5 h，提取次數(shù)為2次。見表5、表6。

表5 中草藥漱口顆粒提取工藝正交試驗(yàn)結(jié)果分析

表6 正交試驗(yàn)中草藥漱口顆粒得膏率方差分析

2.1.4 提取工藝驗(yàn)證試驗(yàn)分別稱取3 份2 個(gè)處方量的中草藥漱口方中藥飲片（每份366 g），按照最佳提取工藝提取，計(jì)算干浸膏重量和得膏率。結(jié)果得知，6 倍量的藥材進(jìn)行放大試驗(yàn)，平均干浸膏重量108.72 g，平均得膏率為29.71%，3 次重復(fù)得膏率相差無(wú)幾，表明優(yōu)選的提取工藝穩(wěn)定性良好，該工藝可行。見表7。

表7 放大試驗(yàn)結(jié)果

2.2 中草藥漱口顆粒成型工藝研究

2.2.1 中草藥漱口顆粒的制備方法

2.2.1.1 浸膏的制備 稱取2 個(gè)處方量的中草藥漱口方中藥飲片，按照優(yōu)選的提取工藝提取，濾液減壓濃縮得浸膏約140 g，每1 g浸膏相當(dāng)于2.61 g原飲片。

2.2.1.2 顆粒的單因素考察 稱取浸膏10 g，與輔料以一定的比例混合，制備中草藥漱口顆粒。見表8。

表8 浸膏與不同輔料配伍

2.2.2 評(píng)價(jià)指標(biāo)

2.2.2.1 成型性考察 取1～4 號(hào)樣品顆粒，依次通過(guò)一號(hào)篩與四號(hào)篩，計(jì)算成型率［3］，成型率＝通過(guò)一號(hào)篩但不能通過(guò)四號(hào)篩的顆粒重／樣品重×100%。見表9。

表9 不同輔料與浸膏的配伍處方結(jié)果

2.2.2.2 溶化性考察 精密稱定1～4號(hào)樣品顆粒5 g，置于干燥至恒重的50 mL 離心管中，精密加入沸水20 mL，并放入3000 r/min 的離心機(jī)中離心15 min（離心半徑10 cm），棄去上清液，于80 ℃將殘?jiān)娓芍梁阒?，精密稱定，計(jì)算溶化率［3］，溶化率=溶化的顆粒重/總顆粒重×100%。見表9。

2.2.2.3 吸濕百分率的測(cè)定 配置一定量的氯化鈉飽和溶液，將其置于玻璃干燥器的底部放置48 h，使干燥器的相對(duì)濕度為75%。精密稱定1～4 號(hào)的樣品顆粒各1 g，置于干燥恒重的5 mL扁稱量瓶中，精確稱量后，輕搖使其均勻分布，置于盛有氯化鈉飽和溶液的干燥器內(nèi)（稱量瓶蓋揭開），96 h 后稱量，計(jì)算吸濕百分率［3］。吸濕百分率=（顆粒濕重－顆粒干重）/顆粒干重×100%。見表9。

2.2.2.4 評(píng)分標(biāo)準(zhǔn) 以中草藥漱口顆粒的綜合評(píng)分為評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)，根據(jù)成型率、溶化率和吸濕率對(duì)中草藥漱口顆粒的影響大小設(shè)定權(quán)重，其中成型率100%得25 分，溶化率100%得25分，最小吸濕率得50分［3，4］，綜合評(píng)分=（25/最大成型率）×成型率+（25/最大溶化率）×溶化率+（最小吸濕率×50）/吸濕率。結(jié)果顯示，浸膏與單一輔料糊精、可溶性淀粉以及微晶纖維素制成的顆粒綜合評(píng)分較高。見表9。為確定最佳成型工藝，選擇這3種輔料進(jìn)行正交試驗(yàn)，以優(yōu)選輔料與浸膏的比例。

2.2.3 正交試驗(yàn)優(yōu)化稱取3 個(gè)處方量的中草藥漱口方中藥飲片（共549 g），按照2.2.1.1 項(xiàng)下的方法制得中草藥漱口顆粒浸膏。分別取浸膏18 g和表10中的輔料以一定的比例混合制備顆粒劑，采用L9（34）正交表，按照2.2.2 項(xiàng)下的考察方法和評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行試驗(yàn)，計(jì)算綜合評(píng)分。通過(guò)極差R 得知，各項(xiàng)因素的影響指標(biāo)從大到小依次為A＞B＞C，結(jié)合K值比較，選擇出最佳輔料配伍方案為A2B2C1，即優(yōu)選出浸膏與輔料的配比為浸膏（g）∶糊精（g）∶可溶性淀粉（g）∶微晶纖維素（g）=18∶10∶10∶1。見表11。

表10 成型工藝L9（34）正交試驗(yàn)

2.2.4 制劑工藝驗(yàn)證試驗(yàn)稱取3 份2 個(gè)處方量的中草藥漱口方中藥飲片，按照2.2.1.1 項(xiàng)下的方法制得中草藥漱口顆粒浸膏約140 g。將浸膏140 g 與糊精78 g、可溶性淀粉78 g、微晶纖維素7.8 g，混合均勻，制成中草藥漱口顆粒劑。根據(jù)正交試驗(yàn)的結(jié)果穩(wěn)定，結(jié)果3 次重復(fù)制得的中草藥漱口顆粒劑重量均在220 g左右，平均綜合評(píng)分為93.74 分，表明采用優(yōu)選的浸膏與輔料配比，制劑成型工藝穩(wěn)定性良好，該工藝可行。見表12。

表12 制劑工藝放大試驗(yàn)結(jié)果分析

3 討論

根據(jù)中草藥漱口顆粒方中石膏的硫酸鈣、骨碎補(bǔ)的柚皮苷、蒲公英的咖啡酸、紫花地丁的秦皮乙素、黃芪的黃芪甲苷等主要藥物的藥效成分特點(diǎn)，結(jié)合臨床應(yīng)用形式，采用水提取工藝制備軟材的浸膏，優(yōu)選最佳提取工藝為浸泡2 h，提取溶劑倍量為10 倍量，提取時(shí)間為1.5 h，提取次數(shù)為2次；且當(dāng)1 g浸膏相當(dāng)于處方中藥飲片2.61 g 時(shí)，制備軟材效果最好。通過(guò)單一輔料對(duì)成型工藝的研究發(fā)現(xiàn)，微晶纖維素對(duì)軟材成型較好，因其溶解性較差，所以在成型工藝優(yōu)化實(shí)驗(yàn)中，選用另外2 個(gè)輔料糊精、可溶性淀粉同一水平1∶1 的加入量進(jìn)行實(shí)驗(yàn)［5］，優(yōu)選出浸膏與輔料的最佳配比為浸膏（g）∶糊精（g）∶可 溶 性 淀 粉（g）∶微 晶 纖 維 素（g）=18∶10∶10∶1。

通過(guò)上述實(shí)驗(yàn)研究，確定了中草藥漱口顆粒的制備工藝：取10 個(gè)處方量的中草藥漱口顆粒中藥飲片，用10 倍量純水浸泡2 h，煎煮2 次，每次1.5 h，濾液濃縮至浸膏約700 g（生藥濃度約為3.3 g/mL），加入輔料糊精390 g，可溶性淀粉390 g，微晶纖維素39 g，制備成1000 g 顆粒劑。該工藝簡(jiǎn)便穩(wěn)定可行，為后續(xù)該制劑開發(fā)奠定良好的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。